CN104086521B - 咖啡酸类衍生化合物及其制备方法和应用 - Google Patents

咖啡酸类衍生化合物及其制备方法和应用 Download PDF

Info

Publication number
CN104086521B
CN104086521B CN201410369624.0A CN201410369624A CN104086521B CN 104086521 B CN104086521 B CN 104086521B CN 201410369624 A CN201410369624 A CN 201410369624A CN 104086521 B CN104086521 B CN 104086521B
Authority
CN
China
Prior art keywords
derivative compound
acids derivative
caffeic acids
extract
preparation
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN201410369624.0A
Other languages
English (en)
Other versions
CN104086521A (zh
Inventor
颜栋美
余炼
覃媚
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Guangxi University
Original Assignee
Guangxi University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Guangxi University filed Critical Guangxi University
Priority to CN201410369624.0A priority Critical patent/CN104086521B/zh
Publication of CN104086521A publication Critical patent/CN104086521A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN104086521B publication Critical patent/CN104086521B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D313/00—Heterocyclic compounds containing rings of more than six members having one oxygen atom as the only ring hetero atom
    • C07D313/16—Eight-membered rings
    • C07D313/18—Eight-membered rings not condensed with other rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C09—DYES; PAINTS; POLISHES; NATURAL RESINS; ADHESIVES; COMPOSITIONS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; APPLICATIONS OF MATERIALS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
    • C09K—MATERIALS FOR MISCELLANEOUS APPLICATIONS, NOT PROVIDED FOR ELSEWHERE
    • C09K15/00—Anti-oxidant compositions; Compositions inhibiting chemical change
    • C09K15/04—Anti-oxidant compositions; Compositions inhibiting chemical change containing organic compounds
    • C09K15/06—Anti-oxidant compositions; Compositions inhibiting chemical change containing organic compounds containing oxygen
    • C09K15/08—Anti-oxidant compositions; Compositions inhibiting chemical change containing organic compounds containing oxygen containing a phenol or quinone moiety

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Materials Engineering (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)

Abstract

本发明公开了一种咖啡酸类衍生化合物(Marilide？A)，系从红树白骨壤果实中提取分离获得，属于天然活性成分，而且易溶于甲醇和乙醇，具有良好的亲醇性。抗氧化活性细胞学定量分析方法测试发现，本发明的咖啡酸类衍生化合物的抗氧化活性的EC50值远小于阳性对照槲皮素，具有良好的抗氧化活性，可单独或组合应用作为药用或非药用抗氧化剂等。

