CN103974951A

CN103974951A - 6-二氟甲基-5,6-二氢-2h-[1,4]噁嗪-3-胺衍生物

Info

Publication number: CN103974951A
Application number: CN201280059719.1A
Authority: CN
Inventors: A.A.特拉班科-苏亚雷兹; H.J.M.吉森; M.苏克恩; H.普罗科科瓦
Original assignee: Janssen Pharmaceutica NV
Current assignee: Janssen Pharmaceutica NV
Priority date: 2011-12-05
Filing date: 2012-12-04
Publication date: 2014-08-06
Anticipated expiration: 2032-12-04
Also published as: NZ626662A; CA2852366C; AU2012347397B2; IL232916A0; EA023909B1; PH12014501235B1; EA201491116A1; UA111749C2; MY165209A; JP2015500223A; HK1198586A1; JP6169095B2; EP2788346B1; PH12014501235A1; ES2558604T3; US20140343048A1; KR102060379B1; WO2013083557A1; SG11201402734XA; BR112014013310A2

Abstract

本发明涉及作为β分泌酶抑制剂的新颖的6-二氟甲基-5,6-二氢-2H-[1,4]噁嗪-3-胺衍生物，β分泌酶也称作β-位点淀粉样蛋白裂解酶、BACE、BACE1、Asp2、或膜天冬氨酸蛋白酶2。本发明还涉及包含此类化合物的药物组合物，涉及制备此类化合物和组合物的方法，并且涉及此类化合物和组合物用于预防和治疗其中涉及β-分泌酶的失调的用途，这些失调如阿尔茨海默病(AD)、轻度认知损害、衰老、痴呆、路易体痴呆、大脑淀粉样血管病、多发梗塞性痴呆、唐氏综合征、与中风相关的痴呆、与帕金森病相关的痴呆和与β-淀粉样蛋白相关的痴呆。

Description

6-二氟甲基-5,6-二氢-2H-[1,4]噁嗪-3-胺衍生物

发明领域

本发明涉及作为β分泌酶抑制剂的新颖的6-二氟甲基-5,6-二氢-2H-[1,4]噁嗪-3-胺衍生物，β分泌酶也称作β-位点淀粉样蛋白裂解酶、BACE、BACE1、Asp2、或膜天冬氨酸蛋白酶2。本发明还涉及包含此类化合物的药物组合物，涉及制备此类化合物和组合物的方法，并且涉及此类化合物和组合物用于预防和治疗其中涉及β-分泌酶的失调的用途，这些失调如阿尔茨海默病(AD)、轻度认知损害、衰老、痴呆、路易体痴呆、唐氏综合征、与中风相关的痴呆、与帕金森病相关的痴呆和与β-淀粉样蛋白相关的痴呆。

发明背景

阿尔茨海默病(AD)是一种与衰老相关的神经退行性疾病。AD患者遭受认知缺陷和记忆丧失连同行为问题，例如焦虑。超过90％的罹患AD的那些病例具有散发形式的失调，而只有10％的病例是家族性或遗传性的。在美国，年龄65岁的人约十分之一患有AD，而年龄85岁的每两个个体中就有1个患有AD。距初次诊断的平均预期寿命是7-10年，并且AD患者需要来自非常昂贵的协助生活机构或来自家庭成员的大量护理。随着群体中老年人数量的不断增加，AD是不断增长的医疗关注。当前可用于AD的疗法只治疗该疾病的症状，并且包括用于改善认知特性的乙酰胆碱酯酶抑制剂连同用于控制与这种疾病相关的行为问题的抗焦虑药和抗精神病药。

AD患者脑中的标志性病理特征是由tau蛋白的高度磷酸化产生的神经原纤维缠结以及由β-淀粉样蛋白1-42(Aβ1-42)肽聚集形成的淀粉样蛋白斑。Aβ1-42形成低聚物并且然后是原纤维，并且最终形成淀粉样蛋白斑。这些低聚物以及原纤维被认为是尤其毒害神经的并且可以引起与AD相关的大多数神经学损伤。预防Aβ1-42形成的药剂具有成为用于AD治疗的疾病改性剂的潜能。Aβ1-42产生自淀粉样前体蛋白(APP)，由770个氨基酸组成。Aβ1-42的N端被β-分泌酶(BACE)裂解，并且然后γ-分泌酶裂解C-末端。除了Aβ1-42之外，γ-分泌酶还释放为主要裂解产物的Aβ1-40，以及Aβ1-38和Aβ1-43。这些Aβ形式也可以聚集以形成低聚物和原纤维。因此，预期BACE抑制剂将预防Aβ1-42连同Aβ1-40、Aβ1-38和Aβ1-43的形成，并且将是AD治疗中的潜在治疗剂。

WO-2011/009943(诺华公司(Novartis))披露了未取代的和2-取代的噁嗪衍生物和它们作为BACE抑制剂用于治疗神经失调的用途。WO-2011/020806(霍夫曼-拉罗什(Hoffmann-LaRoche))披露了具有BACE1和/或BACE2抑制特性的2,6-未取代的3-氨基-5-苯基-5,6-二氢-2H-[1,4]噁嗪衍生物。

发明概述

本发明是针对具有化学式(I)的5,6-二氢-2H-[1,4]噁嗪-3-胺衍生物

及其互变异构体和立体异构形式，其中

R¹是C_1-3烷基；

R²是氢或氟；

L是一个键或–NHCO-；

Ar选自下组，该组由以下各项组成：吡啶基、嘧啶基和吡嗪基，每种任选地被卤素或C_1-3烷氧基取代；

及其药学上可接受的加成盐。

本发明例证了包含药学上可接受的载体以及任何上述化合物的一种药物组合物。本发明的一个例证是通过混合任何上述化合物与药学上可接受的载体制成的一种药物组合物。本发明例证了用于制造一种药物组合物的方法，该方法包括混合任何上述化合物与药学上可接受的载体。

本发明例示了治疗β-分泌酶介导的失调的方法，包括向有需要的受试者给予治疗有效量的任何此处所述的化合物或药物组合物。

本发明进一步例示了抑制β-分泌酶的方法，包括向有需要的受试者给予治疗有效量的任何此处所述的化合物或药物组合物。

本发明的一个实例是治疗选自下组的失调的方法，该组由以下各项组成：阿尔茨海默病、轻度认知损害、衰老、痴呆、路易体痴呆大脑淀粉样血管病、多发梗塞性痴呆、唐氏综合征、与中风相关的痴呆、与帕金森病相关的痴呆以及与β-淀粉样蛋白相关的痴呆，优选地是阿尔茨海默病，该方法包括向有需要的受试者给予治疗有效量的任何此处所述的化合物或药物组合物。

本发明的另一个实例是在治疗以下的疾病中使用的任何上述化合物：在有需要的受试者中，(a)阿尔茨海默病、(b)轻度认知损害、(c)衰老、(d)痴呆、(e)路易体痴呆、(f)唐氏综合征、(g)与中风相关的痴呆、(h)与帕金森病相关的痴呆以及(i)与β-淀粉样蛋白相关的痴呆。

发明的详细说明

本发明针对如在上文中定义的具有化学式(I)的化合物及其药学上可接受的盐和溶剂化物。具有化学式(I)的化合物是β-分泌酶(也称作β-位点裂解酶、BACE、BACE1、Asp2或膜天冬氨酸蛋白酶2)的抑制剂，并且在阿尔茨海默病、轻度认知损害、衰老、痴呆、与中风相关的痴呆、路易体痴呆、唐氏综合征、与帕金森病相关的痴呆以及与β-淀粉样蛋白相关的痴呆，优选地是阿尔茨海默病、轻度认知损害或衰老，更优选地是阿尔茨海默病的治疗中是有用的。

在本发明的一个实施例中，R¹是甲基或乙基。

在本发明的一个实施例中，Ar选自5-甲氧基-吡啶基、5-嘧啶基和5-氟吡嗪基。

在本发明的另一个实施例中，R²是氢或氟。

在另一个实施例中，被R¹取代的四级碳原子具有R-构型。

定义

“卤素(Halo)”应表示氟、氯和溴；“C_1-3烷氧基”应表示一种醚基团，其中C_1-3是具有1、2或3个碳原子的直链或支链饱和烷基基团，例如甲基、乙基、1-丙基和2-丙基。

在此使用的术语“受试者”是指动物，优选地是哺乳动物，最优选地是人类，该受试者是或已经成为治疗、观察或实验的对象。

在此使用的术语“治疗有效量”表示在研究员、兽医、医师或其他临床医生寻找的在组织系统、动物或人类中引出生物学或医学反应的活性化合物或药用剂的量，该反应包括正在被治疗的疾病或失调的症状的减轻。

