CN1040178C - 补体抑制剂用于制备促进移植存活或消除排斥反应的药物 - Google Patents

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Abstract

补体抑制剂用于制备促进同种异体移植或协调性异种移植存活或消除移植排斥反应的药物。

Description

补体抑制剂用于制备促进移植存活或消除排斥反应的药物
本发明涉及将补体抑制剂用于制备在移植中可促进存活和消除排斥反应的药物。因此，本发明涉及促进移植物在宿主上的存活或防止移植物在宿主中丧失。
同种异体移植是同种异体间的组织移植。异种移植为两不同种间组织的移植，它可按生物标准分为两种亚型(Ca1ne，Transplant.Proc.II550-556(1970))。此两亚型为协调异种移植和不协调异种移植。该两亚型之间的区别在于两不协调种间带血管的器官移植物的移植被超急性排斥，即在血管接通后的几分钟或几小时之内移植物被排斥。在两协调种之间，不发生异种移植超急性排斥反应。然而，移植物将在几天之内，而不是在几小时或几分钟之内被排斥，并且排斥反应常常是以加速的方式进行。
虽然还缺乏有效的证据，但一般认为，在两不协调种之间发生的超急性排斥反应是由于抗体对供者自然发生作用的结果。另一方面，对于协调移植而言，由于没有能引起供者破坏的抗体存在，所以移植物至少能在短时期内存治。文献中有许多例子证明这种区别。最好的例子大概算Hammer所列举的那些例子(in“Xenograft 25”(MarkA.Hardy，Ed)E1sevier，Amsterdam(1989))。Hammer总是用狗作受者，并指出肾移植存活时间如下：
狗-狗            11.4天
澳洲野狗-狗    11.5天
狼-狗          19.4天
狐狸-狗        6.5天
狮子-狗        10-24小时
老虎-狗        10-24小时
猫-狗          10-24小时
猪-狗          10-30分钟
从上述数字可以看出，最后四个相互作用是不协调异种移植，前四个异种移植是协调的。Hammer把不协调异种移植和协调异种移植间的这些差异归为交叉种间血凝抗体是否分别存在。
从学术上讲，对协调和不协调种间的关系进行定义是必要的，但存在一些困难。实际上对本发明的目的而言，如果异种移植没有发生超急性排斥反应，就认为这两个不同的种属于协调作用方式。然而，对于本发明的目的而言，即使异种移植发生超急性排斥反应，如果它们从未进行过如基因操作等过程以防止超急性排斥反应，它们仍被认为是有协调作用的种。例如，国际专利申请PCT/GB90/O1575在具体实施方案中涉及了有潜力的异种移植供体动物，它们经过转基因的修饰以表达受体动物的补体抑制调节子(如衰变加速因子(DAF)或膜辅因子蛋白(MCP))。当供体动物器官移植到一般认为不协调关系的种上时，它对供体动物器官不发生超急性排斥反应。因此，对于本发明的目的而言，认为这种转基因的供体动物与欲作为其移植对象的种有协调关系。
具有如上定义的协调关系的种的例子有：家免-野兔、仓鼠-大鼠和非人类灵长类-人(如狒狒-人、黑猩猩-人及猕猴-人)。
