CN103920471B - 一种酵母菌磁性印迹复合微球吸附剂的制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种酵母菌磁性印迹复合微球吸附剂的制备方法，属于环保功能材料制备技术领域。通过共沉淀法制备了四氧化三铁纳米颗粒并对其表面进行疏水改性，随后以油酸改性酵母菌水溶液为水相，模板分子三氟氯氰菊酯，功能单体甲基丙烯酸、4-乙烯基吡啶，交联剂乙二醇二甲基丙烯酸酯，引发剂偶氮二异丁酸二甲酯，疏水Fe₃O₄为油相，制备稳定的Pickering乳液，热引发聚合制备酵母菌磁性印迹复合微球吸附剂。印迹微球磁稳定性较好，静态吸附实验研究了吸附剂的吸附平衡、动力学和选择识别性能。结果表明本发明制备的印迹吸附剂具有较好的吸附容量、较快的吸附动力学和对LC的选择识别性能。

Description

一种酵母菌磁性印迹复合微球吸附剂的制备方法

技术领域

本发明涉及一种酵母菌磁性印迹复合微球吸附剂的制备方法，属环保功能材料制备技术领域。

背景技术

分子印迹技术就是指在模板分子周围形成聚合物网络，除去模板分子后在聚合物的网络结构中留下具有识别能力的结合位点，对模板客体分子表现出高度的选择识别性能。磁分离技术运用到分子印迹中有利于快速简便的将磁性聚合物从样品中分离出来。磁性分子印迹技术因其高效的选择性、易分离、可重复利用性及廉价易制备的优点有着广阔的应用前景。

Pickering乳液近年来引起了较大的关注，它以固体粒子作为稳定颗粒代替表面活性剂，吸附在水油界面，形成Pickering乳液，它克服了传统表面活性剂制备的乳液不稳定、尺寸不均匀、毒性等缺点。按固体稳定颗粒的亲疏水性分为水包油（o/w）或油包水（w/o）型乳液，常用的稳定颗粒包括无机粒子如二氧化硅、四氧化三铁、碳酸钙等，黏土粒子如埃洛石、锂皂石、高岭土等，生物材料如纤维素、淀粉、甲壳素等。微生物相对于上述材料具有廉价、低毒性、易获取、表面基团丰富的特点，酵母菌作为一类常见的微生物，无毒，具有优秀的生物相容性，常用于人类及动物细胞的理想实验模型，用其作为稳定粒子制备Pickering乳液并运用到分子印迹技术中目前尚未见报道。

菊酯类农药因其高效杀虫性广泛应用于农业、渔业、林业及家庭除虫，相比于有机氯农药，菊酯在生物体中毒性较低及具有相对较快的生物转化和代谢速度，但这类杀虫剂经呼吸或表皮吸收，既含有神经毒素易导致中枢神经麻痹，又易引起内分泌紊乱。因此，制备优良的吸附剂从环境中选择性识别和吸附菊酯非常必要。本发明选用三氟氯氰菊酯（LC）作为分子印迹中的模板分子。

本发明以酵母菌作为基质材料，四氧化三铁（Fe₃O₄）粒子作为磁性载体，采用Pickering乳液法制备磁性印迹复合微球（MMIMs），并将其用于LC的选择性识别和吸附。

发明内容

本发明首先通过共沉淀法制备了Fe₃O₄纳米颗粒并对其表面进行疏水改性，随后以油酸改性酵母菌水溶液为水相，模板分子LC，功能单体甲基丙烯酸（MAA）、4-乙烯基吡啶（4-VP），交联剂乙二醇二甲基丙烯酸酯（EGDMA），引发剂偶氮二异丁酸二甲酯（AIBME），疏水Fe₃O₄为油相，制备稳定的Pickering乳液，热引发聚合制备酵母菌磁性印迹复合微球吸附剂。并将吸附剂用于溶液中LC的选择性识别和吸附。

