CN103948577A - 化合物在制备用于治疗、减缓或处理骨癌疼痛的组成物的用途 - Google Patents

Abstract

本发明提供一种由环己烯酮化合物来制备用于治疗、预防、缓解(减缓)或处理骨癌疼痛的组成物的用途。

Description

化合物在制备用于治疗、减缓或处理骨癌疼痛的组成物的用途

本发明主张于2012年11月14日向美国专利局提出的美国专利第13/677,217号临时申请案的优先权，其中该申请所揭示的内容全部并入本发明参考。 

技术领域

本发明是关于一种化合物用于制备治疗、减缓及处理骨癌疼痛的化合物的用途。 

背景技术

在人体中，初期骨癌或骨转移癌症(例如来至胸部、前列腺及肺癌)会提高人类骨癌的疼痛，参考Luger et al.,Pain99:397-406(2002)。由于疼痛的间歇性、自然累积及因活动而产生的恶化，因而难以处理。疼痛模式中普遍的征状为机械性痛觉异常(mechanical allodynia)，而热痛觉过敏(thermal hyperalgesia)及机械性痛觉过敏(mechanical hyperalgesia)可由测量两下肢不同承受重量而进行检测(Medhurst et al.,2002)。对骨头疼痛治疗来说，尤其是骨癌疼痛，大部分病患限于使用类罂粟碱进行治疗，然而，类罂粟碱的疗效极小，且其有效剂量会产生使人衰弱的副作用。 

发明内容

在此，本发明一态样提供一种化合物用于治疗、降低或处理骨癌疼痛的组成物的用途，是将有效剂量的一化合物、一医药上可接受的盐类、其代谢物、其溶剂化物或其前趋药物投予至一主体，该化合物具有下列结构： 

其中，每一X及Y各自独立为氧、NR₅、或硫； 

R为氢、或C(=O)C₁-C₈烷基； 

每一R₁、R₂、及R₃各自独立为氢、甲基、或(CH₂)_m-CH₃； 

R₄为NR₅R₆、OR₅、OC(=O)R₇、C(=O)OR₅、C(=O)R₅、C(=O)NR₅R₆、卤素、5或6员环内酯、C₁-C₈烷基、C₂-C₈烯基、C₂-C₈炔基、芳基、或葡萄糖基，其中，5或6员环内酯、C₁-C₈烷基、C₂-C₈烯基、C₂-C₈炔基、芳基、及葡萄糖基是选择性的经一或以上选自由NR₅R₆、OR₅、OC(=O)R₇、C(=O)OR₅、C(=O)R₅、C(=O)NR₅R₆、C₁-C₈烷基、C₂-C₈烯基、C₂-C₈炔基、C₃-C₈环烷基、及C₁-C₈卤烷基的取代基所取代； 

每一R₅、及R₆各自独立为氢、或C₁-C₈烷基； 

R₇为C₁-C₈烷基、OR₅、或NR₅R₆； 

m为1-12；且 

n为1-12。 

本发明所提到的所有文献、专利、申请中专利的内容均并入本发明的内容以供参考，换言之，于本发明中所明确且分别提到的各个文献、专利、或申请中专利均并入本发明以供参酌。 

附图说明

本发明的新颖特征描述于权利要求中。由参考在下列详细说明的具体实施例，以更佳理解本发明的特征与优点，附图为： 

图1A-B显示在骨癌疼痛的模式中，显示化合物1对机械性痛觉异常(mechanical allodynia)的功效。数据表示为平均±s.e.平均。当与载体(ANOVA及Dunnett’s试验)比较时，^*P<0.05，^**P<0.01且<^***P<0.001。当与载体(Kruskall Wallis及Dunn’s试验)比较时，#P<0.05，##P<0.01且###P<0.001。当与载体(不成对的Student’s试验)比较时，^$P<0.05，^$$P<0.01且^$$$P<0.001。当与载体(Mann Whitney U-试验)比较时，P<0.001。 

图2A-B显示手术后每天服用两次化合物1对机械性痛觉异常(手术后第6天)的发展功效。数据表示为平均±s.e.平均。当与载体(Kruskall Wallis与Dunn’s试验)比较时，#P<0.05。当与载体(不成对的Student’s试验)比较时，^$P<0.05。 

图3A-B显示手术后每天服用两次化合物1对机械性痛觉异常(手术后 第12天)的发展功效。数据表示为平均±s.e.平均。当与载体(ANOVA与Dunnett’s试验)比较时，^**P<0.01且^***P<0.001。当与载体(不成对的Student’s试验)比较时，^$$P<0.01且^$$$P<0.001。 

图4A-B显示手术后每天服用两次化合物1对机械性痛觉异常(手术后第14天)的发展功效。数据表示为平均±s.e.平均。当与载体(Kruskall Wallis与Dunn’s试验)比较时，#P<0.05且###P<0.001。当与载体(不成对的Student’s试验)比较时，^$$$P<0.001。 

图5A-B显示手术后每天服用两次化合物1对机械性痛觉异常(手术后第19天)的发展功效。数据表示为平均±s.e.平均。当与载体(Kruskall Wallis与Dunn’s)比较时，#P<0.05、###P<0.01且###P<0.001。当与载体(不成对的Student’s试验)比较时，^$$$P<0.001。 

图6A-B显示手术后每天服用两次化合物1对机械性痛觉异常(手术后第21天)的发展功效。数据表示为平均±s.e.平均。当与载体(ANOVA与Dunnett’s试验)比较时，^*P<0.05,^***P<0.001。当与载体(Kruskall Wallis与试验)比较时，#P<0.05且###P<0.001。当与载体(不成对的Student’s试验)比较时，^$$$P<0.001。当与载体(Mann Whitney U-试验)比较时，P<0.001。 

具体实施方式

用于治疗病患的骨癌疼痛的药物大多限于类罂粟碱(opioids)，然而，类罂粟碱的功效极小，且其有效剂量会产生使人衰弱的副作用。在部分实施例中，本发明环己烯酮化合物系由天然物质萃取，且本发明的环己烯酮化合物能降低其并发症及/或副作用。部分实施例提供一种透过投予环己烯酮化合物至一主体(如：人类)，以治疗、预防、减缓(降低)或处理骨癌的方法，其中，此环己烯酮化合物对一受治疗主体具有治疗骨癌疼痛的功效(详见实施例1至3)。 

部分实施例提供一种将医疗上有效剂量的化合物、其医药上可接受的盐类、其代谢物、其溶剂化物、或其前趋药物投予至一主体，以治疗、预防、降低或处理骨癌疼痛的方法，该化合物的结构： 

其中，每一X及Y各自独立为氧、NR₅、或硫； 

R为氢、或C(=O)C₁-C₈烷基； 

每一R₁、R₂、及R₃各自独立为氢、甲基、或(CH₂)_m-CH₃； 

R₄为NR₅R₆、OR₅、OC(=O)R₇、C(=O)OR₅、C(=O)R₅、C(=O)NR₅R₆、卤素、5或6员环内酯、C₁-C₈烷基、C₂-C₈烯基、C₂-C₈炔基、芳基、或葡萄糖基，其中，5或6员环内酯、C₁-C₈烷基、C₂-C₈烯基、C₂-C₈炔基、芳基、及葡萄糖基是选择性的经一或以上选自由NR₅R₆、OR₅、OC(=O)R₇、C(=O)OR₅、C(=O)R₅、C(=O)NR₅R₆、C₁-C₈烷基、C₂-C₈烯基、C₂-C₈炔基、C₃-C₈环烷基、及C₁-C₈卤烷基的取代基所取代； 

每一R₅、及R₆各自独立为氢、或C₁-C₈烷基； 

R₇为C₁-C₈烷基、OR₅、或NR₅R₆； 

m为1-12；且 

n为1-12。 

硬骨(bone)为癌症转移的常见部位之一。任何型态的癌症皆能于硬骨中形成转移肿瘤，然而，骨髓的微环境则倾向于某些特殊形态的癌症，包括：前列腺癌、乳癌及肺癌，尤其前列腺癌更仅具癌症骨转移(bone metastases)的倾向。 

于部分实施例中，骨癌的疼痛是源自于骨内原发性肿瘤。于部分实施例中，骨癌的疼痛是源自于骨内瘤(osteosarcoma)。而于部分实施例中，骨癌的疼痛是源自于癌细胞转移至硬骨。于部分实施例中，骨癌的疼痛是源自于乳癌、前列腺癌、肺癌、肾脏癌(renal cancer)、肝癌、肾癌(kidney cancer)、膀胱癌、甲状腺癌、子宫颈癌、结肠癌或其他类似的癌细胞转移至硬骨。在特定实施例中，骨癌的疼痛是源自于前列腺癌转移至硬骨。于特定实施例中，骨癌的疼痛是源自于乳癌转移至硬骨。于特定实施例中，骨癌的疼痛是源自于肺癌转移至硬骨。于特地实施例中，骨癌疼痛源自于肾癌转移至硬骨。于特定实施例中，骨癌的疼痛是源自于食道癌或鼻咽癌转移至硬骨。于特定实施例中，骨癌的疼痛是源自于肉瘤转移至硬骨。请参考实施 例1-3。 

在部分实施例中，在此所提供的该环己烯酮化合物对机械性痛觉异常的发展上，也表现出显著的保护效果(详见实施例2)。 

部分实施例提供一种于治疗、预防、降低或处理机械性痛觉异的方法，包含将有效剂量的一化合物施予至一主体，其中该化合物的结构为： 

其中，每一X及Y各自独立为氧、NR₅、或硫； 

R为氢、或C(=O)C₁-C₈烷基； 

每一R₁、R₂、及R₃各自独立为氢、甲基、或(CH₂)_m-CH₃； 

R₄为NR₅R₆、OR₅、OC(=O)R₇、C(=O)OR₅、C(=O)R₅、C(=O)NR₅R₆、卤素、5或6员环内酯、C₁-C₈烷基、C₂-C₈烯基、C₂-C₈炔基、芳基、或葡萄糖基，其中，5或6员环内酯、C₁-C₈烷基、C₂-C₈烯基、C₂-C₈炔基、芳基、及葡萄糖基是选择性的经一或以上选自由NR₅R₆、OR₅、OC(=O)R₇、C(=O)OR₅、C(=O)R₅、C(=O)NR₅R₆、C₁-C₈烷基、C₂-C₈烯基、C₂-C₈炔基、C₃-C₈环烷基、及C₁-C₈卤烷基的取代基所取代； 

每一R₅、及R₆各自独立为氢、或C₁-C₈烷基； 

R₇为C₁-C₈烷基、OR₅、或NR₅R₆； 

m为1-12；且 

n为1-12。 

在部分实施例中，用于治疗、预防、减缓(降低)或处理骨癌疼痛或机械性痛觉异常的环己烯酮化合物具有 

的结构，该化合物可由任一种适当的起始材料经由合成或半合成的步骤加以制备。在其他实施例中，环己烯酮化合物可经由发酵或其相似方法制备，举例来说，化合物1(即公知的安卓奎诺尔(Antroquinonol^TM或「Antroq」)， 或部分情况下，化合物3可由4-羟基-2,3-二甲氧基-6-甲基环己-2,5-二烯酮(4-hydroxy-2,3-dimethoxy-6-methylcyclohexa-2,5-dienone)制备而获得，其中，该化合物的非限定例子如下所示。 

于其他实施例中，用于治疗、预防、减缓(降低)或处理骨癌疼痛或机械性痛觉异常的环己烯酮化合物具有 

的结构。于部分实施例中，有机溶剂是选自由醇类(如，甲醇、乙醇、丙醇、或其相似物)、酯类(如，乙酸甲酯、乙酸乙酯、或其相似物)、烷类(如，戊烷、己烷、庚烷、或其相似物)、卤烷类(如，氯甲烷、氯乙烷、氯仿、二氯甲烷、或其相似物)、及其相似物。举例来说，范例化合物1-7可从有机溶剂萃取物中分离而获得。于特定实施例中，有机溶剂系醇类，且于特定实施例中，此醇类为乙醇。于部分实施例中，环己烯酮化合物是牛樟芝(Antrodia camphorata)水萃取物分离而获得。 