促进移植物存活的研究已在异种移植(不协调和协调)及同种异体移植领域均受到了注意。Adachi等人首先提出了促进不协调异种移植存活的建议(Transplant.Proc.XIX(1)1149-1152(1987))，并对大鼠不协调心脏病患者异种移植的存活情况进行了研究。在已研究的可能作为存活促进剂的物质当中有环孢菌素A、阿司匹林和眼镜蛇毒毒素因子。此外对环孢菌素A和眼镜蛇毒毒素因子的联合使用也作了研究，Adachi等人报道“在我们的研究中，用环孢菌素A和眼镜蛇毒毒素因子处理的实验组和仅用眼镜蛇毒毒素因子处理的实验组之间的平均存活时间没有统计学意义上的差别”。平均存活时间为40-50小时。Kemp等人(Transplant.Proc.XIX(6)4471-4474(1987))在研究将野兔的肾异种移植入猫时也研究了各种可能的不协调异种移植存活的促进剂。入选的存活促进剂有巯甲丙脯酸、enalapril、心痛定、前列环素、SodiumChromoglycate，硫唑嘌呤/皮质类固醇的组合物、环孢菌素A及眼镜蛇毒毒素因子。除眼镜蛇毒毒素因子外，上述选择的任何促进剂均不能防止发生超急性排斥反应，该文的作者认为，眼镜蛇毒毒素因子“对延长移植物的存活(达7天)具有惊人的效果”。
Hardy等人(Transplantation 33(3)237-242(1982))对协调异种移植排斥反应作了研究，检测了用钯-109-血卟啉联合抗淋巴细胞球蛋白进行选择性淋巴样组织放射治疗效果，这种治疗主要针对T细胞介导的排斥反应。与未经处理的对照组的存活时间(平均2.9天)相比，平均存活时间在12.5天的水平。Homan等人(Transplantation31(3)164-166(1981))研究了环孢菌素A在提高协调异种移植存活中的效果。与未经处理的对照组的2天存活时间比，最好的移植存活时间平均达21天。Monden等人(Transpl antation43(5)745-746(1987))研究了仓鼠-大鼠的肝脏的异种移植，并发现与未处理的对照组比，环孢菌素A对移植物的存活没有显著的促进效果。Valdevere等人(Trans-plant.Proc.XIX(1)1158-1159(1987))也研究了仓鼠-大鼠的肝脏异种移植，发现当进行脾切除术并使用环孢菌素A时，与对照组相比，移植物存活时间有了明显的改善，从平均存活3.6天延长到了17.6天。同Hardy等人进行的实验(参考上文)一样，Knechtle等人(Transplant.Proc.XIX(1)1137-1139(1987))研究了总的淋巴样组织放射治疗(TLI)对促进协调异种移植存活的影响，但这次他们是结合环孢菌素A的治疗进行的。据他们报道，在仓鼠-大鼠心脏异种移植中，高剂量的环孢菌素A显著地延长移植物的存活时间，但是在偶尔的情况下受体上的长期移植物才有功能。TLI同环孢菌素A联合使用时移植物的存活进一步得到了显著的改善。
抗同种异体移植排斥反应的惯常治疗方法是仅仅使用环孢菌素A，或将环孢菌素A与类固醇或与硫唑嘌呤或与此两者一道联合使用。从某种观点来看，上述三种联合治疗的方法并不代表对仅用环孢菌素A的治疗方法作了改进。这些治疗方法对防止和逆转急性移植排斥反应是有效的，并可能阻止慢性移植排斥反应的发生，但似乎对于逆转已发生的慢性排斥反应只有极小作用或者完全没有效果。
本发明在于寻找更好地促进协调异种移植和/或同种异体移植存活的方法或寻求治疗所说的移植排斥反应的方法。本发明是基于下述事实而实现的：通过将环孢菌素A同眼镜蛇毒毒素因子联合使用来进行治疗，或通过将具有类似作用方式的化合物联合使用来进行治疗，可使协调异种移植及同种异体移植的存活得到明显地提高。
根据本发明的第一方面，本发明提供了一种包括补体抑制剂和有类似环孢菌素A活性的免疫抑制剂的药用制剂。
