CN103860802B - 一种接骨七厘片的制备方法及应用 - Google Patents
一种接骨七厘片的制备方法及应用 Download PDFInfo
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Abstract
本发明提供一种接骨七厘片的制备方法，由炒乳香100g、炒没药100g、当归150g、土鳖虫250g、烫骨碎补150g、硼砂100g、血竭150g、煅自然铜100g、酒炒大黄100g作为原料药制成，采用微波提取方法制备而成，使得含量有很大提高，用量减少，本发明还提供了接骨七厘片在制备抑制人结肠癌HT29细胞增殖药物中的应用。
Description
技术领域
本发明涉及中药制剂技术领域，具体涉及一种接骨七厘片的制备方法及应用。
背景技术
接骨七厘片记载于部颁标准（WS3-B-0620-91），处方为炒乳香100g、炒没药100g、当归150g、土鳖虫250g、烫骨碎补150g、硼砂100g、血竭150g、煅自然铜100g、酒炒大黄100g，以上九味，粉碎成细粉，过筛，混匀，加辅料适量，混匀，制粒，压片，包糖衣，即得。能活血化瘀，接骨止痛。用于跌打损伤，续筋接骨，血瘀疼痛。
现有技术中，尚未有接骨七厘片在提取制备方面采用微波技术的报道，而采用打粉和水煎煮的方法，工艺粗糙、落后，杂质多，导致患者用量过大，不方便服用，严重影响了本品在临床上应用。
发明内容
发明目的：为了解决上述问题，本发明的目的在于提供一种接骨七厘片的制备方法。
本发明的另一个目的在于提供一种接骨七厘片在制备抑制人结肠癌HT29细胞增殖药物中的应用。
技术方案：本发明的目的是通过如下的方案实现的：
一种接骨七厘片的制备方法，接骨七厘片由炒乳香100g、炒没药100g、当归150g、土鳖虫250g、烫骨碎补150g、硼砂100g、血竭150g、煅自然铜100g、酒炒大黄100g作为原料药组成，制备方法由下列步骤组成：取上述药材，粉碎，加入2L的70%乙醇，投入微波萃取装置中进行微波萃取，萃取功率为400-600W，萃取2次，每次4-8分钟，合并萃取液，浓缩，加到D101大孔吸附树脂柱上，50%乙醇洗脱，收集5倍量柱体积洗脱液，减压回收乙醇，浓缩并干燥，得微波提取物，加入淀粉，70%乙醇制颗粒，干燥，压片，制成1000片，包衣，每片重0.3g。
上述一种接骨七厘片的制备方法，所述制备方法中微波萃取功率为500W，每次萃取6分钟。
一种接骨七厘片在制备抑制人结肠癌HT29细胞增殖药物中的应用，接骨七厘片由炒乳香100g、炒没药100g、当归150g、土鳖虫250g、烫骨碎补150g、硼砂100g、血竭150g、煅自然铜100g、酒炒大黄100g作为原料药组成，制备方法由下列步骤组成：取上述药材，粉碎，加入2L的70%乙醇，投入微波萃取装置中进行微波萃取，萃取功率为400-600W，萃取2次，每次4-8分钟，合并萃取液，浓缩，加到D101大孔吸附树脂柱上，50%乙醇洗脱，收集5倍量柱体积洗脱液，减压回收乙醇，浓缩并干燥，得微波提取物，加入淀粉，70%乙醇制颗粒，干燥，压片，制成1000片，包衣，每片重0.3g。
上述一种接骨七厘片在制备抑制人结肠癌HT29细胞增殖药物中的应用，接骨七厘片的制备方法中所述微波萃取功率为500W，每次萃取6分钟。
现有技术中，接骨七厘片每片0.3g，每次5片，一日2次，采用本发明制备成的 接骨七厘片每片0.3g，但含有的药材量是原来的2倍，因此每次仅需3片，一日服用2次，在具有更多活性成分的条件下大大减少了服用量。
具体实施方式
以下通过实施例形式，对本发明的上述内容再作进一步的详细说明，但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例，凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。
实施例1