在此使用的术语“组合物”旨在涵盖包括处于特定量的特定成分的产品，连同直接或间接源于处于特定量的特定成分的组合的任何产品。

在上下文中，术语“具有化学式(I)的化合物”意在包括其加成盐、溶剂化物以及立体异构体。

在上下文中，术语“立体异构体”或“立体化学同分异构体形式”可互换地使用。

本发明包括为纯立体异构体或为两种或更多种立体异构体的混合物的、具有化学式(I)的化合物的所有立体异构体。

对映异构体是彼此不重叠镜像的立体异构体。一对对映异构体的1:1混合物是一种外消旋体或外消旋混合物。非对映体(或非对映异构体)为不是对映异构体的立体异构体，即它们不是镜像相关的。因此，本发明包括对映异构体、非对映异构体、外消旋体。

绝对构型是根据Cahn-Ingold-Prelog系统指定的。在不对称原子处的构型可以由R或S指定。具有未知的绝对构型的拆分化合物可通过(+)或(-)来指定，取决于它们的旋转平面偏振光的方向。

当鉴定一种特定立体异构体时，这意味着所述立体异构体基本上无其他异构体，即，与其他异构体的关联小于50％，优选地小于20％，更优选地小于10％，甚至更优选地小于5％，特别是小于2％并且最优选地小于1％。因此，当一种具有化学式(I)的化合物例如被指定为(R)时，这意味着该化合物基本上无(S)异构体。

具有化学式(I)的化合物与具有化学式(I-a)的互变异构体以动态平衡的形式共存。

此外，针对本发明化合物的一些晶型可以作为多晶型存在并且同样旨在包括在本发明之内。另外，本发明的一些化合物可以与水(即，水合物)或常用有机溶剂形成溶剂化物，并且此类溶剂化物也旨在涵盖在本发明的范围之内。

为了在医学中使用，本发明化合物的盐是指无毒的“药学上可接受的盐”。然而，其他盐在根据本发明的化合物或它们的药学上可接受的盐的制备中可能是有用的。这些化合物的适合的药学上可接受的盐包括可以通过，例如，混合该化合物溶液与一种药学上可接受的酸溶液形成的酸加成盐，该酸例如是，盐酸、硫酸、富马酸、马来酸、琥珀酸、乙酸、苯甲酸、柠檬酸、酒石酸、碳酸或磷酸。此外，在本发明的化合物携带一个酸性部分的情况下，其适合的药学上可接受的盐可以包括碱金属盐，例如，钠或钾盐；碱土金属盐，例如，钙或镁盐；以及与适合的有机配体形成的盐，例如，季铵盐。

在药学上可接受的盐的制备中可以使用的代表性的酸包括但不局限于以下这些：乙酸、2,2-二氯乙酸、酰化氨基酸、己二酸、海藻酸、抗坏血酸、L-天冬氨酸、苯磺酸、苯甲酸、4-乙酰氨基苯甲酸、(+)-樟脑酸、樟脑磺酸、癸酸、己酸、辛酸、肉桂酸、柠檬酸、环拉酸、乙烷-1,2-二磺酸、乙磺酸、2-羟基-乙磺酸、甲酸、富马酸、半乳糖二酸、龙胆酸、葡庚糖酸、D-葡糖酸、D-葡萄糖醛酸、L-谷氨酸、β-氧代-戊二酸、乙醇酸、马尿酸、氢溴酸、盐酸、(+)-L-乳酸、(±)-DL-乳酸、乳糖酸、马来酸、(-)-L-苹果酸、丙二酸、(±)-DL-扁桃酸、甲磺酸、萘-2-磺酸、萘-1,5-二磺酸、1-羟基-2-萘甲酸、烟酸、硝酸、油酸、乳清酸、草酸、棕榈酸、双羟萘酸、磷酸、L-焦谷氨酸、水杨酸、4-氨基-水杨酸、癸二酸、硬脂酸、琥珀酸、硫酸、单宁酸、(+)-L-酒石酸、硫氰酸、对甲苯磺酸、三氟甲磺酸、以及十一碳烯酸。在药学上可接受的盐的制备中可以使用的代表性的碱包括但不局限于以下这些：铵、L-精氨酸、苯乙苄胺、苄星青霉素、氢氧化钙、胆碱、二甲基乙醇胺、二乙醇胺、二乙胺、2-(二乙氨基)-乙醇、乙醇胺、乙二胺、N-甲基-葡糖胺、哈胺(hydrabamine)、1H-咪唑、L-赖氨酸、氢氧化镁、4-(2-羟乙基)-吗啉、哌嗪、氢氧化钾、1-(2-羟乙基)-吡咯烷、仲胺、氢氧化钠、三乙醇胺、氨丁三醇以及氢氧化锌。

本发明的化合物的名称是根据由化学文摘服务社(Chemical AbstractsService(CAS))认同的命名法法则、使用先进化学开发(Advanced ChemicalDevelopment)公司软件(ACD/Name product(名称产品)版本10.01；Build15494,2006年12月1日)或根据由国际理论和应用化学联合会(International Union ofPure and Applied Chemistry(IUPAC))认同的命名法法则、使用先进化学开发(Advanced Chemical Development)公司软件(ACD/Name product(名称产品)版本10.01.0.14105，2006年10月)而产生的。在互变异构形式的情况下，产生描述的具有该结构的互变异构形式的名称。其他未描述的互变异构体形式也被包括在本发明的范围内。

化合物的制备

实验程序1

根据反应方案(1)，可以通过具有化学式(II-a)的一种中间化合物的催化氢化来制备根据化学式(I)的最终化合物。可以在一种适合的催化剂(例如像，钯碳)、一种适合的催化剂毒物(例如像，噻吩)的存在下，在一种适合的反应惰性溶剂(例如像，乙酸乙酯或甲醇)中，通过用氢处理该具有化学式(II-a)的中间化合物进行所述转化。在氢气氛中，在适合的温度(典型地是室温)下，在适合的压力下(例如大气压)将该混合物搅拌例如16小时。在反应方案(1)中，所有变量如在化学式(I)中定义的。

实验程序2

根据反应方案(2)，即在一种适合的反应-惰性溶剂(例如像，二氯甲烷或甲醇)中，在一种适合的碱(例如像，三乙胺)存在下，在一种缩合剂(例如像，O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N,N,N’,N’-四甲基脲六氟磷酸酯[HATU，CAS148893-10-1]或4-(4,6-二甲氧基-1,3,5-三嗪-2-基)-4-甲基吗啉鎓氯化物[DMTMM，CAS3945-69-5])的存在下，在热条件(例如像，在25℃加热反应混合物持续完成该反应所需的时间，例如1-16小时)进行的一个反应，通常可以通过将具有化学式(III)的一种中间化合物与具有化学式(IV)的一种化合物进行反应来制备具有化学式(II-b)的中间化合物。在反应方案(2)中，所有变量如在化学式(I)中定义的。

实验程序3

通常，可以通过在一种铃木(Suzuki)型反应中的具有化学式(VI)的中间化合物与一种适当的芳基-硼酸盐或芳基硼酸的反应来制备具有化学式(II-c)的中间化合物。因此，在一种适合的反应-惰性溶剂(例如像，1,4-二噁烷、乙醇或如像1,2-二甲氧基乙烷/水/乙醇的惰性溶剂混合物)中，在一种适合的碱(例如像，水性K₃PO₄、Na₂CO₃或Cs₂CO₃)、一种Pd-络合催化剂(例如像，[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)[CAS72287-26-4]或反式-双二环己胺)二乙酸钯[DAPCy，CAS628339-96-8])或四(三苯基膦)合钯(0)[CAS14221-01-3]的存在下，在热条件(例如像，在微波辐射下，在80℃加热该反应混合物，持续例如2-20小时之间的一个时间段，在130℃加热该反应混合物持续10min)下，具有化学式(VI)的中间化合物可与一种芳基-硼酸盐或芳基硼酸发生反应。在反应方案(3)中，所有变量如在化学式(I)中定义的并且W是卤素。R³和R⁴可以是氢或烷基，或可以一起形成例如化学式–CH₂CH₂-、-CH₂CH₂CH₂-、或-C(CH₃)₂C(CH₃)₂-的二价基。

实验程序4

通常，遵循以下反应方案(4)中示出的反应步骤可以制备具有化学式(III)的中间化合物。

A：溴到胺的转化

B：硫代酰胺到脒的转化

C：酰胺到硫代酰胺的转化(硫化)

遵循领域中已知的铜催化型偶联程序，可以从相应的、具有化学式(VI)的中间化合物制备上述反应方案(4)中具有化学式(III)的中间化合物(反应步骤A)。可以通过将所述的具有化学式(VI)的中间化合物用叠氮化钠，在一种适合的反应惰性溶剂(例如像，DMSO)中，在适合的碱的一种混合物(例如像，二甲基-乙二胺和Na₂CO₃)、和一种铜催化剂(例如，CuI)的存在下，在热条件下(例如像，在110℃加热该反应混合物，持续直至该反应完成，例如1小时)进行处理来进行所述偶联。