因此，本发明的药用制剂至少包括两种成分。第一种成分是补体抑制剂。所说补体抑制剂可以防止补体激活或除去或消耗一种或多种补体成分。优选的补体抑制剂既可抑制补体激活的经典途径，也可抑制其旁路激活途径。因此，那些不论是通过抑制或除去或消耗等作用来阻断C3途径的补体抑制剂都是优先选用的。所以，可以认为抗C3的抗体(例如单克隆抗体)可用作本发明的补体抑制剂。其他适宜的补体抑制剂有可溶性衰变激活因子(DAF)和可溶性膜辅助因子蛋白(MCP)。最优先选用的补体抑制剂之一是眼镜蛇毒毒素因子。
蛇毒毒素是最复杂的动物分泌物，其中含有大量具有不同药理和生化活性的物质。主要影响补体的物质存在于毒液中这一事实已经知道几乎有一个世纪了。有关眼镜蛇毒毒素(Naja naja kaouthia)对血清补体的作用已进行了比较详细的研究。活化因子是分子量为144KDa的糖蛋白，在镁离子存在下与血清B因子结合。随后，通过血清D因子的蛋白水解作用，B因子则裂解成两种成分，生成Bb和Ba。复合物CoF-Bb(CoF代表眼镜蛇毒因子)是一种裂解C3和C5的高活性转化酶。然而，CoF-Bb不同于正常的C3和C5的转化酶，它对正常的补体调节系统有阻碍作用。因此，它的作用将持续到所有的C3被转化，这就有效地消耗了补体活性成分。C5裂解释放出的C5a具有类过敏性作用；并非所有Naja眼镜蛇毒毒素因子都具有这种C5转化酶活性，但并不认为这对于本发明的目的是重要的。对补体的抑制并不局限于眼镜蛇类的毒素。Eggertsen等人(Toxicon1887-96(1980))已对Elapidae、Viperidae和Crotalidae族蛇的毒素进行了研究。研究的26种毒素中有22种能抑制正常人补体的活性。对眼镜蛇毒毒素结构分析表明它同眼镜蛇C3或其部分降解产物是相同的。
由于眼镜蛇毒毒素因子和其他蛇毒毒素因子具有明显的毒性问题，所以本发明不使用它们的天然形式。在对其毒性问题尚无其他解决措施的情况下，一般有必要对粗毒素的活化因子至少进行部分纯化。对眼镜蛇或其他蛇毒毒素因子来说没有必要纯化为均质性物质以用于本发明，但如果没有其他任何要求规定使用实质上纯化的因子，这显然只是一个规章性问题。对于眼镜蛇毒毒素来说，从药品商如Sigma(Sigma Chemicals Limited，Poole，Dorset)那儿可以获得半纯化制品，他们也提供自身纯化的粗眼镜蛇毒毒素。在实施例中有由粗眼镜蛇毒毒素制备眼镜蛇毒毒素因子的工艺方法。
还会了解到，除了使用天然眼镜蛇毒毒素因子和其他蛇毒毒素因子外，这类因子的类似物(包括活性片段)也可以用于本发明，所说类似物是可以用如重组DNA技术获得的合成因子。能使之适用于本发明的CoF的特征是它能与阻止正常的裂解机理的Bb因子形成稳定的复合物，因此具有这种特征的其他分子也可优选用于本发明。
本发明的药物制剂的第二种成分是具有类似环孢菌素A活性的免疫抑制剂。这类化合物是本领域技术人员所熟知的，它包括除环孢菌素A外的其他环孢菌素，如环孢菌素C和G。Eicosanoids也具有类似环孢菌素A的活性，其中包括PGI2(前列环素)，PGE2、PGD2、雷帕霉素和FK506(Fujisawa)，化合物FK506是优先选用于本发明的化合物之一，但最优选的化合物是环孢菌素A本身。环孢菌素A从市场上可以买到，(厂商为Sandoz，商标为SANDIMUN)。
本发明特别优选的实施方案是包括上面讨论的最优选的两种化合物(眼镜蛇毒毒素因子和环孢菌素A)的药物制剂。
其他成分也可存在于本发明的药物制剂中。一般可以使用赋形剂，但这并不包括其他活性成分。其中也可存在每一类活性成分中的一种以上的成分。
所说活性成分不必一定以单剂的形式共同给药。因此本发明的第二方面是提供一种包括补体抑制剂和有类似环孢菌素A活性的免疫抑制剂的产品以作为一种复合制剂同时，单独或依次用于促进同种异体移植或协调异种移植存活或治疗排斥反应。
