CN104076027A - 一种食品生产设备清洗效果评估方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种食品生产设备清洗效果评估方法。该方法通过对食品生产设备表面的无机质残留等级和有机质残留等级进行检测从而对清洗效果进行评估；无机质检测包括：利用去离子水将设备表面的可溶性盐类冲洗干净；利用蘸有无机酸的清洁验证棉签将无机质残留溶解并取样，采用无机质残留检测试剂与之反应；将反应液与无机质残留等级比色卡进行比色，确定无机质残留等级；有机质检测包括：利用蘸有有机溶剂的清洁验证棉签将有机质残留溶解并取样，采用有机质残留检测试剂与之反应；将反应液与有机质残留等级比色卡进行比色，确定有机质残留等级。该方法具有快速、简便等特点，便于对清洗效果进行及时跟踪检测，是一种实用的清洗效果评价方法。

Description

一种食品生产设备清洗效果评估方法

技术领域

本发明涉及一种食品生产设备清洗效果评估方法，属于食品加工技术领域。

背景技术

食品质量安全问题是国家关心的一个热点问题，我国开展了多次食品质量和食品安全的专项整治，食品质量安全关心到人民群众的生命健康和切身利益、关系到中国产品在世界上的形象和荣誉。食品生产过程中生产设备的高效清洗是保证产品质量安全的重要手段。食品生产设备的不洁净会导致产品口味变差、质量降低、货架期缩短，更有甚者会造成消费者发生食物中毒等重大食品安全事故。目前食品质量问题很多情况下是由于设备的清洗不彻底或没有及时发现清洗过程中的“死角”等原因造成的，设备清洗不彻底就会使设备中微生物肆意繁殖，严重影响食品工厂的正常生产，所以如何对设备进行有效清洗并对清洗效果进行有效监控成为食品工厂关心和研究的课题。

食品工厂的CIP程序一般为清水-热碱-清水-热酸-清水，在清洗结束后会用消毒液或热蒸汽对设备进行消毒处理，以达到杀灭微生物的目的。但往往由于清洗不彻底，清洗后设备表面还存在不溶性盐类、蛋白、糖类、脂肪等残留，使得消毒剂无法直接作用于微生物，消毒效率大打折扣，而且这些残留物成为微生物生长和繁殖的温床，久而久之形成微生物被膜，严重威胁食品生产过程。

食品工厂在生产设备CIP结束后，传统的清洗效果评估方法主要应用微生物涂抹结果进行判断。但是在清洗结束后立即进行微生物涂抹，大多数情况下其结果为零或极少，并不能反映出设备的实际清洗效果，其原因在于清洗完立即涂抹，微生物没有足够的生长繁殖时间；再者使用微生物涂抹后续培养操作繁琐，培菌时间较长(一般为24-48小时)，检测结果较为滞后，不能及时发现CIP中存在的问题并加以解决。如果在进行清洗效果检测时能够在生产现场快速完成检测与分析，那么将极大地提高清洗效果检测的速度和效率。食品生产设备表面残留的污垢可以分为无机质污垢和有机质污垢；无机质污垢包括磷、钙、镁等，它们以不溶物的形式附着在设备表面，一般采用酸性清洗剂将其去除，设备表面残留的无机质污垢使得有机质污垢极易附着在设备表面；有机质污垢包括蛋白质、脂肪等，会粘附在设备表面，一般采用碱性清洗剂将其去除，设备表面残留的有机质污垢与微生物繁殖污染有直接关系。

如果找到一种能够快速、有效地检测无机质、有机质残留的方法，从而间接评估设备微生物的生长情况，确定设备清洗效果，将成为一种较为实用的食品工厂清洗效果评估方法。

发明内容

为解决上述技术问题，本发明的目的在于提供一种食品工厂中食品生产设备清洗效果评估方法，通过检测食品生产设备表面残留的无机质(主要是Ca²⁺)、有机质(主要是蛋白质)，来预测清洗之后的设备表面微生物可能的生长情况，以此来评估食品生产设备的清洗效果，该方法具有快速、简便、成本低等优点，适用于食品工厂进行清洗效果的现场评估。

为达到上述目的，本发明提供了一种食品生产设备清洗效果评估方法，其是通过对经过清洗的设备表面的无机质残留(主要是Ca²⁺)和有机质残留(主要是蛋白质)进行检测从而对清洗效果进行评估的方法；该评估方法包括无机质检测和有机质检测两部分；其中，无机质检测包括以下步骤：