遵循领域中已知的硫代酰胺到脒的转化程序，可以从相应的、具有化学式(VII)的中间化合物制备上述反应方案(4)中具有化学式(VI)的中间化合物(反应步骤B)。可以合宜地通过将具有化学式(VII)的中间化合物在一种适合的反应惰性溶剂(例如像，水或甲醇以及类似溶剂)中，在热条件下(例如像，在60℃加热该反应混合物，持续例如6小时)用一种氨源(例如像，氯化铵或氨水)处理来进行所述转化。

遵循领域中已知的硫化程序，可以从相应的、具有化学式(VIII)的中间化合物制备上述反应方案(4)中具有化学式(VII)的中间化合物(反应步骤C)。可以合宜地通过在一种反应惰性溶剂(例如像，四氢呋喃或1,4-二噁烷等等)中，在热条件下(例如像，在50℃加热反应混合物，持续例如50分钟)，用一种硫化剂(例如像，五硫化磷或2,4-双-(4-甲氧基苯基)-1,3-二硫杂-2,4-二磷杂环丁烷2,4-二硫化物[劳森试剂，CAS19172-47-5])处理具有化学式(VIII)的中间化合物来进行所述转化。

实验程序5

遵循领域中已知的还原性脱卤程序，通常可以从具有化学式(X)的中间化合物制备具有化学式(VIII)和(IX)的中间化合物(反应步骤D)。可以通过在一种适合的溶剂(例如乙酸)中，在适合的温度(典型地是室温80℃，持续完成该反应所需的时间，例如1-16小时)下，将具有化学式(X)的中间体用一种适合的锌试剂(例如像，锌粉或锌铜偶)进行处理来进行所述转化。这一转化提供了具有化学式(VIII)和(IX)的中间化合物处于不同比率的一种混合物，该比率依赖于这些反应条件和这些反应物。

实验程序6

通常，遵循以下反应方案(6)中示出的反应步骤可以制备具有化学式(X)的中间化合物。

E：氯化

F：三氟甲基化

G：环化

遵循领域中已知的氯化程序，可以从具有化学式(XI)的中间化合物制备上述反应方案(6)中具有化学式(X)的中间化合物(反应步骤E)。可以在一种碱(例如像，吡啶)的存在下，在一种反应惰性溶剂(例如像，二氯甲烷)中，通过用一种适合的氯化剂(例如像，亚硫酰氯)处理该具有化学式(XI)的中间化合物来进行所述转化。将该反应混合物在适合的温度(例如0℃)下搅拌，持续达到该反应的完成所需要的时间，例如30-60分钟。

遵循领域中已知的三氟甲基化程序，可以从具有化学式(XII)的中间化合物制备上述反应方案(6)中具有化学式(XI)的中间化合物(反应步骤F)。可以在四丁基氟化铵(TBAF)或四丁基三苯基二氟硅酸铵(TBAT)的存在下，在一种适合的反应惰性溶剂(例如像，四氢呋喃)中，通过用一种三氟甲基化剂(例如像，(三氟甲基)三甲基硅烷)处理该具有化学式(XII)的中间化合物来进行所述转化。将该反应混合物在适合的温度(例如室温)下搅拌，持续达到该反应的完成所需要的时间，例如两小时。

遵循领域中已知的二步环化程序，可以从具有化学式(XIV)的中间化合物制备上述反应方案(6)中具有化学式(XII)的中间化合物(反应步骤G)。可以通过首先在一种碱(例如像，NaOH或DIPEA)的存在下，在一种适合的反应惰性溶剂(例如像，二氯甲烷或惰性溶剂(例如像水和1,4-二噁烷或水和THF)的混合物)中，用具有化学式(XIII)的一种中间化合物(例如像，氯乙酰氯)处理具有化学式(XIV)的中间化合物来进行所述转化。可通过添加一种适合的碱(例如像，NaOH)将该反应混合物的pH调节至一个适合的pH值，例如10-11。将该反应混合物在适合的温度(例如0℃至25℃)下搅拌，持续达到该反应的完成所需要的时间，例如1-4小时。随后，可以在一种适合的反应惰性溶剂(例如像，乙腈或DMF)中，通过添加一种适合的碱(例如像，K₂CO₃、Cs₂CO₃、N,N-二异丙基乙胺或NaHCO₃)将所获得的粗残余物进行环化以提供该中间体(XII)。将该反应混合物在热条件(例如像，在微波辐射下，在25℃至80℃加热该反应混合物持续2-24小时，或例如在140℃加热该反应混合物持续15-30分钟)下进行搅拌。还可以在碱的不存在下，在一种适合的反应惰性溶剂(例如乙腈或DMF)中，在适合的温度(典型地是40℃至110℃，持续例如24-48小时的一个时间段)下进行该转化。

药理学

本发明的化合物及其药学上可接受的组合物抑制BACE，并且因此在治疗或预防阿尔茨海默病(AD)、轻度认知损害(MCI)、衰老、痴呆、路易体痴呆、脑淀粉样血管病、多发性梗死性痴呆、唐氏综合征、与帕金森病相关的痴呆以及与β-淀粉样蛋白相关的痴呆中可以是有用的。

本发明涉及一种用作药物的、根据通式(I)的化合物、其立体异构体形式或其药学上可接受的酸或碱加成盐。

本发明还涉及用于在治疗或预防以下疾病或病症中使用的根据通式(I)的化合物、其立体异构体形式或其药学上可接受的酸或碱加成盐，这些疾病或病症选自下组，该组由以下各项组成：AD、MCI、衰老、痴呆、路易体痴呆、脑淀粉样血管病、多发性梗死性痴呆、唐氏综合征、与帕金森病相关的痴呆以及与β-淀粉样蛋白相关的痴呆。

本发明还涉及根据通式(I)的化合物、其立体异构体形式或其药学上可接受的酸或碱加成盐用于制造用于治疗或预防上文中提及的任何一种疾病状况的药物的用途。

鉴于具有化学式(I)的化合物的效用，提供了治疗患有上文中提及的任何一种疾病的受试者例如温血动物(包括人类)的方法，或一种预防受试者例如温血动物(包括人类)免于上文中提及的任何一种疾病的方法。

所述方法包括向受试者例如温血动物(包括人类)给予，即，全身给予或局部给予，优选口服给予一个有效量的具有化学式(I)的化合物、其立体异构体形式、其药学上可接受的加成盐或溶剂化物。

治疗方法还包括在一个方案中给予每天一到四次摄入之间的活性成分。在这些治疗方法中，根据本发明的化合物优选地在给予之前配制。如在此在下文所述的，使用熟知且容易获得的成分通过已知程序制备适合的药物制剂。

可以适合于治疗或预防阿尔茨海默病或其症状的、本发明的化合物可以单独给予或与一种或多种另外的治疗剂联合给予。联合治疗包括：包含具有化学式(I)的化合物以及一种或多种另外的治疗剂的单个药物剂量制剂的给予，连同具有化学式(I)的化合物和以其自身分开的药物剂量制剂存在的每种另外的治疗剂的给予。例如，可以向患者给予一起处于单一口服剂量组合物(例如片剂或胶囊)中的具有化学式(I)的化合物以及治疗剂，或可以将每种药剂以分开的口服剂量制剂给予。

药物组合物

本发明还提供了用于预防及治疗其中β-分泌酶的抑制是有益的疾病，例如阿尔茨海默病(AD)、轻度认知损害、衰老、痴呆、路易体痴呆、唐氏综合征、与中风相关的痴呆、与帕金森病相关的痴呆以及与β-淀粉样蛋白相关的痴呆的组合物。所述组合物包含治疗有效量的、根据具有化学式(I)的化合物以及药学上可接受的载体或稀释剂。

虽然活性成分可以单独给予，但是其优选地是作为药物组合物存在。因此，本发明进一步提供了一种药物组合物，包含根据本发明的化合物、以及药学上可接受的载体或稀释剂。该载体或稀释剂在与该组合物的其他成分的相容性的意义上必须是“可接受的”而对于接受者无害的。

可以通过制药领域中熟知的任何方法制备本发明的药物组合物。将作为活性成分的一种治疗有效量的处于碱形式或加成盐形式的具体化合物与一种药学上可接受的载体组合为一种密切混合物，该载体可以采取多种形式，取决于所希望的用于给予的制品的形式。优选地，令人希望的是这些药物组合物处于适合于全身给予，例如，口服、经皮或肠胃外给予；或局部给予，例如，经由吸入、鼻喷雾、滴眼剂或经由乳膏、凝胶、洗发水等等的单位剂型。例如，在制备处于口服剂型的组合物中，在口服液体制品(例如悬浮液、糖浆、酏剂和溶液)的情况下，可以采用任何常用药物介质，例如像水、二醇类、油类、醇类等等；或者在粉剂、丸剂、胶囊、以及片剂的情况下，采用固体载体，例如淀粉、糖、高岭土、润滑剂、粘合剂、崩解剂等等。由于它们的给予方便，片剂和胶囊代表最有利的口服剂量单位形式，在此情况下显然采用固体药物载体。对于肠胃外组合物，尽管可以包括例如辅助溶解性的其他成分，该载体通常包括占至少大部分的无菌水。例如可制备注射溶液，其中该载体包括盐溶液、葡萄糖溶液或盐水和葡萄糖溶液的混合物。也可以制备注射悬浮剂，在这种情况下可以采用适合的液体载体、助悬剂以及类似物。在适合于经皮给予的组合物中，载体任选地包括渗透增强剂和/或适合的润湿剂，任选地与小比例的适合的任何性质的添加剂组合，这些添加剂不会引起任何对皮肤的显著有害作用。所述添加剂可以促进对皮肤的给予和/或可以有助于制备所希望的组合物。能以不同方式给予这些组合物，例如，作为透皮贴剂、作为喷滴剂(spot-on)或作为软膏剂。