本发明采用的技术方案是：

一种酵母菌磁性印迹复合微球吸附剂的制备方法，按照下述步骤进行：

（1）Fe₃O₄纳米粒子的制备及其疏水改性：

六水合三氯化铁（FeCl₃·6H₂O）和四水合氯化亚铁（FeCl₂·4H₂O）溶解在去离子水中，质量体积比为（1-3）:（0.5-1.5）:（50-100）g/g/ml，20-50℃搅拌10-20min，将氢氧化钠（NaOH）溶液（浓度为0.2-0.6mol/L）在氮气氛中快速加入到上述溶液中，其中氢氧化钠溶液与上述溶液的体积比为（30-60）:（50-100）ml/ml，剧烈搅拌10-30min，生成的Fe₃O₄纳米粒子用磁铁分离回收后，用无水乙醇洗涤3次，分散在的油酸和无水乙醇体积比为1:（1-4）的混合液中，其中分离回收后的Fe₃O₄纳米粒子和混合液的用量比为0.75:40g/ml，30-70℃下搅拌3-8h，产物用磁铁分离回收，用无水乙醇洗涤6次，40℃下真空干燥。

（2）酵母菌的改性：

按每0.5-2.5g酵母菌分散在30ml体积比为1:（1-4）的水和无水乙醇混合溶液中，搅拌5-15min，然后按每0.5-2.5g酵母菌加入3-8ml油酸，30-70℃下搅拌10-20h，40℃下真空干燥，得改性酵母。

（3）磁性分子印迹微球的制备

将模板分子LC、功能单体MAA、功能单体4-VP溶解在甲苯溶剂中，其中模板分子LC、功能单体MAA、功能单体4-VP与甲苯溶剂的比例为0.25:（0.5-1.25）:（0.75-1.5）:（0.2-0.6）mmol/mmol/mmol/ml；放置于黑暗条件下静置5-10h，形成预组装溶液；按每0.1-0.5g步骤（2）所得改性酵母分散在5-20ml去离子水中，搅拌5-20min形成水相分散液；预组装溶液中加入疏水Fe₃O₄，与交联剂EGDMA、引发剂AIBME混合后超声5-20min，形成油相，预组装溶液、疏水Fe₃O₄、EGDMA、AIBME的用量比为（0.32-0.87）:（0.01-0.05）:（0.5-2）:（0.05-0.2）ml/g/ml/ml；油水两相混合，体积比为（0.87-3.07）:（5-20）ml/ml，然后剧烈震荡5-15min，形成稳定的Pickering乳液；容器密封后置于50-80℃水浴中聚合10-20h；生成的酵母菌磁性印迹复合微球吸附剂（MMIMs）用磁铁收集，用无水乙醇洗涤3次，再用体积比为（75-95）:（5-25）的甲醇/醋酸混合溶液为洗脱液进行洗脱，直到洗脱液中检测不到模板分子，脱除模板分子LC后，自然风干。

对应的非印迹聚合物（MNIMs）制备方法类似，但不加LC。

（4）将所制得的吸附剂进行吸附性能分析测试。

上述技术方案中所述的FeCl₃·6H₂O、FeCl₂·4H₂O和NaOH，其特征在于FeCl₃·6H₂O、FeCl₂·4H₂O和NaOH的作用为制备Fe₃O₄纳米粒子。

上述技术方案中所述的油酸，其特征在于油酸的作用为对Fe₃O₄和酵母菌进行疏水改性。

上述技术方案中所述的LC，其特征在于LC的作用为模板分子。

上述技术方案中所述的MAA和4-VP，其特征在于MAA和4-VP的作用为功能单体。

上述技术方案中所述的EGDMA，其特征在于EGDMA的作用为交联剂。

上述技术方案中所述的甲苯，其特征在于甲苯的作用为溶剂。

上述技术方案中所述的AIBME，其特征在于AIBME的作用为引发剂。

上述技术方案中所述的吸附性能分析测试方法具体为：

（1）静态吸附试验

将MMIMs和MNIMs吸附剂分别加入10ml一定浓度的LC溶液中，25℃静置一段时间，研究溶液初始浓度和吸附时间对吸附容量的影响，吸附完成后吸附剂用磁铁收集，溶液中LC剩余浓度用紫外光谱测量并计算出吸附容量（Q_e，μmol/g）：

其中(mg/L)和(mg/L)分别是吸附前后溶液中LC浓度，(mL)为测试液体积，(g)为吸附剂用量，为LC分子量。

（2）选择性吸附试验

选择氰戊菊酯（FL）和邻苯二甲酸二乙酯（DEP）作为结构类似物和结构非类似物进行单组份和双组份的选择性吸附试验。单组份试验中，分别配制模板分子和以上两种酯类化合物的溶液，浓度为100mg/L，各取10ml溶液，其中分别加入10mgMMIMs和MNIMs吸附剂，25℃静置一段时间，吸附完成后，用紫外光谱测量上清液中酯类化合物的浓度。双组分试验中，分别配制LC和以上两种酯类化合物的混合溶液，溶液中LC和另一种物质的浓度都为100mg/L，各取10ml双组份溶液，分别加入10mgMMIMs和MNIMs吸附剂，25℃静置一段时间，吸附完成后，用高效液相色谱测量上清液中LC的浓度。

