CN103989536A - 一种精准化小鼠脊髓夹伤夹子和夹伤力度调整方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及发明领域，尤其涉及一种精准化小鼠脊髓夹伤夹子和夹伤力度调整方法。通过旋进或者或者旋出顶紧螺钉，调整夹子被顶紧侧和夹子夹持穿透侧之间的距离而调整夹持力度。包含如下步骤：选取18-21g雌性小鼠，精确定位小鼠胸11椎体，行该椎体背部椎板骨切除术，以专门改良血管夹将该节段脊髓以左右方向夹伤，即为造模成功，本方法所建立的脊髓损伤模型较之前的方法具有简单易行、精确易重复、成功率高等特点。损伤后观察行为学指标，脊髓损伤病理学指标，以及胶质瘢痕指标，发现本方法很好地模拟了人类脊髓损伤后的实际过程，仿真度极高，实现高度重现，有之前的方法无法比拟的优势。

Description

一种精准化小鼠脊髓夹伤夹子和夹伤力度调整方法

技术领域

本发明涉及机械领域，尤其涉一种精准化小鼠脊髓夹伤夹子和夹伤力度调整方法。 

背景技术

脊髓损伤(Spinal cord injury，SCI)将给患者带来不可逆性神经功能损害。随着现代交通和建筑业的发展，因SCI造成的截瘫患者不断增加。随着医疗手段的进步使得SCI患者死亡率下降的同时，带来的却是更多生活质量严重受损的截瘫患者。同时，患者和社会还需要为SCI后的生活护理和功能康复支付巨额的医疗费用。因此，阐明SCI的机理并寻找逆转的途径是当前神经科学研究领域的热点。目前，对SCI的治疗效果仍不佳，原因是SCI后的病理生理机制非常复杂，人们对此认识还很不全面、深入。而可靠的SCI动物模型对于阐明其病理生理机制和评价损伤后干预手段的效果非常关键。 

目前存在的脊髓损伤动物模型的制作方法主要包括：①压迫和挫伤，②全/半横断伤，③缺血和化学损伤。而其中以压迫和挫伤模型与人类SCI在机理及形态上相关性较好。但是以下因素制约了以Allen建立垂直打击致伤模型为代表的挫伤模型的广泛应用：①需要制作复杂的打击装置以确保损伤的一致性和模型的稳定性，②适于在大鼠等体型较大的动物上操作，而对于体型微小的小鼠难以应用，③垂直打击模型仅仅模拟了从背部单一方向打击造成的组织移位挫伤，而无法模拟临床上SCI后脊髓受到多方向的持续压迫损伤和缺血。 

由于大鼠价格低廉、体型适宜，且与人类SCI损伤相似性较好， 大部分SCI实验研究都以大鼠为对象构建SCI动物模型。而随着大量转基因小鼠的研制成功，在体特异性基因修饰对SCI后损伤修复的影响为SCI研究带来了更多契机。然而小鼠过小的体型增加了SCI建模的难度，这在一定程度上制约了小鼠SCI模型的广泛应用。尽管如此，仍有许多小鼠模型被应用于SCI研究中，其中包括横断、打击、缺血模型等。由于横断损伤的临床相似度较差，打击损伤的重复性不好且需要复杂的设备，Joshi M(参见文献Joshi M，Fehlings MG.Development and characterization of a novel，graded model of clip compressive spinal cord injury in the mouse：Part1.Clip design，behavioral outcomes，and histopathology.J Neurotrauma，2002，19：175-190.)和Plemel JR(参见文献Plemel JR，Duncan G，Chen KW，et al.A graded forceps crush spinal cord injury model in mice.J Neurotrauma，2008，25：350-370.)相继提出了重复性好，易于操作，且临床相似度较高的小鼠脊髓夹伤模型。其优点在于：①制作模型所需装置简单易得，②弥补了打击伤模型的不足，更全面的模拟了临床SCI的损伤特点，③适用于体形较小的小鼠，因而更加便于将基因技术应用与SCI的研究中。 

但是，我们在实际操作过程中发现，Joshi M提出的腹背夹伤模型手术过程中破坏较大，出血较多易致小鼠死亡，大量椎骨的咬除易引起恢复过程中脊柱畸形和周围肌肉压迫；而Plemel JR提出的左右夹伤模型虽克服了上述缺点，但是其夹伤部位选择在脊柱胸5-6节段，该处位于背侧斜方肌内大血管下，术中极易引起该血管损伤后大出血致死，且胸5-6位于脊髓生理弯曲凸向腹侧处，手术操作难度大；Herrmann JE将左右夹伤的脊髓节段选择在腰1-2，而此处脊髓已接近马尾，发出大量神经纤维，不易于术后标本取材及后续操作。 

