CN104059949B - 一种磷脂酰丝氨酸的制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种磷脂酰丝氨酸的制备方法，以粗大豆卵磷脂为原料，加入水饱和的乙酸丁酯搅拌回流降解，减压蒸干乙酸丁酯，浓缩物加入甲醇回流溶解，甲醇层减压回收甲醇得到甲醇可溶物，将甲醇可溶物与有机溶剂配置溶液，再将有机相与含酶水溶液配置水相，混合有机相和水相进行反应，反应完毕分离出有机相，用水洗涤有机相，真空脱去有机溶剂，浓缩物用无水乙醇溶解搅拌，分离出无水乙醇不溶物，真空干燥得到磷脂酰丝氨酸产品。与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：（1）本发明所用的原料为粗大豆卵磷脂，因磷脂酰胆碱含量较低而价格低廉；（2）本发明整体工艺简单，易于实现工业化，制得的磷脂酰丝氨酸含量40%以上，纯度较高，对我国磷脂工业，保健食品以及药品工业都将具有重要意义。
Description
技术领域
本发明属于磷脂技术领域，具体涉及一种磷脂酰丝氨酸的制备方法。
背景技术
磷脂酰丝氨酸（phosphatidylserine，PS）又称丝氨酸磷脂，二酰甘油酰磷酸丝氨酸，简称PS，是一类普遍存在的磷脂，通常位于细胞膜的内层，磷酯化合物中的磷酸甘油酯类，是细胞膜组分之一，与一系列的膜功能有关。尤其在人体的神经系统，是大脑的细胞膜的重要组成成分之一，同时对大脑的各种功能（尤其是对大脑的记忆力和情绪的稳定）起到重要的调节作用，如它能影响着细胞膜的流动性、通透性，并且能激活多种酶类的代谢和合成。现有的合成方法有化学合成法和生物酶法合成法，且以后者居多。化学合成法副反应多，反应复杂，副产物复杂，分离难度非常大，如CN103351403专利文献所公开的方法。生物酶法具有较大优势且研究较多，如US5965413，US6492146，US7049107，US5700668，US6878532等专利文献，但是已公开的酶法合成方法都是以较高纯度的磷脂酰胆碱为原料合成磷脂酰丝氨酸的（如磷脂酰胆碱含量50%以上的优质磷脂），产物甚至以钙盐的形式存在，再生步骤较为繁琐，生产成本较高。
发明内容
本发明的目的在于提供一种工艺简单，成本较低，能耗较低，易于实现工业化生产的利用粗大豆卵磷脂通过酶法制备磷脂酰丝氨酸的方法。
本发明的上述目的是通过采取如下技术手段来实现的：
一种磷脂酰丝氨酸的制备方法，其特征在于，以粗大豆卵磷脂为原料，加入水饱和的乙酸丁酯搅拌回流降解，减压蒸干乙酸丁酯，浓缩物加入甲醇回流溶解，甲醇层减压回收甲醇得到甲醇可溶物，将甲醇可溶物与有机溶剂配置溶液，再将有机相与含酶水溶液配置水相，混合有机相和水相进行反应，反应完毕分离出有机相，用水洗涤有机相，真空脱去有机溶剂，浓缩物用无水乙醇溶解搅拌，分离出无水乙醇不溶物，真空干燥得到磷脂酰丝氨酸产品。
本发明所述粗大豆卵磷脂原料为磷脂酰胆碱含量大于或者等于10%的粗大豆卵磷脂。
本发明所述粗大豆卵磷脂原料与原料回流降解时所用的水饱和的乙酸丁酯的重量体积比为1:1-1:0.5，降解的温度为120-127℃，降解的时间为40-48小时。
本发明所述减压蒸干乙酸丁酯后的浓缩物与加入的甲醇的重量体积比为1:6-1:10。
本发明所述有机溶剂为二氯甲烷或者环己烷，甲醇可溶物与有机溶剂的重量体积比为1:5-1:8。
本发明所述有机相与含酶水溶液的体积比为8:1-12:1，所述含酶水溶液中，L-丝氨酸的浓度为0.15-0.2g/ml，磷脂酶D的酶活为4-5U/ml， pH调节为6.3-6.5。
本发明所述有机相和水相的反应温度为30-35℃，反应时间为35-40小时。
本发明所述洗涤有机相的水与有机相的体积比为1:1-2:1。