利用去离子水将设备表面的可溶性盐类冲洗干净；

利用蘸有无机酸的清洁验证棉签将经过清洗的食品生产设备表面的无机质残留(主要是Ca²⁺)溶解并取样收集，在室温条件下，采用无机质残留检测试剂与之反应，反应之后得到的反应液带有一定的颜色，反应时间为3-5分钟；

将反应液的颜色与无机质残留等级比色卡进行比色，确定食品生产设备表面的无机质残留等级；

有机质检测包括以下步骤：

利用蘸有有机溶剂的清洁验证棉签将食品生产设备表面的有机质残留(主要是蛋白质等)溶解并取样收集，在60-70℃下，采用有机质残留检测试剂A及有机质残留检测试剂B与之反应，反应时间控制为10-15分钟，反应后得到的反应液带有一定的颜色，颜色的深浅与产物的浓度存在线性关系；

将反应液的颜色与有机质残留等级比色卡进行比色，确定食品生产设备表面的有机质残留等级。

在上述评估方法中，优选地，无机质残留检测中所采用的无机酸包括稀硝酸、稀硫酸或稀盐酸，该无机酸的浓度为0.05-1mol/L。

在上述评估方法中，优选地，无机质残留检测中所采用的无机质残留检测试剂是通过以下步骤制备的：将25mL浓度为0.2mol/L的邻苯二甲酸氢钾缓冲液与6.0mL浓度为0.1mol/L的盐酸混合，稀释至100mL(此时pH值大约为2.7)，然后与浓度为0.25g/L的偶氮氯膦III水溶液按照4∶5的体积比混合，得到所述无机质残留检测试剂。

在上述评估方法中，优选地，有机质残留检测中所采用的有机溶剂为酒精或丙酮；所述酒精为无水乙醇或者浓度为95wt％的酒精，所述丙酮的浓度为70-80wt％。

在上述评估方法中，优选地，有机质残留检测中所采用的有机质残留检测试剂A是通过以下步骤制备的：将1g二喹啉甲酸或二喹啉甲酸钠盐、2g无水碳酸钠、0.16g酒石酸钾、0.4g氢氧化钠和0.95g碳酸氢钠溶于100mL蒸馏水中，用0.1mol/L氢氧化钾溶液将pH值调整至11.5，得到所述有机质残留检测试剂A；有机质残留检测试剂B为硫酸铜的水溶液，其浓度为4wt％。

在上述评估方法中，通过将无机质残留检测过程中得到的反应液的颜色与无机质残留等级比色卡进行比色，确定食品生产设备表面的无机质残留等级，其基本原理为：在酸性条件下(pH＜3)，游离偶氮氯膦III在溶液中呈玫瑰红色，当其与Ca²⁺络合后形成紫蓝色偶氮氯瞵III-Ca²⁺络合物，在665nm处有最大吸收峰，在其他pH条件下也可以与金属离子形成不同颜色的络合物，通过调整试剂的pH值可以选择性地测定试样中所含的无机质成分，从而确定无机质残留等级。

通过将有机质残留检测过程中得到的反应液的颜色与有机质残留等级比色卡进行比色，确定设备表面的有机质残留等级，其基本原理为：在碱性环境下蛋白质与Cu²⁺络合，并将Cu²⁺还原成Cu⁺，二喹啉甲酸或二喹啉甲酸钠盐与Cu⁺结合形成稳定的紫色复合物，在562nm处有最大吸收值并与蛋白质浓度成正比，据此可测定蛋白质浓度，从而确定有机质残留等级。

在上述评估方法中，优选地，无机质残留等级比色卡包括四个等级，其中，玫瑰红色代表清洗完全合格，紫色代表清洗合格，浅紫色(或称紫罗兰色)代表清洗不合格，蓝色代表清洗严重不合格。

在上述评估方法中，优选地，有机质残留等级比色卡包括四个等级，其中，绿色代表清洗完全合格，灰色代表清洗合格，紫色代表清洗不合格，深紫色代表清洗严重不合格。

在上述评估方法中，优选地，取样的取样面积为20-30cm²，更优选为25cm²。

在上述评估方法中，优选地，取样的位置包括管路的弯头处和/或堵头处、罐体的入口处和/或出料口等，除此之外，还可以选择其他地方进行评估。具体的取样位置可以根据实际需要和实际情况进行选择。

