CN103861104A - 一种藻蓝蛋白与酞菁的复合物及其制备方法和应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种藻蓝蛋白与酞菁的复合物及其制备方法和应用，在藻蓝蛋白上通过非共价的方式复合上酞菁分子，通过调整反应物的投料比，来调控复合物的组成比。藻蓝蛋白与酞菁的复合物作为具有双功能基和作用光谱的光敏剂用于制备光动力治疗药物时，具有生物相容性高、光动力抗癌活性高等优势。

Description

一种藻蓝蛋白与酞菁的复合物及其制备方法和应用

技术领域

本发明属于功能材料以及药物领域，具体涉及一种藻蓝蛋白与酞菁的复合物及其制备方法和应用。

背景技术

藻蓝蛋白（phycocyanin）是一种卟啉类色素蛋白，具有很好的水溶性；是来源于螺旋藻中的一种天然蛋白。由α和β亚基等摩尔组成，α和β亚基通过分子间的各种相互作用力先形成单体(αβ)，单体之间借助连接多肽的作用再聚合成三聚体(αβ)₃和六聚体(αβ)₆。

藻蓝蛋白仅含有一种发色团，即藻蓝素(phycocyanobilin，PCB)。每种亚基是由脱辅基蛋白和开链四吡咯结构的发色团组成，发色团通过硫醚键与脱辅基蛋白的半胱氨酸残基交联。α亚基上含有一个发色团，而β亚基上含有两个发色团，其 (αβ)单体分子则共含有3个发色团。 

藻蓝蛋白的提取原料来自于红藻和蓝藻，不同藻类中藻蓝蛋白的种类、含量也不同。目前，以螺旋藻、多管藻为提取原料的居多，因螺旋藻中藻胆蛋白的含量非常丰富，可达细胞干重的20%以上，较其他蓝藻较高。因此，本研究过程中选择钝顶螺旋藻为藻蓝蛋白的提取原料。

藻蓝蛋白是藻胆蛋白的主要成分，其用途极其广泛，既可作为天然色素广泛用于食品、染料、化妆品等工业，又可制成荧光试剂，用于临床诊断和免疫化学及生物工程等研究领域中；并且藻蓝蛋白还是一种重要的生理活性物质，具有抗炎、抗癌、促进细胞再生等功效，可制备成康复药品和营养食品，用于配合治疗癌症患者和白血病患者等。藻蓝蛋白还是一种性能优良的光动力治疗药物，促进动物血细胞再生，抑制某些癌细胞等作用。

酞菁是一种具有18个电子的大共轭体系的化合物，因其在科技领域的广泛应用而变得越来越重要。酞菁作为第二代光敏剂，具有以下优点：（1）结构明确，性质稳定；（2）暗毒性和皮肤光毒性小；（3）在光疗窗口（670nm~750nm）有强吸收；（4）光敏化能力很强。但是酞菁也存在一些缺点如酞菁锌在生理溶液中易聚集、水溶性差以及生物活性有待进一步提高。因此，为了提高酞菁的水溶性和靶向性，制备得到酞菁与藻蓝蛋白的水溶性复合物，通过酞菁与藻蓝蛋白的协同作用提高光敏剂的抗癌活性。

发明内容

本发明的目的在于针对上述问题，提供了一种藻蓝蛋白与酞菁的复合物及其制备方法和应用。本发明提供的复合物具有生物相容性高、光动力抗癌活性高的优势。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

在藻蓝蛋白上通过非共价的方式复合上酞菁分子，形成组成比确定的藻蓝蛋白与酞菁的复合物, 通过调整反应物的投料比，来调控复合物的组成比。

所述的酞菁优选：酞菁锌和1,8(11),15(18),22(25)-四(3-羧基苯氧基)酞菁锌，它们的结构分别如式1和式2所示。

式（1）

式（2）

所述的复合物为摩尔比为1-12:1的酞菁锌与水溶性藻蓝蛋白的复合物或摩尔比为1-10:1的1,8(11),15(18),22(25)-四(3-羧基苯氧基)酞菁锌与水溶性藻蓝蛋白的复合物。