为了便于给予和剂量的一致性，尤其有利的将上述药物组合物配制为单位剂型。如在说明书和权利要求中使用的，单位剂型是指适合作为单位剂量的物理上离散的单位，各单位含有经计算以产生所希望的与所需药物载体相关的疗效的预定量的活性成分。这样的单位剂型的实例是片剂(包括刻痕片剂或包衣片剂)、胶囊、丸剂、粉包、薄片、注射溶液或悬浮液、一茶匙容量、大汤匙容量等，及其分开的多种剂型。

如本领域的普通技术人员所熟知的，精确的剂量以及给予的频率取决于具体使用的具有化学式(I)的化合物、进行治疗的具体病症、进行治疗的病症的严重性、具体患者的年龄、体重、性别、失调程度以及总体身体健康状况，连同个体可以服用的其他药物。此外，显然所述有效每日量可以取决于所治疗的受试者的反应和/或取决于对本发明的化合物开处方的医师的评估而降低或增加。

取决于给予模式，该药物组合物将包括按重量计从0.05％至99％，优选地按重量计从0.1％至70％，更优选地按重量计从0.1％至50％的活性成分，以及按重量计从1％至99.95％，优选地按重量计从30％至99.9％，更优选地按重量计从50％至99.9％的一种药学上可接受的载体，所有的百分数都基于该组合物的总重量。

这些化合物可以用于全身给予，例如，口服、经皮或肠胃外给予；或局部给予，如，经由吸入、鼻喷雾、滴眼剂或经由乳膏、凝胶、洗发水等等。优选地这些化合物经口给予。如本领域的普通技术人员所熟知的，精确的剂量以及给予的频率取决于具体使用的根据化学式(I)的化合物、进行治疗的具体病症、进行治疗的病症的严重性、具体患者的年龄、体重、性别、失调的程度以及总体身体健康状况，连同个体可以服用的其他药物。此外，显然所述有效每日量可以取决于所治疗的受试者的反应和/或取决于对本发明的化合物开处方的医师的评估而降低或增加。

可以与载体物质组合以生产一种单一剂型的具有化学式(I)的化合物的量将取决于治疗的疾病、哺乳动物种类、以及具体给予模式而变化。然而，作为一般指导，适合本发明的这些化合物的单位剂量可以，例如，优选地含有0.1mg至约1000mg之间的活性化合物。优选的单位剂量在1mg至约500mg之间。更优选的单位剂量在1mg至约300mg之间。甚至更优选的单位剂量在1mg至约100mg之间。此类单位剂量可以一天给予超过一次，例如一天2、3、4、5或6次，但是优选地每天1或2次，使得对于70kg成人而言，每次给予的总剂量范围在每kg受试者体重0.001至约15mg。优选的剂量是每次给予每kg受试者体重0.01至约1.5mg，并且此类疗法可以持续多个星期或月份，并且在一些情况中，持续多年。然而，如本领域技术人员充分理解的，将理解的是，针对任何具体患者的特定剂量水平取决于多种因素，包括所采用的特定化合物的活性；正在被治疗的个体的年龄、体重、总体身体健康状况、性别以及饮食；给予时间及途径；排泄率；先前已经给予的其他药物；以及经历治疗的具体疾病的严重性。

典型剂量可以是一天服用一次或一天多次的一片1mg至约100mg片剂或1mg至约300mg，或者一天服用一次的、并且包含在比例上含量较高的活性成分的一种定时释放胶囊或片剂。定时释放效应可以通过在不同的pH值下溶解的胶囊材料、通过经渗透压造成的缓慢释放的胶囊、或者通过控制释放的任何其他已知手段来获得。

如本领域技术人员将理解的，在一些情况下可能有必要使用这些范围外的剂量。此外，应当注意临床医生或治疗医生结合个体患者反应将知道如何以及何时开始、中断、调节、或终止治疗。

对于以上提供的这些组合物和方法，本领域的普通技术人员将理解的是用于在每个中使用的优选化合物是以上指出为优选的那些化合物。对于这些组合物和方法来说仍进一步优选的化合物是在以下的实例中提供的那些化合物。

实验部分

在下文中，术语“m.p.”意为熔点、“aq.”意为水性的、“r.m.”意为反应混合物、“r.t.”意为室温、‘DIPEA’意为N,N-二异-丙基乙胺、“DIPE”意为二异丙醚、‘THF’意为四氢呋喃、‘DMF’意为二甲基甲酰胺、‘DCM’意为二氯甲烷、“EtOH”意为乙醇、‘EtOAc’意为乙酸乙酯、“AcOH”意为乙酸、“iPrOH”意为异丙醇、“iPrNH₂”意为异丙胺、“MeCN”意为乙腈、“MeOH”意为甲醇、“Pd(OAc)₂”意为二乙酸钯(II)、“rac”意为外消旋的、‘sat.’意为饱和的、‘SFC’意为超临界流体色谱法、‘SFC-MS’意为超临界流体色谱/质谱法、“LC-MS”意为液相色谱/质谱法、“GCMS”意为气相色谱/质谱法、“HPLC”意为高效液相色谱法、“RP”意为反相、“UPLC”意为超高性能液相色谱法、“R_t”意为停留时间(以分钟计)、“[M+H]⁺”意为化合物游离碱的去质子化质量、“DAST”意为三氟化二乙氨基硫、“DMTMM”意为4-(4,6-二甲氧基-1,3,5-三嗪-2-基)-4-甲基吗啉鎓氯化物、“HATU”意为O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N,N,N’,N’-四甲基脲六氟磷酸酯、“Xantphos”意为(9,9-二甲基-9H-氧杂蒽-4,5-二基)双[二苯基膦]、“TBAT”意为四丁基三苯基二氟硅酸铵、“TFA”意为三氟乙酸、“Et₂O”意为二乙醚、“DMSO”意为二甲亚砜、“MeCN”意为乙腈。

对于关键中间体，连同一些最终化合物，手性中心的绝对构型(表示为R和/或S)是经由与已知构型的标准品的比较或使用适用于绝对构型测定的分析技术，如VCD(振动圆二色)或X-射线结晶确定。当手性中心的绝对构型未知时，主观地指定为R*。

A.中间体的制备

实例A1

中间体1的制备。

将三甲基甲硅烷基氰化物(30.7mL，230mmol)添加到在NH₃/MeOH(150mL)中的5-溴-2-氟苯乙酮(25g，115mmol)和NH₄Cl(18.5g，345mmol)的搅拌溶液中。将该混合物在室温下搅拌3天。然后在真空中蒸发溶剂并且将残余物吸收到EtOAc(80mL)中。将固体过滤，并且将滤液在真空中蒸发以获得中间体1(27.9g，定量产量)，将其不进一步纯化而用于下一步骤中。

实例A2

中间体2的制备。

将中间体1(27g，111mmol)溶解于HCl(37％在H₂O中)(130mL)和乙酸(130mL)中，并将该混合物回流16小时。冷却至室温后，将该混合物在真空中进行浓缩。添加水，并且将水层用EtOAc萃取。将该水层用水性NaOH溶液(25％)碱化至pH7。将该水层在真空中部分浓缩。将该混合物在冰浴中冷却，并过滤掉沉淀物，用水洗涤，并且然后用Et₂O洗涤，并在真空下干燥以产生呈白色固体的中间体2(18g，62％产率)。

实例A3

中间体3的制备。

将中间体2(15g，57.2mmol)溶解于MeOH(300mL)中。添加H₂SO₄(330mL)并且将该反应混合物回流48h。真空浓缩该反应混合物。添加水，并且将该溶液用饱和水性NHCO₃溶液碱化至pH8。然后将该水层用EtOAc萃取。分离该有机层，干燥(MgSO₄)，过滤并且在真空中浓缩，以产生中间体3(15g，95％产率)。

实例A4

中间体4的制备。

通过制备型SFC((DaicelAD30x250mm)、流动相(CO₂，具有0.2％iPrNH₂的MeOH))，将中间体3(10g)分离为相应的对映异构体，以产生中间体4(4.2g，42％产率)。