本发明所提供的上述用于评估食品工厂的食品生产设备清洗效果的方法可以按照以下步骤进行：

(1)选定需要评估的食品生产设备：选择食品生产设备中的评估部位，对于管路一般选择管路的弯头、堵头等地方进行评估，对于罐体一般选择入孔或入口周围、出料口等地方进行评估；除此之外，还可以选择一些其他地方进行评估。

(2)取样面积的确定：该方法中取样面积可以为20-30cm²。

(3)无机质残留取样：用去离子水将待评估部位存在的可溶性盐冲洗掉，滴加数滴无机酸(例如稀硝酸、稀盐酸、稀硫酸)至清洁验证棉签(不含任何蛋白、脂肪、无机离子等对检测有影响的物质)，用棉签涂抹待评估部位，涂抹时应使棉签每个部位都与待评估部位充分接触，涂抹完毕将棉签放置于试管中。

(4)无机质残留检测：在步骤(3)的试管中滴加3mL无机质残留检测试剂，震荡后室温反应3-5min，将反应液与无机质残留等级比色卡进行比色，确定无机质残留等级。本方法将无机质残留分为4个等级，记为1、2、3、4，每个等级对应的无机质残留量(Ca2+残留量)、吸光度值及清洗效果评估结果如表1所示。

表1无机质残留等级评估表

等级	颜色	无机质残留(μg/25cm2)	吸光度值(665nm)	无机质清洗效果评估
					1	玫瑰红色	0.5	0.05-0.12	完全合格
2	紫色	2.0	0.12-0.35	合格
					3	浅紫色	6.0	0.47-0.86	不合格
4	蓝色	15.0以上	1.20以上	严重不合格

表2有机质残留等级评估表

等级	颜色	有机质残留量(μg/25cm2)	吸光度值(562nm)	有机质清洗效果评估
					1	绿色	0.5	0.01-0.16	完全合格
2	灰色	50	0.42-0.76	合格
					3	紫色	125	0.76-1.71	不合格
4	深紫色	150以上	1.94以上	严重不合格

(5)有机质残留取样：滴加数滴酒精至清洁验证棉签(不含任何蛋白、脂肪、无机离子等对检测有影响的物质)，用棉签涂抹待评估部位，涂抹时应使棉签每个部位都与待评估部位充分接触，涂抹完毕将棉签放置于试管中。

(6)有机质残留检测：在步骤(5)的试管中滴加1mL有机质残留检测试剂A以及20μL有机质残留检测试剂B，震荡后在60-70℃的热水浴中反应10-15min，将反应液与有机质残留等级比色卡比色，确定有机质残留等级；本方法将有机质残留分为4个等级，记为1、2、3、4，每个等级对应的有机质残留量(蛋白质残留量)、吸光度值及清洗效果评估结果如表2所示。

(7)清洗效果的评估：根据步骤(4)和步骤(6)得到的无机质残留等级和有机质残留等级，按照表1和表2确定清洗效果，完成对于食品生产设备的清洗效果的评估。

在本发明中，无机质残留等级比色卡是通过以下方法制作的：

准确称取0.2497g碳酸钙于烧杯中，加入30mL蒸馏水，小心加入1mL浓盐酸(浓度为12mol/L)搅拌，使其溶解，转移至100mL容量瓶中摇匀，得含钙为1.000mg/mL的标液。将5mL标液(1000μg/mL)用蒸馏水(容量瓶)稀释成钙离子含量为50μg/mL的工作液I，将10mL标液(1000μg/mL)用蒸馏水稀释成钙离子含量100μg/mL的工作液II。取工作液I10、20、40、80、120、200、300、工作液II200μL(钙离子含量为0.5、1.0、2.0、4.0、6.0、10.0、15.0、20.0μg)于试管中，加蒸馏水补充至300μL加入无机质残留检测试剂3mL反应3-5min，得到钙离子含量吸光度检测数据，具体如表3所示，通过观察各反应液的颜色，选择颜色变化相对明显的4个颜色作为4个等级。

表3

Ca2+的含量μg	0.5	1.0	2.0	4.0	6.0	10.0	15.0	20.0
									等级	1	1-2	2	2-3	3	3	3-4	4
吸光度	0.05	0.12	0.23	0.35	0.52	0.86	1.28	1.75

