CN103866038B - 用于检测烟草对tmv抗性的n基因特异性引物对、检测方法及试剂盒 - Google Patents

用于检测烟草对tmv抗性的n基因特异性引物对、检测方法及试剂盒 Download PDF

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Abstract

本发明提供一种用于检测烟草对TMV抗性的N基因特异性引物对、检测方法及试剂盒，特异性引物对包括上游引物和下游引物；上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示；下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示。检测方法为：在烟草N基因序列特异区域设计一对特异性引物；以待测烟草品种的DNA为模板，使用N基因特异性引物对进行PCR扩增；采用电泳检测PCR扩增产物，判断PCR扩增产物是否含有865bp的特征条带，如果含有，则对TMV具有抗性；反之，则不具有N基因介导的TMV抗性。具有操作简便、结果可靠、检测速度快等优点，能够极大地加速抗TMV育种材料的选育过程，缩短育种周期，提高育种效率。

Description

用于检测烟草对TMV抗性的N基因特异性引物对、检测方法及试剂盒
技术领域
本发明属于生物化学与分子生物学领域，具体涉及一种用于检测烟草对TMV抗性的N基因特异性引物对、检测方法及试剂盒。
背景技术
烟草普通花叶病（TMV，tobacco mosaic virus)是全世界烟草栽培区发生普遍、危害严重的一大病害。发病后，烟叶产量降低，品质变劣，对烟叶生产带来极大危害。目前，对于TMV的防治没有效果较好的药剂，只能采取提前预防、综合防治等措施，由于受耕地资源紧张、连作的影响，培育抗TMV的烟草品种在生产中显得尤为迫切和重要。
N基因起源于野生种黏烟草（Nicotiana glutinosa），是目前已经明确的烟草抗TMV基因，是烟草抗TMV育种的主要抗源。1938年，F.Q.Holmes等研究表明，黏烟草对TMV的抗性是由显性单基因N基因控制的；1994年，S.Whitham等通过转座子标签法克隆得到N基因，并证明其介导的TMV抗性可以产生过敏性坏死反应。N基因全长为6656bp，包括5个外显子和4个内含子，编码NS和NL两种转录产物，属于TIR-NBS-LRR类抗病基因。国外已经利用N基因介导的TMV抗性育成了一批高抗TMV的烟草品种，包括Ky56、By21、NC75、VA770、TN86、Coler176、Coker86等。我国也利用该抗源培育了一系列抗TMV品种（系），如：利用Ky56作为亲本育成了辽烟8号、辽烟10号等抗TMV品种；利用Coker86的抗病性，育成了辽烟13、辽烟14等抗TMV品种。这些品种在我国的烟草生产中发挥了重要作用。
在传统的抗TMV育种中，为鉴定所培育的品种是否具有TMV抗性，通常采取田间鉴定方法，即：需要对育种材料进行单株接种并创造合适的发病条件，因此，如果接种不成功或条件不合适，均会影响品种抗性判断结论，具有品种抗性判断效率低的不足。
发明内容
针对现有技术存在的缺陷，本发明提供一种用于检测烟草对TMV抗性的N基因特异性引物对、检测方法及试剂盒，利用N基因特异引物序列检测不同育种材料TMV抗性，为烟草抗TMV育种提供一条快捷有效的方法，不受生长条件和发育时期的影响，可以快速高效的检测N基因控制的TMV抗性，加快抗TMV种质资源和优良品种筛选，还具有操作简便、结果可靠、检测速度快等优点，能够极大地加速材料的选育过程，缩短育种周期，提高育种效率。
本发明采用的技术方案如下：
本发明第一目的为提供一种用于检测烟草对TMV抗性的N基因特异性引物对，包括上游引物NPF和下游引物NPR；
所述上游引物NPF的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示；
所述下游引物NPR的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示。
本发明第二目的为提供一种烟草是否具有N基因介导的TMV抗性的检测方法，包括以下步骤：
S1，利用Genbank提供的烟草基因组序列进行Blast比对，查找被检测烟草的N基因序列特异区域，并在该特异区域设计N基因特异性引物对；其中，所述N基因特异性引物对包括：上游引物NPF的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示；下游引物NPR的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示；
N基因序列特异区域的序列如下：