于部分实施例中，R为氢、C(=O)C₃H₈、C(=O)C₂H₅、或C(=O)CH₃。于部分实施例中，R₁为氢、或甲基。于特定实施例中，R₂为氢、甲基、乙基、丙基、丁基、戊基、或己基。于部分实施例中，R₃为氢、甲基、乙基、丙基、丁基、戊基、或己基。于部分实施例中，R₄为卤素、NH₂、NHCH₃、N(CH₃)₂、OCH₃、OC₂H₅、C(=O)CH₃、C(=O)C₂H₅、C(=O)OCH₃、C(=O)OC₂H₅、C(=O)NHCH₃、C(=O)NHC₂H₅、C(=O)NH₂、OC(=O)CH₃、OC(=O)C₂H₅、OC(=O)OCH₃、OC(=O)OC₂H₅、OC(=O)NHCH₃、OC(=O)NHC₂H₅、或OC(=O)NH₂。于部分实施例中，R₄为C₂H₅C(CH₃)₂OH、C₂H₅C(CH₃)₂OCH₃、CH₂COOH、C₂H₅COOH、CH₂OH、C₂H₅OH、CH₂Ph、C₂H₅Ph、CH₂CH=C(CH₃)(CHO)、CH₂CH=C(CH₃)(C(=O)CH₃)、5或6员环内酯、C₂-C₈烯基、C₂-C₈炔基、芳基、或葡萄糖基，其中，5或6员环内酯、C₂-C₈烯基、C₂-C₈炔基、芳基、及葡萄糖基是选择性的由一或以上选自由NR₅R₆、OR₅、OC(=O)R₇、C(=O)OR₅、C(=O)R₅、C(=O)NR₅R₆、C₁-C₈烷基、C₂-C₈烯基、C₂-C₈炔基、C₃-C₈环烷基、及C₁-C₈卤烷基的取代基所取代。于特定实施例中，R₄为CH₂CH=C(CH₃)₂。于特定实施例中，此化合物为 

特定医疗及医药用语 

除非特别注明，否则本发明包括说明书及权利要求所使用的词汇，均如下所定义。需了解的是，除非内容明确指出，否则本发明的说明书及权利要求中所指的「一」及「该」的单数型态亦同时包含复数的意思。除非另有所指，否则皆可使用任何公知方法，包括质谱仪、NMR、HPLC、蛋白质化学技术、生化技术、重组DNA技术及药理技术。再者，于本说明中，除非另有所指，否则本发明所使用的「或」或「以及」意指「及/或」。除此之外，「包括」以及其他的「包含」及「含有」等表达方式亦无特别限定。本发明的各段落标题仅为编排的目的，并不限制本发明的标的。 

「烷基」基团是指脂肪族烃基。烷基可为饱和烷基基(意指不含有任一碳-碳双键或碳-碳三键)，或可为不饱和烷基(意指含有至少一碳-碳双键或碳-碳三键)。无论是饱和或不饱和的烷基，均可为支链或直链。 

「烷基」基团可具有1至12个碳原子(即便本发明未定义「烷基」的碳数范围，但无论如何，如「1至12」的范围是表示此范围中的每一个整数；例如，「1至12个碳原子」是指烷基可包含1个碳原子、2个碳原子、3个碳原子等，且最多由12个碳原子所组成)。本发明化合物的烷基可为「C₁-C₈烷基」或其他相似的定义方式。例如(仅用以说明)，「C₁-C₈烷基」是指烷基链上包含有一、二、三、四、五、六、七、或八个碳原子。此外，于烷基的一实施态样中，其是选自由甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基(sec-butyl)、及叔丁基(t-butyl)所组成的群组。一般的烷基基团包括，但不限于：甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、新戊基、己基、烯丙基、2-丁烯基、3-丁烯基、环丙基甲基、环丁基甲基、环戊基甲基、环己基甲基、及其相似基团。于一实施态样中，烷基为C₁-C₈烷基。 

「亚烷基」一词是指二价烷基自由基(divalent alkyl radical)。上述的任一单价烷基基团均可由从烷基移除一第二氢原子而形成一亚烷基团。于一实施态样中，亚烷基为C₁-C₁₂亚烷基。于另一实施态样中，亚烷基为C₁-C₈亚烷基。一般的亚烷基基团包括，但不限于：-CH₂-、-CH(CH₃)-、-C(CH₃)₂-、-CH₂CH₂-、-CH₂CH(CH₃)-、-CH₂C(CH₃)₂-、-CH₂CH₂CH₂-、-CH₂CH₂CH₂CH₂-、及其相似的基团。 

于本发明中，「芳基」是指一芳香环，其中形成芳香环的各原子为碳 原子。芳香环可由五、六、七、八、九、或超过九个碳原子所形成。此外，芳香环可选择性的被取代。于一实施态样中，芳基为苯基或萘基。于一实施态样中，芳基为苯基。于一实施态样中，芳基为C₆-C₁₀芳基。依据结构的不同，芳基团可为一单自由基或一双自由基(即，亚芳基)。此外，于一实施态样中，亚芳基为C₆-C₁₀亚芳基。亚芳基的例子包括：1,2-亚苯基(phenyl-1,2-ene)、1,3-亚苯基(phenyl-1,3-ene)、及1,4-亚苯基(phenyl-1,4-ene)，但不限于此。 

「芳香环」一词是指具有非定域π电子系统的平面环，其中非定域π电子系统是包括4n+2个π电子，且n为一整数。芳香环可由五、六、七、八、九、十、或超过十个原子所组成。此外，芳香环可选择性的被取代。「芳香环」一词包括：碳环芳基(「芳基」，如：苯基)、及杂环芳基(或「杂芳基」或「杂芳族基团」)基团(如：砒啶基)。此外，「芳香环」亦包括单环或稠多环(fused-ring polycyclic)(即，共享相邻碳原子对的环)基团。 

「卤」、「卤素」、或「卤化物」是指氟、氯、溴、或碘。 

「环内酯」是指环酯类，其为同一分子中醇基-OH与羧基-COOH的缩合产物。环内酯的特征在于其为一由两个或以上个碳原子与一个氧原子所组成的封闭环，且在相邻于氧的碳原子上具有一酮基团=O。 

「杂环」是指环中具有一至四个杂原子的杂芳香环(即，杂芳基)及杂环烷基团，其中环中的每一杂原子是选自由O、S及N，且环系中的每一杂环基团具有4至10个原子，但任一环并不含有两相邻的O或S原子。非芳香族杂环基团(即，杂环烷基团)仅于其环系中包括3个原子的基团，但芳香族杂环基团则需于其环系中具有至少5个原子。杂环基团包括苯并稠和环系(benzo fused ring system)。3员杂环基团的例子为氮丙啶基(aziridinyl)。4员杂环基团的例子为氮杂环丁烷基(azetidinyl)。5员杂环基团的例子为噻唑基(thiazolyl)。6员杂环基团的例子为吡啶基(pyridyl)，而10员杂环基团的例子为喹啉基(quinolinyl)。非芳香族杂环基团例子包括：吡咯烷基(pyrrolidinyl)、四氢呋喃基(tetrahydrofuranyl)、二氢呋喃基(dihydrofuranyl)、四氢噻吩乙基(tetrahydrothienyl)、恶唑烷酮基(oxazolidinonyl)、四氢吡喃基(tetrahydropyranyl)、二氢吡喃基(dihydropyranyl)、四氢噻喃基(tetrahydrothiopyranyl)、哌啶基(piperidinyl)、 吗啉基(morpholinyl)、硫代吗啉基(thiomorpholinyl)、噻恶烷基(thioxanyl)、哌嗪基(piperazinyl)、氮丙啶基(aziridinyl)、氮杂环丁烷基(azetidinyl)、乙氧甲基酸基(oxetanyl)、硫化三亚甲基(thietanyl)、高哌啶基(homopiperidinyl)、恶庚因基(oxepanyl)、硫杂丁环基(thiepanyl)、氧杂吖庚因基(oxazepinyl)、二吖庚因基(diazepinyl)、硫杂吖庚因基(thiazepinyl)、1,2,3,6-四氢吡啶基(1,2,3,6-tetrahydropyridinyl)、2-吡咯啉基(pyrrolin-2-yl)、3-吡咯啉基(pyrrolin-3-yl)、二氢吲哚基(indolinyl)、2H-吡喃基(2H-pyranyl)、4H-吡喃基(4H-pyranyl)、二恶烷基(dioxanyl)、1,3-二氧戊环基(1,3-dioxolanyl)、吡唑啉基(pyrazolinyl)、二噻烷基(dithianyl)、二硫戊环基(dithiolanyl)、二氢吡喃基(dihydropyranyl)、二氢噻吩基(dihydrothienyl)、二氢呋喃基(dihydrofuranyl)、吡唑烷基(pyrazolidinyl)、咪唑啉基(imidazolinyl)、咪唑烷基(imidazolidinyl)、3-氮杂双环[3.l.0]己烷基(3-azabicyclo[3.l.0]hexanyl)、3-氮杂双环[4.1.0]庚烷基(3-azabicyclo[4.1.0]heptanyl)、3H-吲哚基(3H-indolyl)、以及喹嗪基(quinolizinyl)。芳香族杂环基团例子包括：吡啶基(pyridinyl)、咪唑基(imidazolyl)、嘧啶基(pyrimidinyl)、吡唑基(pyrazolyl)、噻唑基(triazolyl)、吡嗪基(pyrazinyl)、四唑基(tetrazolyl)、呋喃基(furyl)、噻吩基(thienyl)、异恶唑基(isoxazolyl)、噻唑基(thiazolyl)、唑基(oxazolyl)、异噻唑基(isothiazolyl)、吡咯基(pyrrolyl)、喹啉基(quinolinyl)、异喹啉基(isoquinolinyl)、吲哚基(indolyl)、苯并咪唑基(benzimidazolyl)、苯并呋喃基(benzofuranyl)、噌嗪基(cinnolinyl)、吲唑基(indazolyl)、吲哚嗪(indolizinyl)、酞嗪基(phthalazinyl)、哒嗪基(pyridazinyl)、三嗪基(triazinyl)、异氮茚基(isoindolyl)、蝶啶基(pteridinyl)、嘌呤基(purinyl)、恶二唑基(oxadiazolyl)、噻二唑基(thiadiazolyl)、呋吖基(furazanyl)、苯并呋吖基(benzofurazanyl)、苯并噻吩基(benzothiophenyl)、苯并噻唑基(benzothiazolyl)、苯并恶唑基(benzoxazolyl)、喹唑啉基(quinazolinyl)、喹喔啉基(quinoxalinyl)、萘啶基(naphthyridinyl)、及呋喃并吡啶基(furopyridinyl)。如有可能，前述基团可能以C-连接或以N-连接。例如，衍生于吡咯的基团可为吡咯-1-基(N-连接)、或吡咯-3-基(C-连接)。再者，衍生于咪唑的基团可为咪唑-1-基或咪唑-3-基(皆为N-连接)，或咪唑-2-基、咪唑-4-基或咪唑-5-基(皆为C-连接)。杂环基团包括苯并稠和环系。非芳香族杂环则可经 一个或两个氧基团(=O)所取代，如吡咯啉-2-酮(pyrrolidin-2-one)。 