α_D:-10.1°(365nm,c0.762w/v％,MeOH,20℃)。

实例A5

中间体5的制备。

将THF(150mL)添加到中间体4(40g，145mmol)在NaOH(在H₂O中1M，360mL)中的溶液里。将该混合物在室温搅拌4小时。将该混合物在真空下浓缩以提供呈白色固体的中间体5(42g)，将其照原样用于下一反应步骤中。

实例A6

中间体6的制备。

向中间体5(41.3g，145mmol)在H₂O(150mL)中的冷却溶液中逐滴添加氯乙酰氯(24mL，304.5mmol)在1,4-二噁烷(75mL)中的溶液。同时，添加NaOH(在H₂O中5M，29mL)以将该pH调节在10-11。将有机层分离并且将水层用Et₂O萃取。然后该水层用HCl(6M，在H₂O中)酸化直至pH2。通过过滤收集沉淀的白色固体，用H₂O洗涤并干燥以产生中间体6(42g，86％产率)。

实例A7

中间体7的制备。

中间体6(42g，124mmol)和NaHCO₃(20.8g，248mmol)溶解于DMF(1000mL)中，并将该反应混合物在80℃下搅拌3小时。将该混合物在减压下部分地浓缩，冷却至室温，并且然后用硅藻土过滤。将滤液在真空中浓缩并且将残余物通过快速柱色谱法(硅胶；洗脱液：MeOH/DCM0/100至5/95)进行纯化。收集所希望的部分并且在真空中进行浓缩，以产生中间体7(36g，96％产率)。

实例A8

中间体8的制备。

将TBAT(2.08g，3.85mmol)添加至中间体7(11.6g，38.5mmol)于THF(117mL)中的溶液中。然后，逐滴添加(三氟甲基)三甲基硅烷(12.5mL，84.6mmol)，并将该反应混合物在室温下搅拌20分钟。将该混合物用水性NaCl进行淬灭并用EtOAc进行萃取。将合并的有机层进行干燥(MgSO₄)，过滤并在真空中浓缩以产生为顺式和反式异构体的混合物的中间体8(14g，98％产率)，将其照原样用于下一步骤中。

实例A9

中间体9的制备。

将中间体8(14g，37.6mmol)溶解于DCM(600mL)中并冷却至0℃。然后逐滴添加亚硫酰氯(11.2mL，150mmol)。将该反应混合物在0℃搅拌30min，并且然后添加吡啶(18.2mL，225.7mmol)。30分钟后，将该反应用1NHCl水溶液水解，并且然后用DCM进行萃取。将这些有机层分离，干燥(MgSO₄)，过滤并在真空中蒸发。将该粗产物通过快速柱色谱法(硅胶；洗脱液：氨在甲醇中7M溶液/DCM，0/100至2/98)进行纯化。收集所希望的部分并且在真空中进行浓缩，以产生中间体9(6g，41％产率，非对映异构体的混合物)。

实例A10

中间体10的制备。

在室温下，将中间体9(7g，17.9mmol)和锌铜偶(8.55g，66.3mmol)在乙酸(420mL)中搅拌16小时。将该反应混合物过滤，用DCM洗涤并且在真空中进行浓缩。添加氢氧化铵溶液(在水中28％)以及DCM并且将该混合物在室温下搅拌1h。将有机层分离，并且将水层用DCM萃取。将这些合并的有机层进行干燥(MgSO₄)，过滤并且在真空中蒸发，以产生呈一种白色粉末的中间体10(6g，99％产率)。

实例A11

中间体11的制备。

在室温下，将P₂S₅(5.95g，26.8mmol)添加在中间体10(6g，17.9mmol)在THF(145mL)中的溶液里。将反应混合物在70℃搅拌90分钟。然后，将该混合物冷却至室温，过滤掉，并且在真空中蒸发该有机溶剂，以产生中间体11(5.9g)，将其照原样用于下一步骤中。

实例A12

中间体12的制备。

该中间体11(5.9g，16.8mmol)溶解于在MeOH中(390mL)的7N氨中，并将该反应混合物在80℃搅拌2小时。蒸发该溶剂并且将该粗产物通过柱色谱法(硅胶；洗脱液：氨在甲醇中7M溶液/DCM，0/100至5/95)进行纯化。收集所希望的部分并且在真空中进行浓缩，以产生中间体12(4.04g，72％产率)。

实例A13

中间体13的制备。

将中间体12(3.6g，10.7mmol)与NaN₃(1.75g，26.9mmol)、CuI(2.56g，13.4mmol)以及Na₂CO₃(2.28g，21.5mmol)在DMSO(153mL)中合并，并且将反应除气。之后，添加N,N’-二甲基乙二胺(2mL，18.8mmol)，并将该混合物在110℃下加热直至反应完成，大约3小时。将该反应混合物在真空中浓缩。添加在MeOH中的7N氨，并且将该混合物搅拌过夜。将形成的沉淀过滤出并且将滤液在真空中浓缩。将该粗产物通过柱色谱法(硅胶；洗脱液：氨在甲醇中7M溶液/DCM，0/100至30/70)进行纯化。收集所希望的部分并且在真空中进行浓缩，以产生中间体13(1.52g，52％产率)。

实例A14

中间体14的制备。

将5-甲氧基吡嗪-2-羧酸(0.218g，1.42mmol)溶解于MeOH(30mL)中并且添加DMTMM(0.456g，1.548mmol)。在将该混合物搅拌5min后，在0℃添加中间体13(0.35g，1.29mmol)于MeOH(20mL)中的溶液，并且将该混合物在室温下搅拌16小时。在真空中蒸发溶剂。将该粗物料通过快速柱色谱法(硅胶；洗脱液：氨在甲醇中7M溶液/DCM，0/100至5/95)进行纯化。收集所希望的部分并且在真空中进行浓缩。将该残余物从DIPE/庚烷中悬浮，过滤并在高真空下干燥，以产生呈白色固体的中间体14(0.266g，51％产率)。

实例A15

中间体15的制备。

遵循实例A14中所述的相同的方法合成中间体15。起始于中间体13(0.35g，1.29mmol)，获得呈白色固体的中间体15(0.362g，71％产率)。

实例A16

中间体16的制备。

将1-(5-溴-2-氟-苯基)乙酮[(CAS198477-89-3)，70g，322mmol)和二氧化硒(71.6g，645mmol)溶解于吡啶(520mL)中。将该反应混合物在100℃下搅拌2小时。蒸发溶剂并且添加HCl1N水溶液。将该水层用EtOAc萃取。将合并的有机层进行干燥(Mg₂SO₄)，过滤并在真空中浓缩以产生中间体16(62g，78％产率)，将其照原样用于下一反应中。

实例A17

中间体17的制备。

在0℃下，将亚硫酰氯(37mL，510mmol)逐滴添加至中间体16(42g，170mmol)于MeOH(456mL)中的搅拌溶液中。将该混合物回流18小时。将溶剂在真空中蒸发并且将该残余物在饱和Na₂CO₃和DCM之间进行分配。分离该有机层，干燥(Mg₂SO₄)，过滤并且在真空中浓缩，以产生呈一种黄色油的中间体17(30g，68％产率)。

实例A18

中间体18的制备。

将异丙醇钛(IV)(153mL，522mmol)添加至中间体17(68g，261mmol)和(S)-2-甲基-2-丙烷亚磺酰胺(37.9g，313mmol)于正庚烷(1000mL)中的搅拌混合物中。将该混合物在80℃搅拌1.5小时。将该混合物冷却降至室温，并且添加冰-水。将所得混合物在硅藻土衬垫上过滤并且用正庚烷进行漂洗。将该水层用EtOAc萃取。将合并的有机层进行干燥(MgSO₄)，过滤并在真空中浓缩以产生中间体18(87.9g，86％产率)，将其照原样用于下一反应中。

实例A19

中间体19的制备。

在-78℃，在氮气中,将溴化乙基镁(3M，86mL，259mmol)逐滴添加至中间体18(72.6g，185mmol)于DCM(1154mL)中的搅拌溶液中。在这个温度下将该混合物搅拌30min，并且然后通过添加饱和水性NH4Cl溶液接着添加水淬灭该反应。将该混合物用DCM萃取并用水洗涤。分离有机层，干燥(MgSO₄)，过滤并在真空中蒸发溶剂。将该粗产物通过快速柱色谱(硅胶；洗脱液：庚烷/EtOAc90/10至70/30)进行纯化。收集所希望的部分并且在真空中进行浓缩，以产生呈黄色油的中间体19(25.56g，33％产率，非对映异构体的混合物)。

实例A20

中间体20的制备。

将2M水性NaOH溶液(91mL，181.8mmol)添加至粗制中间体19(25.6g，60.6mmol)于MeOH(68mL)中的溶液中。将所得混合物在回流下搅拌5小时。将该混合物冷却至室温，并且然后在水和EtOAc之间进行分配。分离水层,并通过添加1M水性HCl溶液进行中和，并且然后用DCM萃取。分离有机层，干燥(MgSO4)，过滤并在真空中蒸发溶剂。将该残余物从DIPE中悬浮，过滤出沉淀物并在真空下干燥，以产生呈白色固体的中间体20(17.5g，76％产率，非对映异构体的混合物)。