本发明的第三个方面是提供一种包括补体抑制剂的药物制剂和具有类似环孢菌素A活性的免疫抑制剂药物制剂的药盒。
实施本发明时，环孢菌素A和有类似环孢菌素A活性的其他免疫抑制剂一般经非肠道给药。这种情况下，包含免疫抑制剂的制品是无菌的。然而，环孢菌素A本身和其他免疫抑制剂可采用口服给药方式，此时无菌不是必需的。环孢菌素A本身难溶于水，为使其溶解优选将它溶解在油中(如植物油)，实施时也可使用橄榄油，只有当免疫抑制剂不溶于水时，将其溶解在油中才是必需的，一般而言，所说免疫抑制剂可溶解于生理学上可接受的任何载体中。在某些场合，溶解甚至于也不是必要的。当然所制备的免疫抑制剂的浓度取决于免疫抑制剂本身的性质和欲采用的剂量，其剂量一般将遵从临床医生或内科大夫的指导。然而，一般说来制备具有下述浓度的环孢菌素制剂是适宜的：1-100mg/ml、例如1-10mg/ml，非肠道给药一般为5mg/ml左右，或经口服给药为25-100mg/ml，如50-100mg/ml，一般为100mg/ml左右。
眼镜蛇毒毒素因子一类补体抑制剂一般采用非肠道给药，为此目的它一般是无菌的。眼镜蛇毒毒素本身可用磷酸盐缓冲液(无叠氮化物)或任何其他适宜的溶剂或载体予以配制。可将此配制为口服制剂。药物制剂中补体抑制剂的浓度同样取决于最终所用剂量，此剂量将遵临床医生或内科大夫所嘱。一般而言，眼镜蛇毒毒素可在PBS中配制成浓度从0.05mg/ml到溶解度极限浓度的制品，所说溶解度极限值取决于该毒素因子的纯度。实际上浓度达5mg/ml的组合物是适用的，例如0.1-2mg/ml的组合物，如0.5mg/ml左右的组合物。
由于环孢菌素A基本上是不溶于水介质中的，而眼镜蛇毒毒素因子是溶于水介质中的，所以实际上这两种优选的活性成分一般将分开配制并分开给药。然而，因可将此两种活性成分配制为适宜的乳剂，活性成分的不同结合物可溶解于共同的溶剂中，或至少可悬浮于一共同载体中，因此上述问题并不是一个主要问题。
参照上文所述进行肠外途径注射。由于肌肉注射的滞留效果，所以优选注射部位是肌肉。然而，在某些场合，静脉注射也是可以的，而皮下注射也会有如果不是全部也是部分肌肉注射的优点。如情况需要，也可采用腹膜内注射。
本发明的第四方面是提供一种将补体抑制剂和有类似环孢菌素A活性的免疫抑制剂用于制备促进同种异体移植或协调异种移植存活或消除排斥反应的制剂。因此将会看到本发明提供了一种促进在宿主上的同种异体移植或协调异种移植存活或消除排斥反应的方法，该方法包括对移植受体或欲移植的受体使用补体抑制剂或有类似环孢菌素A活性的免疫抑制剂。
在许多场合下述方案也是优选的，即在进行移植手术前，预先使用适用于本发明的某些或全部活性成分。应予以指出的是，当涉及同种异体移植时，本发明的主要优点是适用于本发明的活性成分的联合使用将用于防止慢性排斥反应发生或在慢性排斥反应发生后对其予以控制(即消除排斥反应)；同种移植后一般将进行此法多年。
遭受慢性移植排斥反应或有慢性移植排斥反应发生危险的同种移植受体可以接受环孢菌素A或有类似环孢菌素A活性的其他免疫抑制剂的免疫抑制作用。对于本发明的目的而言，为了治疗或预防这类患者中的慢性移植排斥反应，仅仅增加补体抑制剂治疗是必要的。本发明的第五个方面提供了一种在用有类似环孢菌素A活性的免疫抑制剂治疗移植受体时将补体抑制剂用于制备促进同种异体移植或协调异种移植存活或消除这种移植排斥反应的制剂的方法。因此本发明提供了一种使用方法，该方法为促进宿主上的同种异体移植或协调异种移植存活和/或消除移植在宿主上的排斥反应，所说方法包括对移植受体或欲移植的受体使用有类似环孢菌素A活性的免疫抑制剂和补体抑制剂。