所述的藻蓝蛋白为水溶性植物蛋白，可以从各种红藻和蓝藻中提取（如钝顶螺旋藻等）。

所述的藻蓝蛋白与酞菁的复合物的制备方法包括以下主要步骤：

（a）将酞菁配合物溶解在合适的溶剂中，配制成一定浓度的酞菁配合物溶液，将水溶性藻蓝蛋白溶解在缓冲溶液中或含有尿素的缓冲溶液中，配制成一定浓度的水溶性藻蓝蛋白溶液；

（b）按一定的投料比，将酞菁配合物溶液逐渐滴加到水溶性藻蓝蛋白溶液中，形成一反应混合物；

（c）将上述反应混合物置于25-37℃下振荡或搅拌2-12小时，使酞菁配合物通过分子间作用力与水溶性藻蓝蛋白结合成复合物，得到一混合溶液，混合溶液中包含复合物和游离的酞菁配合物；

（d）通过凝胶渗透色谱，以缓冲溶液作为洗脱剂分离上述溶液；

（e）将含复合物的洗脱组分，再经过凝胶渗透色谱，以水为流动相，脱除其中的缓冲盐；

（f）将除盐后的复合物水溶液，通过真空冷冻干燥，除去水分。

步骤（d）（e）还可通过膜透析法来进行。

所述的藻蓝蛋白与酞菁的复合物用于制备光敏剂或光动力药物或光敏药剂。所述光敏药剂，或简称光敏剂，或称光敏药物制剂，又称为光动力药剂。所制备的光动力药物或光敏药剂可用于光动力治疗、光动力诊断、光动力消毒或光动力美容。所述的光动力治疗可以是恶性肿瘤的光动力治疗，或是良性肿瘤的光动力治疗，或是白血病的骨髓体外光动力净化治疗，或是非癌症疾病的光动力治疗。所述的非癌症疾病，可以是细菌感染，或是口腔疾病，或是黄斑变性眼病，或是动脉硬化，或是创伤感染，或是皮肤病，或是病毒感染。所述的光动力消毒可以是血液或血液衍生物的光动力灭菌净化，或是水的光动力灭菌消毒，或是医用或生活用器的光动力消毒。

利用本发明所述的藻蓝蛋白与酞菁的复合物制备光敏药剂的方法是：用水，或水和其它物质的混和溶液，其中其它物质的质量分数不高于10％，作为溶剂，溶解复合物，配制成含一定浓度的光敏药剂，复合物的浓度不高于其饱和浓度；在制成的溶液中加入抗氧化剂、缓冲剂和等渗剂作为添加剂以保持光敏药剂的化学稳定性和生物相容性。

本发明的有益效果和突出优势在于：

（1）本发明提供的藻蓝蛋白与酞菁的复合物为独特的具有双功能基和作用光谱的复合抗癌光敏剂。复合物中具有两个光动力活性基团，即酞菁环和藻蓝素，最大吸收波长分别位于670nm和600nm，这种特征的光敏剂在光动力治疗中有更高的价值。

（2）本发明提供的藻蓝蛋白与酞菁的复合物具有良好的水溶性、可以克服无取代酞菁的疏水性，不需要借助任何助剂即可以制成水剂。

（3）本发明提供的复合物是通过大量的筛选试验获得的，一些酞菁化合物或者难于与藻蓝蛋白通过非共价键形成复合物，或者所形成的复合物没有显示更高的光动力活性。例如：四-a-[4－(4－乙酰基哌嗪)苯氧基]锌酞菁，二[氨基乙基苯氧基]硅酞菁，二(4－乙酰氨基苯氧基)硅酞菁，二[4－(4－乙酰基哌嗪)苯氧基]硅酞菁等。