Description

咖啡酸类衍生化合物及其制备方法和应用
技术领域
本发明属于抗氧化剂技术领域，尤其涉及一种咖啡酸类衍生化合物及其制备方法和应用。
背景技术
人体新陈代谢过程中会产生化学反应活性强、存在寿命短的自由基。在正常生理条件下，人体内自由基清除系统(也称抗氧化体系)能够有效清除过多自由基，使细胞和组织免受自由基的伤害性攻击。在病理条件下，人体自由基产生和清除系统失去平衡，导致自由基过剩。临床试验和流行病学表明，过剩自由基会诱导氧化应激现象，从而引起生物大分子(如DNA、脂类和蛋白质)的氧化损伤，导致癌症、衰老、心血管病和老年痴呆症等慢性退行性疾病发生。饮食摄入和补充外源性抗氧化剂是预防这些疾病的有效途径。
白骨壤(Avicenniamarina)为爵床科海榄雌属红树植物。白骨壤果实在广西和泰国沿海地区都属于时令食品。肝癌细胞HepG2与人体肝细胞具有基本相同生物学功能，是人体物质代谢的主要场所。Wolf等在2007年建立了基于HepG2模型的抗氧化活性细胞学定量分析方法(CAA)。与其他体外抗氧化活性分析方法相比，CAA法测定结果的生物相关性更高。白骨壤作为一种广泛分布于中国华南红树树种，迄今为止，还未见有对白骨壤果实中次生代谢产物的研究报道，更未见从白骨壤果实中获得具有抗氧化活性的咖啡酸类衍生化合物报道。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种咖啡酸类衍生化合物及其制备方法和应用，具体是作为抗氧化活性剂的应用。
为解决上述技术问题，本发明采用以下技术方案：咖啡酸类衍生化合物，具有以下结构式：
该化合物为(E)-((3R,5R)-5-甲基-8-环氧-3-酯)3-(3,4-二羟苯基)丙烯酸酯。
上述咖啡酸类衍生化合物的制备方法，从红树白骨壤果实中提取分离而得。
上述的咖啡酸类衍生化合物的制备方法，将白骨壤果实切碎，使用乙醇浸泡提取，浸提液减压浓缩得浸膏状总提取物；使用正丁醇对浸膏进行萃取，正丁醇萃取液减压回收正丁醇得到正丁醇萃取物；将正丁醇萃取物经正相硅胶柱选用CHCl3-MeOH系统依次梯度洗脱，收集、合并流份；根据薄层色谱法检测引导，再由分析半制备型高效液相色谱采用甲醇和水混合液进行分离获得。
梯度洗脱分别使用体积比10:1、10:2、10:3、0:10的CHCl3-MeOH混合液。
甲醇和水混合液体积比为45:55。
上述咖啡酸类衍生化合物作为非药用抗氧化剂的应用。
上述咖啡酸类衍生化合物在制备药用抗氧化剂方面的应用。
发明人从红树白骨壤果实中提取分离获得一种咖啡酸类衍生化合物(MarilideA)，属于天然活性成分，而且易溶于甲醇和乙醇，具有良好的亲醇性。抗氧化活性细胞学定量分析方法测试发现，本发明的咖啡酸类衍生化合物的抗氧化活性的EC50值远小于阳性对照槲皮素，具有良好的抗氧化活性，可单独或组合应用作为药用或非药用抗氧化剂等。
具体实施方式
(1)制备咖啡酸类衍生化合物MarilideA
白骨壤果实(湿重约20.0kg)切碎，使用95％的工业酒精20L在室温下浸泡提取三次，每次浸泡一周，共获得浸提液55L，减压浓缩(0.09MPa,50℃)得浸膏状总提取物2.41kg。使用正丁醇对浸膏进行萃取，获得正丁醇萃取液3.1L，减压回收正丁醇，得到正丁醇萃取物(干重269g)。
将正丁醇萃取物269g与300g硅胶(200-300目)混合，通风干燥后研磨成粉末状，用湿柱法装入正相硅胶柱(柱体积:8000mL)内，选择使用CHCl3-MeOH系统(CHCl3:MeOH＝10:1,10:2,10:3,0:10/V:V)依次梯度洗脱，每个极性段的洗脱液体积为32000mL，一共收集了75个流份。通过薄层色谱法检测引导，按照薄层色谱显示的结果，合并其中成分相近的流份，得到了7个分离部位A(流份1-5)、B(流份6-12)、C(流份13-24)、D(流份25-37)、E(流份38-52)、F(流份53-61)、G(流份62-75)。
取组份B(0.65g)与300g硅胶(200-300目)混合，通风干燥后研磨成粉末状，用湿柱法装入正相硅胶柱(柱体积:600mL)内，选择使用CHCl3-MeOH系统(CHCl3:MeOH＝10:1,10:2/V:V)依次梯度洗脱，每个极性段的洗脱液体积为2400mL，一共收集了43个子流份。通过薄层色谱法检测引导，按照薄层色谱显示的结果，合并其中成分相近的子流份，得到了4个次组份B1(子流份1-9)、B2(子流份10-27)、B3(子流份28-34)、B4(子流份35-43)。
取次组分B2(0.12g)通过分析半制备型高效液相色谱采用甲醇和水(MeOH:H2O＝45:55,V:V)进行分离，在18.50min分钟处获得目标化合物MarilideA(5.9mg)。
(2)化合物MarilideA的结构解析
经核磁共振检测分析，确定本发明目标化合物的化学结构，其理化性质和波谱数据分别为：
MarilideA:黄色油状；[α]20D:-26.2°(c0.13,MeOH)；1H(CD3OD,600MHz)和13C(CD3OD,150MHz)NMR数据见表1；HRESIMS:m/z321.1336(calcd.forC23H24O7+H,321.1338)。
表1MarilideA的1H(600MHz)and13CNMR(150MHz)数据
(3)化合物MarilideA的抗氧化活性测试
将HepG2细胞接种在高糖DMEM细胞培养基(含2mML-谷氨酰胺、10mMHepes、10％FBS、1％非必需氨基酸、100U/mL青霉素、100μg/mL链霉素)中，放置在5％CO2培养箱中，培养温度为37℃。实验所用的细胞在第10-40代之间。
将100μLHepG2细胞的单细胞悬浮液，按5×104个/孔细胞浓度接种至黑色96孔细胞培养板中，放置在5％CO2培养箱(培养温度为37℃)中培养24h，建立HepG2细胞的单层模型。移去高糖DMEM细胞培养基，用200μL1×PBS浸洗1次，化合物MarilideA用DMSO溶解，配成的一系列浓度梯度(5-40μM)，加入到96孔细胞培养板，每孔5μL，每个样品的测试包括3个重复，再用100μL15μMDCFH-DA溶液在5％CO2培养箱中的细胞共同孵育90min，移去抗氧化剂处理高糖DMEM细胞培养基，用200μL1×PBS浸洗1次，用移液器将100μL500μMAAPH加入到各孔中，立即将96微孔板置于荧光检测仪测定其荧光强度，测定条件为37℃，激发波长485nm，发射波长538nm。在所有的测试中，通过Probit软件计算EC50(半数有效抑制浓度)。
实验结果表明，本发明化合物MarilideA的EC50值为2.4±0.3μM，而阳性对照槲皮素为11.3±0.8μM，MarilideA抗氧化效果优于常用抗氧化剂槲皮素，为槲皮素的4.71倍(CAA值)，具有良好的抗氧化活性，且为纯天然活性成分，可以用于制备新型药用或非药用抗氧化剂。