于本发明中，「烯基」是指直链、支链、或环状烃基(亦称的为「环烯基」)，其中，环状烃基是含有2-10个碳且由移除两个氢所而包含至少一个碳-碳双键。于部分实施例中，依据结构不同，烯基可为单自由基或双自由基(即，亚烯基)基团。于部分实施例中，烯基可经选择性的取代。烯基的例子可包括：乙烯基、2-丙烯基、2-甲基-2-丙烯基、3-丁烯基、4-戊烯基、5-己烯基、2-庚烯基、2-甲基-1-庚烯基、及3-癸烯基(3-cecenyl)，但不限于此。 

于本发明中，「炔基」是指直链、支链、或环状烃基(亦称的为「环炔基」)，其中，环状烃基是含有2-10个碳且藉由移除四个氢而包含至少一个碳-碳双键。于部分实施例中，依据结构不同，炔基可为单自由基或双自由基(即，亚炔基)。于部分实施例中，炔基是经选择性的取代。炔基的例子可包括：乙炔、丙炔、丁炔、戊炔、己炔、庚炔、及其他相似基团，但不限于此。 

于本发明中，「烷氧基」是指将本发明所定义的烷基基团加上一氧原子所形成的分子基团。烷氧基的例子包括：甲氧基、乙氧基、丙氧基、2-丙氧基、丁氧基、叔丁氧基、戊氧基、及己氧基，但不限于此。 

于本发明中，「环烷基」是指单环或多环自由基，其仅含有碳及氢原子，且可包含饱和、部分未饱和、或完全未饱和的环烷基。环烷基包含3至10个环状原子的基团。环烷基的代表例子包括如下，但不限于下列基团： 

于部分实施例中，依据结构不同，环烷基基团是单自由基或双自由基(即，亚环烷基)基团。 

于本发明中，「卤烷基」、「卤烯基」、「卤炔基」、及「卤烷氧基」是指烷基、烯基、炔基、及烷氧基中的氢原子被至少一个卤原子所取代。于特定实施例中，当两个或以上个氢原子被卤原子所取代时，该些卤原子可彼此相同。于其他实施例中，当两个或以上个氢原子被卤原子所取代时，该些卤原子非彼此相同。此外，「氟烷基」及「氟烷氧基」是指分别代表将卤烷基及卤烷氧基基团中的卤原子以氟原子取代。于特定实施例中，卤氧基可经选择性的被取代。 

于本发明中，「葡萄糖基」包括D-或L-型葡萄糖基团，其中葡萄糖基基团是通过葡萄糖环上的任一羟基基团而连接。 

「可接受」一词是指本发明的药剂、组成物、或活性成分不会对治疗主体的日常生活健康造成持续有害反应。 

牛樟芝系属薄孔菌科(Meripilaceae)的真菌类。牛樟芝子实体一般呈扁平状或由生长表面向外生长，且子实层系朝向外；此外，其边缘可能会略为翘起，而呈现小括号状。大多数的牛樟芝物种均生长在北部温带林中，且会造成树木的褐腐病(brown rot)。此外，此种真菌中的部分特殊物种更具有疗效，而在中国台湾常作为中药药材之一。 

于本发明中，「载体」一词是指相对无毒的化合物或化学试剂，其可帮助将一化合物送至细胞或组织中。 

于本发明中，「共投予」一词包括投予所选择的治疗药剂至一患者，且还包括将药剂进行相同或不同投药方式、或进行相同或不同投药时间的治疗方法。 

「稀释剂」一词是指在投药之前，用以将所使用的化合物稀释的化合物。稀释剂因可提供一更加稳定的环境，故亦可用以稳定化合物。本技术领域常用的盐类缓冲溶液(其可用以控制或维持pH值)亦可作为稀释剂，其包括磷酸盐缓冲溶液，但不限于此。 

于本发明中，「有效剂量」或「治疗上有效剂量」一词意指一投予足够剂量的试剂或化合物，以于某种程度上减轻所治疗疾病或症状的一种或以上的病症。由此，可减缓及/或缓和疾病的症候、病症、或病因，或可依需求对生理系统造成任何其他的改变。例如，治疗上使用的「有效剂量」是指对疾病病症可提供临床上显著改善所需的组成物剂量，其中组成物包含本发明所揭示的化合物。此外，于不同个别情况下，适当的「有效」剂量需依照如剂量递增试验的方法来决定。 

于本发明中，「增进」或「增强」一词是指增加或延长预定功效的效力或持续时间。因此，对治疗药剂的增强效果而言，「增进」或「增强」一词是指无论对效力或持续时间可达到增加或延长的特性，或者是对一系统中的其他治疗药剂可达到增加或延长的效果。本发明所使用的「增进有效剂量」，是指一足够增加系统中另外治疗药剂效果的足够剂量。 

于本发明中，「代谢物」一词是指化合物经代谢后所形成的化合物衍生物。「活性代谢物」一词是指化合物经代谢后所形成的生理上具有活性的化合物衍生物。此外，于本发明中，「代谢」一词是指一特定成分经一有机体改变的所有过程(其包括，但不限于：水解反应及酵素催化反应)。因此，酵素可对一化合物做特殊的结构改变。例如，细胞色素P450可催化多种氧化及还原反应，而尿苷二磷酸葡萄糖醛酸基转移酶(uridine diphosphate glucuronyltransferase)则可催化将活性葡萄醛酸(glucuronic acid)分子转移至芳香醇、脂肪醇、羧酸、胺及巯基(sulphydryl)自由基团上。于本发明中，化合物的代谢物亦选择性的可透过：将化合物投予一宿主并分析该宿主的组织样品、或将化合物与肝脏细胞体外培养并分析所得的化合物等方式来判定。 

于本发明中，「医药组合物(pharmaceuticalcombination)」一词意指混合或组合一种以上的活性成分，且包含活性成分的固定及非固定组合物。在此，「固定组合物」一词意指将活性成分，例如：一化合物(即本发明的环己烯酮化合物)及一助剂，以单一药体或剂量同时投予至一患者。「非固定组合物(非固定配方)」一词意指将活性成分，例如：一化合物(即本发明的环己烯酮化合物)及一助剂，以分开剂型同时、共同、或无特定时间间隔限制地依序投予至一患者，其中，此投药方式可将两有效剂量的化合物提供 给患者。此外，非固定组合物亦可应用鸡尾酒疗法，如：投予三种或以上的活性成分。 

「医药组成物(pharmaceuticalcomposition)」一词是指一化合物(即本发明所述的环己烯酮化合物)与其他化学成分的混合物，其他化学成分如载体、稳定剂、稀释剂、分散剂、悬浮剂、增稠剂、及/或赋形剂。医药组成物可帮助化合物投予至一生物。本发明所属技术领域已知的多种投予化合物的技术包括：静脉注射、口服、喷雾投药、肠道外投药(非消化道投药)、经眼部投药、肺部投药(吸入投药)、及外用投药等，但不限于此。 

此外，「主体」或「患者」一词包括哺乳动物；而哺乳动物的例子不限于哺乳纲的任何物种，包括：人类、如猩猩及其他猿及猴物种等非人灵长类；农场动物，如牛、马、羊、山羊、猪；家畜，如兔子、狗、及猫；包括啮齿目动物的实验用动物，如大鼠、小鼠、天竺鼠、及其他相似动物。于一实施例中，哺乳动物为人类。 

于本发明中，「治疗」一词包括：通过预防及/或治疗以缓和、减轻或改善疾病或症状的至少一病症；预防其他病症；抑制疾病或症状(如，防止疾病或症状产生)；缓和疾病或症状，使疾病或症状复原；缓和疾病或症状所导致的症状；或抑止疾病或症状的病症。 

投药途径 

本发明所适用的投药途径包括：经口服、静脉注射、肠道、喷雾式、肠道外、眼部、肺部、黏膜、皮肤表面、阴道、耳部、鼻腔、及外用投药等方式。此外，肠道外投药的例子包括：肌肉内、皮下、静脉内、脊髓内注射，且亦包括脑脊髓膜内、直接腹腔内、腹膜内、淋巴内、鼻腔内注射，但不限于此。 

于特定实施例中，本发明所述的化合物通常可制备成储存剂型或持续释放剂型，且通过局部方式而非系统性方式投药，例如，将化合物直接注射至脏器。于特定实施例中，可通过植入方式(如皮下或肌肉内)或肌肉内注射等方式，以投予长效剂型的药物。再者，于其他实施例中，药物可由标靶药物传递系统(例如，包覆有器官专一性抗体的微脂体)进行投药。于此实施例中，微脂体可针对一器官且被此器官选择性的吸收。于其他实施例中，本发明所述的化合物可制备成快速释放剂型、缓慢释放剂型、或立 即释放剂型。于其他实施例中，本发明所述的化合物可以外用方式投药。 

于某些实施例中，环己烯酮化合物、或其医药上可接受的盐类、其代谢物、其溶剂化物、或其前趋药物是以肠道外或静脉内方式投药。于其他实施例中，环己烯酮化合物、或其医药上可接受的盐类、其代谢物、其溶剂化物、或其前趋药物是以注射方式投药。于部分实施例中，环己烯酮化合物、或其医药上可接受的盐类、其代谢物、其溶剂化物、或其前趋药物是以口服方式投药。 

医药组成物/剂型 

部分实施例提供一种医药组成物、或其医药上可接受的盐类、其代谢物、其溶剂化物、或其前趋药物的用途；以及一医药可接受的赋形剂，其中，该医药组成物包含有效剂量的一环己烯酮化合物，且该环己烯酮化合物具有下列的结构： 

其中，每一X及Y各自独立为氧、NR₅、或硫； 

R为氢、或C(=O)C₁-C₈烷基； 

每一R₁、R₂、及R₃各自独立为氢、甲基、或(CH₂)_m-CH₃； 

R₄为NR₅R₆、OR₅、OC(=O)R₇、C(=O)OR₅、C(=O)R₅、C(=O)NR₅R₆、卤素、5或6员环内酯、C₁-C₈烷基、C₂-C₈烯基、C₂-C₈炔基、芳基、或葡萄糖基，其中，5或6员环内酯、C₁-C₈烷基、C₂-C₈烯基、C₂-C₈炔基、芳基、及葡萄糖基是选择性的经一或以上选自由NR₅R₆、OR₅、OC(=O)R₇、C(=O)OR₅、C(=O)R₅、C(=O)NR₅R₆、C₁-C₈烷基、C₂-C₈烯基、C₂-C₈炔基、C₃-C₈环烷基、及C₁-C₈卤烷基的取代基所取代； 

每一R₅、及R₆各自独立为氢、或C₁-C₈烷基； 

R₇为C₁-C₈烷基、OR₅、或NR₅R₆； 

m为1-12；以及 

n为1-12。 

于部分实施例中，本发明所述的化合物可制备成一医药组成物。于特定实施例中，医药组成物可使用一或以上种生理可接受的载体，并以公知 方式制备，其中该生理上可接受的载体包括赋形剂及辅剂，其可帮助活性化合物的加工制备工艺，以制作出医药上可用的药剂。适当的剂型可依照投药路径而做选择。任何医药上可接受的技术、载体、及赋形剂均可适用于制备本发明的医药组成物：Remington:The Science and Practice of Pharmacy,Nineteenth Ed(Easton,Pa.:Mack Publishing Company,1995)；Hoover,John E.,Remington’s Pharmaceutical Sciences,Mack Publishing Co.,Easton,Pennsylvania 1975；Liberman,H.A.and Lachman,L.,Eds.,Pharmaceutical Dosage Forms,Marcel Decker,New York,N.Y.,1980；以及Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems,Seventh Ed.(Lippincott Williams&Wilkinsl999)。 

本发明提供一种医药组成物，其包括一化合物(即本发明的环己烯酮化合物)及一医药上可接受的稀释剂、赋形剂、或载体。于特定实施例中，所述的化合物可以混合一化合物(即，本发明所述的环己烯酮化合物)及其他活性成分的医药组成物，以合并治疗方法。本发明包括所有本发明说明书中有关合并治疗法段落中所述的活性成分的组合物。于特定实施例中，医药组成物系包括一或以上种化合物(即，本发明的环己烯酮化合物)。 