取炒乳香100g、炒没药100g、当归150g、土鳖虫250g、烫骨碎补150g、硼砂100g、血竭150g、煅自然铜100g、酒炒大黄100g，粉碎，加入2L的70%乙醇，投入微波萃取装置中进行微波萃取，萃取功率400W，萃取2次，每次4分钟，合并萃取液，浓缩，加到D101大孔吸附树脂柱上，50%乙醇洗脱，收集5倍量柱体积洗脱液，减压回收乙醇，浓缩并干燥，得微波提取物，加入淀粉，70%乙醇制颗粒，干燥，压片，制成1000片，包衣，每片重0.3g
实施例2
取炒乳香100g、炒没药100g、当归150g、土鳖虫250g、烫骨碎补150g、硼砂100g、血竭150g、煅自然铜100g、酒炒大黄100g，粉碎，加入2L的70%乙醇，投入微波萃取装置中进行微波萃取，萃取功率500W，萃取2次，每次5分钟，合并萃取液，浓缩，加到D101大孔吸附树脂柱上，50%乙醇洗脱，收集5倍量柱体积洗脱液，减压回收乙醇，浓缩并干燥，得微波提取物，加入淀粉，70%乙醇制颗粒，干燥，压片，制成1000片，包衣，每片重0.3g
实施例3
取炒乳香100g、炒没药100g、当归150g、土鳖虫250g、烫骨碎补150g、硼砂100g、血竭150g、煅自然铜100g、酒炒大黄100g，粉碎，加入2L的70%乙醇，投入微波萃取装置中进行微波萃取，萃取功率600W，萃取2次，每次8分钟，合并萃取液，浓缩，加到D101大孔吸附树脂柱上，50%乙醇洗脱，收集5倍量柱体积洗脱液，减压回收乙醇，浓缩并干燥，得微波提取物，加入淀粉，70%乙醇制颗粒，干燥，压片，制成1000片，包衣，每片重0.3g
实施例4： 接骨七厘片抑制人结肠癌HT29细胞增殖的实验研究资料
1实验材料
1.1 实验用细胞株：人结肠癌HT29细胞，南京医科大学实验动物中心实验室细胞库，DMEM + 10% FBS 常规培养。
1.2 实验药物
研究药物：本发明 接骨七厘片：按实施例2方法制备。
药液储液：称取100mg 接骨七厘片，溶于5 ml 无水乙醇中，0.2μm滤器过滤，500μldoff管分装，-20 ℃存储，同时0.2μm 滤器过滤无水乙醇以备对照组之用。
1.3 实验试剂
DMEM（GIBCO公司Cat. No.12100-061 Lot. No.758137）；胎牛血清（浙江天杭生物科技有限公司Lot. No.100419）；NaHCO3 （上海久亿化学试剂有限公司 Cat. No.11810-033 Lot. No. 1088387）；Trypsin（AMRESCO 公司 批号：2010/04）；EDTA（AMRESCO 公司 批号：2009/10）；Penicillin G Sodium Salt（AMRESCO公司 批号：2010242）；StreptomycinSulfate（AMRESCO 公司 批号：2010382）；无水乙醇（南京化学试剂有限公司 批号：080310182）；MTT(Biosharp 批号：0793);PBS（实验室自配）；
1.4 实验器材
莱卡倒置显微镜（德国Leica 型号：DM1L）；可见-紫外光微孔板检测仪（美国MD公司 型号：SPECTRA MAX 190）；CO2培养箱（FORMA 型号：3111）；超净台（苏净集团安泰公司制造 型号：SW-CJ-ZFD）；纯水仪（美国Spring公司 型号：S/N 020579）；精密移液器（法国吉尔森公司 型号：P2）；电子天平（德国赛多利斯有限公司 型号：BT323S）；全自动高压灭菌锅（日本SANYO公司 型号：MLS-3020）；台式电热鼓风干燥箱（上海精密实验设备公司 型号：DHG9123A）；冰箱（西门子公司 型号：KG18V21TI）；液氮罐（CBS 型号：2001）；低速离心机（上海安亭科学仪器厂 型号：KA-1000）；0.2μm 滤器（MILLIPORE 型号：SLGP033RB）；10cm 培养皿(NEST公司)、96孔培养板（NEST公司）；细胞计数板；离心管、移液管、Tips 若干。
2 实验方法