考虑到予以治疗的种及予以移植的器官，可在任何适宜有效但无毒的水平上使用有类似环孢菌素A活性的免疫抑制剂。人对环孢菌素耐受性的上限是由受体肾毒性和年龄决定的。虽然其他种可能有更高的耐受性，但在许多场合下，对于治疗人的安全上限为每天每公斤体重20mg的给药量(20mg/Kg/day)。环孢菌素A在低剂量时是有效的，所以可以使用的最低量仅仅是产生有效应答的最低量。业已发现有时每天每公斤体重1或2mg的用量是有效的。作为一般性指导，其给药量为5-10mg/Kg/day。如果经非肠道给药，环孢菌素A可采用隔天给药，这时将剂量予以加倍。然而，对于优选的口服给药途径来说，每天的剂量则取决于所选的给药方案，更确切地说，对于优选的给药方案而言，每天可以两次或多次给用环孢菌素A以达到每天5-10mg/Kg总的给药量。在有效但无毒的剂量下给用有类似环孢菌素A活性的其他免疫抑制剂，该剂量由临床医生或内科大夫决定。
作为指导原则，眼镜蛇毒毒素因子等补体抑制剂将按有效抑制补体活性的量给药，这将由补体溶血(CH50)试验来决定，但按2mg/Kg的剂量给药未出现毒性。眼镜蛇毒毒素因子的最小剂量有种的依赖性并易于由CH50试验来确定。对于眼镜蛇毒毒素因子来说，业已发现按每天0.01-0.1mg(或0.2mg)/Kg的剂量给药是有效的。其他补体抑制剂有效但无毒的剂量对于本领域的普通技术人员也很容易确定。例如，用CH50试验来确定。
肌肉给药后，眼镜蛇毒毒素大约需要6小时其最初活性才产生效力，一旦观察到了最初活性，它可持续1天以上，例如两天。所以对于眼镜蛇毒毒素而言，不必要每天给药。事实上，对于眼镜蛇毒毒素因子来说优选的是采用隔天给药，在这种情况下，上述给出的每天的优选剂量将加倍。实际中，业已发现特别适宜的优选剂量方案是每隔一天按0.4mg/Kg进行肌肉给药。
环孢菌素A或其他免疫抑制剂给药一般是连续的。眼镜蛇毒毒素因子或其他补体抑制剂给药一般是不连续的，但可以延长；即使在实践中这可能不是关健的，对于短期治疗来说，可能都需要对协调异种移植排斥反应进行治疗或消除。
本发明第二至第五个方面的优选特点和第一方面予以必要修改后的特点相同。
本发明将参照下面的制备例和实施例予以说明。实施例涉及有附图，其中；
图1为仓鼠心脏异种移植于大鼠中的存活图，反映移植后的时间与存活百分率的关系。
图2是对应于图1的，为仓鼠心脏异种移植于经环磷酰胺治疗的大鼠中的存活图。
制备
该制备例给出了由粗眼镜蛇毒毒素制备眼镜蛇毒毒素因子的方法。
将1克Naja Naja Kaouthia毒素(Sigma，Product No.V-9125，LotsNos.116F-0398and 58F-0565)溶解于pH为7.5的60ml脱气磷酸钠缓冲溶液(0.01M)中，并将其泵入DEAE纤维素柱(90cm×26mm内径)(DE52，Whatman)，再用同样的缓冲溶液进行平衡。用上述缓冲液以每小时43ml的速度对所说柱进行洗脱直至流出物的A280吸光度回复至零。以每小时40ml的速度将初始缓冲液和极限缓冲液(0.01M磷酸钠，pH7.5，含0.5M氯化钠)按3升；3升的线性梯度浓度泵入。收集7ml馏分。对此馏分进行抗补体试验，把阳性馏分收集起来，用CX-10超过滤器进行浓缩。