在本发明中，有机质残留等级比色卡是通过以下方法制作的：

按照WPC(浓缩乳清蛋白)80中蛋白含量80％计算，准确称取0.625g WPC80，用蒸馏水定容至100mL，制得蛋白浓度为5mg/mL的标液I；将10mL的标液I利用蒸馏水配制成蛋白浓度为0.5mg/mL的工作液II；将20mL的标液I采用蒸馏水定容至100mL，制成浓度为1mg/mL的工作液III，取工作液II10、20、60、100、120、240、250、300μL，取工作液III180、210、250μL(蛋白质含量分别为5、10、30、50、60、120、125、150，180、210、250μg)，加蒸馏水补充体积至300μL，分别加入1mL有机质残留检测试剂A、20μL有机质残留检测试剂B，在60-70℃反应10-15min，得到蛋白质含量吸光度的检测数据，通过观察各反应液的颜色，选择颜色变化相对明显的4个颜色作为4个等级，具体如表4所示。

从试验结果来看，各个等级间的界限并不一定要完全按照制定的评估表严格区分，吸光度可以介于2个等级间，这不会影响评估等级的确定。

利用本发明提供的食品生产设备清洗效果评估方法检测设备的清洗效果具有快速、简便等特点，便于车间对清洗效果进行及时跟踪检测，是一种实用的清洗效果评价方法。

表4有机质残留等级比色卡制作

蛋白含量μg	5	10	30	50	60	120	125	150	180	210	250
												比色等级	1	1-2	2	2	2-3	3	3	3-4	4	4	4
吸光度	0.01	0.16	0.42	0.70	0.76	1.41	1.46	1.71	1.94	2.14	2.34

附图说明

图1为实施例1中的有机质残留等级与菌落总数的关系图。

图2为实施例1中的无机质残留等级与菌落总数的关系图。

图3a-图3f为食品生产设备不同部位的有机质残留等级、无机质残留等级及微生物生长情况进行检测分析结果。

图4为钙离子检测标准曲线。

图5为蛋白质检测标准曲线。

具体实施方式

为了对本发明的技术特征、目的和有益效果有更加清楚的理解，现对本发明的技术方案进行以下详细说明，但不能理解为对本发明的可实施范围的限定。

实施例1

利用本发明提供的评估方法对清洗消毒5小时后的挤奶设备(采样点包括计量瓶、挤乳器、奶衬、吸奶管、过滤管、奶罐等)的清洗效果进行评估，同时采用传统的微生物涂抹方法进行验证，具体按照以下步骤进行：

无机质残留检测：在指定部位表面，用去离子水冲洗后，用蘸有稀硝酸(浓度为0.1mol/L)的清洁验证棉签擦取试样，取样面积为20-30cm²；取样后将棉签放入小试管中，加入3mL无机质残留检测试剂，室温下反应3-5分钟，将反应液与无机质残留比色卡进行对比确定残留等级；

有机质残留检测：在指定部位表面，用蘸有无水乙醇的清洁验证棉签擦取试样，取样面积为20-30cm²；将棉签放入小试管中，加入1mL有机质残留检测试剂A和20μL有机质残留检测试剂B，然后在60-70℃反应10-15分钟，将反应液与有机质残留比色卡对比确定残留等级；

微生物检测：在指定部位表面，用沾有生理盐水的无菌棉签(或无菌纸片)擦取试样，取样面积为20-30cm²，然后采用国标法进行检测。

挤奶设备早上9:00与晚上8:00各进行一次清洗，在清洗结束5小时后采样，由于晚上采样太晚(凌晨1:00)，所以每天只有下午进行一次采样。检测的挤奶设备包括计量瓶(玻璃材质)、挤乳器(橡胶材质)、奶衬(橡胶材质)、吸奶管(不锈钢材质)、过滤管(不锈钢材质)、奶罐(不锈钢材质)，每次采集计量瓶、挤乳器、奶衬各4个、过滤器及奶罐(包括出口及罐顶内壁)各1个，连续采集6天(普查天数/检测天数)，实验中共采集无机质残留样本112个、有机质残留、微生物样本各113个，以寻找微生物与有机质、无机质残留等级的关系。具体采样位置及采样数量见表5。

