CN102824406B - 龙丹通络胶囊在制备抑制mj细胞增殖药物中的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了龙丹通络胶囊在制备抑制MJ细胞增殖药物中的应用，龙丹通络胶囊处方为黄芪、地龙、水蛭、丹参、葛根、麝香、冰片、犀角，能益气活血，祛瘀通脉，规格为每粒0.3g，每板12粒，每盒3板，口服，一次4粒，一日3次，用于气虚血瘀型脑血栓形成恢复期或冠心病轻中度稳定型劳累性心绞痛表现为气虚血瘀证者的康复保健，现发现其能抑制MJ细胞增殖。
Description
技术领域
本发明涉及一种中成药的新用途，尤其涉及龙丹通络胶囊在制备抑制MJ细胞增殖药物中的应用。
背景技术
淋巴细胞发生了恶变即称为淋巴瘤，按照“世界卫生组织淋巴系统肿瘤病理分类标准”，目前已知淋巴瘤有近70种病理类型，大体可分为霍奇金淋巴瘤和非霍奇金淋巴瘤两大类。在我国，霍奇金淋巴瘤占淋巴瘤的9%～10%，是一组疗效相对较好的恶性肿瘤；非霍奇金淋巴瘤占全部淋巴瘤病例的90%左右，并且近十几年来发病率逐年升高。
龙丹通络胶囊是哈尔滨圣泰制药股份有限公司的独家产品，目前还没有其抑制淋巴瘤（MJ）细胞增殖的文献报道。
发明内容
发明目的：本发明的目的在于提供龙丹通络胶囊在制备抑制MJ细胞增殖药物中的应用。
技术方案：龙丹通络胶囊在制备抑制MJ细胞增殖药物中的应用。
龙丹通络胶囊处方为黄芪、地龙、水蛭、丹参、葛根、麝香、冰片、犀角，能益气活血，祛瘀通脉，规格为每粒0.3g，每板12粒，每盒3板，口服，一次4粒，一日3次，用于气虚血瘀型脑血栓形成恢复期或冠心病轻中度稳定型劳累性心绞痛表现为气虚血瘀证者的康复保健，现发现其能抑制MJ细胞增殖。
有益效果：龙丹通络胶囊抑制MJ细胞增殖，效果良好。
具体实施方式
龙丹通络胶囊抑制MJ细胞增殖的实验研究资料
1实验材料
1.1实验用细胞株
淋巴瘤（MJ），来自本公司实验室细胞库，DMEM+10%FBS常规培养。
1.2实验药物
1.研究药物：龙丹通络胶囊，哈尔滨圣泰制药股份有限公，批号：20110423
药液储液：称取100mg龙丹通络胶囊内容物，溶于5ml无水乙醇中，0.2μm滤器过滤，500μldoff管分装，-20℃存储，同时0.2μm滤器过滤无水乙醇以备对照组之用。
1.3实验试剂
DMEM（GIBCO公司Cat.No.12100-061Lot.No.758137）；胎牛血清（浙江天杭生物科技有限公司Lot.No.100419）；NaHCO3（上海久亿化学试剂有限公司Cat.No.11810-033Lot.No.1088387）；Trypsin（AMRESCO公司批号：2010/04）；EDTA（AMRESCO公司批号：2009/10）；PenicillinGSodiumSalt（AMRESCO公司批号：2010242）；StreptomycinSulfate（AMRESCO公司批号：2010382）；无水乙醇（南京化学试剂有限公司批号：080310182）；MTT(Biosharp批号：0793);PBS（实验室自配）；
1.4实验器材
莱卡倒置显微镜（德国Leica型号：DM1L）；可见-紫外光微孔板检测仪（美国MD公司型号：SPECTRAMAX190）；CO2培养箱（FORMA型号：3111）；超净台（苏净集团安泰公司制造型号：SW-CJ-ZFD）；纯水仪（美国Spring公司型号：S/N020579）；精密移液器（法国吉尔森公司型号：P2）；电子天平（德国赛多利斯有限公司型号：BT323S）；全自动高压灭菌锅（日本SANYO公司型号：MLS-3020）；台式电热鼓风干燥箱（上海精密实验设备公司型号：DHG9123A）；冰箱（西门子公司型号：KG18V21TI）；液氮罐（CBS型号：2001）；低速离心机（上海安亭科学仪器厂型号：KA-1000）；0.2μm滤器（MILLIPORE型号：SLGP033RB）；10cm培养皿(NEST公司)、96孔培养板（NEST公司）；细胞计数板；离心管、移液管、Tips若干。
2实验方法
1）MJ细胞用DMEM+10%FBS于37℃、5%CO2进行常规培养（10cm培养皿），当细胞生长至对数期时，收集细胞，弃去培养液，PBS轻洗3遍，加入3ml0.25%胰蛋白酶-0.04%EDTA，37℃消化2min后，向其中加入5ml完全培养基中和反应，吹打细胞后将其转入离心管中，1000rpm离心5min，调整细胞悬液浓度3×104个/ml。
2）将细胞种入96孔培养板中，每孔加入细胞悬液180μl，培养板放入细胞培养箱中（37℃，5%CO2）常规培养。
3）根据细胞生长情况，一般长至50%-70%，加入龙丹通络胶囊溶液，继续培养24h。
4）24h后加入20μlMTT溶液（5mg/ml，即0.5%MTT），继续培养4h。
5）4h后扣板法倒去上清，用吸水纸轻轻拍干，每孔加入200μl二甲基亚砜，置摇床上低速振荡10min，使结晶物充分溶解。在酶联免疫检测仪490nm处测量各孔的吸光值。
6）同时设置本底（不加细胞，只加培养液），对照孔（细胞、相同浓度的药物溶解介质、培养液、MTT、二甲基亚砜），每组设定6个复孔。
7）结果以药物对细胞增值的抑制率表示：
细胞增值抑制率（%）=（对照孔OD值-给药孔OD值）/对照孔OD值×100%。实验重复3次。
3统计处理
采用MicrosoftExcel2003软件中的相关分析和Studentt检验，数据以mean±S.D表示。
4实验结果
MTT法实验后统计结果显示，与对照组比较，当剂量达到5mg/ml时，对MJ细胞增殖抑制有差异（P<0.05），剂量在10mg/ml时该差异具有显著性（P<0.01），当剂量达到15-20mg/ml时有极显著性差异（P<0.001）。
表1龙丹通络胶囊对MJ细胞增殖抑制影响研究
注：与对照组比较，*P<0.01；**P<0.001
5实验结论
龙丹通络胶囊可以抑制MJ细胞增殖，减少MJ细胞的细胞生长数目，该作用呈剂量依赖性。
Claims (1)
1.龙丹通络胶囊在制备抑制MJ细胞增殖药物中的应用。
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