AGGGGAAAAATAACTTAGCCTCAAAATAAAGCTCTTTAAAAGATAGACATTCACTCTAAATAGAATTCTATTATAACACTTTTGGCGTACTTCCTTTTTTGGCTAGAATTATGATACATGTCTTTAAATGAACAGAAGTTGCTTTTGTAATTTATCAGGACTTATGTTGAAACTTATGAAAATTGTTATTGTTTATGTTGTCTAATACTAAATATAAAATACAATAATATTTTATCGTAATTTTTTAAAAATTTGTCAAATAATGCAAATGAAAAATTAAATTTTTTGGTCCTTTAAAAATTTGAGAATGAAAAAGTACGAGTTATACTTCCTAAAAGTTTGATAGTGAATAATATGTAAAATTTAAAGAATGACTAATATTGGACTAATACTTTAAAACAAATAACTTAATATACAAATTATAGCGAGACATTTTCATTCGTTGTACTGAATGCAAGAAAGAAAGGAAAAAAAAACTCATTTATAATATAGTTTGTCTTCTACTATTTTACCTTATTGCTTCAAATTTGTATTTTATCGATTTTGCTATATCTTATGATTTTTTTCACGGTCAATATTCTTCTTACAAGAATAAATTTTATATACCTCAAGTGTTTTGTCAATTTGATAAATAATTTTTCTTATATGATGAACTTGTAAAATAATAGAATTGGATTCTTTTGCTAATTAGTTAATTCAACGACTTAATTATTTATTCTCAACATTAAAGGAAATAATTTAGTTTTTATTAATTCAAACTCTTAGTATTTGCTCATTCTAATTTTCAGTCCAATAAGAATTCAATTTTCAAATAGTAAGAAAAGTCATATATTTTGAATTTTATGTTTTCCGAAGCATTGTTTGTTTGTTTAACTCTACGGGAGTTTTCTAACTCACATTTTGTATAATAAAATTTTTTGAGTAGTAGTTCAGTACAACTCTAATATTAATGGGCTTTAAATAAGGAAATATATATTACGTAAAA
在上述N基因序列特异区域中，前面划下划线的序列即为上游引物NPF；后面划下划线的序列即为下游引物NPR。
S2，提取被检测烟草品种的DNA；
S3，以所述被检测烟草品种的DNA为模板，使用所述N基因特异性引物对对所述被检测烟草品种的DNA进行PCR扩增；
S4，采用电泳检测PCR扩增产物，判断所述PCR扩增产物是否含有865bp的特征条带，如果含有，则所述被检测烟草品种具有N基因序列，对TMV具有抗性；反之，则所述被检测烟草品种不具有N基因介导的TMV抗性。
优选的，所述PCR扩增的反应体系组成为：2×Dreamtaq MIX10ul，模板DNA1ul，上游引物1ul，下游引物1ul，最后用双蒸水将反应体系补至20ul。
优选的，所述PCR扩增的反应条件为：94～95℃预变性3～5min；94～95℃变性30s；退火温度53-57℃，30s；72℃延伸1min；30-35个循环，最后72℃，10min停止反应。
优选的，所述PCR扩增的反应条件为：94℃预变性3min；94℃变性30s；退火温度56℃，30s；72℃延伸1min；共35个循环，最后72℃10min停止反应。
本发明第三目的为提供一种检测烟草是否具有N基因介导的TMV抗性的试剂盒，所述的试剂盒包括：PCR反应试剂和引物；所述引物包括：
上游引物NPF的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示；
下游引物NPR的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示。
本发明提供的用于检测烟草对TMV抗性的N基因特异性引物对、检测方法及试剂盒，在烟草N基因的特异序列区域设计引物，通过PCR扩增，能够在含有N基因的烟草品种（系）中扩增出一条长度为865bp的特异条带，而在TMV感病品种或非N基因控制的TMV抗性品种(系)中不能扩增出目的条带。具体具有以下优点：
（1）引物序列更加特异，扩增效率更高，结果判断更加直观、便捷，本发明可用于烟草抗TMV分子标记辅助育种，加速抗TMV育种材料和资源的筛选。现有技术引物序列不够特异，不论待测烟草材料是否含有N基因，均有长度不同的扩增产物出现，影响判断结果。而本发明通过对N基因序列特点及功能结构域进行分析可以得知，在烟草基因组内，N基因与其他很多基因具有保守的功能结构域，根据这一特点，本发明利用Genbank提供的烟草基因组序列进行Blast比对，查找N基因序列特异区域，并在特异区设计了引物，从而避开了N基因与其他基因的保守结构域，保证了引物序列的特异性，使得引物扩增效率更高，结果更准确。