表5挤奶设备取样位置及数量

将各个残留等级下菌落总数进行统计和平均处理，结果如图1和图2所示，图1为有机质残留等级与菌落总数的关系图，图2为无机质残留等级与菌落总数的关系图。

设备表面有机质残留与微生物生长有直接关系。从图1可以看出，当有机质残留等级在1、2时，设备表面的微生物生长较少，微生物数量级基本一致；当有机质残留等级在3、4时，设备表面微生物大量生长，较多的有机质残留为微生物生长提供了充足的营养，使清洗后设备表面微生物大量繁殖。从图2可以看出，当无机质残留等级达到4时，微生物数量急剧增加，无机质残留与微生物生长并不存在直接关系，但较多的无机质残留会使蛋白、糖类等更易粘附在设备表面，难以清除，造成微生物滋长，因此，无机质残留等级也能够反应设备的清洗效果。

从实施例1可以看出，采用本发明提供的方法可以及时地了解设备清洗状况，预判设备表面微生物生长情况，所以该方法可以作为一种食品工厂的食品生产清洗效果的评估方法。

实施例2

实施例1中对于挤奶设备的检测分析结果分别如图3a-图3f所示，其中，图3a为计量瓶下口处的检测分析结果，图3b为挤乳器下盘处的检测分析结果，图3c为奶衬内壁的检测分析结果，图3d为吸奶管下口处的检测分析结果，图3e为奶罐内壁的检测分析结果，图3f为过滤管下口处的检测分析结果。从图3a-图3f所显示的结果来看，除吸奶管下口外，其余各设备表面微生物生长情况与有机质残留等级呈一定的相关性，即有机质残留等级在3、4时，微生物的数量明显较多；同时结果表明设备的材质对于检测结果没有较大影响，本发明所提供的方法能够适用于不同材质的设备，并且能够很好地反映出有机质残留与微生物生长的相关性，体现出设备的清洗效果。

实施例3

有机质残留检测试剂的稳定性测试：

按照WPC80中蛋白含量80％计算，准确称取0.625g WPC80，用蒸馏水配制得到100mL浓度为5mg/mL的标液I；取10mL的标液I，用蒸馏水配制得到100mL浓度为500μg/mL的工作液II；将20mL的标液I采用蒸馏水定容至100mL，制成浓度为1mg/mL的工作液III；用工作液II、III和蒸馏水配制蛋白质含量分别为10、30、60、90、120、150、210、240μg的溶液(所需标液体积见表6)，并补充蒸馏水至0.3mL，加入1mL有机质残留检测试剂A和20μL有机质残留检测试剂B，分别在60℃保温10min后测定吸光度以及在60℃保温10min后继续在常温下放置18h后测定吸光度。测试结果如表6所示，其中，1代表60℃保温10min后的检测结果；2代表60℃保温10min后继续常温下静置18h(16:00-次日10:00)后的检测结果。

从表6所示的检测结果来看，吸光度值的变异系数(CV)平均值是1.35％，很小，说明60℃保温10min内反应是近乎完全的，后续的常温条件下颜色变化也很小。

表6不同放置时间对检测结果的影响试验结果

实施例4

油脂类物质对有机质残留(蛋白质)检测结果的影响试验：

以实施例3中的工作液II和III为基准物质，配制蛋白质含量分别为10、60、120、240μg的蛋白溶液(所需标液及蒸馏水体积见表6)，然后按照蛋白质质量的0.1、0.2、0.4和0.6倍加入色拉油，并加入1mL有机质残留检测试剂A和20μL有机质残留检测试剂B，然后在60℃保温10min后进行检测，检测结果如表7所示，其中，P:F是指蛋白质与油脂的质量比。

表7油脂对有机质残留检测结果的影响试验结果

从表7所示的结果来看油脂类物质对有机质残留(蛋白质)的检测结果不会造成影响，在蛋白质溶液中加入不同量的油脂，其检测结果不会发生变化。

实施例5

酒精、丙酮作为有机质回收试剂对检测结果的影响试验：

在不锈钢试片上涂抹一定量蛋白质溶液(蛋白含量分别为5、40、100、300μg，所对应的蛋白质残留等级分别为1、2、3、4)，制作已知残留等级的污片，晾干后，分别用无水乙醇、浓度为70wt％的丙酮沾湿棉签进行涂抹，加入1mL有机质残留检测试剂A和20μL有机质残留检测试剂B，然后在60℃保温10min后测定有机质残留等级，结果如表8所示。