步骤（2）中酵母菌为高活性干酵母，厂家：安琪酵母股份有限公司。

本发明的技术优点：

利用Pickering乳液法制备磁性分子印迹聚合物微球，方法简便，快速，以酵母菌微生物材料作为Pickering乳液的稳定剂，廉价易得，无毒，表面基团丰富且具有良好的生物相容性；产物刚性好，机械性能高，识别位点不易被破坏，磁强度好，在溶液中能够实现快速分离；一系列吸附试验表明，制备的磁性印迹微球对模板分子LC的吸附性能良好，具有优秀的选择识别性能，且重复利用性高。

附图说明

下面结合附图对本发明做进一步描述。

图1为实例2中酵母菌（a）、改性后酵母菌（b）、MMIMs（c）和疏水Fe₃O₄（d）接触角照片。从图中看出，改性后酵母菌疏水性提高，有利于稳定o/w乳液，聚合后MMIMs为亲水聚合物，在水相体系中分散较好，有利于从水体中分离模板分子，Fe₃O₄改性后疏水性较强，作为磁性载体，分散在油相中。

图2为实施例2中制备的Pickering乳液的光学显微照片（a）、激光共聚显微照片（b）和MMIMs微球的扫描显微照片（c）、激光共聚显微照片（d）。从a中看出，实施例2中获得的Pickering乳液平均直径为52.8微米，分布均一，从b中看出，带有荧光标记的酵母菌颗粒稳定在液滴表面，排列紧密，说明酵母菌疏水改性成功，从c中看出，聚合后酵母固定在聚合物微球表面，菌周围有PMAA小球生成，提高了微球的亲水性，从d中看出，聚合后带有荧光的酵母菌仍稳定在微球表面，由于菌周围生成了聚甲基丙烯酸（PMAA），荧光强度有所降低，说明聚合过程成功进行。

图3为实施例2中酵母菌（a）、改性后酵母（b）和MMIMs（c）的红外光谱图。从a中看出，在3323cm^-1和2927cm^-1处为酵母菌的O—H和脂肪族饱和烃中C—H的伸缩振动吸收峰，酰胺Ⅰ、酰胺Ⅱ和酰胺Ⅲ带分别位于1654cm^-1，1540cm^-1和1240cm^-1说明酵母菌中蛋白质的存在，P=O伸缩振动峰在1070cm^-1处，从b中看出，改性后酵母菌在1708cm^-1处具有来自油酸中羧酸的C=O特征峰，说明油酸改性成功，从c中看出，MAA中的O—H伸缩振动峰在3440cm^-1处，1731cm^-1处为MAA和EGDMA中C=O羰基伸缩振动峰，1640cm^-1、1250cm^-1和1153cm^-1分别为EGDMA中C=C的伸缩振动峰、C—O对称和非对称伸缩振动峰，说明印迹聚合物聚合成功。

图4为实施例2中MMIMs内部的能谱图（a）和Fe₃O₄（b(a)）、MMIMs（b(b)）的XRD图谱。从b中可知，在衍射角为20°-70°范围内，(a)和(b)中有Fe₃O₄的6个特征峰（220），（311），（400），（422），（511），（440），从a中可知，MMIMs中，碳原子氧原子含量较多，主要来自聚合物，铁原子主要来自油相中Fe₃O₄磁性载体，说明MMIMs被成功制备。

图5为实施例2中Fe₃O₄（a）、MMIMs（b）磁滞回线，磁分离效果图（c）和磁漏曲线图（d）。从图中看出，Fe₃O₄和MMIMs都为超顺磁性，饱和磁化强度分别为53.865emu/g和0.73emu/g。MMIMs在外加磁场下磁分离效果较好，有良好的磁稳定性，能够有效防止漏磁。