把收集的眼镜蛇毒毒素因子全部泵入90cm×26mm内径的Sephadex G200柱(精细品)(Pharmacia GB Limited，London)。用PBS(无叠氮化合物)将其平衡，并用PBS以每小时36ml的速度进行洗脱，收集6ml馏分并作抗补体活性试验。收集眼镜蛇毒毒素因子部分(即活性部分)，尤其是收集在峰值的下降支时的毒素因子，用CX-10超滤器浓缩，将其分成数等份试样，在-20℃冻存备用。
上文涉及到的眼镜毒毒素因子的抗补体活性可用下述方法测定。于37℃把20ul试样与20ul新鲜人血清温育20分钟。在试验板的小井中加入由下述试剂制得的试样5ul；
5.0ml2％的琼脂水液；
4.5ml含有20mM EDTA的双强度PBS；
0.5ml10％的经洗涤的豚鼠红细胞；和
0.5ml正常人的新鲜血清。把所说的试样板在+4℃下培育过夜。培育后被溶解的透明区表示抗补体活性阳性。
实施例1(比较例)
在本实施例中所用的大鼠是从Banting和Kindom得到的DA鼠，仓鼠是Syrian仓鼠，也来自Banting和Kindom。按Heron的方法(Acta.Pathol. Microbiol. Scand.79 366-372(1971))，把仓鼠心脏移植到大鼠的颈部，用Heron的套管技术连接仓鼠的主动脉与大鼠的颈动脉。用类似的方法把仓鼠的肺动脉与大鼠的颈静脉连接起来。结扎仓鼠其他的全部心脏血管。在去除血管夹的几分钟时间内，移植的心脏开始跳动，然后闭合移植心脏处的颈部皮肤，采用外触诊的方法每天对移植的心脏进行监测。
图1中示出了心脏移植存活的数据并用线1表示，从中可以看到移植物的平均存活率为3天。
实施例2(比较例)
重复实施例1的步骤，但每隔1天施用20mg/Kg的环孢菌素A。环孢菌素A可按20mg/ml的橄榄油制剂给药，并在移植时采取肌肉注射所给出的第一次剂量。其后每隔1天进行肌肉注射。移植物存活数据同样示于图1中，用线2表示本实施例的实验结果。其平均移植存活率为3天。
实施例3(比较例)
重复实施例1的步骤，但每隔天按0.4mg/ml施用眼镜蛇毒毒素。所用的眼镜蛇毒毒素是以无叠氮化合物的PBS配制的溶液(0.5mg/ml)。首先在进行移植时进行肌肉注射，其后每隔1天进行肌肉注射。图1中示出了移植排斥反应的数据，线3给出的本实施例实验结果表明移植物的平均存活率为6天。
实施例4
重复实施例1的步骤，但对受者既使用环孢菌素A也使用眼镜蛇毒毒素因子。每隔1天环孢菌素A的给药量为20mg/Kg。这样，环孢菌素A的给药条件和实施例2相同。按实施例3所述的相同给药条件施用眼镜蛇毒毒素因子。两者均在移植时行首次给药。移植物存活数据同样示于图1中。在此实施例中未观察到移植排斥反应的现象，这可从图1的线4所示看出。这种情况下移植物平均存活率超过50天。
实施例5
重复实施例4的步骤，但对眼镜蛇毒毒素因子是在移植后的第28天以后采用间断给药。移植物平均存活超过100天。在第103天和105天时损失了两个实验动物，移植物的组织学检查表明心脏组织结构正常。剩下的一只带有跳动的仓鼠心脏的大鼠至今已存活了5个多月。
实施例6(比较例)
按实施例1的方案，给20只大鼠移植了仓鼠的心脏。如实施例2所述的那样，将它们用环孢菌素A治疗。此外，在移植前一天和移植后两天给它们腹腔内使用ENDOXAN环磷酰胺(20mg/Kg)(ENDOXAN是环磷酰胺的商标名，是抗体产生的抑制剂)。图2中线5示出了仓鼠心脏被排斥的情况。所观察到的迟发排斥反应看似由于不适当的免疫抑制方案所致的迟发性异种移植排斥反应类型。观察到的迟发性排斥反应是由于缺乏环磷酰胺治疗的结果。
实施例7
按实施例6的方法对5只大鼠进行处理，但从第7天开始，按实施例4的方法对其使用眼镜蛇毒毒素因子。投用眼镜蛇毒毒素因子进行的治疗持续14天。正如图2中的线6所示，全部实验动物均消除了排斥反应。