实例A21

中间体21的制备。

在室温下，将中间体20(17.5g，46mmol)在4MHCl于二噁烷(46mL)中的溶液中搅拌15min。向所得悬浮液中，添加DIPE，并且过滤出沉淀物并在真空下干燥，以产生呈白色固体的中间体21(15.1g，定量产量，外消旋体)。

实例A22

中间体22的制备。

在0℃下，向中间体21(15.1g，43.2mmol)和DIPEA(35mL，203.7mmol)于DCM(350mL)中的冷却溶液中逐滴添加氯乙酰氯(5.6mL，70.6mmol)。在0℃搅拌15分钟后，将该反应混合物升温至室温，并且用HCl(2M于H₂O中，10mL)进行酸化。将该混合物用EtOAc进行萃取并用盐水洗涤。分离有机层，干燥(MgSO4)，过滤并在真空中蒸发溶剂。将该粗产物用DIPE进行研磨，并过滤出沉淀物，并在真空下干燥，以产生呈棕色固体的中间体22(8.04g，53％产率)。

实例A23

中间体23的制备。

遵循实例7中所述的相同的方法合成中间体23。起始于中间体22(8g，22.69mmol)，获得呈白色固体的中间体23(4.5g，63％产率)。

实例A24

中间体24的制备。

遵循实例8中所述的相同的方法合成中间体24。起始于中间体23(2.34g，7.4mmol)，获得呈一种油的中间体24(1.9g，66％产率)。

实例A25

中间体25的制备。

遵循实例9中所述的相同的方法合成中间体25。起始于中间体24(1.9g，4.92mmol)，获得呈淡黄色固体的中间体25(1.58g，79％产率)。

实例A26

中间体26的制备。

在100℃下，将中间体25(1.4g，3.46mmol)在乙酸(42mL)中搅拌5分钟。添加锌(0.91g，13.8mmol)并且将该混合物在100℃搅拌1h。添加额外的锌(0.452g，6.9mmol)，并且进一步将该混合物在100℃进行搅拌。在另一个小时后，添加新的锌(0.226g，3.46mmol)，并且将该混合物在100℃搅拌2h。最后，添加额外的锌(0.91g，13.8mmol)并且将该混合物在100℃搅拌1h。冷却后，将该反应混合物过滤，用DCM洗涤并且在真空中进行浓缩。添加氢氧化铵溶液(28％于水中)、水性饱和NaHCO₃溶液以及水。将水层用DCM进行萃取。将这些合并的有机层进行干燥(MgSO₄)，过滤并且在真空中蒸发，以产生呈一种白色固体的中间体26(1.26g，98％产率)。

实例A27

中间体27的制备。

遵循实例11中所述的相同的方法合成中间体27。起始于中间体26(1.26g，3.4mmol)，获得呈白色固体的中间体27(1.09g，83％产率)。

实例A28

中间体28以及中间体29的制备

在微波辐射下，将中间体27(1g，2.59mmol)溶解于在MeOH中(60mL)的7N氨中，并将该反应混合物在130℃下搅拌15分钟。将该反应混合物在真空下浓缩，并添加新的于MeOH(30mL)中的7N氨。在微波辐射下，将反应混合物在130℃搅拌另一个15分钟。蒸发该溶剂并且将该粗产物通过柱色谱法(硅胶；洗脱液：氨在甲醇中7M溶液/DCM，0/100至2/98)进行纯化。收集所希望的部分并且在真空中进行浓缩，以产生呈白色固体的中间体28(0.29g，30％产率，顺式外消旋体)以及呈一种油的中间体29(0.27g，30％产率)。

实例A29

中间体30的制备。

遵循实例13中所述的相同的方法合成中间体30。起始于中间体29(0.189g，0.542mmol)，获得呈一种油的中间体30(0.16g)，将其照原样用于下一反应中。

实例A30

中间体31的制备。

遵循实例A14中所述的相同的方法合成中间体31。起始于中间体30(0.09g，0.315mmol)，获得呈灰白色固体的中间体31(0.028g，21％产率)。

实例A31

中间体32的制备。

将中间体12(0.4g，1.194mmol)、5-嘧啶基硼酸(0.296g，2.387mmol)以及四(三苯基膦)合钯(0)(0.207g，0.179mmol)溶解于1,4-二噁烷(18mL)与水性NaHCO₃(饱和溶液，8.5mL)的混合物中。将所得混合物用N₂进行冲洗，并且然后将其在70℃加热2小时。然后将该反应混合物用水进行稀释，并且然后用DCM(3x)进行萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，干燥(Na₂SO₄)，过滤并在真空中蒸发溶剂。将该粗产物通过快速柱色谱法(硅胶；氨于甲醇中7M溶液/DCM，0/100至5/95)进行纯化。收集所希望的部分并且在真空中浓缩，以产生呈白色泡沫的中间体32(0.3g，75％产率)。

实例A32

中间体33的制备。

起始于3-溴苯乙酮(CAS2142-63-4)，遵循实例A1-A12中对于中间体12所述的相同的反应程序合成中间体33。

实例A33

中间体34的制备。

遵循实例A31中所述的相同的方法合成中间体34。起始于中间体33(0.31g，0.978mmol)，获得呈白色固体的中间体34(0.21g，68％产率)。

实例A34

中间体35的制备。

将中间体13(2.78g，10.25mmol)溶解于EtOAc(70mL)中，并添加钯碳(10％)(1.09g)和噻吩(在THF中的0.4％溶液，14mL)。将该混合物在室温和大气压下氢化16小时。过滤出催化剂，并在真空中蒸发溶剂。将该粗产物通过快速柱色谱法(硅胶；洗脱液：氨在甲醇中7M溶液/DCM，0/100至10/90)进行纯化。收集所希望的部分并且在真空中进行浓缩，以产生中间体35(0.478g，17％产率)。

B.最终化合物的制备

实例B1

化合物1的制备：N-{3-[(2R*,3R)-5-氨基-2-(二氟甲基)-3-甲基-3,6-二氢-2H-1,4- 噁嗪-3-基]-4-氟苯基}-5-甲氧基吡嗪-2-羧酰胺

将中间体14(0.154g，0.378mmol)溶解于EtOAc(5mL)中，并添加钯碳(10％)(0.04g，0.038mmol)和噻吩(在THF中的0.4％溶液，0.5mL，0.026mmol)。将该混合物在室温和大气压下氢化16小时。过滤出催化剂，并在真空中蒸发溶剂。将该粗产物通过快速柱色谱法(硅胶；洗脱液：氨在甲醇中7M溶液/DCM，0/100至2/98)进行纯化。收集所希望的部分并且在真空中进行浓缩。将该残余物从DIPE中悬浮，过滤并在高真空下干燥，以产生化合物1(0.067g，43％产率)。

实例B2

化合物2的制备：N-{3-[(2R*,3R)-5-氨基-2-(二氟甲基)-3-甲基-3,6-二氢-2H-1,4- 噁嗪-3-基]-4-氟苯基}-5-氟吡啶-2-羧酰胺

遵循实例B1中所述的相同的方法合成化合物2。起始于中间体15(0.251g，0.637mmol)，获得呈白色固体的化合物2(0.114g，45％产率)。

实例B3

化合物3的制备：顺式-外消旋-N-{3-[5-氨基-2-(二氟甲基)-3-乙基-3,6-二氢 -2H-1,4-噁嗪-3-基]-4-氟苯基}-5-甲氧基吡嗪-2-羧酰胺

将中间体31(0.028g，0.066mmol)溶解于MeOH(1.3mL)中，并在H-立方体(H-cube)反应器(1mL/min，10％Pd/C筒，全H2模式(fullH2mode)中进行氢化，首先在25℃，然后在50℃并且最后在80℃。在真空中蒸发溶剂。将该粗产物通过制备型HPLC(C18X桥19x1005um)进行纯化，流动相(梯度从80％的在水中0.1％NH₄CO₃H/NH₄OHpH9溶液，20％CH₃CN至0％的在水中0.1％NH₄CO₃H/NH₄OHpH9溶液，100％CH₃CN)。收集所希望的部分并且在真空中进行浓缩，以产生化合物3(0.0032g，11％产率)。

实例B4

化合物4的制备：(5R,6R*)-6-(二氟甲基)-5-(2-氟-5-嘧啶-5-基苯基)-5-甲基-5,6- 二氢-2H-1,4-噁嗪-3-胺

遵循实例B1中所述的相同的方法合成化合物4。起始于中间体32(0.155g，0.464mmol)，获得化合物4(0.018g，12％产率)。

实例B5

化合物5的制备：(5R,6R*)-6-(二氟甲基)-5-甲基-5-(3-嘧啶-5-基苯基)-5,6-二氢 -2H-1,4-噁嗪-3-胺

遵循实例B1中所述的相同的方法合成化合物5。起始于中间体34(0.124g，0.392mmol)，获得呈白色固体的化合物5(0.04g，32％产率)。

实例B6

化合物6的制备：N-{3-[(2R*,3R)-5-氨基-2-(二氟甲基)-3-甲基-3,6-二氢-2H-1,4- 噁嗪-3-基]-4-氟苯基}-5-氯吡啶-2-羧酰胺