具体实施方式

下面结合具体实施实例对本发明做进一步说明。

实施例1：

1．一种酵母菌磁性印迹复合微球吸附剂的制备方法，其特征在于按照下述步骤进行：

（1）Fe₃O₄纳米粒子的制备及其疏水改性：

1gFeCl₃·6H₂O和0.5gFeCl₂·4H₂O溶解在50ml去离子水中，20℃搅拌10min，30mlNaOH溶液（浓度为0.2mol/L）在氮气氛中快速加入到上述溶液中，剧烈搅拌10min。生成的Fe₃O₄纳米粒子用磁铁分离回收后，用无水乙醇洗涤3次，分散在40ml体积比为1:1的油酸和无水乙醇混合液中，30℃下搅拌3h，产物用磁铁分离回收，用无水乙醇洗涤6次，40℃下真空干燥。

（2）酵母菌的改性：

0.5g酵母菌分散在30ml体积比为1:4的水和无水乙醇混合溶液中，搅拌5min，加入3ml油酸，30℃下搅拌10h，40℃下真空干燥。

（3）磁性分子印迹微球的制备

模板分子LC0.25mmol、功能单体MAA0.5mmol、功能单体4-VP0.75mmol溶解在0.2ml甲苯溶剂中。放置于黑暗条件下静置5h，形成预组装溶液。0.1g改性酵母分散在5ml去离子水中，搅拌5min形成水相分散液，预组装溶液中加入0.01g疏水Fe₃O₄，与0.5ml交联剂EGDMA、0.05ml引发剂AIBME混合后超声5min，形成油相，油水两相混合后剧烈震荡5min，形成稳定的Pickering乳液。容器密封后置于50℃水浴中聚合20h。生成的酵母菌磁性印迹复合微球吸附（MMIMs）剂用磁铁收集，用无水乙醇洗涤3次，再用体积比为95:5的甲醇/醋酸混合溶液为洗脱液进行洗脱，直到洗脱液中检测不到模板分子，脱除模板分子LC后，自然风干。

对应的非印迹聚合物（MNIMs）制备方法类似，但不加LC。

2．吸附性能测试

（1）分别取10ml初始浓度为50、100、150、200、250mg/L的LC溶液加入到比色管中，分别加入10mg实施例1中方法制备的MMIMs和MNIMs吸附剂，比色管放入25℃水浴中静置12h后，上清液用磁铁收集，用紫外可见分光光度计测量未吸附的LC浓度，并根据结果计算出吸附容量。

结果表明：MMIMs印迹吸附剂25℃时饱和吸附容量为60.34μmol/g，MNIMs非印迹吸附剂饱和吸附容量为34.55μmol/g，印迹吸附剂饱和吸附容量明显高于非印迹吸附剂。

（2）取10ml初始浓度为200mg/L的LC溶液加入比色管中，分别加入10mg实施例1中方法制备的MMIMs和MNIMs吸附剂，比色管放入25℃水浴中分别静置10、20、40、60、100、180、300、420、540、720min后，上清液用磁铁收集，用紫外可见分光光度计测量未吸附的LC浓度，并根据结果计算出吸附容量。

结果表明：吸附60min后，MMIMs印迹吸附剂和MNIMs非印迹吸附剂吸附率分别迅速增加到91.47%和82.74%，随后吸附在560min内逐渐达到吸附平衡，平衡时印迹和非印迹吸附剂的吸附容量分别为45.93μmol/g和24.54μmol/g。

（3）分别配制LC、FL和DEP的溶液，浓度为100mg/L，各取10ml溶液至比色管中，其中分别加入10mg实施例1中方法制备的MMIMs和MNIMs吸附剂，比色管放入25℃水浴中静置12h后，上清液用磁铁收集，用紫外可见吸光光度计测量未吸附的各酯类化合物浓度。

结果表明：MMIMs印迹吸附剂对LC、FL和DEP的吸附容量分别为29.78μmol/g、20.41μmol/g和12.32μmol/g，MNIMs非印迹吸附剂对LC、FL和DEP的吸附容量分别为20.38μmol/g、15.22μmol/g和11.24μmol/g，印迹吸附剂对LC有显著的专一识别性，吸附容量高于其他结构类似物和结构非类似物。

（4）分别配制LC和FL、DEP的混合溶液，溶液中LC和另一种物质的浓度都为100mg/L，各取10ml双组份溶液至比色管中，分别加入10mg实施例1中方法制备的MMIMs和MNIMs吸附剂，比色管放入25℃水浴中静置12h后，上清液用磁铁收集，用高效液相色谱测量未吸附的LC的浓度，并根据结果计算出吸附容量。

结果表明：MMIMs印迹吸附剂在LC、FL双组份溶液中，对LC吸附容量为33.87μmol/g，MNIMs非印迹吸附剂吸附容量为12.11μmol/g，在LC、DEP双组份溶液中，印迹吸附剂对LC吸附容量为27.21μmol/g，非印迹吸附剂吸附容量为26.04μmol/g，印迹吸附剂在混合溶液中对LC选择性较好。