表8不同有机质残留回收试剂对检测结果的影响试验结果

从表8所示的检测结果来看，采用酒精和丙酮作为回收有机质残留的试剂，其检测结果一致。

实施例6

稀硝酸、稀盐酸及稀硫酸作为无机质回收试剂对检测结果的影响试验：

在不锈钢试片上涂抹一定量钙离子(钙离子含量分别为1、4、9、16μg、所对应的钙离子残留等级分别为1、2、3、4)，制作已知残留等级的污片，晾干后，分别用浓度为0.1mol/L的稀硝酸、稀盐酸和稀硫酸沾湿棉签进行涂抹，然后加入3mL无机质残留检测试剂测定无机质残留等级，结果如表9所示。

表9不同无机质残留回收试剂对检测结果的影响试验结果

实施例7

无机质残留检测试剂稳定性测试试验：

称取0.2497g碳酸钙，使其与30mL蒸馏水混合，加入1mL浓盐酸(浓度为12mol/L)搅拌使其溶解，加入蒸馏水制得含钙1.000mg/mL的标液；

用5mL标液(1.000mg/mL)以蒸馏水定容至100mL稀释成50μg/mL的工作液I，按表10所示的添加量在试管中分别加入工作液I、蒸馏水及无机质残留检测试剂，在室温下放置3-5分钟后，检测吸光度值(如表10中吸光度值中的1所示)，继续在室温下放置2h后再次检测吸光度值(如表10中吸光度值中的2所示)。试验结果如表10所示。

由表10所示的结果可知，放置2h后和未放置的检测结果之间的变异系数均值为3.10％，表明该无机质残留检测试剂在常温下放置3-5min反应基本完全，随着时间的延长，吸光度值仍能够保持稳定。

表10不同放置时间对检测结果的影响试验结果

实施例8

无机质残留检测方法中对无机质残留回收情况试验：

采用实施例7中的标液用蒸馏水配制成得含钙20μg/mL的工作液II；按表10所示的添加量添加工作液II、蒸馏水制成已知浓度的钙离子溶液，将已知浓度钙离子溶液涂抹在不锈钢试片表面，晾干后用蘸有稀硝酸的棉签收集钙离子，加入3mL无机质残留检测试剂并在室温下放置3-5分钟后进行无机质残留测定，并将反应液采用分光光度计(665nm)检测吸光度值，用事先制作好的钙离子检测标准曲线公式计算回收的钙离子含量(标准曲线公式y＝0.082x+0.036，R²=0.998，其中y表示吸光度、x表示钙离子含量，单位为μg)。试验结果如表11所示。

由表11所示的结果可知，回收率平均值为80.06％，说明使用本发明的方法检测的Ca²⁺含量低于实际设备表面残留的Ca²⁺含量，但是该回收率在可以接受的范围之内，本发明所提供的测试方法的准确度可以接受。

表11Ca²⁺回收试验试验结果

钙离子检测标准曲线制作：

采用实施例7的标液，用蒸馏水制成含钙20μg/mL的工作液II，按表12给出的数据添加试剂，室温反应3-5分钟后，将反应液采用分光光度计(665nm)检测吸光度值，得到标准曲线，如图4所示，得到钙离子标准曲线公式为：y＝0.082x+0.036，R²＝0.998，其中y表示吸光度、x表示钙离子含量，单位为μg。

表12钙离子检测标准曲线制作

实施例9

有机质残留检测试剂对蛋白质残留的回收情况试验：

按照WPC80中蛋白含量80％计算，准确称取0.50g WPC80，用蒸馏水制得蛋白浓度为4mg/mL的标液I；吸取2.5mL标液I，加入7.5mL蒸馏水稀释制得浓度为1mg/mL的工作液II；按表13所示的添加量添加工作液II、蒸馏水制成已知蛋白质浓度的溶液，将已知浓度的蛋白质溶液涂抹于不锈钢试片上，晾干后用棉签蘸酒精收集蛋白质后，加入1mL有机质残留检测试剂A和20μL有机质残留检测试剂B，在60℃保温10min后进行有机质残留检测，并将反应液采用分光光度计(562nm)进行检测，用事先制作好的蛋白质标准曲线公式(y＝0.011x+0.048，R²＝0.997，其中y表示吸光度、x表示蛋白质含量，单位为μg)计算蛋白质含量。试验结果如表13所示。

由表13所示的结果可知，蛋白质平均回收率为77.9％，表明使用本发明检测到的蛋白质含量低于实际残留的蛋白质量，但该回收率在可接受的范围内，本发明所提供的测试方法的准确度可以接受。