总结经验，我们认为由于小鼠体型较小，手术操作难度较大，为了确保模型建立的稳定性和重复性，建模过程中应特别注意以下关键 要素：①小鼠性别：在实验设计允许的情况下，应尽量选择雌性小鼠，因雌性小鼠尿路相对于雄性小鼠更短，更易术后护理排尿。②小鼠年龄和体重：由于本模型是以压迫脊髓至一定厚度造成损伤，为确保模型的一致性，应尽量保证小鼠体重、体型的接近，且8w以上体重大于18g的成年小鼠(雌性小鼠成年在18-22g)体型大小比较适宜夹伤操作。体型过小，脊柱和脊髓过细则模型难以构建或操作所致误差易增大。③夹伤节段的选择：由于斜方肌下血管容易大出血，造成小鼠失血死亡，且腰椎以上部位椎体较细，并向腹侧屈曲，操作难度较大，易增加操作所致误差；而夹伤位置过低，则因发出神经纤维过多不易取材。故体积较大，凸向背侧的腰椎胸11节段椎体，更适于夹伤操作，亦便于术后取材。④节段的定位：因小鼠脊髓从头侧至尾侧每一节段粗细不一，故同样的夹伤厚度在不同的节段造成的损伤程度不同，为确保模型的稳定性，各组小鼠的夹伤节段应尽可能保持一致，而传统的通过观察脊柱形状判断节段的方法有失准确。本发明首次提出了通过探查肋骨而判断脊柱节段的方法能够准确无误的判定所需夹伤的脊柱节段，具有良好的可靠性。 

而且，通用的夹伤力度不可调整，因此造成标准不统一，评价混乱。 

由于既往报道的小鼠脊髓损伤模型存在上述不足之处，为了更好地研究脊髓损伤的病理生理机制，并准确判断干预手段对脊髓损伤后功能结局的影响，我们需要稳定、重复性好、易操作的动物模型作为研究平台。 

发明内容

发明的目的：为了提供为了提供更为稳定、易行的夹伤夹子和夹伤调控方法，具体目的见具体实施部分的多个实质技术效果。 

为了达到如上目的，本发明采取如下技术方案： 

一种精准化小鼠脊髓夹伤夹子，包含夹子顶端和其伸出的两个侧 壁，两个侧壁之间形成夹持空间，其特征在于，所述两个侧壁分别为夹子被顶紧侧(4)和夹子夹持穿透侧(5)，其中夹子被顶紧侧(4)包含一个顶住孔(3)，顶住孔(3)为槽状，还包含穿过夹子夹持穿透侧(5)的穿透孔的顶紧螺钉(1)，所述穿透孔内壁上包含螺纹，所述顶紧螺钉(1)能够在穿透孔中旋进或者或者旋出而调整夹子被顶紧侧(4)和夹子夹持穿透侧(5)之间的距离。 

本发明的进一步技术方案在于，所述顶紧螺钉(1)端部包含手持部分(2)，所述手持部分(2)为圆形。 

本发明的进一步技术方案在于，所述顶紧螺钉(1)上包含刻度。 

一种精准化小鼠脊髓夹伤夹伤力度调整方法，利用如权利要求1所述的夹子，通过旋进或者或者旋出顶紧螺钉(1)，调整夹子被顶紧侧(4)和夹子夹持穿透侧(5)之间的距离而调整夹持力度。 