Claims (6)

1.一种咖啡酸类衍生化合物，其特征在于具有以下结构式：
2.根据权利要求1所述的咖啡酸类衍生化合物的制备方法，其特征在于：将白骨壤果实切碎，使用乙醇浸泡提取，浸提液减压浓缩得浸膏状总提取物；使用正丁醇对浸膏进行萃取，正丁醇萃取液减压回收正丁醇得到正丁醇萃取物；将正丁醇萃取物经正相硅胶柱选用CHCl3-MeOH系统依次梯度洗脱，收集、合并流份；根据薄层色谱法检测引导，再由分析半制备型高效液相色谱采用甲醇和水混合液进行分离获得。
3.根据权利要求2所述的咖啡酸类衍生化合物的制备方法，其特征在于：所述梯度洗脱分别使用体积比10:1、10:2、10:3、0:10的CHCl3-MeOH混合液。
4.根据权利要求3所述的咖啡酸类衍生化合物的制备方法，其特征在于：所述甲醇和水混合液体积比为45:55。
5.权利要求1所述咖啡酸类衍生化合物作为非药用抗氧化剂的应用。
6.权利要求1所述咖啡酸类衍生化合物在制备药用抗氧化剂方面的应用。
CN201410369624.0A 2014-07-30 2014-07-30 咖啡酸类衍生化合物及其制备方法和应用 Active CN104086521B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201410369624.0A CN104086521B (zh) 2014-07-30 2014-07-30 咖啡酸类衍生化合物及其制备方法和应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201410369624.0A CN104086521B (zh) 2014-07-30 2014-07-30 咖啡酸类衍生化合物及其制备方法和应用

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN104086521A CN104086521A (zh) 2014-10-08
CN104086521B true CN104086521B (zh) 2016-04-06

Family

ID=51634311

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201410369624.0A Active CN104086521B (zh) 2014-07-30 2014-07-30 咖啡酸类衍生化合物及其制备方法和应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN104086521B (zh)

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN108129443B (zh) * 2017-12-29 2020-04-03 山东省医学科学院药物研究所 咖啡酸酯类衍生物及其制备方法