本发明所述真空脱去有机溶剂后的浓缩物用无水乙醇溶解搅拌的温度为25-30℃，时间为2-5小时，浓缩物与无水乙醇重量体积比为1:7-1:10。
本发明所述磷脂酰丝氨酸产品中，磷脂酰丝氨酸的含量大于40%。
与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：
（1）本发明所用的原料为粗大豆卵磷脂，因磷脂酰胆碱含量较低而价格低廉；
（2）本发明整体工艺简单，易于实现工业化，制得的磷脂酰丝氨酸含量40%以上，纯度较高，对我国磷脂工业，保健食品以及药品工业都将具有重要意义。
具体实施方式
以下实施例仅用于阐述本发明，而本发明的保护范围并非仅仅局限于以下实施例。所述技术领域的普通技术人员依据以上本发明公开的内容和各参数所取范围，均可实现本发明的目的。
实施例1
100g粗大豆卵磷脂原料（磷脂酰胆碱含量为10%），加入50ml水饱和的乙酸丁酯120℃搅拌回流降解40小时，减压蒸干乙酸丁酯，浓缩物加入600ml甲醇回流溶解，甲醇层减压回收甲醇得到甲醇可溶物55克。加入275ml二氯甲烷溶解甲醇可溶物，再配置含酶水溶液34.5ml，其中酶液中L-丝氨酸的浓度为0.15g/ml，酶液中磷脂酶D的酶活为4U/ml，调节pH为6.3。混合有机相和水相，于30℃反应40小时。反应完毕分离出有机相，用275ml水洗涤有机相，真空脱去有机溶剂得到60克浓缩物，浓缩物用420ml无水乙醇25℃溶解搅拌2小时，分离出无水乙醇不溶物，真空干燥得到磷脂酰丝氨酸含量为41%的产品9g。
实施例2
100g粗大豆卵磷脂原料（磷脂酰胆碱含量为11%），加入60ml水饱和的乙酸丁酯127℃搅拌回流降解41小时，减压蒸干乙酸丁酯，浓缩物加入700ml甲醇回流溶解，甲醇层减压回收甲醇得到甲醇可溶物57克。加入456ml二氯甲烷溶解甲醇可溶物，再配置含酶水溶液38ml，其中酶液中L-丝氨酸的浓度为0.18g/ml，酶液中磷脂酶D的酶活为4.5U/ml，调节pH为6.4。混合有机相和水相，于30℃反应35小时。反应完毕分离出有机相，用650ml水洗涤有机相，真空脱去有机溶剂得到63克浓缩物，浓缩物用504ml无水乙醇27℃溶解搅拌3小时，分离出无水乙醇不溶物，真空干燥得到磷脂酰丝氨酸含量为42%的产品10g。
实施例3
100g粗大豆卵磷脂原料（磷脂酰胆碱含量为17%），加入90ml水饱和的乙酸丁酯121℃搅拌回流降解48小时，减压蒸干乙酸丁酯，浓缩物加入800ml甲醇回流溶解，甲醇层减压回收甲醇得到甲醇可溶物62克。加入372ml环己烷溶解甲醇可溶物，再配置含酶水溶液46.5ml，其中酶液中L-丝氨酸的浓度为0. 2g/ml， 酶液中磷脂酶D的酶活为4.7U/ml，调节pH为6.5。混合有机相和水相，于35℃反应36小时。反应完毕分离出有机相，用496ml水洗涤有机相，真空脱去有机溶剂得到69克浓缩物，浓缩物用552ml无水乙醇30℃溶解搅拌4小时，分离出无水乙醇不溶物，真空干燥得到磷脂酰丝氨酸含量为47%的产品12g。
实施例4
100g粗大豆卵磷脂原料（磷脂酰胆碱含量为20%），加入100ml水饱和的乙酸丁酯122℃搅拌回流降解48小时，减压蒸干乙酸丁酯，浓缩物加入900ml甲醇回流溶解，甲醇层减压回收甲醇得到甲醇可溶物64克。加入512ml环己烷溶解甲醇可溶物，再配置含酶水溶液42.6ml，其中酶液中L-丝氨酸的浓度为0. 19g/ml，酶液中磷脂酶D的酶活为5 U/ml，调节pH为6.4。混合有机相和水相，于35℃反应38小时。反应完毕分离出有机相，用800ml水洗涤有机相，真空脱去有机溶剂得到70克浓缩物，浓缩物用630ml无水乙醇27℃溶解搅拌5小时，分离出无水乙醇不溶物，真空干燥得到磷脂酰丝氨酸含量为49%的产品14g。