（2）检测结果更加简单、快捷。与现有技术相比，利用本发明提供的引物序列能够在含有N基因的烟草材料中扩增出865bp长度的片段，且仅此一条扩增产物，在不含N基因的烟草中则没有任何扩增产物，避免了PCR扩增假阳性，保证了PCR扩增的特异性和准确性，使得结果判断更加简单，快捷。已通过后续比较例二证实了检测结果的可靠性。
附图说明
图1为本发明比较例一中，N基因特异引物NPF/NPR在含有N基因烟草品种枯斑三生和不含N基因烟草品种K326中的扩增结果；其中，M：DL2000Marker；1：枯斑三生；2：K326；
图2为本发明比较例二中，N基因特异引物NPF/NPR在68份烟草品种中的扩增结果；其中，M：DL2000Marker，1-68：待测烟草品种，品种名称详见表1。
具体实施方式
以下结合附图对本发明进行详细说明：
N基因控制的TMV抗性属于显性单基因控制，为提高抗TMV育种效率提供了依据。一方面，可以通过杂种优势与优质高产种质进行杂交，直接利用F1，将会大大缩短获得抗病优质烟草新品种（系）的时间；另一方面，还可通过回交的方式获得优质抗病品种（系），以优质品种（系）为父本，连续回交，对后代进行严格的抗性鉴定，保持父本的优异品质性状，并结合抗TMV性状；此外，还可以通过聚合杂交等育种方法，将多个抗源的抗性基因聚合在一起，创造高抗TMV兼抗其它病原的烟草品种或种质。
本发明提供的用于检测烟草对TMV抗性的N基因特异性引物对、检测方法及试剂盒，利用N基因特异引物序列检测不同育种材料TMV抗性，为烟草抗TMV育种提供一条快捷有效的方法，不受生长条件和发育时期的影响，还具有操作简便、结果可靠、检测速度快等优点，能够极大地加速材料的选育过程，缩短育种周期，提高育种效率。
以下通过两个比较例证明本发明提供的N基因特异性引物对检测烟草是否具有N基因控制的TMV抗性的特异性和可靠性：
比验例一
（1）本发明根据N基因序列特点及功能结构域特征设计合成的引物序列如下所示：
上游引物NPF：5’-CACTTTTGGCGTACTTCCTT-3’
下游引物NPR：5’-GAGTTGTACTGAACTACTACTC-3’。
（2）材料的准备：将枯斑三生和K326的烟草种子种植于烟草专用育苗盘中，当烟苗长至5-6叶期时，取叶片100mg，用液氮速冻，-80℃保存，以备提取DNA之用。其中，枯斑三生为含有N基因抗TMV烟草品种；K326为不含N基因感TMV烟草品种。
（3）DNA提取：本发明DNA提取不受烟株生长发育时期的影响，具体取样时间可以根据试验要求安排。DNA提取方法可以采用植物基因组DNA提取试剂盒，操作步骤见试剂盒说明书。本发明所用的DNA提取试剂盒购自北京全式金生物技术有限公司。
（4）PCR反应扩增：以枯斑三生、K326基因组DNA为模板，利用NPR/NPF引物进行PCR扩增。
PCR反应体系组成为：2×Dreamtaq MIX10ul，模板DNA1ul，上下游引物各1ul，补加双蒸水至20ul；
PCR反应条件为：94℃预变性3min，94℃变性30s，退火温度56℃30s，72℃延伸1min，35个循环，最后72℃10min停止反应。
（5）电泳检测：步骤（4）的扩增产物用1%的琼脂糖凝胶电泳检测，检测结果如图1所示，其中，M：DL2000Marker；1：枯斑三生；2：K326；从图1可以看出，枯斑三生基因组DNA能扩增出一条865bp的特征条带，而K326基因组DNA没有该扩增产物出现。检测结果与实际完全相符，说明本发明设计合成的N基因引物序列特异性较强。
比验例二
（1）选取68份烟草品种（系），品种名称见表1。
（2）将这68份烟草种子种植于烟草专用育苗盘中，当烟苗长至5-6叶期时，取叶片100mg，用液氮速冻，-80℃保存，以备提取DNA之用。同时将这些材料利用摩擦法接种TMV菌液，进行过TMV抗性鉴定。
（3）用购自北京全式金生物技术有限公司的植物基因组DNA提取试剂盒提取上述烟草品种的基因组DNA。具体操作步骤见使用说明书。
（4）以待测烟草品种（系）DNA为模板，利用NPR/NPF引物进行PCR扩增。PCR反应体系及反应条件同比较例1。
（5）PCR产物检测同实施例1，检测结果见图2和表1。从电泳检测结果可以看出，引物NPR/NPF检测结果同68份烟草品种（系）的TMV抗性鉴定结果相吻合（见表2），符合N基因控制的TMV抗性特点。因此，本比较例可以证明本发明提供的引物序列用于鉴定N基因控制的TMV抗性具有可靠性，可用于抗TMV育种材料的高通量筛选。
表1.PCR扩增与TMV抗性鉴定结果
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视本发明的保护范围。