采用如上技术方案的本发明，相对于现有技术有如下有益效果：调整方便，力度调整灵活便捷，提供了一种标准的夹伤方法。 

进一步地，包含如下步骤： 

选取成年雌性小鼠，体重(18-21g)。用工具将血管夹两臂宽度打磨至0.5mm，于两臂间固定一定厚度间隔物使血管夹闭合时将脊髓压迫至相应厚度。 

腹腔麻醉小鼠，小鼠俯卧位固定于手术台上，以胸11棘突为中心，备皮。75％酒精消毒背部皮肤，取背部正中切口切开皮肤，长约2cm。依次切开背斜方肌、背阔肌，显露胸9-腰1椎体棘突及椎板。用精细蚊式止血钳探查小鼠左侧第13肋骨，其脊柱发出部位即胸12与胸13交界处，借以判定胸11脊椎位置，小心咬除胸11椎体棘突及背侧椎板。以血管夹从左右两侧将胸11节段小鼠脊髓夹伤，夹伤的过程中调整好夹伤力进行夹伤，持续15秒。术中以冰生理盐水棉球压迫止血。逐层缝合肌肉和皮肤，腹腔注射1.0ml生理盐水以补充术中丢失血容量，置于暖光灯下复苏。术后分笼饲养，每天挤压膀胱 2次，以协助排尿，直至小鼠自主排尿反射恢复。 

采用如上技术方案的本发明，相对于现有技术有如下有益效果： 

1、雌性小鼠尿路相对于雄性小鼠更短，更易术后护理排。 

2、8w以上体重大于18g的成年小鼠(雌性小鼠成年在18-22g)体型大小比较适宜夹伤操作。 

3、体积较大，凸向背侧的腰11节段椎体，更适于夹伤操作，亦便于术后取材。 

4、通过探查肋骨而判断脊柱节段的方法能够准确无误的判定所需夹伤的脊柱节段，具有良好的可靠性。 

5、本模型非常类似于绝大多数人体脊髓损伤的实际过程。 

6、本发明建立的动物模型重复性好。 

附图说明

为了进一步说明本发明，下面结合附图进一步进行说明： 

图1为夹子的结构示意图； 

图2为夹子的调整夹持力的局部结构示意图； 

图3为小老鼠脊椎部分结构示意图； 

1.顶紧螺钉；2.手持部分；3.顶住孔；4.夹子被顶紧侧；5.夹子夹持穿透侧。 

具体实施方式

下面结合附图对本发明的实施例进行说明，实施例不构成对本发明的限制： 

以下以小鼠的试验模型建立为例； 

实验动物及夹伤装置 

成年雌性C57BL/6J小鼠，体重(18-21g)，由第三军医大学野战外科研究所实验动物中心提供。血管夹(微血管合拢器，ZF610R)购于山东新华器械有限公司，并用工具将血管夹两臂宽度打磨至0.5mm，于两臂间固定不同厚度间隔物(0.1、0.25、0.4mm直径金属 丝)使血管夹闭合时将脊髓压迫至不同厚度。夹子的结构如下：所述两个侧壁分别为夹子被顶紧侧4和夹子夹持穿透侧5，其中夹子被顶紧侧4包含一个顶住孔3，顶住孔3为槽状，还包含穿过夹子夹持穿透侧5的穿透孔的顶紧螺钉1，所述穿透孔内壁上包含螺纹，所述顶紧螺钉1能够在穿透孔中旋进或者或者旋出而调整夹子被顶紧侧4和夹子夹持穿透侧5之间的距离。通过旋进或者或者旋出顶紧螺钉1，调整夹子被顶紧侧4和夹子夹持穿透侧5之间的距离而调整夹持力度。因此可以调整夹伤力度。 

另外，根据不同的动物还能够选择不同的夹伤距离和夹伤力度。 

动物模型制作 

4％水合氯醛腹腔麻醉小鼠(10ml/kg体重)，以胸11棘突为中心，备皮。75％酒精消毒背部皮肤，取背部正中切口切开皮肤，长约2cm。依次切开背斜方肌、背阔肌(注意避开斜方肌下方大血管)，显露胸9-腰1椎体棘突及椎板。用精细 蚊式止血钳(ZH109R，山东新华器械有限公司)探查小鼠左侧第13肋骨，其脊柱发出部位即胸12与胸13交界处，借以判定胸11脊椎位置，小心咬除胸11椎体棘突及背侧椎板(左右夹伤组)，腹背夹伤组还须咬除两侧椎弓根，仅保留椎管腹侧骨质。以不同间隔厚度血管夹分别从左右两侧将胸11节段小鼠脊髓压迫至0.1mm(n＝8)、0.25mm(n＝8)和0.4mm(n＝8)，持续15s。对照组仅咬除胸11椎体棘突及椎板，不夹伤脊髓(n＝8)。术中以冰生理盐水棉球压迫止血。逐层缝合肌肉和皮肤，腹腔注射1.0cc生理盐水以补充术中丢失血容量，置于暖光灯下复苏。术后分笼饲养，每天挤压膀胱2次，以协助排尿，直至小鼠自主排尿反射恢复。 