实施例2：

1．一种酵母菌磁性印迹复合微球吸附剂的制备方法，其特征在于按照下述步骤进行：

（1）Fe₃O₄纳米粒子的制备及其疏水改性：

3gFeCl₃·6H₂O和1.5gFeCl₂·4H₂O溶解在100ml去离子水中，50℃搅拌20min，60mlNaOH溶液（浓度为0.6mol/L）在氮气氛中快速加入到上述溶液中，剧烈搅拌30min。生成的Fe₃O₄纳米粒子用磁铁分离回收后，用无水乙醇洗涤3次，分散在40ml体积比为1:4的油酸和无水乙醇混合液中，70℃下搅拌8h，产物用磁铁分离回收，用无水乙醇洗涤6次，40℃下真空干燥。

（2）酵母菌的改性：

2.5g酵母菌分散在30ml体积比为1:1的水和无水乙醇混合溶液中，搅拌15min，加入8ml油酸，70℃下搅拌20h，40℃下真空干燥。

（3）磁性分子印迹微球的制备

模板分子LC0.25mmol、功能单体MAA1.25mmol、功能单体4-VP1.5mmol溶解在0.6ml甲苯溶剂中。放置于黑暗条件下静置10h，形成预组装溶液。0.5g改性酵母分散在20ml去离子水中，搅拌20min形成水相分散液，预组装溶液中加入0.05g疏水Fe₃O₄，与2ml交联剂EGDMA、0.2ml引发剂AIBME混合后超声20min，形成油相，油水两相混合后剧烈震荡15min，形成Pickering乳液。容器密封后置于80℃水浴中聚合10h。生成的酵母菌磁性印迹复合微球吸附剂（MMIMs）用磁铁收集，用无水乙醇洗涤3次，再用体积比为75:25的甲醇/醋酸混合溶液为洗脱液进行洗脱，直到洗脱液中检测不到模板分子，脱除模板分子LC后，自然风干。

对应的非印迹聚合物（MNIMs）制备方法类似，但不加LC。

实施例2中各表征图如附图中图1-5所示。

2．吸附性能测试

（1）分别取10ml初始浓度为50、100、150、200、250mg/L的LC溶液加入到比色管中，分别加入10mg实施例2中方法制备的MMIMs和MNIMs吸附剂，比色管放入25℃水浴中静置12h后，上清液用磁铁收集，用紫外可见分光光度计测量未吸附的LC浓度，并根据结果计算出吸附容量。

结果表明：MMIMs印迹吸附剂25℃时饱和吸附容量为62.87μmol/g，MNIMs非印迹吸附剂饱和吸附容量为36.90μmol/g，印迹吸附剂饱和吸附容量明显高于非印迹吸附剂。

（2）取10ml初始浓度为200mg/L的LC溶液加入比色管中，分别加入10mg实施例1中方法制备的MMIMs和MNIMs吸附剂，比色管放入25℃水浴中分别静置10、20、40、60、100、180、300、420、540、720min后，上清液用磁铁收集，用紫外可见分光光度计测量未吸附的LC浓度，并根据结果计算出吸附容量。

结果表明：吸附60min后，MMIMs印迹吸附剂和MNIMs非印迹吸附剂吸附率分别迅速增加到93.75%和85.26%，随后吸附在560min内逐渐达到吸附平衡，平衡时印迹和非印迹吸附剂的吸附容量分别为48.05μmol/g和26.70μmol/g。

（3）分别配制LC、FL和DEP的溶液，浓度为100mg/L，各取10ml溶液至比色管中，其中分别加入10mg实施例1中方法制备的MMIMs和MNIMs吸附剂，比色管放入25℃水浴中静置12h后，上清液用磁铁收集，用紫外可见吸光光度计测量未吸附的各酯类化合物浓度。

结果表明：MMIMs印迹吸附剂对LC、FL和DEP的吸附容量分别为31.34μmol/g、23.33μmol/g和14.41μmol/g，MNIMs非印迹吸附剂对LC、FL和DEP的吸附容量分别为22.46μmol/g、17.31μmol/g和13.50μmol/g，印迹吸附剂对LC有显著的专一识别性，吸附容量高于其他结构类似物和结构非类似物。