具体实施方式

本发明所述的藻蓝蛋白由参考文献或专利公开的方法制备。本发明所述的酞菁锌使用专利（黄剑东，柯美荣，专利号ZL200710200223.2）公开的方法制备。

本发明所述的藻蓝蛋白与酞菁的复合物的制备方法，包括以下主要步骤：（a）将酞菁配合物溶解在合适的溶剂中，配制成一定浓度的酞菁配合物溶液，将水溶性藻蓝蛋白溶解在缓冲溶液中或含有尿素的缓冲溶液中，配制成一定浓度的水溶性藻蓝蛋白溶液；（b）按一定的投料比，将酞菁配合物溶液逐渐滴加到水溶性藻蓝蛋白溶液中，形成一反应混合物；（c）将上述反应混合物置于25-37℃下振荡或搅拌2-12小时，使酞菁配合物通过分子间作用力与水溶性藻蓝蛋白结合成复合物，得到一混合溶液，混合溶液中包含复合物和游离的酞菁配合物；（d）通过凝胶渗透色谱，以缓冲溶液作为洗脱剂分离上述溶液；（e）将含复合物的洗脱组分，再经过凝胶渗透色谱，以水为流动相，脱除其中的缓冲盐；（f）将除盐后的复合物水溶液，通过真空冷冻干燥，除去水分。步骤（d）（e）还可通过膜透析法来进行。

本发明所述的酞菁与藻蓝蛋白复合物具有光敏化能力，可以作为光敏剂使用，即在光照射下能有效地产生活性氧或其他活性物质，利用所产生的活性氧或其他活性物质，用于降解污染物、美容、消毒以及开展疾病的光动力治疗。

本发明所述的酞菁与藻蓝蛋白复合物可作为光敏剂在制备光动力治疗药物中应用。本发明所述的光动力治疗是指皮肤病的光动力治疗，或是癌症的光动力治疗，或是病毒性疾病的光动力治疗，或是细菌性疾病的光动力治疗，或是真菌性疾病的光动力治疗。

本发明所述的酞菁与藻蓝蛋白复合物作为光敏剂的应用，需配套适宜的光照装置，所述的适宜的光源可以由普通光源连接合适的滤光片来提供或由特定波长的激光来提供，光源的波长范围为600～800nm。

采用1,3－二苯基异苯呋喃探针法的测定结果表明，在红光照射下（光照波长＞610nm），本发明所述的酞菁与藻蓝蛋白复合物产生单线态氧的能力，高于相应的酞菁化合物。

利用本发明所述的藻蓝蛋白与酞菁的复合物制备光敏药剂的方法是：用水，或水和其它物质的混和溶液，其中其它物质的质量分数不高于10％，作为溶剂，溶解复合物，配制成含一定浓度的光敏药剂，复合物的浓度不高于其饱和浓度；在制成的溶液中加入抗氧化剂、缓冲剂和等渗剂作为添加剂以保持光敏药剂的化学稳定性和生物相容性。

以下采用非限制性实施例对本发明作进一步说明。

实施例1

藻蓝蛋白的提取与纯化

（1）藻蓝蛋白的粗提取

配制pH=7的磷酸盐缓冲溶液，称取10g螺旋藻粉，溶解于250mL缓冲液中，超声振荡5min后置于-20℃冰箱内冷冻12h，取出解冻，摇匀离心，取上清液测其电子吸收光谱。

（2）藻蓝蛋白的盐析

取藻蓝蛋白水提液，加入饱和硫酸铵溶液或研磨的硫酸铵粉末，使溶液中硫酸铵的饱和度分别为40%，4℃过夜，进行盐析，于12000r/min离心20min，将上清液稀释适当倍数或沉淀用适量蒸馏水溶解后测定紫外-可见吸收光谱，测定波长范围250-800nm，计算溶液中蛋白的纯度和浓度。