本发明的医药组成物是指一化合物(即，本发明所述的环己烯酮化合物)与其他化合物的混合物，其他化合物例如：载体、稳定剂、稀释剂、分散剂、悬浮剂、增稠剂、及/或赋形剂。于特定实施例中，医药组成物可有助于将化合物投予至一生物体。于部分实施例中，本发明的治疗方法或用途，是将治疗上有效剂量的化合物(即，本发明所述的环己烯酮化合物)以一医药组成物方式投药至具有疾病或症状的一治疗主体。于特定实施例中，哺乳动物为人类。于特定实施例中，治疗上有效剂量依照疾病严重程度、主体年龄及健康程度、化合物效力及其他因素而改变。此外，本发明所述的化合物可单独使用，或是可与一或以上的治疗剂(可作为混合物的成分)合并使用。 

于一实施例中，化合物(即，本发明所述的环己烯酮化合物)制备成水溶液形式。于特定实施例中(仅说明用途)，水溶液的例子可选自由生理上相容的缓冲液(如汉克氏溶液(Hank’s solution)、林格氏溶液(Ringer’s solution)、或生理食盐水。于其他实施例中，化合物(即，本发明所述的环 己烯酮化合物)可制备成黏膜方式投药的剂型。于特定实施例中，黏膜投药剂型包括可适当渗透黏膜屏障的渗透剂。于另其他实施例中，本发明的化合物制备成其他肠道外注射的剂型，且适当的剂型包括水性或非水性溶液。于特定实施例中，这类溶液包括生理上相容的缓冲液及/或赋形剂。 

于另一实施例中，本发明所述的化合物可制备成口服剂型。在此所述的化合物(即本发明的环己烯酮化合物)系包含将活性成分与例如像医药可接受的载体或赋形剂结合，以形成制剂。于不同的实施例中，本发明所述的化合物可制备成口服剂型，其例子包括锭剂、粉末、药片、药丸、胶囊、药水、凝胶、含药糖浆、酏剂、药浆、悬浮剂、及相似剂型。 

于特定实施例中，口服剂型的制备可将一种或以上固态赋形剂与一种或以上本发明所述的化合物混合，并选择性的研磨所形成的混合物，若需要可再添加适当辅剂后，再加工粉末混合物以制得锭剂或药丸。特别是，适当的赋形剂为：填充剂，如包含乳糖、蔗糖、甘露糖醇、或山梨糖醇的糖类；纤维素，如玉蜀黍淀粉、小麦淀粉、米淀粉、马铃薯淀粉、明胶、橡胶树胶、甲基纤维素、微晶纤维素、羟丙基甲基纤维素、羧甲基纤维素钠；或其他如聚乙烯吡咯烷酮(PVP或聚维酮)或磷酸钙。于特定实施例中，可选择性的添加崩解剂。为说明用途，该崩解剂的例子可包括：交联甲羧纤维素钠(Croscarmellose sodium)、聚乙烯吡咯烷酮、琼脂、或海藻酸或其盐类(如海藻酸钠)。 

于一实施例中，如药丸及锭剂的药剂可具有一层或以上的适当包覆层。于特定实施例中，浓缩糖类溶液是用以包覆药剂。选择性可添加的糖类溶液例如为：阿拉伯胶、滑石、聚乙烯吡咯烷酮、卡伯波凝胶(carbopol gel)、聚乙二醇、及/或二氧化钛；包覆溶液；以及适当有机溶剂或溶剂混合物，而此些例子仅用以说明。染料及/或色素亦可选择性的添加至包覆层中，用以辨识用途。此外，染料及/或色素亦可选择性使用，用以标示不同活性化合物药剂的组合物。 

于特定实施例中，本发明所述的至少一化合物的治疗上有效剂量系可制备成口服剂型以外的形式。口服剂型包含由明胶所制成的推入套合式胶囊(push-fitcapsule)，以及由明胶及塑化剂(如甘油或山梨糖醇)所制成的软且密封的胶囊。于特定实施例中，推入套合式胶囊包含与一种或以上填充 剂混合的活性成分。填充剂的例子可包括：乳糖、如淀粉的黏着剂、及/或如滑石或硬脂酸镁的润滑剂，并可选择性的包括稳定剂，然而该些例子仅用以说明。于其他实施例中，软胶囊包括一种或以上溶解或悬浮在适当液体中的活性化合物。适当液体的例子包括：一种或以上脂肪油、液态石腊、或液态聚乙二醇，而此些例子仅用以说明。此外，可选择性的添加稳定剂。 

于其他实施例中，本发明所述的至少一化合物的治疗上有效剂量系可制备成口颊投药剂型或舌下投药剂型的形式。口颊或舌下投药的适用剂型例子，包括锭剂、药片、或凝胶，而此些例子仅用以说明。于再其他实施例中，本发明所述的化合物可制备成肠道外注射剂型，其包括适用于大剂量注射(bolusinjection)或持续灌注的剂型。于特定实施例中，注射剂型为单位剂量形式(如，安瓶形式)、或多剂量包装，此外，可选择性的于注射剂型中添加防腐剂。于再其他实施例中，化合物(即本发明所述的环己烯酮化合物)的医药组成物系溶于油性或水性媒介物中，而制备成无菌悬浮液、溶液、或乳化剂等适合用于肠道外注射的剂型。肠道外注射剂型可选择性的包括如悬浮剂、稳定剂、及/或分散剂等配方剂。于特定实施例中，肠道外投药的医药剂型包括水溶性形式的活性化合物水溶液。于其他实施例中，活性化合物的悬浮液制备成适当的油性注射悬浮液。用于本发明的医药组成物中的适当油溶溶剂或媒介的例子，可包括如芝麻油的脂肪油、或如油酸乙酯(ethyleleate)或三酸甘油酯(triglyceride)的合成脂肪酸酯、或微脂体，而此些例子仅用以说明。于特定实施例中，水性注射悬浮液包含可增加悬浮液黏度的物质，如羧甲基纤维素钠、山梨糖醇、或葡聚糖。此外，悬浮液可选择性的包括适当的稳定剂或试剂，以提升化合物的溶解度，而用以制备高浓缩溶液。另一方面，于其他实施例中，活性成分可制成粉末形式，而可在使用前与适当媒介(如无菌无热原水(sterile pyrogen-free water))混合。 

于一实施态样中，化合物(即本发明所述的环己烯酮化合物)是以本发明所述的方法或本技术领域已知的方法制备成肠道外注射的溶液，且可利用一自动注射器投药。自动注射剂如美国专利第4,031,893号、第5,358,489号、第5,540,664号、第5,665,071号、第5,695,472号、及W0/2005/087297 中所揭示，且上述每一篇专利所揭示的内容均并入本发明以供参考。一般而言，所有的自动注射器包含一待注射体积的溶液，此溶液包含一化合物(即，本发明所述的环己烯酮化合物)。此外，自动注射器包括：一用以容置溶液的储存空间，此储存空间流体连通至一针头以进行给药；以及自动插入针头机构，其是将针头插至一患者上以将药剂传送至患者体内。例如，注射器可提供约0.3mL、0.6mL、1.0mL、或其他适合体积的溶液，且每1mL溶液中含有浓度约为0.5mg至50mg的化合物(即，本发明所述的环己烯酮化合物)。此外，每一注射器可仅传送一剂量的化合物。 

于再其他实施例中，化合物(即本发明所述的环己烯酮化合物)可外用投药。在此，本发明所述的化合物可制备成各种可外用投药的组成物，如溶液、悬浮液、乳剂、凝胶、药浆、药棒、药膏、乳膏、软膏等。此外，这类的医药组成物可选择性的含有增溶剂、稳定剂、张力增强剂(tonicity enhancing agent)、缓冲剂、或防腐剂。 

于更一实施例中，化合物(即本发明所述的环己烯酮化合物)可由皮肤吸收方式投药。于特定实施例中，皮肤吸收剂型可为皮肤投药装置或皮肤投药贴片，且可为油溶性乳化剂、或溶解及/或分散在聚合物或黏着剂中的缓冲水性溶液。于各种实施例中，这类的贴片是用以持续性、间隔性、或依需求进行投药。于其他实施例中，化合物(即本发明所述的环己烯酮化合物)的皮肤吸收方式投药，可采用离子电渗透贴片(iontophoretic patch)及其相似贴片。于特定实施例中，皮肤吸收贴片可控制传送一化合物(即，本发明所述的环己烯酮化合物)。于特定实施例中，可由速率控制薄膜、或将化合物局限在一聚合物基质或胶体中，而达成减缓吸收速率。于另一实施例中，亦可使用吸收促进剂以帮助吸收。吸收促进剂或载体可包括可吸收医药上可接受的溶剂，其可帮助化合物穿过皮肤。例如，于一实施例中，皮肤投药装置为一绷带形式，其包括：一背薄膜；一用以容置化合物并选择性容置载体的储存空间；一选择性速率控制屏障，以依一控制且预定速率于长时间内传送药物至主体的皮肤上；以及一安全组件，以确保装置对皮肤的安全性。 

本发明所述的皮肤吸收剂型可使用本技术领域已知的各种装置进行投药。装置的例子可包括，但不限于美国专利第3,598,122号、第3,598,123 号、第3,710,795号、第3,731,683号、第3,742,951号、第3,814,097号、第3,921,636号、第3,972,995号、第3,993,072号、第3,993,073号、第3,996,934号、第4,031,894号、第4,060,084号、第4,069,307号、第4,077,407号、第4,201,211号、第4,230,105号、第4,292,299号、第4,292,303号、第5,334,168号、第5,665,378号、第5,837,280号、第5,869,090号、第6,923,983号、第6,929,801号、及第6,946,144号中所述的装置。 

本发明所述的皮肤吸收药剂形式可包含本技术领域已知的特定医药上可接受的赋形剂。于一实施例中，本发明所述的皮肤吸收剂型包括至少三种成分：(1)化合物药剂(即本发明所述的环己烯酮化合物)；(2)吸收促进剂；以及(3)水性佐剂。此外，皮肤吸收剂型可包括其他成分，例如：胶凝剂、乳霜或药膏基质、及其相似成分，但不限于此。于部分实施例中，皮肤吸收剂型更包括一织布或不织布底垫材料，以帮助吸收并防止皮肤吸收剂型从皮肤上脱离。于其他实施例中，本发明所述的皮肤吸收剂型系维持在饱和或过度饱和状态，以帮助药剂其扩散至皮肤中。 

于其他实施例中，化合物(即本发明所述的环己烯酮化合物)可制备成吸入式方式投药。各种适合用于吸入式投药的剂型包括，但不限于喷雾、水气或粉末形式。化合物(即本发明所述的环己烯酮化合物)的医药组成物一般系由加压装置或喷雾器，并搭配使用一适当的推进剂(如，二氯二氟甲烷、三氯一氟甲烷、二氯四氟乙烷、二氧化碳、或其他适合气体)，而形成雾状喷雾形式以进行投药。于特定实施例中，加压喷雾的单位剂量是通过阀决定，以传送计量供给的剂量。于特定实施例中，吸入器或吹药器中使用的明胶胶囊及储存药包(仅用以举例用)可制备成含有一化合物及适当粉末基质(如乳糖或淀粉)的粉末混合物。 