（4）分别配制LC和FL、DEP的混合溶液，溶液中LC和另一种物质的浓度都为100mg/L，各取10ml双组份溶液至比色管中，分别加入10mg实施例1中方法制备的MMIMs和MNIMs吸附剂，比色管放入25℃水浴中静置12h后，上清液用磁铁收集，用高效液相色谱测量未吸附的LC的浓度，并根据结果计算出吸附容量。

结果表明：MMIMs印迹吸附剂在LC、FL双组份溶液中，对LC吸附容量为35.91μmol/g，MNIMs非印迹吸附剂吸附容量为13.31μmol/g，在LC、DEP双组份溶液中，印迹吸附剂对LC吸附容量为29.41μmol/g，非印迹吸附剂吸附容量为28.31μmol/g，印迹吸附剂在混合溶液中对LC选择性较好。

Claims (2)

1.一种酵母菌磁性印迹复合微球吸附剂的制备方法，按照下述步骤进行：

（1）Fe₃O₄纳米粒子的制备及其疏水改性：

六水合三氯化铁和四水合氯化亚铁溶解在去离子水中，六水合三氯化铁、四水合氯化亚铁和去离子水的质量体积比为（1-3）:（0.5-1.5）:（50-100）g/g/ml，20-50℃搅拌10-20min，将氢氧化钠溶液在氮气氛中快速加入到上述溶液中，其中氢氧化钠溶液与上述溶液的体积比为（30-60）:（50-100）ml/ml，剧烈搅拌10-30min，生成的Fe₃O₄纳米粒子用磁铁分离回收后，用无水乙醇洗涤3次，分散在油酸和无水乙醇体积比为1:（1-4）的混合液中，其中分离回收后的Fe₃O₄纳米粒子和混合液的用量比为0.75:40g/ml，30-70℃下搅拌3-8h，产物用磁铁分离回收，用无水乙醇洗涤6次，40℃下真空干燥；

（2）酵母菌的改性：

按每0.5-2.5g酵母菌分散在30ml体积比为1:（1-4）的水和无水乙醇混合溶液中，搅拌5-15min，然后按每0.5-2.5g酵母菌加入3-8ml油酸，30-70℃下搅拌10-20h，40℃下真空干燥，得改性酵母；

（3）磁性分子印迹微球的制备

将模板分子三氟氯氰菊酯、功能单体甲基丙烯酸、功能单体四乙烯基吡啶溶解在甲苯溶剂中，其中模板分子三氟氯氰菊酯、功能单体甲基丙烯酸、功能单体四乙烯基吡啶与甲苯溶剂的比例为0.25:（0.5-1.25）:（0.75-1.5）:（0.2-0.6）mmol/mmol/mmol/ml；放置于黑暗条件下静置5-10h，形成预组装溶液；按每0.1-0.5g步骤（2）所得改性酵母分散在5-20ml去离子水中，搅拌5-20min形成水相分散液；预组装溶液中加入疏水Fe₃O₄，与交联剂乙二醇二甲基丙烯酸酯、引发剂偶氮二异丁酸二甲酯混合后超声5-20min，形成油相，预组装溶液、疏水Fe₃O₄、乙二醇二甲基丙烯酸酯、偶氮二异丁酸二甲酯的用量比为（0.32-0.87）:（0.01-0.05）:（0.5-2）:（0.05-0.2）ml/g/ml/ml；油水两相混合，体积比为（0.87-3.07）:（5-20）ml/ml，然后剧烈震荡5-15min，形成稳定的皮克林乳液；容器密封后置于50-80℃水浴中聚合10-20h；生成的酵母菌磁性印迹复合微球吸附剂用磁铁收集，用无水乙醇洗涤3次，再用体积比为（75-95）:（5-25）的甲醇/醋酸混合溶液为洗脱液进行洗脱，直到洗脱液中检测不到模板分子，脱除模板分子三氟氯氰菊酯后，自然风干；

其中步骤（1）中氢氧化钠溶液的浓度为0.2-0.6mol/L。

2.根据权利要求1所述的一种酵母菌磁性印迹复合微球吸附剂的制备方法，其特征在于：其中油酸的作用为对Fe₃O₄和酵母菌进行疏水改性；三氟氯氰菊酯的作用为模板分子；甲基丙烯酸和四乙烯基吡啶的作用为功能单体；乙二醇二甲基丙烯酸酯的作用为交联剂；甲苯的作用为溶剂；偶氮二异丁酸二甲酯的作用为引发剂。