（3）藻蓝蛋白的脱盐

取5mL藻蓝蛋白盐析液先用0.45mm的微孔滤膜过滤，通过葡聚糖凝胶G50层析柱，用蒸馏水进行洗脱，合并纯度接近且电导率较低的洗脱组分，计算收集液中藻蓝蛋白的浓度、纯度。

（4）藻蓝蛋白的纯化

根据目标蛋白的分子量选取截留分子量5万的纤维膜组件。将步骤（3）制得的藻蓝蛋白溶液加入稀释后，通过进液口送入超滤装置，浓缩液出口管亦置于盐析液烧杯中，出水口管则置于另一个大烧杯中。超滤过程不断向浓缩液中补加蒸馏水，至纯化浓缩液光谱纯度达到4.0以上，则停止加入蒸馏水，收集全部纯化液。计算藻蓝蛋白的浓度、纯度。

经吸收光谱检测，得到的纯化藻蓝蛋白，最大吸收为600-620nm左右，纯度Amax/A280为4.0以上；以不同波长的光激发，最大荧光发射峰均位于650nm左右，其中以590nm光激发时荧光最强。

实施例2

1,8(11),15(18),22(25)-四(3-羧基苯氧基)酞菁锌的合成

（1）制备中间体3-(3-羧基苯氧基)邻苯二腈：

将0.69g（5mmol）3-羟基苯酸和0.69-2.08g (4-6mmol)(优选0.87g,5mmol）3-硝基邻苯二腈加入到35mlDMF中,通氮气，室温搅拌，10分钟后加2.1g（15mmol）碳酸钾,反应24小时。将反应混合物抽滤，收集滤液，在滤液中加入200ml冰水混合物中，用2 mol/L HCl溶液调节pH值至1～3（优选2），产物以沉淀析出，过滤，水洗至中性，收集滤饼，70℃常压干燥，得粗产物。将粗产物用少量DMF溶解，然后加大量水，析出沉淀，过滤，水洗3次，70℃常压干燥，得1.11g白色固体, 产率84％，Rf = 0.53(乙醇)。

产物的结构表征数据如下：

MS （ESI）m/z: 264.1 [M]^-。UV: λ_max=319 nm(DMF)。¹H NMR (DMSO-d₆，ppm)：13.16 (s, 1H, COOH), 7.81-7.88 (m, 3H, A_r-H), 7.62- 7.67(m, 2H, A_r-H), 7.52 (t, J=0.6, 1H, Ar-H), 7.32 (d, J=4.05, 1H, Ar)。

IR（KBr，cm^－1）：3613.1，3078.4，2232.9，1688.8，1585.6，1466.7，1450.9，1303.7，1278.7，1208.9，1099.4，994.6，904.7，805.0，726.3，703.3，670.3，545.9。  

（2）制备1,8(11),15(18),22(25)-四(3-羧基苯氧基)酞菁锌（II）

在氮气的保护下，将上述过程（1）获得的3-(3-羧基苯氧基)邻苯二腈0.27g（1mmol）、0.14g（1mmol）碳酸钾加入到10ml正戊醇中，搅拌,升温至90℃，加0.1g（0.55mmol）醋酸锌和0.3ml DBU，升温至130℃，在氮气下反应10～24小时（优选12小时）。蒸去正戊醇后，加少量DMF溶解，用稀HCl溶液酸化析出粗产物，过滤(优选微孔膜过滤)，水洗至滤液为无色，除去滤液，用1mol/L NaOH溶液溶解滤饼，过滤。将滤液用HCl稀溶液调节pH值至1～3（优选2），析出粗产物，微孔膜过滤，水洗至滤液为无色，70℃常压干燥滤饼，得粗产物。将粗产物用DMF溶解，过硅胶柱纯化，洗脱剂为DMF/甲醇(体积比为2：1)混合液，收集相应的酞菁组分，浓缩，加水析出，过滤（优选微孔膜过滤）。利用硅胶柱或凝胶柱进一步精制，干燥得暗蓝色产物，Rf=0.75 (甲醇)。