将5-氯吡啶-2-羧酸(63mg，0.4mmol)溶解于MeOH(7mL)中并且添加DMTMM(129mg，0.44mmol)。在将该混合物搅拌5min后，在0℃添加中间体35(100mg，0.366mmol)于MeOH(8mL)中的溶液，并且将该混合物在室温下搅拌16小时。在真空中蒸发溶剂。将该粗物料通过快速柱色谱法(硅胶；洗脱液：氨在甲醇中7M溶液/DCM，0/100至5/95)进行纯化。收集所希望的部分并且在真空中进行浓缩。将该残余物用DIPE进行研磨，过滤并在高真空下干燥，以产生呈白色固体的化合物6(0.116g，74％产率)。

实例B7

化合物7的制备：N-{3-[(2R*,3R)-5-氨基-2-(二氟甲基)-3-甲基-3,6-二氢-2H-1,4- 噁嗪-3-基]-4-氟苯基}-5-氰基吡啶-2-羧酰胺

遵循实例B6中所述的相同的方法合成化合物7。起始于中间体35(100mg，0.4mmol)，获得化合物7(110mg，75％产率)。

表1中的化合物1至7列出了根据以上实例之一制备的化合物。‘Ex.No.’是指根据化合物合成的方案的实例编号。‘Co.No.’是指化合物编号。C₂(R*)是指C₂处的绝对构型是R或S，但还未知。

表1：

C.分析部分

LCMS

对于本发明化合物的(LC)MS-表征，使用以下方法。

方法1：

使用Acquity UPLC(沃特斯)系统进行LC测量，该系统包括二元泵、样品组织器(sample organizer)、柱加热器(设置为55℃)、二极管阵列检测器(DAD)以及如在以下对应的方法中限定的柱。来自该柱的流被分流到MS光谱仪。该MS检测器被配置为具有一个电喷雾电离源。通过使用0.02秒的驻留时间在0.18秒内从100至1000的扫描获得质谱。毛细管针电压是3.5kV并且该源温度保持在140℃。使用氮气作为雾化器气体。用Waters-MicromassMassLynx-Openlynx数据系统进行数据采集。

在桥联的乙基硅氧烷/硅石混合体(BEH)C18柱(1.7μm，2.1x50mm；沃特斯(Waters)Acquity)上以0.8ml/min的流速进行反相UPLC(超高效液相色谱)。采用两个流动相(10mM乙酸铵于H₂O/乙腈95/5中；流动相B：乙腈)来运行一个梯度条件：在1.3分钟内从95％A和5％B至5％A和95％B，并且保持0.7分钟。使用0.75μl的注射体积。

对于阳离子化模式的锥孔电压是10V，并且对于阴离子化模式的锥孔电压是20V。

方法2：

使用AcquityUPLC(沃特斯公司(Waters))系统进行UPLC(超高效液相色谱)测量，该系统包括一个样品组织器(sampler organizer)、一个二元泵(该泵具有除气器)、一个四柱温箱、一个二极管阵列检测器(DAD)以及一个柱，如在以下对应的方法中详细说明的。该MS检测器被配置为具有一个ESCI双离子化作用源(与大气压化学电离组合的电喷射)。使用氮气作为雾化器气体。源温度维持在140℃。使用MassLynx-Openlynx软件进行数据采集。

在来自安捷伦公司的一个RRHD Eclipse Plus-C18(1.8μm，2.1x50mm)上，在50℃不与MS检测器分离的情况下，使用1.0ml/min的流速进行反相UPLC(超高效液相色谱法)。所使用的梯度条件是：95％A(0.5g/l乙酸铵溶液+5％乙腈)、5％B(乙腈)，3.8分钟后至40％A、60％B，4.6分钟后至5％A、95％B，保持直至5.0分钟。注射体积2μl。通过使用0.08秒的通道间延迟，在0.1秒内从100至1000进行扫描，获取低分辨率质谱(单四极杆，SQD检测器)。毛细管针电压是3kV。对于阳离子化模式的锥孔电压是25V并且对于阴离子化模式的锥孔电压是30V。

方法3：

使用Acquity UPLC(沃特斯)系统进行LC测量，该系统包括二元泵、样品组织器、柱加热器(设置为55℃)、二极管阵列检测器(DAD)以及如在以下对应的方法中限定的柱。来自该柱的流被分流到MS光谱仪。该MS检测器被配置为具有一个电喷雾电离源。通过使用0.02秒的驻留时间在0.18秒内从100至1000的扫描获得质谱。毛细管针电压是3.5kV并且该源温度保持在140℃。使用氮气作为雾化器气体。用Waters-Micromass MassLynx-Openlynx数据系统进行数据采集。

在桥联的乙基硅氧烷/硅石混合体(BEH)C18柱(1.7μm，2.1x50mm；沃特斯(Waters)Acquity)上以0.8ml/min的流速进行反相UPLC(超高效液相色谱)。采用两个流动相(10mM乙酸铵于H₂O/乙腈95/5中；流动相B：乙腈)来运行一个梯度条件：在1.3分钟内从95％A和5％B至5％A和95％B，并且保持0.3分钟。使用0.5μl的注射体积。对于阳离子化模式的锥孔电压是10V，并且对于阴离子化模式的锥孔电压是20V。

熔点

值是峰值熔化范围，并且获得的值具有与这个分析方法通常相关的实验不确定性。

DSC823e(由表2中的DSC所示)

对于多种化合物，熔点是用DSC823e(梅特勒-托利多)来确定。使用30℃/分钟的温度梯度来测量熔点。最高温度是400℃。

表2：分析数据-R_t表示保留时间(以分钟计)，[M+H]⁺表示化合物的质子化质量，方法是指用于(LC)MS的方法。

n.d.表示表示未确定

旋光度

在具有钠灯的Perkin-Elmer341旋光计上测量旋光度并且记录如下：[α]_λ ^t℃(cg/100ml，溶剂)。

表3：分析数据-对映异构体纯的化合物的旋光值。

NMR

对于多种化合物，¹HNMR谱是记录在具有标准脉冲序列的BrukerDPX-360上、在Bruker DPX-400上或在Bruker Avance600光谱仪上，它们分别在360MHz、400MHz以及600MHz运行，使用氯仿-d(氘化的氯仿，CDCl₃)或DMSO-d₆(氘化的DMSO，二甲基-d6亚砜)作为溶剂。化学位移(δ)被报道为相对于四甲基硅烷(TMS)(用作内标)的百万分率(ppm)。

表4：

D.药理学实例

在本发明中提供的化合物是β-位点APP-裂解酶1(BACE1)的抑制剂。BACE1(一种天冬氨酸蛋白酶)的抑制被认为对于阿尔茨海默病(AD)的治疗是有意义的。来自β-淀粉样前体蛋白(APP)的β-淀粉样蛋白肽(Aβ)的产生和累积被认为在AD的起始和进展中起关键作用。通过在Aβ结构域的N末端和C末端分别由β-分泌酶与和γ-分泌酶进行连续裂解从淀粉样前体蛋白(APP)产生Aβ。

凭借它们抑制酶活性的能力，具有化学式(I)的化合物被预期为基本上在BACE1处具有它们的作用。使用下文描述的并且适合此类化合物(并且更具体地，根据具有化学式(I)的化合物)的鉴定的、基于生物化学荧光共振能量转移(FRET)的测定和SKNBE2细胞中的细胞αlisa测定，测试了这样的抑制剂的行为，这些行为显示于表5和表6中。

基于生物化学FRET的测定

该测定是基于荧光共振能量转移测定(FRET)的测定。用于该测定的底物是APP衍生的、含有淀粉样前体蛋白(APP)β-分泌酶裂解位点的‘Swedish’Lys-Met/Asn-Leu突变的13个氨基酸的肽。这种底物还含有两个荧光团：

(7-甲氧基香豆素-4-基)乙酸(Mca)是具有在320nm处的激发波长和405nm处的发射波长的一种荧光供体并且2,4-二硝基苯酚(Dnp)是一种专有的淬灭体受体。已经对这两个基团之间的距离进行了选择，使得在光激发后，供体荧光能量通过共振能量传递被受体显著地淬灭。在被BACE1裂解时，荧光团Mca与淬灭基团Dnp分离，恢复供体的全荧光效应。荧光的增加与蛋白质水解速率线性相关。