鼻腔内投药剂型为本技术领域已知的剂型，且如美国专利公开第4,476,116号、第5,116,817号、及第6,391,452号中所述，且每一专利可并入本发明以供参考。根据上述方法或其他本技术领域已知方法制备的药剂，可制备成生理食盐水的溶液，其中，此药剂包括一化合物(即，本发明所述的环己烯酮化合物)，且此溶液可包含本技术领域已知的苯甲醇或其他适合的防腐剂、氟碳化合物、及/或其他增溶剂或分散剂。例如，可参考Ansel,H.C.et al.Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery System, Sixth Ed.(1995)。较佳为，此些组成物及药剂可与适当的无毒医药上可接受的成分一同制备。此些成分可参考本技术中常用的参考数据，如REMINGTON:THE SCIENCE AND PRACTICE PHARMACY,21^st edition,2005。此外，载体可根据所需求的鼻腔内药剂剂型特性做适当的选择，如：溶液、悬浮液、药膏、或凝胶等。鼻腔内投药剂型一般含有大量的水以及活性成分。此外，亦可包含少量其他成分，如pH调整剂、乳化剂或分散剂、防腐剂、界面活性剂、凝胶剂、或缓冲剂及其他稳定剂与增溶剂。较佳为，鼻腔内投药剂型为与鼻内分泌物具有等渗透压。 

当以吸入式方式投药时，本发明所述的化合物可制备成喷雾、水气或粉末。本发明所述的医药组成物一般由加压装置或喷雾器，并搭配使用一适当的推进剂(如，二氯二氟甲烷、三氯一氟甲烷、二氯四氟乙烷、二氧化碳、或其他适合气体)，而形成雾状喷雾形式以进行投药。于加压喷雾的例子中，单位剂量是通过阀决定，以传送计量供给的剂量。此外，吸入器或吹药器中使用的明胶胶囊及储存药包(仅用以举例用)可制备成含有本发明的化合物及适当粉末基质(如乳糖或淀粉)的粉末混合物。 

于再其他实施例中，化合物(即，本发明所述的环己烯酮化合物)可制备成直肠用组成物，如灌肠剂、直肠凝胶、直肠泡沫剂、直肠喷雾剂、栓剂、胶体栓剂、或留置灌肠剂，其包含公知栓剂基质(如可可油或其他甘油酯)、以及合成聚合物(如聚乙烯吡咯烷酮、PEG及其相似物)。此外，于组成物的栓剂剂型中，可将可可油选择性的与低熔点蜡(例如脂肪酸甘油酯混合物，但不限于此)使用，且低熔点蜡会先融化。 

于特定实施例中，医药组成物是与一或以上生理上可接受的载体，通过任何公知方式制备，其中，生理上可接受的载体包括赋形剂及辅剂，其可帮助活性化合物的加工并适用于医药上。此外，可依照所选择的投药路径来选择适当的剂形。若适用且符合本技术领域已知的知识，可选择性的使用任何医药上可接受的技术、载体、及赋形剂。包含化合物(即，本发明所述的环己烯酮化合物)的医药组成物可以公知的方法制备，例如(仅用以举例用)习知的混合、溶解、研磨、药丸制作、粉末化、乳化、制成胶囊、包覆或压锭等工艺。 

医药组成物可包括：至少一医药上可接受的载体、稀释剂或赋形剂； 以及至少一本发明所述的化合物(即本发明所述的环己烯酮化合物)，此化合物是作为一活性成分。活性成分是呈现游离酸或游离碱形式，或为医药上可接受的盐类形式。此外，本发明所述的方法及医药组成物包括晶体型态(即多晶型物)，亦包括此些化合物的具有相同活性的活性代谢物。本发明所述的化合物的互变异构体亦并入本发明所述化合物的范围中。此外，本发明所述的化合物亦可包含非溶剂形式、以及溶剂形式，其中溶剂形式是使用医药上可接受的溶剂，如水、乙醇、及相似溶剂。于本发明中，化合物的溶剂形式亦并入本发明所揭示的范围中。此外，医药组成物可选择性的包括其他药物或药剂、载体、佐剂(如保存剂、稳定剂、加湿剂、或乳化剂)、溶液促进剂、用以调整渗透压的盐类、缓冲液、及/或其他治疗上有效的物质。 

于本发明中，包含本发明化合物的组成物的制备方法包括：将化合物与一种或以上种低活性且医药上可接受的赋形剂或载体一同配制，而制备成固态、半固态或液态的形式。固态组成物包括：粉末、锭剂、分散颗粒、胶囊、及栓剂，但不限于此。液态组成物包括：溶有化合物的溶液；含有化合物的乳液；或含有微脂体、胶质粒子、或纳米粒子的溶液，其中微脂体、胶质粒子、或纳米粒子内包覆有本发明所述的化合物。半固态组成物包括：凝胶、悬浮液、或乳霜，但不限于此。本发明所述的医药组成物的型态可包括：液体溶液或悬浮液、可于使用前于液体中形成溶液或悬浮液的固态形式、或者是乳液。这些组成物亦可选择性的含有少量无毒的辅剂，如加湿剂或乳化剂、pH缓冲剂等辅剂。 

于部分实施例中，本发明所述的包含至少一化合物(即本发明所述的环己烯酮化合物)的医药组成物，其为一液态形式，其中药剂存在于溶液中、悬浮液中、或两者中。一般而言，当组成物以溶液或悬浮液的方式投药时，药剂的第一部分为溶液形式，而药剂的第二部分则具有特殊形式，如于液态基质中的悬浮液。于部分实施例中，液态组成物包括凝胶剂型。于其他实施例中，液态组成物为水溶液形式。 

于特定实施例中，医药水性悬浮液包括一种或以上的聚合物，以作为悬浮剂。聚合物可包括如纤维素聚合物的水溶性聚合物(如：羟丙基甲基纤维素)、以及如交联含羧基聚合物的非水溶性聚合物。本发明所述的特定医 药组成物包括黏膜粘附聚合物(mucoadhesive polymer)，其可选自由如：羧甲基纤维素、卡波姆(carbomer)(丙烯酸聚合物)、聚(甲基丙烯酸甲酯)、聚丙烯胺、聚卡波非(polycarbophil)、丙烯酸/丙烯酸丁酯共聚物、海藻酸钠(sodiumalginate)、及葡聚糖。 

医药组成物亦可选择性的包含增溶剂，以帮助化合物(即，本发明所述的环己烯酮化合物)的溶解度。「增溶剂」一般是指包括：一可用以形成胶束溶液(micellar solution)的试剂、或一可形成溶液的试剂。此外，如聚山梨醇酯80(polysorbate 80)的特定非离子界面活性剂亦可来作为增溶剂，且增溶剂亦可为眼部可接受的二醇、聚二醇(如，聚乙二醇400)、及二醇醚。 

再者，医药组成物可选择性的包括一或以上pH调整剂或缓冲剂。其中，pH调整剂或缓冲剂包括：如乙酸、硼酸、柠檬酸、乳酸、磷酸、及氢氯酸等酸类；如氢氧化钠、磷酸钠、硼酸钠、柠檬酸钠、醋酸钠、乳酸钠、及三-羟基甲基氨基甲烷(tris-hydroxymethylaminomethane)等碱类；以及如柠檬酸酯/葡萄糖(dextrose)、碳酸氢钠、及氯化铵等缓冲物质。这类的酸、碱、及缓冲物质的含量，为一可维持组成物pH值在可接受范围的含量。 

此外，医药组成物可选择性的包括一或以上盐类，此盐类所需的量是用以将组成物的渗透压维持在一可接受范围的含量。可使用的盐类包括：钠、钾、或铵根的阳离子；以及氯、柠檬酸根、抗坏血酸根(ascorbate)、硼酸根、磷酸根、碳酸氢根(bicarbonate)、硫酸根、硫代硫酸根、或亚硫酸根的阴离子。此外，适当的盐类例子包括：氯化钠、氯化钾、硫代硫酸钠、亚硫酸钠、及硫酸铵。 

其他医药组成物可选择性的包括一或以上种防腐剂，以抑制细菌活性。适当的防腐剂包括：如硼酸苯汞(merfen)及硫柳汞(thiomersal)的含汞物质；稳定的二氧化氯(chlorine dioxide)；及如苯扎氯铵(benzalkonium chloride)、十六烷基三甲基溴化铵(cetyltrimethylammonium bromide)、及氯化十六烷吡啶(cetylpyridinium chloride)的四级胺化合物。 

于其他医药组成物中，可包括一或以上界面活性剂，以增强物理稳定性或其他特定。适合的非离子界面活性剂包括：聚氧乙烯脂肪酸甘油酯(polyoxyethylene fatty acid glyceride)及植物油，如：聚氧乙烯(60)氢化蓖麻 油；以及聚氧乙烯烷基醚(polyoxyethylene alkylethers)及烷基苯基醚，如辛基酚聚醚10(octoxynol10)、辛基酚聚醚40。 

于再其他医药组成物中，可包含一或以上种抗氧化剂，以增加所需的化学稳定性。适合的抗氧化剂包括(仅用于示例)：抗坏血酸及偏亚硫酸氢钠(sodiummetabisulfite)。 

于特定实施例中，医药水性悬浮液组成物是包装成单一剂量，且可包装在不可重复开启的容器中。此外，亦可使用多剂量可重复开启的容器，在此，组成物中一般会包含防腐剂。 

于另一实施例中，亦可使用用于疏水性医药化合物的投药系统。例如，本发明可利用微脂体及乳化剂作为投药的媒介或载体。于特定实施例中，可使用如N-甲基吡咯烷酮的有机溶剂。于另外实施例中，本发明所述的化合物可由持续释放系统进行投药，如含有治疗药剂的固态疏水聚合物的半渗透基质。此外，各种持续释放材料亦可用于本发明中。于部分实施例中，持续释放胶囊可于数小时，甚至超过24小时释放化合物。随着治疗药剂的化学特性及生物稳定性的不同，可额外使用蛋白质稳定的技术。 

于特定实施例中，本发明所述的药剂可包括一或以上抗氧化剂、金属螯合剂、含硫醇化合物、及/或其他一般常用的稳定剂。这类稳定剂的例子包括，但不限于：(a)约0.5%至约2%w/v的甘油、(b)约0.1%至约1%w/v的蛋胺酸(methionine)、(c)约0.1%至约2%w/v的单硫代甘油(monothioglycerol)、(d)约1mM至约10mM的EDTA、(e)约0.01%至约2%w/v的抗坏血酸、(f)0.003%至约0.02%w/v的聚山梨酸酯80(polysorbate 80)、(g)0.001%至约0.05%w/v的聚山梨酸酯20、(h)精胺酸(arginine)、(i)肝素(heparin)、(j)硫酸葡聚糖(dextran sulfate)、(k)环糊精(cyclodextin)、(l)戌聚糖聚硫酸酯(pentosan polysulfate)及其他类肝素(heparinoid)、(m)如镁离子及锌离子的二价阳离子；或(n)其混合物。 

合并治疗法 

一般而言，当使用合并疗法时，因化合物不同的物理及化学特性，本发明的组成物及其他药剂并不以同一医药组成物进行投药，且于部分实施例中是以不同投药路径进行投药。于部分实施例中，最初药剂剂型是依照预定方法给药，而后依照所观察到的现象，医护人员可改变剂量、投药方 法及投药时间。 

于部分实施例中，当药物进行合并治疗时，可改变有效治疗剂量。此外，合并治疗还包括起始与结束间多次给药的间隔治疗，以此有助于患者临床治疗处理。于本发明所述的合并治疗法中，共投予化合物剂量可依照所使用的复合药物形式、所使用的特定药物、疾病、不适情况、或所治疗的病症等而加以改变。 

应了解的是，于部分实施例中，为了达到舒缓而用以治疗、预防或改善症状的药物治疗，可依照各种不同因素而改变，而这些因素包括：患者主体所感染的疾病，以及患者主体的年龄、体重、性别、饮食、及用药情形。因此，于其他实施例中，药物治疗实际变化很大，也因此本发明所述的药物治疗方式也会有所改变。 