行为学观察 

小鼠后肢运动功能观察采用BMS(Basso Mouse Score，BMS)运动功能评分法(表1)，于直径100cm，高30cm的塑料观察盆中进行。 术前3d，所有小鼠均于观察盆内预适应15min/d，伤后第一周于2d，4d，7d观察3次，之后每周观察1次，共8周。观察时间取小鼠睡眠/觉醒周期中行动活跃阶段，在晚间20：00进行。 

表1 

脊髓损伤程度观察 

于脊髓损伤后8w将各组小鼠麻醉，剑突下剪开膈肌，显露心脏，经左心室插管至主动脉并固定，于右心耳剪口，经导管灌注生理盐水，待流出清亮液体时，换4％多聚甲醛持续灌注固定。取胸11及损伤周围2cm脊髓标本，置于4％多聚甲醛固定液中过夜，30％蔗糖脱水，恒冷箱连续冠状切片(片厚20μm)，冷贴片，切片行HE染色。 

胶质瘢痕观察 

4只小鼠于脊髓损伤(左右夹伤至0.1mm)后8w灌注取脊髓，固定脱水，恒冷箱连续纵行矢状切片(片厚16μm)，冷贴片。采用免疫组化ABC法观察胶质瘢痕形成情况：PBS漂洗3次，入3％H₂O₂室温10min；PBS漂洗3次，入含0.1％TritonX-100的2％山羊封闭血清20min，室温；加入兔抗胶质纤维酸性蛋白(GFAP)多克隆抗 体(1∶250，中杉公司)，37℃湿盒孵育2.5h；PBS漂洗3次后，加入与一抗相应的二抗，37℃湿盒孵育20min；PBS漂洗3次后加入三抗，37℃湿盒孵育20min；PBS漂洗3次后DAB显色。脱水，透明，中性树胶封片后显微镜下观察，Olympus显微摄影系统照相。 

生物素标记葡聚糖(BDA)顺行束路追踪 

4只小鼠于脊髓损伤(左右夹伤至0.1cm)后6w行BDA顺行示踪以观察皮质脊髓束(corticospinal tract，CST)在脊髓夹伤后的损伤及恢复情况。小鼠再次按上述方法麻醉后将头部固定于立体定向仪上，切开额顶头皮，设6个注射位点(距中线2侧1.0mm；距前囟前0.5mm，前囟后0.5mm和前囟后1.0mm)，用微型钻磨去颅骨，手术显微镜下剪开硬脑膜，用微量注射器将10％BDA溶液(Invitrogen公司)缓慢注入2侧的感觉运动区皮质内。注射时将微量注射器固定在立体定向支架上，选择无血管区作为注射点，进针距皮层表面0.5mm，每个注射点注射剂量0.5μL，注射速度为0.05μL/min。每次注射后针头滞留2min，然后缓慢退针。注射完毕后缝合头皮。16d后再次麻醉动物，取材及后续组织处理方法同前。恒冷箱连续矢状切片(片厚30μm)，收集标本行漂片法免疫组化染色。 

脊髓标本PBS漂洗3次，入3％H₂O₂室温10min；加入辣根酶标记链亲合素(1∶100，中杉公司)，37℃湿盒孵育1h；PBS漂洗3次后DAB-硫酸镍铵增强显色3min。部分切片于显色后再次复染GFAP，步骤同前，最后DAB显色。将以上染色脊髓标本裱于多聚赖氨酸处理载玻片上，脱水透明，中性树胶封片后显微镜下观察，Olympus显微摄影系统照相。 

统计学分析 

本实验内容数据采用SPSS13.0软件进行统计处理。行为学比较采用重复测量方差分析，P＜0.01代表显著性差异。 

结果 

模型一般情况及后肢运动功能恢复 

本夹伤模型的手术死亡率低于10％。死亡的主要原因为术中出血过多，以及小鼠对麻醉的敏感程度不一导致部分小鼠不能耐受麻醉剂量而致呼吸衰竭。术后神经学评估中，小鼠的死亡率为0。除对照组外，各组小鼠夹伤后均表现出不同程度截瘫。由于腹背方向夹伤组小鼠3只出现脊柱畸形，且运动学评分组内变异较大，未纳入统计分析。 