Claims (10)

1.将补体抑制剂用于制备在用类环菌素A活性的免疫抑制剂或其与补体抑制剂结合起来处理的接受移植中，可促进同种移植或协调异种移植存活或消除排斥反应的药物，其中所说的同种移植存活或消除排斥反应是指非过急性排斥的同种移植。
2.权利要求1的用途，其中所说的补体抑制剂既抑制补体激活的经典途径，也抑制旁路激活途径。
3.权利要求1的用途，其中所说的补体抑制剂包括可溶性膜辅助因子蛋白、衰变加速因子或C3抗体。
4.权利要求1的用途，其中所说的补体抑制剂包括与Bb因子形成稳定复合物的分子，其中所说复合物能阻止正常的破坏机理。
5.权利要求1的用途，其中所说的补体抑制剂包括眼镜蛇毒毒素因子。
6.权利要求1的用途，其中所说的有类似环孢菌素A活性的免疫抑制剂是环孢菌素或类花生酸。
7.权利要求6的用途，其中所说的免疫抑制剂是环孢菌素A。
8.权利要求6的用途，其中所说的免疫抑制剂是FK506。
9.权利要求1的用途，其中补体抑制剂和有类似环孢菌素A活性的免疫抑制剂同时，分别或依次施用。
10.权利要求1的用途，其中补体抑制剂和有类似环孢菌素A活性免疫抑制剂是以药盒形式提供的。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
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AU2001291579B2 (en) * 2000-09-29 2006-08-31 Viron Therapeutics Inc. Use of serp- 1 in combination with an immunosuppressant for influencing inflammatory and immune reactions
US20090028850A1 (en) * 2004-05-14 2009-01-29 Alexion Pharmaceuticals, Inc. Prolongation of survival of an allograft by inhibiting complement activity
US7285530B2 (en) 2004-10-21 2007-10-23 Viron Therapeutics, Inc. Use of SERP-1 as an antiplatelet agent
US8703136B2 (en) 2006-10-10 2014-04-22 Regenesance B.V. Complement inhibition for improved nerve regeneration
PT2894165T (pt) * 2008-11-10 2023-03-17 Alexion Pharma Inc Métodos e composições para o tratamento de distúrbios associados ao complemento
KR101834469B1 (ko) 2013-08-07 2018-03-06 알렉시온 파마슈티칼스, 인코포레이티드 비정형적 용혈성 요독증후군 (ahus) 바이오마커 단백질

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
CA,VOL,107,NO.1,36页,453C 1986.6.6 *

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