与其他活性剂组合的可减缓或降低疼痛的化合物(即，本发明所述的环己烯酮化合物)亦可涵盖于此。 

在部分实施例中，治疗、预防(降低风险)、减缓(降低)、或处理骨癌疼痛的方法还包含：将治疗上或疾病预防上有效剂量的至少一第二活性剂投予病患。在部分实施例中，第二活性剂可减缓或减少疼痛。在部分实施例中，疼痛减缓或降低剂的例子包含但不限于下述：抗抑郁剂(antidepressant)、抗高血压(antihypertensive)、抗不安(anxiolytic)、钙通道阻滞剂(calcium channel blocker)、肌肉松弛剂(musclerelaxant)、非麻醉药品止痛剂(non-narcoticanalgesic)、抗发炎剂(anti-inflammatoryagent)、cox-2抑制剂(cox-2inhibitor)、α肾上腺素受体促进剂(alpha-adrenergic receptor agonist)、α肾上腺素受体促进剂、K他命(ketamine)、麻醉药、免疫调节剂(immunomodulatoryagent)、免疫抑制剂(immunosuppressiveagent)、皮质类固醇(corticosteroid)、高压氧剂(hyperbaric oxygen)、抗痉挛(anticonvulsant)及其组合物或其相似物。 

在部分实施例中，活性剂为柳酸乙酯、希乐葆(celecoxib)、K他命、镇顽癫(gabapentin)、卡马西平(carbamazepine)、奥卡西平(oxcarbazepine)、苯妥英(phenytoin)、丙戊酸钠(sodiumvalproate)、波尼松(prednisone)、尼非待平(nifedipine)、氯压定(clonidine)、氧可酮(oxycodone)、派替啶(meperidine)、吗啡硫酸盐(morphine sulfate)、氢吗啡酮(hydromorphone)、 芬酞尼(fentanyl)、对乙酰氨基酚(acetaminophen)、布洛芬(ibuprofen)、奈普生钠(naproxen sodium)灰黄霉素(griseofulvin)、安米替林(amitriptyline)、丙咪嗪(imipramine)、多塞平(doxepin)及其组合物等。 

在部分实施例中，环己烯酮化合物及疼痛缓和或降低剂的组合物包含与其他药剂的其他的疗法及治疗方法。在部分实施例中，其他治疗方法及治疗处方可包括其他疼痛缓和或降低剂疗法。或者，于其他实施例中，在使用合并治疗时，其他治疗方法及治疗方案包括用以治疗与癌症有关的相关症状的其他药剂、或该药剂的副作用。于再一实施例中，辅剂或增效剂亦可与在此所使用的合并疗法一同使用。其他疼痛缓和或降低治疗法包含物理治疗法、针灸治疗法、非药物学草本治疗法、或其他治疗法，这些治疗法能够缓和或减低病患的骨癌疼痛。 

实施例1：环己烯酮化合物的制备 

将100克的牛樟芝菌丝体、子实体或二者的混合物，置入三角锥形瓶中，加入适当比例的水与醇类(70%～100%乙醇水溶液)，于20～25℃下搅拌至少1小时以上。接着，以滤器及0.45μm滤膜过滤，收集萃取物。 

将前述收集的牛樟芝萃取液，利用高效能液相层析仪(High Performance Liquid chromatography,HPLC)，以RP18的层析管(column)进行分析，并以甲醇(A)及0.3%醋酸水溶液(B)做为移动相(mobilephase)(其溶液梯度系：0-10分钟，B比例为95%-20%；10-20分钟，B比例为20%-10%；20-35分钟，B比例为10%-10%；35-40分钟，B比例为10%-95%)，在每分钟1ml的速度下冲提，同时以紫外-可见光全波长侦测器分析管柱冲提液。将21.2分钟至21.4分钟的冲提液收集浓缩即可得一淡黄色液体产物(化合物5)。经分析后，化合物5即为4-羟基-5-(11-羟基-3,7,11-三甲基-2,6-十二碳二烯)-2,3-二甲氧基-6-甲基-2-环己烯酮(4-hydroxy-5-(11-hydroxy-3,7,11-trimethyldodeca-2,6-dieny1)-2,3-dimethoxy-6-methylcyclohex-2-enone))，其分子量为408，分子式为C₂₄H₄₀O₅。¹H-NMR(CDCl₃)δ(ppm):1.21,1.36,1.67,1.71,1.75,1.94,2.03,2.07,2.22,2.25,3.68,4.05,5.71,5.56¹³C-NMR(CDCl₃)δ(pprn):12.31,16.1,16.12,17.67,25.67,26.44,26.74,27.00,30.10,40.27,43.34,59.22,60.59,71.8,120.97,123.84,124.30,131.32,134.61,135.92,138.05,160.45,197.11 

化合物5：4-羟基-5-(11-羟基-3,7,11-三甲基-2,6-十二碳二烯)-2,3-二甲氧基-6-甲基-2-环己烯酮。 

将23.7分钟至24.0分钟的冲提液收集浓缩即可得一淡黄色液体产物(化合物7)。经分析后，化合物7即为4-羟基-2,3-二甲氧基-5-(11-甲氧基-3,7,11-三甲基-2,6-十二碳二烯)-6-甲基-2-环己烯酮(4-hydroxy-2,3-dimethoxy-5-(11-methoxy-3,7,11-trimethyldodeca-2,6-dienyl)-6-methylcyclohex-2-enone)，其分子量为422，分子式为C₂₅H₄₂O₅。¹H-NMR(CDCl₃)δ(ppm):1.21,1.36,1.71,1.75,1.94,2.03,2.07,2.22,2.25,3.24,3.68,4.05,5.12,5.50,5.61；¹³C-NMR(CDCl₃)δ(pprn):12.31,16.1,16.12,17.67,24.44,26.44,26.74,27.00,37.81,39.81,40.27,43.34,49.00,59.22,60.59,120.97,123.84,124.30,135.92,138.05,160.45,197.12 

化合物7：4-羟基-2,3-二甲氧基-5-(11-甲氧基-3,7,11-三甲基-2,6-十二碳二烯)-6-甲基-2-环己烯酮。 

将25分钟至30分钟的冲提液收集浓缩即可得一淡黄棕色液体产物，此即4-羟基-2,3-二甲氧基-6-甲基-5-(3,7,11-三甲基-2,6,10-十二碳三烯)-2-环己烯酮(4-hydroxy-2,3-dimethoxy-6-methy-5-(3,7,11-trimethyldodeca-2,6,10-trienyl)cyclohex-2-enone)(化合物1)。经分析后，化合物1分子式为C₂₄H₃₈O₄，分子量为390，熔点为48至52℃。 

¹H-NMR(CDCl₃)δ(ppm):1.51,1.67,1.71,1.75,1.94,2.03,2.07,2.22,2.25,3.68,4.05,5.07,5.14 

¹³C-NMR(CDCl₃)δ(pprn):12.31,16.1,16.12,17.67,25.67,26.44,26.74, 27.00,39.71,39.81,40.27,43.34,59.22,60.59,120.97,123.84,124.30,131.32,135.35,135.92,138.05,160.45,197.12 

化合物1：4-羟基-2,3-二甲氧基-6-甲基-5-(3,7,11-三甲基-2,6,10-十二碳三烯)-2-环己烯酮。 

经动物实验，将老鼠喂食化合物1所得的尿液样品，即为化合物1的代谢物(化合物6)。化合物6为4-羟基-2,3-二甲氧基-6-甲基-5-(3-甲基-2-己烯酸)-2-环己烯酮(4-hydroxy-2,3-dimethoxy-6-methyl-5-(3-methyl-2-hexenoicacid)cyclohex-2-enone)，其分子量为312，分子式为C₁₆H₂₄O₆。此外，将化合物1置于40℃下6小时，则可得到化合物4，即3,4-二羟基-2-甲氧基-6-甲基-5-(3,7,11-三甲基-2,6,10-十二碳三烯)-2-环己烯酮(3,4-dihydroxy-2-methoxy-6-methyl-5-(3,7,11-trimethyldodeca-2,6,10-trieny1)cyclohex-2-enone)，其分子量为376，分子式为C₂₃H₃₆O₄。 

此外，示例化合物亦可由4-羟基-2,3-二甲氧基-6-甲基-2,5-环己烯酮(4-hydroxy-2,3-dimethoxy-6-methyl-cyclohexa-2,5-dienone)或其相似化合物所制备而得。 

同样地，其他具有 

结构的环己烯酮化合物亦可从牛樟芝中分离而获得，或使用适当起始材料，通过合成或半合成的方式制得。本领域技术人员可选择适当的条件以进行化合物的合成。 

实施例2：化合物1在骨癌疼痛的老鼠模式的效果 

本发明的目的为在骨癌疼痛的动物模式，评估剂量为15、30及45mg/kg的化合物1对抗疼痛及抗致癌的功效。由注射Walker256老鼠乳腺癌细胞至右胫骨的髓腔，以模拟癌细胞转移至骨头(Mao-Yinga,et al.由Walker256老鼠乳腺癌细胞的内部胫骨接种所引发的骨癌疼痛的老鼠模式。Biochem Biophys Res Commun2006;345:1292-1298)。机械性痛觉异常的发展可通过建构行为测试(Von Frey试验)来进行监控。从手术日起，长期投药治疗，且于21天中，每天投药两次，以确定其对机械性痛觉异常的发展是否有具有预防效果。在此以唑莱磷酸(Zoledronic acid)作为参考物。非法规式试验方针可应用于本发明中。 

试验物及材料 

将该试验及参考物储存于常温下。 

试验物：化合物1 

用于试验物的载体：玉米油(批次号码058K0070；保存期限2014年3月18日；亮黄色至黄绿色液体；Sigma，英国) 

参考物：唑莱磷酸(批次号码；保存期限2013年1月30日；清澈液体；从Lyndsay&Gilmour的指示药；由Novartis制造) 

物种选择、投药途径与剂量等级 

以老鼠作为研究骨癌疼痛模式。化合物1与载体的投药途径为口服。化合物1的剂量为15、30及45mg/kg，每天投药两次(间隔约10小时)，为期21天。 

根据纪录的数据，从手术日起每隔一天，单一次以30μg/kg的唑莱磷酸的剂量投药，且通过皮下途径进行投药。 

动物 

任意地分配每一动物一个独一识别号码，该号码显示在数据表与笼卡(cage card)上。由防水尾状标记(waterproof tail mark)来辨识动物。 

物种：老鼠 

种：Sprague-Dawley 

性别：雌性 

动物数目：分配60只动物进行研究；其余5只动物返回储存 

年纪范围：9至12周(根据平均体重) 

重量范围：181至233克(于手术日) 

适应：投药后3天，开始行为测试之前 

来源：Harlan UK Ltd 

研究位置、居住与环境 

动物最初饲养于动物房中的仓库(stock room)，直到搬移至操作室(procedureroom)。将至多5群动物饲养在铺有锯木屑的笼子中，在适应期间，以规律的时间打扫饲养室及笼子以维持卫生。由荧光灯来照射该室，设定12小时亮-暗循环(在7点打开，19点关闭)，如在Home Office Animals(Scientific Procedures)Act1986的建议。饲养室装设有空调并测量气温与相对湿度。在适应期间，维持室温(19℃至20℃)且湿度程度为36%至43%的范围之间。在研究期间，维持温度(20℃至21℃)且湿度程度在27%至50%之间。 

饮食与水 

任意提供啮齿动物食物RM1(E)SQC(Special Diets Services,Witham,UK)足够的饮食及饮用水，每批饮食皆附有分析证明书(C of A)，该分析证明书详细地记载营养组成物与污染物等级(例如，重金属、黄曲毒素及杀虫剂)。饮用水的杂质与污染物定期由The City of Edinburgh Council Analytical and Scientific Services分析，且饲料成分及饮用水的可接受标准亦个别落在饲料制造商及饮水分析服务所提供的分析说明书中。 