BMS运动评分显示，各损伤组在夹伤后后肢运动功能均逐渐恢复，且在前2周内恢复较快，于2-3周到达平台期(b表2)。重复测量方差分析显示，术后8周，各组间后肢运动评分存在显著差异(p＜0.001)，夹伤越轻，恢复程度越好。其中，损伤最重的0.1mm组，8w时的平均BMS得分为2.94±0.78，意味着小鼠后肢踝关节可广泛运动但无法负重完成足底步态。而夹伤至0.25mm组小鼠在8w时的平均BMS得分为4.88±0.95，意味着小鼠已可完成偶尔足底步态。而损伤最轻的0.4mm组小鼠在8w时的平均BMS得分为7.94±0.56，表明小鼠足底步态已很频繁且协调，但可能存在严重躯干不稳或下肢离地时旋转。 

表2 

为了研究SCI后治疗措施的有效性，理想的动物模型应具备损伤后的长期功能缺陷，由于小鼠和大鼠的自发恢复能力较人类为强，因 此我们对本夹伤模型的致伤程度作了分级检测，我们发现夹伤至0.5mm组小鼠的功能在实验的早期已基本恢复至正常水平，而0.25mm和0.1mm组小鼠在术后8w，仍表现出严重的功能缺陷，因此0.25mm以及更严重的损伤程度较为适用于脊髓损伤的长期实验研究。 

组织病理学观察 

病理切片HE染色可见损伤震中处脊髓结构紊乱，严重变形，脊髓中央管消失，可见小的坏死空洞，但并无类似大鼠脊髓损伤后的中心位置巨大囊腔形成。夹伤至0.4mm组脊髓中，可见结构紊乱的嗜碱核细胞团簇主要位于脊髓腹侧部，背侧灰质及白质处尚有较多正常组织残留。随着夹伤程度的加重，残留的脊髓正常组织越少，夹伤至0.1mm组脊髓中可见整个脊髓几乎被结构紊乱的嗜碱性细胞团簇占据，仅在边缘尚有微量白质残留。 

组织病理学检测显示随着夹伤程度的加重，脊髓的病变程度也逐级加重，这与行为学结果有很好的相关性。但我们发现小鼠的脊髓损伤后并没有类似大鼠脊髓损伤后的囊腔形成，这可能是由于小鼠和大鼠的基因差异或血管构成差异导致继发性损伤程度不同引起。当然，没有空洞和囊腔的脊髓将更适于神经组织的再生与修复，因此，如能进一步阐明小鼠脊髓损伤后没有较大空洞形成的机制将有助于增加临床SCI患者神经功能恢复的可能性。 

示踪及胶质瘢痕观察星形胶质细胞标志物GFAP免疫组化染色显示，SCI后8w，夹伤处存在大量肥大增生的星形胶质细胞，形成致密的胶质瘢痕，且离损伤震中越近，星形胶质细胞增生越显著。BDA顺行束路追踪显示，SCI后8w，夹伤至0.1mm组小鼠脊髓中，大部分BDA标记的皮质脊髓束到达夹伤处的头侧端，但是无法继续下行，在夹伤处头侧端形成多个圆形的终球，仅有少数BDA着色的神经纤维在原皮质脊髓束位置的背侧方通过夹伤处，到达夹伤处尾侧 端。示踪切片经GFAP复染后，可见BDA终球形成位置恰为星形胶质细胞肥大增生形成胶质瘢痕处，充分提示胶质瘢痕的形成阻挡了皮质脊髓束再生通过损伤区域。 

脊髓损伤后的治疗难点在于中枢神经系统的再生异常困难，而胶质瘢痕形成的机械性和化学性屏障作用仍然是再生最大的障碍之一。我们发现，除0.5mm夹伤组小鼠因损伤过轻使得小鼠在经过1w的脊髓休克期后已基本恢复正常运动功能外，0.25mm和0.1mm夹伤组小鼠受损的后肢运动功能在4w以前恢复较快，而在4w时达到平台期，这一点，与我们观察到的损伤后脊髓病理改变也相符合。损伤后的前4w，我们发现小鼠的脊髓在经历了前两周最严重的坏死、水肿和继发性损伤后，到4w时损伤处的病理改变已被局限化，而水肿和坏死也已基本消失，说明某种机制起到局限炎症并修复损伤的作用；而星形胶质细胞的反应恰恰符合这一作用特点，在损伤后1w和2w，我们发现星形胶质细胞大量活化，包绕原发损伤区和水肿区，而随着损伤反应的减弱，其活化程度也逐渐降低。但是，活化的星形胶质细胞正是一把双刃剑，我们发现在损伤后的4w和8w的GFAP染色脊髓切片中，在夹伤区呈现出外周包围活化的星形胶质细胞，内部聚集大量嗜碱核细胞的瘢痕形态。我们通过BDA示踪发现CST仅仅到达损伤头侧胶质细胞的活化区域之外就不能继续延伸而肿胀为异形的终球，更尚未到达嗜碱核细胞瘢痕的边缘，说明正是外圈活化的胶质细胞形成的胶质瘢痕阻碍了神经纤维的再生，这也成为4w后小鼠后肢功能几乎没有明显恢复的主要原因。因此，本夹伤模型很好地模拟了SCI后的胶质瘢痕形成阻碍受损神经纤维再生的过程，从而适用于研究胶质瘢痕与神经再生关系的研究。 