实施例5
100g粗大豆卵磷脂原料（磷脂酰胆碱含量为22%），加入100ml水饱和的乙酸丁酯125℃搅拌回流降解48小时，减压蒸干乙酸丁酯，浓缩物加入1000ml甲醇回流溶解，甲醇层减压回收甲醇得到甲醇可溶物65克。加入520ml环己烷溶解甲醇可溶物，再配置含酶水溶液43.3ml，其中酶液中L-丝氨酸的浓度为0. 2g/ml， 酶液中磷脂酶D的酶活为4.9 U/ml，调节pH为6.5。混合有机相和水相，于33℃反应40小时。反应完毕分离出有机相，用1040ml水洗涤有机相，真空脱去有机溶剂得到71克浓缩物，浓缩物用710ml无水乙醇27℃溶解搅拌5小时，分离出无水乙醇不溶物，真空干燥得到磷脂酰丝氨酸含量为50%的产品15g。
Claims (9)
1.一种磷脂酰丝氨酸的制备方法，其特征在于，以粗大豆卵磷脂为原料，加入水饱和的乙酸丁酯搅拌回流降解，降解的温度为120-127℃，降解的时间为40-48小时，减压蒸干乙酸丁酯，浓缩物加入甲醇回流溶解，甲醇层减压回收甲醇得到甲醇可溶物，将甲醇可溶物与有机溶剂配置溶液，有机溶剂为二氯甲烷或者环己烷，再将有机相与含酶水溶液配置水相，混合有机相和水相进行反应，反应完毕分离出有机相，用水洗涤有机相，真空脱去有机溶剂，浓缩物用无水乙醇溶解搅拌，分离出无水乙醇不溶物，真空干燥得到磷脂酰丝氨酸产品。
2.根据权利要求1所述的一种磷脂酰丝氨酸的制备方法，其特征在于，所述粗大豆卵磷脂原料为磷脂酰胆碱含量大于或者等于10%的粗大豆卵磷脂。
3.根据权利要求1所述的一种磷脂酰丝氨酸的制备方法，其特征在于，所述粗大豆卵磷脂原料与原料回流降解时所用的水饱和的乙酸丁酯的重量体积比为1:1-1:0.5。
4.根据权利要求1所述的一种磷脂酰丝氨酸的制备方法，其特征在于，所述减压蒸干乙酸丁酯后的浓缩物与加入的甲醇的重量体积比为1:6-1:10。
5.根据权利要求1所述的一种磷脂酰丝氨酸的制备方法，其特征在于，所述甲醇可溶物与有机溶剂的重量体积比为1:5-1:8。
6.根据权利要求1所述的一种磷脂酰丝氨酸的制备方法，其特征在于，所述有机相与含酶水溶液的体积比为8:1-12:1，所述含酶水溶液中，L-丝氨酸的浓度为0.15-0.2g/ml，磷脂酶D的酶活为4-5U/ml， pH调节为6.3-6.5。
7.根据权利要求1所述的一种磷脂酰丝氨酸的制备方法，其特征在于，所述有机相和水相的反应温度为30-35℃，反应时间为35-40小时。
8.根据权利要求1所述的一种磷脂酰丝氨酸的制备方法，其特征在于，所述洗涤有机相的水与有机相的体积比为1:1- 2:1。
9.根据权利要求1所述的一种磷脂酰丝氨酸的制备方法，其特征在于，所述真空脱去有机溶剂后的浓缩物用无水乙醇溶解搅拌的温度为25-30℃，时间为2-5小时，浓缩物与无水乙醇重量体积比为1:7-1:10。
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| Bioconversion of Phosphatidylserine by Phospholipase D from Streptomyces racemochromogenes in a Microaqueous Water-Immiscible Organic Solvent;Sheng Chen et al.;《Biosci.Biotechnol.Biochem.》;20130907;第77卷(第9期);摘要部分，第1939页右栏第4段 * |
| 高纯大豆卵磷脂的制备工艺研究;李召妍;《全国优秀硕士学位论文全文数据库》;20101231;全文 * |
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