简言之，在384孔规格中，在化合物的不存在或存在下，将处于1μg/ml终浓度的重组BACE1蛋白在室温下与10μm底物在孵育缓冲液(pH5.0的40mM柠檬酸盐缓冲液、0.04％PEG、4％DMSO)中孵育120分钟。接下来通过在T＝0和T＝120处(在320nm处激发且在405nm处发射)的荧光测量直接测量蛋白质水解的量。结果以RFU(相对荧光单位)表示为在T120与T0之间的差异。

通过最小平方和法，以％对照_最小(Controlmin)相对于化合物浓度作图拟合出最佳拟合曲线。由此可以获得IC₅₀值(引起50％活性抑制的抑制浓度)。

LC＝低对照值的中位值

＝低对照：不与酶反应

HC＝高对照值的中位值

＝高对照：与酶反应

％效应＝100-[(样品-LC)/(HC-LC)*100]

％对照＝(样品/HC)*100

％对照_最小＝(样品-LC)/(HC-LC)*100

以下示例性的化合物如上所述被基本测试并且展现出以下活性：

表5：

SKNBE2细胞中的细胞αLisa测定

在两个αLisa测定中，对产生并分泌到人神经母细胞瘤SKNBE2细胞培养基中的总Aβ和Aβ1-42水平进行定量。该测定基于表达野生型淀粉样前体蛋白的人神经母细胞瘤SKNBE2(hAPP695)。稀释这些化合物并且添加到这些细胞中，孵育18小时并且然后进行Aβ1-42和总Aβ的测量。通过夹心αLisa测量总Aβ以及Aβ1-42。αLisa是一种夹心测定，使用了附接到链霉亲和素包被的珠子上的生物素酰化抗体AbN/25以及分别检测总Aβ以及Aβ1-42的抗体Ab4G8或cAb42/26结合的受体珠子。在总Aβ或Aβ1-42的存在下，这些珠子变得紧密靠近。供体珠子的激发引起单线态氧分子的释放，触发受体珠子中能量传递的级联，导致光发射。在孵育1小时之后测量光发射(在650nm处激发并且在615nm处发射)。

LC＝低对照值的中位值

＝低对照：在没有化合物的情况下预孵育细胞，在αLisa中没有生物素酰化的Ab

HC＝高对照值的中位值

＝高对照：在没有化合物的情况下预孵育细胞

％效应＝100-[(样品-LC)/(HC-LC)*100]

％对照＝(样品/HC)*100

％对照_最小＝(样品-LC)/(HC-LC)*100

表6：

体内效力证明

本发明的Aβ肽降低剂可以用于治疗哺乳动物(例如人)中的AD，或可替代地，在动物模型，例如但不局限于，小鼠、大鼠或豚鼠中证明效力。哺乳动物可以不被诊断为患有AD，或可以不具有针对AD的遗传易感性，但是可以是转基因的，使得它以类似于在罹患AD的人类中见到的方式过度产生并最终沉积Aβ。

可以使用任何标准方法以任何标准形式给予Aβ肽降低剂。例如但不局限于，Aβ肽降低剂可以处于口服或通过注射摄入的液体、片剂或胶囊的形式。Aβ肽降低剂可以按足以显著降低在血液、血浆、血清、脑脊液(CSF)、或脑中的Aβ肽的水平的任何剂量给予。

为了确定Aβ42肽降低剂的急性给药是否会降低体内Aβ肽水平，使用了非转基因的啮齿动物，例如，小鼠或大鼠。检查用Aβ肽降低剂处理的动物并与未处理或用媒介物处理的那些进行比较，并且通过标准技术，例如，使用ELISA对可溶性Aβ42以及总Aβ的脑水平进行定量。处理周期从小时(h)至天变化，并且一旦效应起始时程可以确立，基于Aβ42降低的结果调节处理周期。

显示了用于测量体内Aβ42降低的一个典型方案，但这只是可以用来优化可检出Aβ水平的许多变化中的一种。例如，Aβ肽降低化合物被配制到20％羟丙基β环糊精中。以单次口服剂量(p.o.)或单次皮下剂量(s.c.)向禁食过夜的动物给予这些Aβ肽降低剂。在一定的时间之后，通常是2h或4h(如在表7中指出的)，处死这些动物并且分析Aβ42水平。

通过断头术和放血将血液收集在EDTA-处理过的收集管中。将血液在4℃于1900g离心10分钟(min)并且回收血浆并快速冰冻以用于后续分析。将脑从颅骨和后脑上移除。移除小脑并且分开左半球和右半球。将左半球在-18℃下储存以用于测试化合物水平的定量分析。将右半球用磷酸盐缓冲盐水(PBS)缓冲液冲洗并且立即在干冰上冷冻并在-80℃下储存直到匀浆以用于生化测定。

将来自非转基因动物的小鼠脑重悬浮于含有蛋白酶抑制剂(Roche-11873580001或04693159001)的、每克组织8倍体积的0.4％DEA(二乙胺)/50mMNaCl中，例如，对于0.158g的脑，添加1.264ml的0.4％DEA。在FastPrep-24系统(MP生物医学公司(MPBiomedicals))中使用溶解基质D(MPBio#6913-100)在6m/s持续20秒将所有样品均质化。将匀浆在221.300xg离心50min。然后将所得高速上清液转移到新的微量离心管中。将九份上清液用1份0.5MTris-HCl(pH6.8)中和并用来定量总Aβ和Aβ42。

为了定量脑匀浆的可溶性部分中的总Aβ和Aβ42，使用了酶联免疫吸附测定。简言之，在Ultraculture公司的1.5ml微量离心管中制备标准品(合成的Aβ1-40以及Aβ1-42的稀释液，Bachem公司)，其中最终浓度范围从10000至0.3pg/ml。将样品和标准品与用于Aβ42检测的HRPO-标记的N末端抗体以及与用于总Aβ检测的生物素酰化的中间-结构域(mid-domain)抗体4G8共孵育。然后将50μl的结合物/样品或结合物/标准品混合物添加到抗体包被的板上(对于Aβ42检测，捕获抗体选择性地识别Aβ42的C末端，抗体JRF/cAβ42/26，对于总Aβ检测，捕获抗体选择性地识别Aβ的N末端，抗体JRF/rAβ/2)。允许该板在4℃孵育过夜以允许抗体-淀粉样蛋白复合物的形成。根据制造商的说明书(皮尔斯公司(PierceCorp.)，伊利诺伊州罗克福德市)，在这种孵育以及随后的洗涤步骤之后，通过添加Quanta Blu荧光过氧化物酶底物来完成用于Aβ42定量的ELISA。在10min至15min之后进行读数(在320nm处激发/在420nm处发射)。

针对总Aβ检测，根据制造商的说明书(皮尔斯公司，伊利诺伊州罗克福德市)，添加链霉亲和素-过氧化物酶-结合物，60min之后进行一个另外的洗涤步骤并且添加Quanta Blu荧光过氧化物酶底物。在10min至15min之后进行读数(在320nm处激发/在420nm处发射)。

在这个模型中，与未处理的动物相比，至少20％的Aβ42降低将是有利的。以下示例性的化合物如上所述被基本测试并且展现出以下活性：

表7：

n.t.意思是未测试；s.c.意思是皮下注射；p.o.意思是口服

Claims

1.一种具有化学式(I)的化合物

或其一种互变异构体或立体异构体形式，其中

R¹是C_1-3烷基；

R²是氢或氟；

L是一个键或–NHCO-；

或其药学上可接受的一种加成盐。

2.如权利要求1所述的化合物，其中R¹是甲基或乙基。

3.如权利要求2所述的化合物，其中Ar选自5-甲氧基-吡啶基、5-嘧啶基和5-氟吡嗪基。

4.如权利要求1所述的化合物，其中R²是氢或氟。

5.如权利要求1所述的化合物，其中被R¹取代的四级碳原子具有R-构型。

6.一种药物组合物，该药物组合物包含治疗有效量的如在权利要求1至5中任一项所定义的化合物和一种药学上可接受的载体。

7.一种用于制备如权利要求6中定义的药物组合物的方法，其特征在于将一种药学上可接受的载体与治疗有效量的如在权利要求1至5中任一项所定义的化合物进行密切混合。

8.如在权利要求1至5中任一项所定义的化合物，用于在阿尔茨海默病(AD)、轻度认知损害、衰老、痴呆、路易体痴呆、大脑淀粉样血管病、多发梗塞性痴呆、唐氏综合征、与中风相关的痴呆、与帕金森病相关的痴呆或与β-淀粉样蛋白相关的痴呆的治疗或预防中使用。

9.一种治疗受试者中选自下组的失调的方法，该组由以下各项组成：阿尔茨海默病、轻度认知损害、衰老、痴呆、路易体痴呆、大脑淀粉样血管病、多发梗塞性痴呆、唐氏综合征、与中风相关的痴呆、与帕金森病相关的痴呆以及与β-淀粉样蛋白相关的痴呆，该方法包括向有需要的受试者给予治疗有效量的如在权利要求1至5中任一项所定义的化合物或如在权利要求6中所定义的药物组合物。