同时，我们的研究还提示，正是夹伤处瘢痕内圈的嗜碱核细胞团簇持续激活了其周边的星形胶质细胞，并且没有星形胶质细胞能进入其中，从而导致了脊髓损伤两侧的物理性隔断，如能消除这一因素， 可能有助于减弱后期的星形胶质细胞活化为胶质瘢痕，并能促进损伤区域头尾侧脊髓的桥接修复。Silver J等报道(参见文献Silver J，Miller JH.Regeneration beyond the glial scar.Nat Rev Neurosci，2004；5：146-156)，脊髓损伤后的瘢痕结构中，包绕在活化星形胶质细胞内部的主要是巨噬细胞。因此，我们对本夹伤模型的小胶质细胞/巨噬细胞活化情况作了连续性观察，结果发现小胶质细胞不仅在损伤的早期即可被激活为较强的活化状态，并且一直持续到脊髓损伤后的8w。而静息的小胶质细胞活化为巨噬细胞，在脊髓损伤后的继发病理改变尤其是星形胶细胞的活化中起到重要作用。既往体内体外实验均发现活化的小胶质细胞对星形胶质细胞有明确的激活效应(参见文献Penkowa M，Poulsen C，Carrasco J，et al.M-CSF deficiency leads to reduced metallothioneins I and II expression and increased tissue damage in the brain stem after6-aminonicotinamide treatment.Exp Neurol，2002；176：308-321)。正如以上所述，早期活化的小胶质细胞激活星形胶质细胞有助于损伤的修复，而后期持续激活的星形胶质细胞却成为阻碍神经修复的屏障，这些病理改变在本模型都得到了很好的重复。 

本模型能够准确地反映小鼠脊髓损伤后的行为学及病理学变化特点，可作为标准化小鼠SCI动物模型。 

以上显示和描述了本发明的基本原理、主要特征和本发明的优点。本领域的技术人员应该了解本发明不受上述实施例的限制，上述实施例和说明书中描述的只是说明本发明的原理，在不脱离本发明精神和范围的前提下，本发明还会有各种变化和改进，这些变化和改进都落入要求保护的范围内。 

Claims (4)

1.一种精准化小鼠脊髓夹伤夹子，包含夹子顶端和其伸出的两个侧壁，两个侧壁之间形成夹持空间，其特征在于，所述两个侧壁分别为夹子被顶紧侧(4)和夹子夹持穿透侧(5)，其中夹子被顶紧侧(4)包含一个顶住孔(3)，顶住孔(3)为槽状，还包含穿过夹子夹持穿透侧(5)的穿透孔的顶紧螺钉(1)，所述穿透孔内壁上包含螺纹，所述顶紧螺钉(1)能够在穿透孔中旋进或者或者旋出而调整夹子被顶紧侧(4)和夹子夹持穿透侧(5)之间的距离。

2.如权利要求1所述的一种精准化小鼠脊髓夹伤夹子，其特征在于，所述顶紧螺钉(1)端部包含手持部分(2)，所述手持部分(2)为圆形。

3.如权利要求1所述的一种精准化小鼠脊髓夹伤夹子，其特征在于，所述顶紧螺钉(1)上包含刻度。

4.一种精准化小鼠脊髓夹伤夹伤力度调整方法，利用如权利要求1所述的夹子，通过旋进或者或者旋出顶紧螺钉(1)，调整夹子被顶紧侧(4)和夹子夹持穿透侧(5)之间的距离而调整夹持力度。