CN104107175A - 毛蕊异黄酮在制备免疫抑制剂方面的用途 - Google Patents

Abstract

本发明通过对毛蕊异黄酮进行实验研究，首次发现毛蕊异黄酮可明显对抗刀豆蛋白A(ConA)诱导的T淋巴细胞增殖，具有免疫抑制作用，利于未来制备免疫抑制药物。

Description

毛蕊异黄酮在制备免疫抑制剂方面的用途

技术领域

本发明涉及医药领域，具体涉及毛蕊异黄酮在制备免疫抑制剂方面的用途。 

背景技术

黄芪是是一味健脾益气的中药，具有补气固表、利尿托毒、排脓、敛疮生肌的作用，临床用于气虚乏力，食少便溏，中气下陷，久泻脱肛，便血崩漏，表虚自汗，气虚水肿，痈疽难溃，久溃不敛，血虚痿黄，内热消渴，慢性肾炎蛋白尿和糖尿病等症(参见：国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[z].北京：化学工业出版社，2005：212-213.)。现代药理学研究认为，黄芪能够调节机体免疫功能并具有抗病毒作用(参见：晏洪波，梁文，涂亚庭.黄芪的免疫调节及抗病毒作用[J].华南国防医学杂志，2008，22(6)：69-70)。 

黄芪的主要化学成分包括：黄芪黄酮类化合物、黄芪皂苷类化合物、黄芪多糖类化合物、以及黄芪中的氨基酸和微量元素，其中黄芪黄酮类化合物是黄芪的重要有效成分。毛蕊异黄酮是黄芪异黄酮类中重要的化合物之一，其在免疫抑制方面的用途目前尚无人报道。 

发明内容

本发明的目的是提供毛蕊异黄酮在制备免疫抑制剂方面的用途。 

本发明所研究的毛蕊异黄酮化学结构如下，通过从蒙古黄芪中分离制备得到： 

毛蕊异黄酮： 

本发明通过刀豆蛋白A(Con A)诱导小鼠T淋巴细胞增殖试验，首次发现毛蕊异黄酮对T淋巴细胞增殖具有抑制作用，能用于未来制备免疫抑制剂。  

具体实施方式

下面结合实施例对本发明作进一步的描述： 

实施例：毛蕊异黄酮对刀豆蛋白A(ConA)诱导的小鼠T细胞增殖的影响 

1材料 

1.1动物 

BALB/c小鼠，体重18～20g，雄性；由北京大学实验动物部提供(许可证号：SCXK11-00-0008)。动物饲养于标准环境：温度(23±1)℃，相对湿度(55±5)％，明暗周期12h/12h，标准颗粒饲料喂养。 

1.2试剂 

刀豆蛋白A(ConA)，噻唑蓝(MTT)购自美国Sigma公司；胎牛血清(FBS)，购自美国GIBCO公司；红细胞裂解液，1640培养液，磷酸盐(PBS)缓冲液均购自北京迈晨生物科技公司；DMSO(二甲基亚砜，批号20101008)，购自北京化工厂。毛蕊异黄酮样品用DMSO配制。 

1.3仪器 

Bro-Rad iMark酶标仪(美国伯乐公司)，Sigma3K-15离心机(德国Sigma公司)，CO₂培养箱(美国Thermal Technology LLC公司)，超净工作台(北京东联哈尔仪器制造有限公司)等。 

2方法 

小鼠摘眼球放血，无菌取脾脏匀浆过滤，离心5min(4℃，1000r·min^-1)，弃上清，用红细胞裂解液裂解红细胞后用PBS洗涤2次；用1640培养液(含10％FBS)悬浮脾细胞，细胞计数并使用台盘蓝染色法测定细胞的存活率，存活率＝未着色细胞数/细胞总数×100％，存活率＞95％者用于试验，细胞调至2×10⁶个/mL。 

以丝裂原刀豆蛋白(ConA，2.5μg·mL^-1)刺激T细胞使其增殖。分组：细胞对照组(含等浓度的DMSO)，Con A刺激组，毛蕊异黄酮样品组(浓度根据预试验结果定为30μmol·L^-1)，各设3个复孔，重复3次。培养44h(37℃，5％CO₂，饱和湿度)后加入MTT20μL(0.5mg·mL^-1)，培养4h，离心6min(1500r·min^-1)，弃上清后各孔均加DMSO100μL轻微振荡10min，酶标仪570nm测吸光度值(A值)。 

抑制率(％)＝(Con A组A均值样品组A均值)/Con A组A均值×100％ 

3实验结果 

ConA能明显促进小鼠T淋巴细胞增殖(p＜0.01)，首次发现毛蕊异黄酮能明显抑制ConA诱导的T细胞增殖(p＜0.01)，抑制率为：61.63％，未来可用于制备免疫抑制方面的药物， 具体结果见下表： 

表1：毛蕊异黄酮对ConA诱导的T淋巴细胞增殖的影响 

(n＝3，mean±SD) 

与DMSO对照组相比，^##P＜0.01，与ConA组相比**P＜0.01。 

Claims (1)

1.毛蕊异黄酮在制备免疫抑制剂中的用途，其结构式如下：