健康状况 

当动物送达时先进行研究前检查，以确定所有的动物须健康并适用于研究。 

测试物及参考物的制备 

在玉米油中溶解该化合物1萃取物，以制备浓度为3、6及9mg/mL的测试物化合物1。未使用校正因子。使用前，将该化合物储存于约4℃且需避免光，并且该化合物需在制备的8天以内使用。 

以唑莱磷酸(Zoledronic acid)作为适于注射的预先配置溶液。利用0.9%w/v氯化钠稀释已知浓度的唑莱磷酸原液，以形成最终浓度30μg/mL。在此未使用校正因子。所制备的溶液储存于冷冻中、避免光照，且于制备后 8天内使用。 

取得测试物的分析证明书(C of A)与材质安全数据表。 

群组大小、剂量与数值字确认(identification numbers) 

共5个治疗群组，每一群组至多12只老鼠。每一治疗群组赋予一字母(A至E)。在手术日时，于服用药物前，任意将该老鼠分配至治疗群组中： 

测试物与载体治疗的剂量为5mL/kg，化合物1的载体为玉米油。连续21天，每天以口服剂量的测试物及载体强迫喂食每只老鼠各两次(约早上8点和晚上6点)。参考物治疗的剂量为1mL/kg，其中须喂食参考物的老鼠，从手术起每两天一次进行单一剂量的皮下注射(约早上8点)。 

盲治疗 

由保密给药方式，以使观察者无法察觉治疗群组的特性。由于给药方式的不同，因此不可能使进行给药的实验者完全不知道给药物质为参考物，就此，该配方保密为E。 

体重 

在手术前先称动物体重，并且于每日一次的投药前先记录体重。 

每日观察 

从手术后第0天起，每天对所有动物进行观察，并对动物的影响肢体进行特殊照顾。 

实验流程 

细胞制备。以体外继代培养(sub-confluent culture)获得Walker 256老鼠乳腺癌细胞(从American Type Culture Collection(ATCC)获得)，并确认存活的细胞数。接着，将细胞悬浮在无菌的磷酸盐缓冲液(PBS)中，使其浓度为4x10⁵个细胞。将6μL的4x10⁵Walker 256老鼠乳腺癌细胞注射于雌性Sprague-Dawley老鼠的右腿，详述于下述的手术过程中。 

适应性。在行为试验之前，将动物进行例行性处理，并使其适应行为测试的环境。 

基础行为试验(baseline behavioural testing)。在行为测试之前，将老鼠移到操作室5天。接着操作室中饲养老鼠、给药并观察。在手术之前，将所有老鼠分为2组进行行为观察，以建立基础值(baseline values)。于测试最后一天(第二天)取得手术前基础值(测试第一天的数据仅归为适应性的一部份，并不包含在该值)。 

机械性痛觉异常(脚底触觉敏感度测试(Von Frey test))：将每一动物放置于铁丝笼中，并将一系列的VonFrey细丝施用于后脚掌的脚底面上。将细丝以施力渐升(开始以最弱的力)的方式，以评估左、右后掌的足反射阀值。将每一细丝皆压在脚的中脚底表面上，直至脚开始弯曲，以约1Hz的频率，每一细丝重复进行上述步骤约8至10次。该足反射阀值系定义以VonFrey细丝持续两次或多次诱发反射反应的最小力量(即短暂的脚掌轻弹)。 

手术过程。手术准备动物超过两天，将每一只老鼠以含有1%至3%的氧气的异氟烷中进行麻醉，沿着伤口位置的表面将毛发去除并消毒，并在无菌的条件下，于右胫骨顶部所覆盖的皮肤上形成一道伤口，以使胫骨头暴露在最小的伤害下。在膝盖关节正下方使用针将胫骨刺穿；将针移除并以与10μL微注射器连接的针进行置换，随后将癌细胞(于6μL PBS下为4x10⁵)注射入右骨髓肿瘤胫骨凹处。该注射器保留在适当的地方约2分钟，以避免癌细胞从注射位置渗出，并以骨蜡密封注射位置。使用适当的结构材料使交迭的肌肉与皮肤愈合，并终止麻醉。将麻醉复原的老鼠重新放回笼中与其他老鼠(cage-mates)饲养，全夜于柔软且填装有填料的饲具上，以减少被感染的风险，随后在兽医床(vetbed)上约一星期，接着移至锯木屑饲具直到完全复原。在行为测试重新开始之前，该动物需复原5天。 

给药与行为测试。本发明的动物未禁食。在手术之前(第0天)进行测试物投药，连续投药21天(参考物则系每间隔两天)直至手术后第21天。于每日给药时，每一动物施予口服剂量的测试物或载体(约早上8点与晚上6点)，或者皮下注射单剂量的参考物(在适当日约早上8点)。在手术后第6、12、14、19及21天，以Von Frey试验评估每一只老鼠的右与左脚的 机械性痛觉异常，以检视治疗效果。 

结果与组织收集。将未分组的动物放回治疗群组饲养。在给药期间，有3只动物(老鼠20、25及32)给药剂量错误，有2只动物因体弱与压抑情况(老鼠6与13)而试验终止，有1只动物因于注射处长出大肿瘤而由研究中排除。 

将分组动物以高浓度二氧化碳进行安乐死。为了研究维持于行为测试研究的最后一天的状态，故收集每一动物的右胫骨，将组织固定并储放于10%福尔马林中。将样品除去钙质、脱水并埋在石蜡中，再以切片机(microtome)进行切片及以苏木精素(haematoxylin)与伊红染料来染色。接着请负责研究员对收集的骨头进行组织学分析，以测试每一治疗组的骨头破坏程度、及发炎细胞渗透情形。 

统计分析 

在分析之前，先将Von Frey数据进行对数转换(log¹⁰(力(g)x10000))。以参数化或非参数化的统计方式，于治疗组之间进行统计比较。基于该比较群组是否满足各种条件下的同构型，以选择参数化或非参数化试验(以Levene Mean试验评估)。除了从第21天是以Mann-Whitney U测试来分析左掌(以F-测试评估)的数据之外，以非成对学生氏t-测试来分析该参考物的数据。当P<0.05时，则代表具有显著性。 

结果 

群组足反射阀值(withdrawal threshold)的平均±s.e.平均数据记载于表1与表2及图1至6中。 

表1为化合物1对骨癌疼痛的老鼠模式的机械性痛觉异常(克数据)的功效 

数据表示为平均±s.e.平均。 

载体为玉米油。 

每一群组的动物数目n=12，除了跨号内另述者外。 

统计分析是以对数转换数据表示。 

表2为化合物1对具骨癌疼痛的老鼠模式的机械性痛觉异常(对数数据)功效 

数据表示为平均±s.e.平均。 

载体为玉米油。 

每一群组的动物数目n=12，除了跨号另述者之外。 

当与载体(ANOVA及Dunnett’s测试)比较时，^*P<0.05、^**P<0.01及^***P<0.001。 

当与载体(Kruskall Wallis及Dunn’s测试)比较时，#P<0.05、##P<0.01及###P<0.001。 

当与载体(为成对学生氏t-测试)比较时，^$P<0.05、^$$P<0.01及 ^$$$P<0.001。 

当与载体(Mann Whitney U-测试)比较时，

机械性痛觉异常的发展 

利用已建立的行为测试(即Von Frey细丝)观察于右脚内胫骨注射有Walker256细胞的机械性痛觉异常发展。于载体控制组中证实，Von Frey细丝对右掌的敏感性于手术后第6天时显著增加，此结果显示肿瘤的发展以及生理变化与癌症骨转移相关。于研究过程中亦发现左掌对Von Frey细丝的敏感性亦显著增加，此结果显示「镜像疼痛(mirror image pain)」的现象。然而，关于此现象的背后机制原因不明，但认为是一种重要反应(centrally acting)。 

化合物1对机械性痛觉异常的发展功效 

以30及45mg/kg的剂量每天口服两次化合物1(自手术日起)，于最早于手术后第6天时可产生有明显的保护功效。于第12天时，相较于载体控制组，所有化合物1治疗群组的左、右掌对Von Frey细丝明显具有较低的敏感性，且此现象随着研究持续进行而延续。于手术后第21天时，相较于载体组的实验数据(3.24±0.47g)，口服15mg/kg(7.82±1.43g；P<0.05；ANOVA及Dunnett’s试验)、30mg/kg(8.15±1.43g；P<0.05；ANOVA及Dunnett’s试验)及45mg/kg(19.06±2.17g;P<0.001;ANOVA及Dunnett’s试验)剂量的化合物1，其右掌足反射阀值呈现明显具有较低的敏感性。同样的，于手术后第21天时，相较于载体组实验数据(6.99±0.50g)，口服15mg/kg(13.74±2.42g；P<0.05;Kruskal Wallis及Dunn’s test)、30mg/kg(11.40±0.81g；P<0.05；Kruskal Wallis及Dunn’s试验)及45mg/kg(20.12±1.67g；P<0.001；Kruskal Wallis and Dunn’s试验)剂量的化合物1，其左后脚掌足反射阀值则呈现明显较小的敏感性。由上述数据 结果了解，于低剂量中观察，以两倍以上的高剂量进行治疗的群组，其足反射阀值对化合物1剂量依赖性(dose-dependent)成正比的现象。第21天高剂量治疗组的足反射阀值，其双足掌的敏感性呈现逆转的现象，且与手术前的基础值相似。 

唑莱磷酸对机械性痛觉异常的发展效果 

以30μg/kg剂量的唑莱磷酸(自手术起每隔一天)进行皮下注射，最早于手术后第6天(左脚掌)时，即具有明显的保护功效。于第12天时，相较于载体群组，由对照组动物的足反射阀值显示，其左与右掌对Von Frey细线的敏感性显著降低，且此现象随研究进行而持续。于手术后第21天时，相较于载体群组数据(3.24±0.47g)，右后掌的足反射阀值明显增加(13.25±2.28g；P<0.001；未成对，学生氏t-测试)，且当与载体群组数据比较时(6.99±0.50g)，其左后脚掌的足反射阀值明显增加(15.46±2.06g；P<0.001；Mann Whitney U-测试)。上述该些数据与文献记载相符。 

结论 

对于此模式建构的机械性痛觉异常而言，口服剂量为15、30及45mg/kg(自手术日起每天两次，共21天)的化合物1可具有明显地预防效果。随着载体控制组的异常疼痛发展，于手术后第6天时即可观察到功效，且于研究过程中显著增加。由于受影响的对侧后肢系藉由化合物1的治疗而受保护，因此，研究的时间历程中，以高剂量化合物1治疗的群组，其足反射阀值与手术前基础值相符，此结果显示，此剂量对于肿瘤形成的预防及后续形成的机械性痛觉异常具有高治疗效果。上述数据结果显示化合物1能有效避免临床的骨癌疼痛。 

以30μg/kg剂量的唑莱磷酸进行皮下注射(自手术日起每隔一天)，最早于手术后第6天(左掌)时，即具有明显的保护效果。于第12天时，相较于载体群组，对照动物的足反射阀值显示其左、右掌对Von Frey细丝的敏感性大幅降低，且此现象随研究进行而持续。此结果与双磷酸盐化合物(用于骨癌治疗)的唑莱磷酸的已知药理特性相符。 

实施例3：化合物1在骨癌移转相关疼痛的治疗效果 

本研究将对前列腺癌病患，通过每隔两天以50mg化合物1进行静脉注射，以评估化合物1对骨转移癌症相关疼痛的治疗功效及安全性。 

研究型态：介入性试验 

研究设计： 

药物配置：非随机 

指标分类(Endpoint Classification)：安全及药效分析 

侵入模式：单一群组分配 

设盲(masking)：开放性(open label) 