产物的结构表征数据如下：

MS （ESI）m/z: 1121.2 [M+H]。UV-vis：λ_max= 688 nm (DMF)。¹H NMR (DMSO-d₆，ppm)：12.75 (s, 1H, OH), 8.89-9.01 (m, 4H, Pc-H_α), 8.48 (m, 4H, Ar-H_β), 7.93-7.97 (m, 4H, Pc-H_β), 7.77 (t, J=2.281, 4H, Ar-H-CO), 7.60-7.69 (m, 4H, O-Ar-H-CO)，7.45-7.53 (m, 4H, Ar-H), 7.31-7.39 (m, 4H, Ar-H-O)。IR（KBr，cm^－1）：3273.8，3065.5，1706.8，1578.3，1480.9，1443.8，1327.9，1246.6，1096.3，1082.6，971.9，900.7，746.5。

实施例3

无取代酞菁锌与藻蓝蛋白的非共价结合复合物的制备

通过温育交换法来制备酞菁与藻蓝蛋白的非共价结合复合物：将酞菁与藻蓝蛋白以摩尔比10:1混匀在磷酸盐缓冲溶液（PBS）中混匀，37℃在气浴摇床上温育2～12小时。然后，通过凝胶色谱分离纯化，所用的凝胶为G-100凝胶，流动相为PBS缓冲液或水。收集对应于复合物的馏分，去除未复合的酞菁化合物，置 4 ℃冰箱保存或冷冻干燥制成固体粉末备用。复合物中藻蓝蛋白的含量和酞菁含量均通过吸收光谱法测定。

按照上述方法可得到摩尔组成比为8:1的无取代酞菁锌-水溶性藻蓝蛋白的复合物。

调节[酞菁]/[藻蓝蛋白] 的投料比（2～10:1），重复上述步骤，可以获得摩尔组成比约为1 ~ 8：1的酞菁-藻蓝蛋白复合物。

实施例4

四取代酞菁锌与藻蓝蛋白的非共价结合复合物的制备

制备方法同实施例3，除了用1,8(11),15(18),22(25)-四(3-羧基苯氧基)酞菁锌代替实施例3中的无取代酞菁锌，可得到相应的复合物。

当1,8(11),15(18),22(25)-四(3-羧基苯氧基)酞菁锌与藻蓝蛋白的投料比为10:1时，得到摩尔组成比为6：1的酞菁-藻蓝蛋白复合物。

调节[酞菁]/[藻蓝蛋白] 的投料比（2～10:1），重复上述步骤，可以获得摩尔组成比约为1 ~ 6：1的酞菁-藻蓝蛋白复合物。

实施例5

本发明中藻蓝蛋白为水溶性蛋白，在水溶液中其外部主要以亲水基团为主，而藻蓝蛋白与酞菁的非共价结合是通过分子间作用力和/或疏水作用，采用合适的变性剂改变藻蓝蛋白的高级结构，使更多的疏水基团裸露出来，更有利于藻蓝蛋白与酞菁的复合。

预先配制8M尿素（用PBS溶液配制），然后将藻蓝蛋白溶解于8M尿素溶液中，加入无取代酞菁锌，以与藻蓝蛋白摩尔比为10～20:1混匀，余下其他实验步骤同实施例3，获得了无取代酞菁锌-藻蓝蛋白复合物的结合比为12:1。在没有尿素存在下，只能获得结合比为8:1的复合物。

实施例6

制备方法同实施例5，除了用1,8(11),15(18),22(25)-四(3-羧基苯氧基)酞菁锌代替实施例5中的无取代酞菁锌，得到得到摩尔组成比为10：1的酞菁与藻蓝蛋白复合物。