Claims (6)

1.一种用于检测烟草对TMV抗性的N基因特异性引物对，其特征在于，包括上游引物NPF和下游引物NPR；
所述上游引物NPF的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示；
所述下游引物NPR的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示。
2.一种烟草是否具有N基因介导的TMV抗性的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1，利用Genbank提供的烟草基因组序列进行Blast比对，查找被检测烟草的N基因序列特异区域，并在该特异区域设计N基因特异性引物对；其中，所述N基因特异性引物对包括：上游引物NPF的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示；下游引物NPR的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示；
S2，提取被检测烟草品种的DNA；
S3，以所述被检测烟草品种的DNA为模板，使用所述N基因特异性引物对对所述被检测烟草品种的DNA进行PCR扩增；
S4，采用电泳检测PCR扩增产物，判断所述PCR扩增产物是否含有865bp的特征条带，如果含有，则所述被检测烟草品种具有N基因序列，对TMV具有抗性；反之，则所述被检测烟草品种不具有N基因介导的TMV抗性。
3.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于，所述PCR扩增的反应体系组成为：2×Dreamtaq MIX 10ul，模板DNA 1ul，上游引物1ul，下游引物1ul，最后用双蒸水将反应体系补至20ul。
4.根据权利要求3所述的检测方法，其特征在于，所述PCR扩增的反应条件为：94～95℃预变性3～5min；94～95℃变性30s；退火温度53-57℃，30s；72℃延伸1min；30-35个循环，最后72℃，10min停止反应。
5.根据权利要求4所述的检测方法，其特征在于，所述PCR扩增的反应条件为：94℃预变性3min；94℃变性30s；退火温度56℃，30s；72℃延伸1min；共35个循环，最后72℃10min停止反应。
6.一种检测烟草是否具有N基因介导的TMV抗性的试剂盒，其特征在于，所述的试剂盒包括：PCR反应试剂和引物；所述引物包括：
上游引物NPF的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示；
下游引物NPR的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104830982B (zh) * 2015-04-29 2018-08-31 广东省农业科学院作物研究所 一种筛选抗tmv烟草品种的方法
WO2019056205A1 (zh) * 2017-09-20 2019-03-28 云南省烟草农业科学研究院 包含短n导入片段的抗tmv的烟草植株及其选育方法
CN108486124B (zh) * 2018-03-26 2020-08-04 浙江大学 嘉兴黑猪tfam基因特征序列及肉质性能鉴定方法
CN113999930B (zh) * 2021-11-16 2023-07-28 云南省烟草农业科学研究院 一种烟草中N’直系同源基因N’alata检测方法及其试剂盒

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101209055A (zh) * 2006-12-29 2008-07-02 河南农业大学 防治烟草花叶病毒病的方法
CN102604857A (zh) * 2011-12-22 2012-07-25 中国农业科学院烟草研究所 一株烟草普通花叶病毒生防蒙氏假单胞菌菌株

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101209055A (zh) * 2006-12-29 2008-07-02 河南农业大学 防治烟草花叶病毒病的方法
CN102604857A (zh) * 2011-12-22 2012-07-25 中国农业科学院烟草研究所 一株烟草普通花叶病毒生防蒙氏假单胞菌菌株

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
"抗TMV烟草种质资源的N基因片段序列研究";袁清华;《广东农业科学》;20111231(第S1期);摘要，第96页左栏第1段，第97页左栏第1.2节 *

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