主要目的：治疗 

主要结果量测 

在治疗结束时，以五等级分数(TOTPAR=全部疼痛缓和(TOTal PAin Relief))来测量病患的疼痛缓和强度。[时间轴：12周或16周(治疗结束)] 

次要结果量测 

以PAR在每一访问测量病患疼痛缓和的强度。[时间轴：在12周至16周每3或4周][指定为安全问题：是] 

以VAS评估在V1、V2、V3、V4、V5之间的疼痛变化。[时间轴：在12至16周期间，每3或4周][指定为安全问题：是] 

以BPI(简易疼痛量表(Brief Pain Inventor))评估疼痛变化并以VAS(视觉仿真评分(Visual Analog Scale))比对[时间轴：在12至16周期间，每3或4周][指定为安全问题：是] 

在V1与V5间，评估止痛剂的使用(止痛级数(analgesic score))以及需止痛放射治疗的病患数[时间轴：在12至16周期间，每3或4周][指定为安全问题：是] 

评估过程的反应[时间轴：在12至16周(治疗结束)][指定为安全问题：是] 

经由病患来评估骨骼相关项目数量[时间轴：在12至16周期间，每3或4周][指定为安全问题：是] 

在V1及V5之间，评估功能残疾、专业活动(BPI)、PS及总体条件(VAS)的结果[时间轴：在12至16周期间，每3或4周][指定为安全问题：是] 

评估在V1与研究结束之间的PSA(前列腺特异性抗原(Prostate specific Antigen)变化、或过早的(premature)反射[时间轴：在12至16周期间(治疗结束)，每3或4周][指定为安全问题：是] 

资格 

用于研究的年龄资格：18岁且更大(60至100人)；用于研究的性别资格：男性；接受健康的自愿者：不是。 

条件 

包括条件 

·组织证实为前列腺癌 

·骨扫描纪录转移 

·年纪>18岁 

·在试验之前，至少4周开始非控制性的骨癌疼痛损坏系统抗肿瘤疗法(贺尔蒙或化学疗法) 

·预期寿命>3个月 

·书面的知情通知 

除外条件 

·新系统抗肿瘤疗法开始于进入研究的少于4周前或预测需进行新治疗的8周以内 

·在进入研究的少于4周前，完成在骨头靶病变(bone target lesion)的辐射疗法或骨靶向同位素疗法(bone-targeted isotope therapy)(锶或钐) 

·在进入研究的8周前，进行双磷酸盐疗法 

·异常肾功能(血清肌酸酐>2×正常上限或肌酸酐清除率<30ml/min) 

·修正血清钙>3mmol/L<2mmol/L 

·对唑莱磷酸、或其他双磷酸盐或存在于研究药物的配方中的一化合物临床相关过敏 

·可能妨碍病患生活质量或影响疼痛解释的严重伴随医疗症状 

·病患无法填写调查表(神经病的或精神病的状况、文盲等) 

·可应用其他协议定义的除外条件 

实施例4：肠道外投药剂型 

将100mg的本发明所述的化合物或其盐类溶于DMSO中，而后与10mL的0.9%无菌生理时盐水混合，以制备适合用于肠道外注射投药的医药组成物。此混合物包装成一剂量单元形式，以适用于注射投药。 

实施例5：口服剂型 

制将100mg的示范化合物1与100mg的玉米油混合，以制备用于口服投药的医药组成物。此混合物系包装在一口服单元中，如胶囊中，以适用于口服投药。 

于部分实施例中，100mg的本发明所述的化合物系与750mg的淀粉混合，并将此混合物系包装在一口服单元中，如硬质的明胶胶囊中，以适用于口服投药。 

实施例6：舌下投药(硬质锭剂)剂型 

将100mg的本发明所述的化合物与420mg糖粉末混合，再与1.6mL的淡玉米糖浆、2.4mL蒸馏水、及0.42mL薄荷萃取物混合，以制备用以口颊投药的医药组成物。而后，小心研磨混合物，并将研磨后的混合物倒入一模型中，以形成适用于口颊投药的锭剂。 

实施例7：吸入组成物 

将本发明所描述的20mg化合物与50mg无水柠檬酸及100mL的0.9%氯化钠溶剂，以制备直接吸入的药物组成物。将该混合物合并于直接吸入单位(例如喷雾剂)，该混合物适合吸入投药。 

实施例8：直肠凝胶剂型 

将本发明所描述的20mg化合物与50mg无水柠檬酸及100mL的0.9%氯化钠溶剂，以制备直接吸入的药物组成物。将该混合物合并于直接吸入单位(例如喷雾剂)，该混合物适合吸入投药。 

实施例11：外用凝胶组成物 

将100mg的本发明所述的化合物与1.75g的羟丙基纤维素、10mL的丙二醇、10mL的肉豆蔻酸异丙酯(isopropyl myristate)、及100mL的USP级乙醇，以制备外用凝胶医药组成物。将所制得的凝胶混合物包装在一容器中，如软管，以适用于以外用方式投药。 

实施例12：眼药水组成物 

将100mg的本发明所述的化合物与0.9g的NaCl(溶于100mL纯水中)混合，并使用0.2微米过滤膜进行过滤。将所得的非离子性溶液包装在一眼部投药单元中，如眼药水容器，以适用于通过眼部进行投药。 

在此所显示与描述的本发明较佳的实施例，仅经由例子来提供此实施例，对本领域技术人员而言为显而易知的。本领域技术人员可在不偏离本 发明的范围下，进行各种改变、修饰、及取代。此外，对本发明实施例所做的各种改变，均应解释为用以实施本发明。同时，本发明所主张的权利范围自应以权利要求所述为准，且本发明权利要求所主张的方法及结构及其均等物，均涵盖于本发明的范围中。 

Claims (20)

1.一种化合物在制备用于治疗、减缓或处理骨癌疼痛的组成物的用途，其是将医疗上有效剂量的该化合物、其医药上可接受的盐类、其代谢物、其溶剂化物、或其前趋药物投予至一主体，该化合物结构为：

其中，每一X及Y各自独立为氧、NR₅、或硫；

R为氢、或C(=O)C₁-C₈烷基；

每一R₁、R₂、及R₃各自独立为氢、甲基、或(CH₂)_m-CH₃；

R₄为NR₅R₆、OR₅、OC(=O)R₇、C(=O)OR₅、C(=O)R₅、C(=O)NR₅R₆、卤素、5或6员环内酯、C₁-C₈烷基、C₂-C₈烯基、C₂-C₈炔基、芳基、或葡萄糖基，其中，5或6员环内酯、C₁-C₈烷基、C₂-C₈烯基、C₂-C₈炔基、芳基、及葡萄糖基是选择性的经一或以上选自由NR₅R₆、OR₅、OC(=O)R₇、C(=O)OR₅、C(=O)R₅、C(=O)NR₅R₆、C₁-C₈烷基、C₂-C₈烯基、C₂-C₈炔基、C₃-C₈环烷基、及C₁-C₈卤烷基的取代基所取代；

每一R₅、及R₆各自独立为氢、或C₁-C₈烷基；

R₇是C₁-C₈烷基、OR₅、或NR₅R₆；

m为1-12；且

n为1-12。

2.如权利要求1所述的用途，其中，包含将治疗上或预防上有效剂量的至少一第二活性剂投予病患。

3.如权利要求2所述的用途，其中，该第二活性剂能够缓和或降低疼痛。

4.如权利要求1所述的用途，其中，该骨癌疼痛是源自于由骨头引发的癌症。

5.如权利要求1所述的用途，其中，该骨癌疼痛是源自于骨内瘤。

6.如权利要求1所述的用途，其中，该骨癌疼痛是源自于癌症转移至骨头。

7.如权利要求6所述的用途，其中，该骨癌疼痛是源自于乳癌、前列腺癌、肺癌、肾脏癌、肝癌、肾癌、膀胱癌、甲状腺癌、子宫颈癌或结肠癌转移至骨头。

8.如权利要求6所述的用途，其中，该骨癌疼痛是源自于食道癌或鼻咽癌转移至骨头。

9.如权利要求6所述的用途，其中，该骨癌疼痛是源自于肉瘤转移至骨头。

10.如权利要求7所述的用途，其中，该骨癌疼痛是源自于乳癌、前列腺癌、肾脏癌或肺癌转移至骨头。

11.如权利要求2所述的用途，其中，至少一种该第二活性剂选自由抗抑郁剂(antidepressant)、抗高血压(antihypertensive)、抗不安(anxiolytic)、钙通道阻滞剂(calcium channel blocker)、肌肉松弛剂(muscle relaxant)、非麻醉药品止痛剂(non-narcotic analgesic)、抗发炎剂(anti-inflammatoryagent)、cox-2抑制剂(cox-2inhibitor)、α肾上腺素受体促进剂(alpha-adrenergicreceptor agonist)、α肾上腺素受体促进剂、K他命(ketamine)、麻醉药、免疫调节剂(immunomodulatoryagent)、免疫抑制剂(immunosuppressiveagent)、皮质类固醇(corticosteroid)、高压氧剂(hyperbaric oxygen)、抗痉挛(anticonvulsant)及其组合物所组成的群组。

12.如权利要求2所述的用途，其中，至少一种该第二活性剂选自由柳酸乙酯、希乐葆(celecoxib)、K他命、镇顽癫(gabapentin)、卡马西平(carbamazepine)、奥卡西平(oxcarbazepine)、苯妥英(phenytoin)、丙戊酸钠(sodium valproate)、波尼松(prednisone)、尼非待平(nifedipine)、氯压定(clonidine)、氧可酮(oxycodone)、派替啶(meperidine)、吗啡硫酸盐(morphinesulfate)、氢吗啡酮(hydromorphone)、芬酞尼(fentanyl)、对乙酰氨基酚(acetaminophen)、布洛芬(ibuprofen)、奈普生钠(naproxen sodium)灰黄霉素(griseofulvin)、安米替林(amitriptyline)、丙咪嗪(imipramine)、多塞平(doxepin)及其组合物所组成的群组。

13.如权利要求1所述的用途，其中，该化合物分离自牛樟芝。

14.如权利要求1所述的用途，其中，R为氢、C(=O)C₃H₈、C(=O)C₂H₅或C(=O)CH₃。

15.如权利要求1所述的用途，其中，R₁、R₂及R₃分别为氢、甲基、乙基、丙基、丁基、戊基、己基、庚基或辛基。

16.如权利要求15所述的用途，其中，R₁或R₂为氢或甲基。

17.如权利要求1所述的用途，其中，R₄为C₂H₅C(CH₃)₂OH、C₂H₅C(CH₃)₂OCH₃、CH₂COOH、C₂H₅COOH、CH₂OH、C₂H₅OH、CH₂Ph、C₂H₅Ph、CH₂CH=C(CH₃)(CHO)、CH₂CH=C(CH₃)(C(=O)CH₃)、5或6-员内酯、芳基或葡萄糖基，其中该5或6-员内酯、芳基及葡萄糖基是选择地与一或以上选自由NR₅R₆、OR₅、OC(=O)R₇、C(=O)OR₅、C(=O)R₅、C(=O)NR₅R₆、C₁-C₈烷基、C₂-C₈烯基、C₂-C₈烯基、C₃-C₈环烷基及C₁-C₈卤烷基所组成的群组的取代基所取代。

18.如权利要求1所述的用途，其中，R₄为选择地以一或以上选自由NR₅R₆、OR₅、OC(=O)R₇、C(=O)OR₅、C(=O)R₅、C(=O)NR₅R₆、C₁-C₈烷基、C₂-C₈烯基、C₂-C₈烯基、C₃-C₈环烷基及C₁-C₈卤烷基所组成的取代基所取代。

19.如权利要求18所述的用途，其中，R₄为CH₂CH=C(CH₃)₂。

20.如权利要求19所述的用途，其中，该化合物为