实施例7

本发明所述的酞菁与藻蓝蛋白复合物作为光敏剂的应用，需配套适宜的光照装置，所述的适宜的光源可以由普通光源连接合适的滤光片来提供或由特定波长的激光来提供，光源的波长范围为600～800nm。

实施例8

本发明所述的酞菁与藻蓝蛋白复合物制备用于光动力治疗药物（即光敏药剂）的基本方法是：使用水或生理盐水或缓冲溶液作为溶剂，溶解本发明所述的酞菁与藻蓝蛋白复合物，配制成含一定浓度的光敏制剂，酞菁与藻蓝蛋白复合物的浓度不高于其饱和浓度。在制成的溶液中可加入抗氧化剂、缓冲剂和等渗剂作为添加剂以保持光敏药剂的化学稳定性和生物相容性。

实施例9

比较了本发明所述的无取代酞菁锌-藻蓝蛋白复合物（组成比为8:1）、无取代酞菁锌和藻蓝蛋白对人肝癌细胞HepG2的光动力抑制活性。

首先制备光敏药剂：（1）将组成比为8:1的无取代酞菁锌-藻蓝蛋白复合物溶于水或生理盐水或磷酸盐缓冲溶液中，制成复合物药剂。药剂中复合物的浓度为4mmol/L，则相应的酞菁浓度为32mmol/L，蛋白的浓度为4mmol/L。（2）将藻蓝蛋白溶于水或生理盐水或磷酸盐缓冲溶液中，制成藻蓝蛋白药剂，药剂中藻蓝蛋白的浓度为4mmol/L。（3）将无取代酞菁锌溶于DMF中，配成1mM的母液，进而溶于磷酸盐缓冲溶液中，制成浓度为0.080 mmol/L的药剂。

将上述光敏药剂稀释到细胞培养液中，制成不同浓度的光敏剂的细胞培养液。将癌细胞分别在含有不同浓度光敏剂的培养液中培养2小时，尔后弃培养液，用PBS清洗细胞后，加入新的培养液（不含光敏剂）。光照实验组，对细胞进行红光照射（所用激发光光源为波长大于610nm的红光，照射30分钟，照射光的功率为15mw×cm^-2）；不照光组，将细胞置于暗处20分钟。光照或不光照后，细胞的存活率采用MTT法考察。具体实验步骤参见《Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters》, 2006, 16，2450－2453。

结果表明，当体系中，复合物的浓度为1×10^-6 mol/L（相应的酞菁浓度为8×10^-6 mol/L)时，若不进行光照，则对人肝癌细胞HepG2没有杀伤和生长抑制作用，表明它们没有暗毒性；但如果进行红光照射，则可以100％杀伤癌细胞。通过测定光敏剂的浓度和细胞存活率的量效关系测定，获得在光照条件下，复合物的半致死浓度（IC₅₀，即杀死50％癌细胞所需的药物浓度），为0.27×10^-6 mol/L（相应的酞菁浓度为2.10×10^-6 mol/L)。

但是，对于藻蓝蛋白，当浓度为1×10^-6 mol/L，在同样红光照射条件下，也不能导致对人肝癌细胞HepG2的杀伤和生长抑制作用。对于无取代酞菁锌，当浓度为8×10^-6 mol/L时，在同样红光照射条件下，仅能导致70%癌细胞的死亡，半致死浓度IC₅₀为4.23×10^-6 mol/L。

可见，无取代酞菁锌-藻蓝蛋白复合物的光动力抗癌活性明显高于相应的无取代酞菁锌和藻蓝蛋白，显示了显著的协同效应。

其他结合比的无取代酞菁锌-藻蓝蛋白复合物也显示了更高的光动力抗癌活性。

实施例10

按照实施例9所述的方法，测试了实施例4中所述的1,8(11),15(18),22(25)-四(3-羧基苯氧基)酞菁锌与藻蓝蛋白复合物（组成比为6:1）、1,8(11),15(18),22(25)-四(3-羧基苯氧基)酞菁锌和藻蓝蛋白对HepG2人肝癌细胞的光动力抗癌活性。

结果表明，当体系中，复合物的浓度为0.67×10^-6 mol/L（相应的酞菁浓度为4×10^-6 mol/L)时，若不进行光照，则对人肝癌细胞HepG2没有杀伤和生长抑制作用，表明它们没有暗毒性；但如果进行红光照射，则可以100％杀伤癌细胞。通过测定光敏剂的浓度和细胞存活率的量效关系，获得在光照条件下的半致死浓度（IC₅₀，即杀死50％癌细胞所需的药物浓度），为0.15×10^-6 mol/L（相应的酞菁浓度为0.93×10^-6 mol/L)。

但是，对于藻蓝蛋白，当浓度为1×10^-6 mol/L，在同样红光照射条件下，也不能导致对人肝癌细胞HepG2的杀伤和生长抑制作用。而对于1,8(11),15(18),22(25)-四(3-羧基苯氧基)酞菁锌，当浓度为4×10^-6 mol/L时，在同样红光照射条件下，仅能导致40%癌细胞的死亡，半致死浓度IC₅₀为6.06×10^-6 mol/L。

可见，1,8(11),15(18),22(25)-四(3-羧基苯氧基)酞菁锌与藻蓝蛋白复合物的光动力抗癌活性明显高于相应的1,8(11),15(18),22(25)-四(3-羧基苯氧基)酞菁锌和藻蓝蛋白，显示了显著的协同效应。

其他结合比的1,8(11),15(18),22(25)-四(3-羧基苯氧基)酞菁锌-藻蓝蛋白复合物也显示了更高的光动力抗癌活性。

以上所述仅为本发明的较佳实施例，凡依本发明申请专利范围所做的均等变化与修饰，皆应属本发明的涵盖范围。

Claims (6)

1.一种藻蓝蛋白与酞菁的复合物，其特征在于：在藻蓝蛋白上通过非共价的方式复合上酞菁分子，通过调整反应物的投料比，来调控复合物的组成比。

2.根据权利要求1所述的藻蓝蛋白与酞菁的复合物，其特征在于：所述的酞菁为酞菁锌或1,8(11),15(18),22(25)-四(3-羧基苯氧基)酞菁锌。

3.根据权利要求1或2所述的藻蓝蛋白与酞菁的复合物，其特征在于：所述的复合物为摩尔比为1-12:1的酞菁锌与水溶性藻蓝蛋白的复合物或摩尔比为1-10:1的1,8(11),15(18),22(25)-四(3-羧基苯氧基)酞菁锌与水溶性藻蓝蛋白的复合物。

4.一种制备如权利要求1所述的藻蓝蛋白与酞菁的复合物的方法，其特征在于：包括以下步骤：

（1）配制酞菁配合物溶液和水溶性藻蓝蛋白溶液；

（2）将酞菁配合物溶液逐滴滴加到水溶性藻蓝蛋白溶液中，形成混合溶液；

（3）将混合溶液置于25-37℃下振荡或搅拌2-12小时；

（4）通过凝胶渗透色谱分离步骤（3）的混合溶液，脱除多余的酞菁配合物；

（5）将含复合物的洗脱组分，再经过凝胶渗透色谱，以水为流动相，脱除其中的盐；

（6）将除盐后的复合物水溶液，通过真空冷冻干燥，除去水分，制得所述的藻蓝蛋白与酞菁的复合物。

5.根据权利要求4所述的藻蓝蛋白与酞菁的复合物的制备方法，其特征在于：步骤（4）、（5）通过膜透析法来进行。

6.一种如权利要求1所述的藻蓝蛋白与酞菁的复合物的应用，其特征在于：所述的藻蓝蛋白与酞菁的复合物用于制备光敏剂或光动力药物或光敏药剂。