表13蛋白质回收试验结果

蛋白质标准曲线制作

取实例3中工作液II，按表14所记载的添加量添加试剂，加入有机质残留检测试剂A1mL、有机质残留检测试剂B20μL，60℃保温10min，将反应液采用分光光度计(562nm)进行检测，得到蛋白质标准曲线，如图5所示，计算得到蛋白质标准曲线公式为：y＝0.011x+0.048，R²＝0.997，其中y表示吸光度、x表示蛋白质含量，单位为μg。

表14蛋白质标准曲线的制作

工作液II/μL	--	20	60	120	180	240	300
								蒸馏水/μL	300	280	240	180	120	60	--
蛋白含量/μg	0	10	30	60	90	120	150

综上所述，本发明所提供的食品生产设备清洗效果评估方法能够实现对于设备的清洗效果的快速、简便检测，便于车间对清洗效果进行及时跟踪检测，是一种实用的清洗效果评价方法。

Claims (10)

1.一种食品生产设备清洗效果评估方法，其是通过对经过清洗的食品生产设备表面的无机质残留和有机质残留进行检测从而对清洗效果进行评估的方法，该评估方法包括无机质检测和有机质检测两部分；

其中，所述无机质检测包括以下步骤：

利用去离子水将经过清洗的食品生产设备表面的可溶性盐类冲洗干净；

利用蘸有无机酸的清洁验证棉签将食品生产设备表面的无机质残留溶解并取样收集，在室温条件下，采用无机质残留检测试剂与之反应，反应时间为3-5分钟；

将反应液的颜色与无机质残留等级比色卡进行比色，确定食品生产设备表面的无机质残留等级；

所述有机质检测包括以下步骤：

利用蘸有有机溶剂的清洁验证棉签将食品生产设备表面的有机质残留溶解并取样收集，在60-70℃下，采用有机质残留检测试剂A及有机质残留检测试剂B与之反应，反应时间为10-15min；

将反应液的颜色与有机质残留等级比色卡进行比色，确定食品生产设备表面的有机质残留等级。

2.根据权利要求1所述的食品生产设备清洗效果评估方法，其中，所述无机酸包括稀硝酸、稀硫酸或稀盐酸，所述无机酸的浓度为0.05-1mol/L。

3.根据权利要求1所述的食品生产设备清洗效果评估方法，其中，所述无机质残留检测试剂是通过以下步骤制备的：

将25mL浓度为0.2mol/L的邻苯二甲酸氢钾缓冲液与6.0mL浓度为0.1mol/L的盐酸混合，稀释至100mL，然后与浓度为0.25g/L的偶氮氯膦III水溶液按照4∶5的体积比混合，得到所述无机质残留检测试剂。

4.根据权利要求1所述的食品生产设备清洗效果评估方法，其中，所述有机溶剂为酒精或丙酮；所述酒精为无水乙醇或者浓度为95wt％的酒精，所述丙酮的浓度为70-80wt％。

5.根据权利要求1所述的食品生产设备清洗效果评估方法，其中，所述有机质残留检测试剂A是通过以下步骤制备的：将1g二喹啉甲酸或二喹啉甲酸钠盐、2g无水碳酸钠、0.16g酒石酸钾、0.4g氢氧化钠和0.95g碳酸氢钠溶于100mL蒸馏水中，用浓度为0.1mol/L的氢氧化钾溶液将pH值调整至11.5，得到所述有机质残留检测试剂A；

所述有机质残留检测试剂B为硫酸铜的水溶液，其浓度为4wt％。

6.根据权利要求1所述的食品生产设备清洗效果评估方法，其中，所述无机质残留等级比色卡包括四个等级，其中，玫瑰红色代表清洗完全合格，紫色代表清洗合格，浅紫色代表清洗不合格，蓝色代表清洗严重不合格。

7.根据权利要求1所述的食品生产设备清洗效果评估方法，其中，所述有机质残留等级比色卡包括四个等级，其中，绿色代表清洗完全合格，灰色代表清洗合格，紫色代表清洗不合格，深紫色代表清洗严重不合格。

8.根据权利要求1所述的食品生产设备清洗效果评估方法，其中，所述取样的取样面积为20-30cm²。

9.根据权利要求8所述的食品生产设备清洗效果评估方法，其中，所述取样的取样面积为25cm²。

10.根据权利要求1所述的食品生产设备清洗效果评估方法，其中，所述取样的位置包括管路的弯头处和/或堵头处、罐体的入口处和/或出料口。