1）人结肠癌HT29细胞用DMEM + 10% FBS于37℃、5% CO2进行常规培养（10 cm培养皿），当细胞生长至对数期时，收集细胞，弃去培养液，PBS轻洗3遍，加入3 ml 0.25%胰蛋白酶-0.04% EDTA ，37 ℃消化2 min后，向其中加入5 ml完全培养基中和反应，吹打细胞后将其转入离心管中，1000 rpm离心5 min，调整细胞悬液浓度3×104个/ml。
2） 将细胞种入96孔培养板中，每孔加入细胞悬液180μl，培养板放入细胞培养箱中（37 ℃，5% CO2）常规培养。
3）根据细胞生长情况，一般长至50%-70%，加入 接骨七厘片溶液，继续培养24h。4）24h后加入20μl MTT溶液（5 mg/ml，即0.5%MTT），继续培养4h。 5）4h后扣板法倒去上清，用吸水纸轻轻拍干，每孔加入200μl二甲基亚砜，置摇床上低速振荡10min，使结晶物充分溶解。在酶联免疫检测仪490nm处测量各孔的吸光值。 6）同时设置本底（不加细胞，只加培养液），对照孔（细胞、相同浓度的药物溶解介质、培养液、MTT、二甲基亚砜），每组设定6个复孔。 7）结果以药物对细胞的抑制率表示：
细胞增值抑制率（%）=（对照孔OD值-给药孔OD值） /对照孔OD值×100%。实验重复3次。
3 统计处理
采用Microsoft Excel 2003 软件中的相关分析和Student t 检验，数据以mean± S.D.表示。
4 实验结果
MTT 法实验后统计结果显示，与对照组比较，当剂量达到5mg/ml时，对人结肠癌HT29细胞增殖抑制有差异（P<0.05），剂量在10mg/ml时该差异具有显著性（P<0.01），当剂量达到15-20 mg/ml时有极显著性差异（P<0.001）。
表1 接骨七厘片对人结肠癌HT29细胞增殖抑制影响研究 (X±SD)
5 实验结论
接骨七厘片可以抑制人结肠癌HT29细胞增殖，减少人结肠癌HT29细胞的细胞生长数目，该作用呈剂量依赖性。
Claims (2)
1.一种接骨七厘片在制备抑制人结肠癌HT29细胞增殖药物中的应用，其特征在于接骨七厘片由炒乳香100g、炒没药100g、当归150g、土鳖虫250g、烫骨碎补150g、硼砂100g、血竭150g、煅自然铜100g、酒炒大黄100g作为原料药组成，制备方法由下列步骤组成：取上述药材，粉碎，加入2L的70％乙醇，投入微波萃取装置中进行微波萃取，萃取功率为400-600W，萃取2次，每次4-8分钟，合并萃取液，浓缩，加到D101大孔吸附树脂柱上，50％乙醇洗脱，收集5倍量柱体积洗脱液，减压回收乙醇，浓缩并干燥，得微波提取物，加入淀粉，70％乙醇制颗粒，干燥，压片，制成1000片，包衣，每片重0.3g。
2.根据权利要求1所述一种接骨七厘片在制备抑制人结肠癌HT29细胞增殖药物中的应用，其特征在于接骨七厘片的制备方法中所述微波萃取功率为500W，每次萃取6分钟。
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Citations (1)
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Non-Patent Citations (3)
| Title |
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| 接骨七厘片促进骨折愈合临床实验研究;罗毅文等;《中国中医骨伤科》;19970628;第05卷(第03期);全文 * |
| 接骨七厘片治疗高粘血症102例(三等奖);陈梦麟等;《湖南中医杂志》;20001215;第16卷(第06期);全文 * |
| 王沛教授肿瘤论治及用药规律初探;乔占兵等;《中国临床医生》;20050401;第33卷(第04期);第52-55页 * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
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