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1976914A (zh) * 2004-04-30 2007-06-06 曾田香料株式会社 11－甲基－13－十三内酯、1 2－甲基－14－十四内酯以及13－甲基－15－十五内酯，包含它们的香料组合物、以及包含它们的化合物的制造方法
CN102311421A (zh) * 2011-09-08 2012-01-11 南京泽朗医药科技有限公司 一种制备哥纳香庚内酯a、b的方法
WO2013045704A2 (en) * 2011-09-29 2013-04-04 L'oreal Dye composition comprising a glycosyl iridoid compound and a particular aldehyde or imine, dyeing process and devices therefor

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1976914A (zh) * 2004-04-30 2007-06-06 曾田香料株式会社 11－甲基－13－十三内酯、1 2－甲基－14－十四内酯以及13－甲基－15－十五内酯，包含它们的香料组合物、以及包含它们的化合物的制造方法
CN102311421A (zh) * 2011-09-08 2012-01-11 南京泽朗医药科技有限公司 一种制备哥纳香庚内酯a、b的方法
WO2013045704A2 (en) * 2011-09-29 2013-04-04 L'oreal Dye composition comprising a glycosyl iridoid compound and a particular aldehyde or imine, dyeing process and devices therefor

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Unique Reactivity of Alkoxy Ginkgolide Lactones to Nucleophilic Reagents: Preparation of New Lactol Derivatives;Katsunori Tanaka et al.;《Bull. Chem. Soc. Jpn.》;20051004;第78卷(第10期);第1843-1850页 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN104086521A (zh) 2014-10-08

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN102353745B (zh) 一种刺梨的炮制方法及多指标检测方法
Panichayupakarananta et al. Antioxidant assay-guided purification and LC determination of ellagic acid in pomegranate peel
Zheng et al. Composition and serum antioxidation of the main flavonoids from fermented vine tea (Ampelopsis grossedentata)
CN102138998B (zh) 枳椇子总黄酮提取物及其在制备抗疲劳、抗缺氧或抗高原缺氧药物或食品中的应用
CN103623433A (zh) 一种改进的斑马鱼药物代谢模型建立方法
CN104546957B (zh) 一种菱角果壳多酚提取物及其制备方法与应用
CN104983915B (zh) 一种黑果枸杞天然复合抗氧化剂的制备方法
CN110433114B (zh) 抑制酪氨酸酶活性的植物提取物及其应用
CN101957346B (zh) 一种用模式生物斑马鱼研究药物代谢的新方法
CN104086521B (zh) 咖啡酸类衍生化合物及其制备方法和应用
CN101810696B (zh) 一种苹果总三萜的制备方法及用该方法制备的苹果总三萜
CN102764299B (zh) 一种中药材的提取方法
Liu et al. The beneficial effect of ginsenosides extracted by pulsed electric field against hydrogen peroxide-induced oxidative stress in HEK-293 cells
JP7050967B2 (ja) 肝臓の糖新生を抑制するための苦味のないゴーヤ由来のトリテルペン組成物およびその使用
CN106924117B (zh) 用提取青蒿素后剩余的黄花蒿残渣制备的洗护用品组合物
CN106119117A (zh) 一种原多甲藻酸毒素的产毒藻及其标准样品的制备与应用
CN109134488A (zh) 一种新化合物及其制备方法和在化妆品中的应用
CN109369586A (zh) 一种乌药烷型倍半萜二聚体及其制备方法和用途
Kok et al. Apoptogenic activity of a synthetic cantharimide in leukaemia: Implication on its structural activity relationship
CN105232600B (zh) 一种人参籽提取物及其制备方法和应用
CN105200112B (zh) 一种黄绿蜜环菌子实体抗肝癌活性甾醇类组分的制备方法
CN103823016A (zh) 一种丹天颈舒口服制剂的检测方法
CN104974214B (zh) 商陆皂苷元氨基胍衍生物Hu-17及其制备方法
CN113768918A (zh) 芦荟松在制备抗氧化应激损伤产品中应用
Sárközy et al. Isolation and characterization of chemical constituents from the poroid medicinal mushroom Porodaedalea chrysoloma (Agaricomycetes) and their antioxidant activity

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant