CN103845571A - 一种治疗滑膜炎和骨性关节炎的药物组合物 - Google Patents
一种治疗滑膜炎和骨性关节炎的药物组合物 Download PDFInfo
- Publication number
- CN103845571A CN103845571A CN201210519959.7A CN201210519959A CN103845571A CN 103845571 A CN103845571 A CN 103845571A CN 201210519959 A CN201210519959 A CN 201210519959A CN 103845571 A CN103845571 A CN 103845571A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- pharmaceutical composition
- group
- rat
- compositions
- osteoarthritis
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Landscapes
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
Abstract
本发明公开了一种治疗滑膜炎和骨性关节炎的药物组合物,本发明药物组合物根据中医配伍理论,采用桑枝、赤芍、连翘、川芎、牛膝、绵萆薢、当归、黄芪、猪苓、泽泻、陈皮十一味药,共收清热祛湿,活血通络之功效;同时药效实验结果表明,其对滑膜炎与关节炎与对照药相比具有良好的治疗作用。
Description
发明领域
本发明涉及一种药物组合物,特别涉及一种治疗滑膜炎和骨性关节炎的药物组合物。
背景技术
滑膜炎是一种多发性疾病,其发病部位主要在膝关节。由于膝关节滑膜广泛并位于肢体表较浅部位,故遭受损伤和感染的机会较多,膝关节滑膜炎主要是因膝关节扭伤和多种关节内损伤,而造成的一组综合症。骨性关节炎(Knee Jio nt Osteo arthritis,简称KOA)是一种老年性多发病,属中医“骨痹”、“膝痛”范畴。其主要临床表现为缓慢发展的关节痛、僵硬、关节肿胀伴活动受限。目前中成药以滑膜炎为适应证的品种很少,西药治疗以非甾体类抗炎药为主,疗效确切,但副作用大,容易产生胃溃疡等不良反应。
发明内容
本发明的目的在于提供一种治疗滑膜炎和骨性关节炎的药物组合物。
本发明的目的是通过如下技术方案实现的:
本发明药物组合物的原料药组成为:
本发明药物组合物的原料药组成优选为:
本发明药物组合物的原料药组成进一步优选为:
或
或
本发明药物组合物加入常规辅料,按照常规工艺,制成药学上可接受的各种剂型,包括但不限于片剂、胶囊剂、颗粒剂、丸剂、口服液体制剂。
本发明药物组合物根据中医配伍理论,采用桑枝、赤芍、连翘、川芎、牛膝、绵萆薢、当归、黄芪、猪苓、泽泻、陈皮十一味药,共收清热祛湿,活血通络之功效;同时药效实验结果表明,其对滑膜炎与关节炎与对照药相比具有良好的治疗作用。
下述实验例和实施例用于进一步证明但不限于本发明。
实验例1:本发明药物组合物药效实验研究
一、实验材料
1.受试药物本发明药物组合物颗粒(由实施例2方法制备),含生药6.67g/g干浸膏粉,亚宝药业集团有限公司提供,批号110604。阳性对照药滑膜炎颗粒,神威药业有限公司产品,批号11041101。
2.剂量设计本发明药物组合物颗粒人临床日用量为48.0g生药,按60公斤体重计算,用药剂量为0.8g生药/kg体重;按动物与人公斤体重等效剂量折算,小鼠剂量为17.6g、8.8g、4.4g生药/kg;大鼠剂量为8.6g、4.3g、2.15g生药/kg;家兔剂量为5.0g、2.5g、1.25g生药/kg。中剂量相当于临床等效剂量,高剂量为中剂量的两倍,低剂量为中剂量的1/2。滑膜炎颗粒临床日用量为36.0g,折合0.6g/kg体重,小鼠用量13.2g/kg、大鼠用量6.5g/kg、家兔用量3.7g/kg为临床等效剂量的两倍。
3.动物:CD(SD)、Wistar大鼠和CD-1(ICR)小鼠,北京维通利华实验动物技术有限公司提供,动物许可证号分别为SCXK(京)2006-0009和SCXK(京)2011-0011;家兔,由北京沙河通利实验动物养殖场提供,动物许可证号为SCXK(京)2010-0004。饲养于屏障环境,室温22-25℃,自由进食与饮水。清洁级大、小鼠维持饲料,由北京科澳协力饲料有限公司提供,合格证号:京饲审(2009)06166。实验动物使用许可证号:SYXK(京)2008-0023,适用范围:屏障环境:小鼠、大鼠、豚鼠、兔,有效期为2008年11月17日至2013年11月17日。
4.试剂:木瓜蛋白酶,aladdin产品,批号:38549;L-半胱氨酸,CIVI-CHEM产品,批号:20110529;考马斯亮蓝蛋白、总超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)测定试剂盒,南京建成生物工程研究所生产,批号分别为:20111028、20111011和20111013;白介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子(TNF-α)测定试剂盒,批号:20110909;白介素-1(IL-1)和前列腺素E2(PGE2)测定试剂盒,批号:20111017,BlueGene公司产品;Freund’s完全佐剂,Sigma公司产品,批号F5881;角叉菜胶,Sigma公司产品,2011年分装;巴豆油,日本株式会社产品,批号DCCL7737;甲醛,北京化工厂生产,批号:980219。
5.仪器:PV-200足趾容积测量仪,成都泰盟科技有限公司产品;RCY-2热板测痛仪,冀星实验仪器有限公司生产;RT-6000酶标分析仪,深圳雷杜生命科学股份有限公司出品;AVE型半自动生化分析仪,爱威科技实业有限公司产品;SA-5000自动血流变测试仪,北京赛科希德科技发展有限公司产品;电热三用水箱,北京医疗设备厂有限责任公司生产;6K15型离心机,Sigma公司产品;微量加样器:5-50、50-200、1000μl和1-5ml等规格,瑞士SOCOREX产品。
二、方法和结果
1本发明药物组合物颗粒对关节炎模型动物的影响
1.1对骨性关节炎模型大鼠的影响
试验方法选取雄性SD大鼠,体重200-220g,按体重随机分为6组,分别为正常对照组、模型对照组、本发明药物组合物颗粒高、中、低三个剂量组和阳性对照药滑膜炎颗粒组,每组10只。除正常对照组外,分别在第1、3、7天,于大鼠右膝关节腔内注入4%木瓜蛋白酶溶液与0.3mol/L半胱氨酸溶液(1∶1),每只50μl。造模同时,分别灌胃给予本发明药物组合物颗粒高、中、低三个剂量和阳性药滑膜炎颗粒,正常和模型对照组给予相同体积的蒸馏水,灌胃体积为10ml/kg,每日一次,连续给药4周。末次药后1小时,用戊巴比妥钠30mg/kg腹腔注射麻醉,大鼠麻醉后,经腹主动脉取血,3000rmp/min离心15min,分离血清,测定血清总超氧化物歧化酶(SOD)活力及丙二醛(MDA)含量。同时取右侧膝关节滑膜组织进行病理组织学检查,对炎症程度进行判定。
炎症程度判定标准:
“-”:膝关节滑膜组织结构正常。
“±”:膝关节滑膜组织细胞增生不明显。
“+”:膝关节滑膜组织细胞轻度增生,间质有充血。
“++”:膝关节滑膜充血、瘀血明显,并有细胞增生。
“+++”:膝关节滑膜间质血管充血明显,滑膜增厚,炎症细胞增生活跃。
“++++”:膝关节滑膜组织明显瘀血,炎症细胞明显增生,骨膜明显增厚。
注:与模型对照组比较*P<0.05,**P<0.01。
表2本发明药物组合物颗粒对骨关节炎大鼠膝关节滑膜炎症程度的影响
注:秩和H0.05=78H0.01=71
试验结果以本发明药物组合物颗粒连续给药4周,所试剂量明显降低骨关节炎大鼠血清MDA含量,高、中剂量明显增加血清SOD活力,与模型对照组相比均有显著性差异(表1)。病理检查结果表明(详见病理报告一及照片):模型组大鼠部分膝关节滑膜明显增厚,滑膜细胞增生活跃,细胞明显增大、增多,间质瘀血。阳性药组和给药高、中、低三个不同剂量组大鼠膝关节滑膜增厚、细胞增多、瘀血等病变与模型组相比,有不同程度的减轻。经秩和检验分析,本发明药物组合物颗粒高、中剂量可明显改善大鼠关节炎症浸润,与模型对照组相比有显著性差异(表2)。结果表明,本发明药物组合物颗粒对大鼠骨性关节炎具有治疗作用。
1.2对家兔运动性膝关节创伤性滑膜炎的影响
试验方法选取体重2.2-2.5kg家兔,雌雄各半,按体重随机分为6组,分别为正常对照组、模型对照组、阳性对照药滑膜炎颗粒组(3.7g/kg)和本发明药物组合物颗粒高、中、低(5.0g、2.5g、1.25g生药/kg)三个剂量组,每组8只。用人工使膝关节不停的被动屈伸,每天两次,每次在10分钟内屈伸运动300次,共10天。造模同时开始灌胃给药,连续10天,每日一次,灌胃体积2ml/kg体重。实验第11天,用3%戊巴比妥钠按1ml/kg由耳缘静脉缓慢推注进行麻醉后,家兔颈动脉取血,3000rmp/min离心15min,分离血清,检测血清SOD活性和MDA含量。然后膝关节注射生理盐水1ml,回抽关节液,用考马斯亮蓝法检测其蛋白含量,并测定IL-1β和PGE2的含量,分别用pg/mg蛋白和ng/mg蛋白表示其水平。打开关节,取出滑膜组织,10%福尔马林溶液固定,石蜡切片,HE染色,进行病理切片炎症程度判定。
炎症程度判定标准:
“-”:膝关节滑膜未见充血、炎症,结构正常。
“±”:膝关节滑膜有充血、未见炎症。
“+”:膝关节滑膜有充血,细胞轻度增生。
“++”:膝关节滑膜充血明显,细胞增生明显。
“+++”:膝关节滑膜间质血管充血明显,滑膜增厚,炎症细胞增生活跃。
“++++”:膝关节滑膜增厚,严重充血、瘀血,大面积炎症细胞浸润。
表3本发明药物组合物颗粒对家兔膝关节液IL-1β和PGE2水平的影响
注:与模型对照组相比*P<0.05,**P<0.01。
表4本发明药物组合物颗粒对家兔血清SOD活性和MDA含量的影响
注:与模型对照组相比较*P<0.05,**P<0.01
表5本发明药物组合物颗粒对家兔膝关节滑膜炎症程度的影响
注:秩和H0.05=49H0.01=43
试验结果由表3、4可见,本发明药物组合物颗粒高剂量明显降低运动性膝关节创伤性滑膜炎家兔关节腔滑膜液中PGE2含量;高、中剂量明显增加血清SOD活力和降低血清MDA含量。病理检查结果表明(详见病理报告二及照片),模型组家兔部分膝关节滑膜有充血及出血点,有血管扩张,滑膜细胞增生活跃,滑膜明显增厚。本发明药物组合物颗粒高、中、低三个不同剂量组家兔膝关节滑膜病变与模型组相比,有不同程度减轻。经秩和检验分析,本发明药物组合物颗粒所试剂量明显改善大鼠关节炎症浸润,与模型对照组相比有显著性差异(表5)。结果表明本发明药物组合物颗粒对滑膜炎具有治疗作用。
1.3本发明药物组合物颗粒对大鼠佐剂性关节炎的影响
试验方法选取160-180g雄性大鼠,按体重随机分为6组,分别为正常对照组、模型对照组、阳性对照药滑膜炎颗粒组(6.5g/kg)和本发明药物组合物颗粒高、中、低(8.6g、4.3g、2.15g生药/kg)三个剂量组,每组10只。试验前,先用足趾容积测量仪测定大鼠左、右后足趾容积(ml)为基础值。于大鼠右后足垫皮内注射Freund’s完全佐剂0.1ml/只致炎,致炎第二天测量足趾容积后开始灌胃给药,连续24天,每日一次,灌胃容积为1ml/100g体重。分别于给药后4小时、第四天及以后每四天药后2小时测量各组大鼠右后足容积,药后第8天开始,每四天测量致炎对侧足容积,按下列公式计算各时间点肿胀值和抑制率,采用t检验分别比较各时间点给药组与模型对照组之间差异的显著性,并每8天称体重一次,计算体重增长值。给药24天后,大鼠眶静脉丛取血,离心,检测血清IL-6和TNF-α,并处死大鼠,摘取胸腺、脾脏器称重,计算重量指数,并分别按下式计算肿胀值(ml)和抑制率(%):
肿胀值(ml)=致炎后足趾容积(ml)-致炎前足趾容积(ml)
表6本发明药物组合物颗粒对佐剂性关节炎大鼠体重增长的影响(n=10)
注:与模型对照组相比*P<0.05,**P<0.01。
表10本发明药物组合物颗粒对佐剂性关节炎大鼠血清IL-6和TNF-α含量的影响
注:与模型对照组相比较*P<0.05,**P<0.01。
试验结果表6结果可见,注射佐剂后大鼠体重增长缓慢,本发明药物组合物颗粒各剂量组药后可不同程度地改善由佐剂引起的体重增长缓慢的状况,高剂量组体重增长与模型对照组相比有显著性差异。表7、8、9结果显示,模型对照组在致炎后12天左右踝关节肿胀达高峰,此后逐渐消退;本发明药物组合物颗粒高、中剂量给药组,在给药当天开始起效,与模型对照组相比有显著性差异,一直持续到实验结束;对致炎对侧足踝关节继发肿胀亦有不同程度的抑制作用;对胸腺、脾脏器指数无明显影响。由表10可见,本发明药物组合物颗粒高、中剂量对佐剂性关节炎大鼠血清TNF-α的升高有明显的抑制作用。结果提示:本发明药物组合物颗粒对大鼠佐剂性关节炎具有一定的治疗作用,可能是通过抑制炎症细胞因子TNF-α发挥作用。
2.本发明药物组合物颗粒对一般炎症的影响
2.1对小鼠耳壳巴豆油性炎症的影响
试验方法小鼠按体重随机分组(见表11),用2%巴豆油0.05ml涂于右耳前后两面,左耳为对照,致炎后半小时,分别灌胃给予本发明药物组合物颗粒(17.6g、8.8g、4.4g生药/kg)三个剂量和阳性对照药滑膜炎颗粒(13.2g/kg),模型对照组给予相同体积的蒸馏水。致炎后4小时将小鼠处死,沿耳廓基线剪下两耳,用直径8mm的不锈钢冲子在同一部位分别冲下耳片,称重。以左右耳片的重量差为肿胀值,用t检验进行统计学处理。
注:与模型对照组相比*P<0.05,**P<0.01。
试验结果本发明药物组合物颗粒高、中剂量对巴豆油引起的小鼠耳肿胀均有较强的抑制作用(表11)。提示本发明药物组合物颗粒具有一定的抗炎作用。
2.2对大鼠角叉菜胶性足肿胀的影响
试验方法160-180g SD健康大鼠50只,按体重随机分为5组,分别为模型对照组、阳性对照药滑膜炎颗粒(6.5g/kg)组和本发明药物组合物颗粒高、中、低(8.6g、4.3g、2.15g生药/kg)三个剂量组,每组10只。实验开始时,用足趾容积测量仪测定大鼠右后足容积(ml)为基础值,每组分别灌胃给予大鼠相应药液,灌胃容积为10ml/kg体重,模型对照组给予相同容积的蒸馏水。给药后1小时,于每只大鼠右侧后足跖中央皮下注射1%角叉菜胶溶液0.1ml,分别于致炎后1、2、4、6小时各测一次右后足跖容积,计算出肿胀值(致炎后与致炎前容积之差),分别比较各时间点给药组与模型对照组之间的差异性,按下列公式计算各时间点给药组的肿胀抑制率(%):
表12本发明药物组合物颗粒对大鼠角叉菜胶性足肿胀的影响(n=10)
注:与模型对照组相比*P<0.05,**P<0.01。
实验结果由表12可见,在6小时的观察期间,本发明药物组合物颗粒三个剂量对角叉菜胶性足肿胀均有不同程度的抑制作用,高、中剂量作用明显。提示本发明药物组合物颗粒具有一定的抗炎作用。
3.本发明药物组合物颗粒的镇痛作用
3.1本发明药物组合物颗粒对醋酸刺激致小鼠疼痛反应的影响(扭体法)
试验方法取健康小鼠,按体重随机分为5组,分别为模型对照组、阳性对照滑膜炎颗粒组、本发明药物组合物颗粒(17.6g、8.8g、4.4g生药/kg)三个剂量组,每组10只,每日灌胃给药一次,灌胃容积为0.2ml/10g体重(模型对照组给予相同容积的蒸馏水),连续三天。末次药后1小时,每鼠腹腔注射0.6%醋酸溶液0.2ml,记录致痛5分钟后15分钟内小鼠扭体次数,扭体数以t检验进行统计学处理。
表13本发明药物组合物颗粒对醋酸致小鼠扭体反应的影响
注:与模型对照组相比*P<0.05。
结果表13结果表明,本发明药物组合物颗粒可显著减少醋酸引起的小鼠扭体发生数,高、中剂量组小鼠扭体次数与模型对照组相比,有显著性差异。提示本发明药物组合物颗粒具有一定的镇痛作用。
3.2本发明药物组合物颗粒对热刺激致小鼠疼痛反应的影响(热板法)
实验方法选取体重20-21g小鼠,用热板测痛仪,记录小鼠自放入热板至出现舔足所需时间(秒),该时间作为小鼠的痛阈值,凡小鼠舔足时间小于5秒或大于30秒或跳跃者均弃之不用。将合格小鼠随机分为5组,分别为正常对照组、阳性对照药滑膜炎颗粒组和本发明药物组合物颗粒高、中、低三个剂量组,各组分别灌胃给予药物,每日一次,灌胃容积为0.2ml/10g体重,正常对照组给予相同容积的蒸馏水,连续3天。末次药后1小时和2小时,以前述方法测定痛阈值。以t检验进行统计学处理。
表14本发明药物组合物颗粒对热板致小鼠疼痛反应的影响
注:与正常对照组相比*P<0.05,**P<0.01。
试验结果采用小鼠热板法试验结果显示,本发明药物组合物颗粒所试剂量明显提高热刺激致小鼠疼痛的痛阈值,与正常对照组相比有显著性差异。提示本发明药物组合物颗粒具有一定的镇痛作用。
4.本发明药物组合物颗粒对肾上腺素结合冰水浸泡致大鼠血粘度增高的影响
实验方法选取Wistar大鼠,体重200-220g,按体重随机分为6组,分别为正常对照组、模型对照组、本发明药物组合物颗粒高、中、低三个剂量组和阳性对照药滑膜炎颗粒组,每组10只。分别灌胃给予药物,正常和模型对照组给予相同体积的蒸馏水,灌胃容积为10ml/kg,连续7天。末次药后1小时,除正常对照组外,其余大鼠皮下注射肾上腺素10μg/ml(0.08ml/100g体重)共2次,两次间隔4小时,在两次注射肾上腺素之间(前后各间隔2小时)将大鼠浸入冰水内5分钟,处置后禁食16小时,股动脉取血,肝素钠抗凝,测定1s-1、5s-1、50s-1、100s-1和200s-1切变率下的全血粘度。
试验结果本发明药物组合物颗粒所试剂量明显抑制皮下注射肾上腺素结合冰水浸泡致大鼠全血粘度增高,高、中剂量组大鼠在不同切变率下全血粘度值均明显低于模型对照组(表15)。提示本发明药物组合物颗粒具有一定的活血化瘀作用。
实验例2:药物组合物药效比较研究
一、实验材料
1.受试药物
组合物A:本发明药物组合物,按实施例2方法制备;
组合物B:川芎275g黄芪413g丹参413g猪苓413g 牛膝275g赤芍330g 泽泻330g 萆薢248g 连翘413g,按与组合物A同样方法制备;
组合物A、B均含生药6.67g/g干浸膏粉,亚宝药业集团股份有限公司提供。
2.剂量设计组合物A人临床日用量为48.0g生药,按60公斤体重计算,用药剂量为0.8g生药/kg体重;按动物与人公斤体重等效剂量折算,小鼠剂量为17.6g、8.8g、4.4g生药/kg;大鼠剂量为8.6g、4.3g、2.15g生药/kg;家兔剂量为5.0g、2.5g、1.25g生药/kg;中剂量相当于临床等效剂量,高剂量为中剂量的两倍,低剂量为中剂量的1/2。组合物B人临床日用量为48.0g生药,实验选用临床等效剂量的两倍,即小鼠剂量为17.6g生药/kg,大鼠剂量为8.6g生药/kg,家兔剂量为5.0g生药/kg。
3.动物同实验例1。
4.试剂:同实验例1。
5.仪器:同实验例1。
二、方法和结果
1组合物A、B对关节炎模型动物的影响
1.1对骨性关节炎模型大鼠的影响
试验方法选取雄性SD大鼠,体重200-220g,按体重随机分为6组,分别为正常对照组、模型对照组、组合物A高、中、低三个剂量组和组合物B组,每组10只。除正常对照组外,分别在第1、3、7天,于大鼠右膝关节腔内注入4%木瓜蛋白酶溶液与0.3mol/L半胱氨酸溶液(1∶1),每只50μl。造模同时,分别灌胃给予组合物A高、中、低三个剂量和组合物B,正常和模型对照组给予相同体积的蒸馏水,灌胃体积为10ml/kg,每日一次,连续给药4周。末次药后1小时,用戊巴比妥钠30mg/kg腹腔注射麻醉,大鼠麻醉后,经腹主动脉取血,3000rmp/min离心15min,分离血清,测定血清总超氧化物歧化酶(SOD)活力及丙二醛(MDA)含量。同时取右侧膝关节滑膜组织进行病理组织学检查,对炎症程度进行判定。
注:与模型对照组比较*P<0.05,**P<0.01。
表17镜下大鼠膝关节滑膜炎症统计
炎症程度判定标准:
“-”:膝关节滑膜组织结构正常。
“±”:膝关节滑膜组织细胞增生不明显。
“+”:膝关节滑膜组织细胞轻度增生,间质有充血。
“++”:膝关节滑膜充血、瘀血明显,并有细胞增生。
“+++”:膝关节滑膜间质血管充血明显,滑膜增厚,炎症细胞增生活跃。
“++++”:膝关节滑膜组织明显瘀血,炎症细胞明显增生,骨膜明显增厚。
表18组合物A、B对骨关节炎大鼠膝关节滑膜炎症程度的影响
注:秩和H0.05=78H0.01=71
试验结果以组合物A连续给药4周,所试剂量明显降低骨关节炎大鼠血清MDA含量,高、中剂量明显增加血清SOD活力,与模型对照组相比均有显著性差异(表16)。病理检查结果表明:模型组大鼠部分膝关节滑膜明显增厚,滑膜细胞增生活跃,细胞明显增大、增多,间质瘀血。组合物A高、中、低三个不同剂量组和组合物B组大鼠膝关节滑膜增厚、细胞增多、瘀血等病变与模型组相比,有不同程度的减轻。经秩和检验分析,组合物A高、中剂量可明显改善大鼠关节炎症浸润,与模型对照组相比有显著性差异(表17-18)。结果表明,组合物A对大鼠骨性关节炎具有治疗作用。
1.2对家兔运动性膝关节创伤性滑膜炎的影响
试验方法选取体重2.2-2.5kg家兔,雌雄各半,按体重随机分为6组,分别为正常对照组、模型对照组、组合物B组和组合物A高、中、低三个剂量组,每组8只。用人工使膝关节不停的被动屈伸,每天两次,每次在10分钟内屈伸运动300次,共10天。造模同时开始灌胃给药,连续10天,每日一次,灌胃体积2ml/kg体重。实验第11天,用3%戊巴比妥钠按1ml/kg由耳缘静脉缓慢推注进行麻醉后,家兔颈动脉取血,3000rmp/min离心15min,分离血清,检测血清SOD活性和MDA含量。然后膝关节注射生理盐水1ml,回抽关节液,用考马斯亮蓝法检测其蛋白含量,并测定IL-1β和PGE2的含量,分别用pg/mg蛋白和ng/mg蛋白表示其水平。打开关节,取出滑膜组织,10%福尔马林溶液固定,石蜡切片,HE染色,进行病理切片炎症程度判定。
注:与模型对照组相比*P<0.05,**P<0.01。
注:与模型对照组相比较*P<0.05,**P<0.01
表21镜下家兔膝关节滑膜炎症半定量统计
炎症程度判定标准:
“-”:膝关节滑膜未见充血、炎症,结构正常。
“±”:膝关节滑膜有充血、未见炎症。
“+”:膝关节滑膜有充血,细胞轻度增生。
“++”:膝关节滑膜充血明显,细胞增生明显。
“+++”:膝关节滑膜间质血管充血明显,滑膜增厚,炎症细胞增生活跃。
“++++”:膝关节滑膜增厚,严重充血、瘀血,大面积炎症细胞浸润。
表22组合物A、B对家兔膝关节滑膜炎症程度的影响
注:秩和H0.05=49H0.01=43
试验结果由表19、20可见,组合物A高剂量明显降低运动性膝关节创伤性滑膜炎家兔关节腔滑膜液中PGE2含量;高、中剂量明显增加血清SOD活力和降低血清MDA含量。病理检查结果表明,模型组家兔部分膝关节滑膜有充血及出血点,有血管扩张,滑膜细胞增生活跃,滑膜明显增厚。组合物A高、中、低三个不同剂量组家兔膝关节滑膜病变与模型组相比,有不同程度减轻。经秩和检验分析,组合物A所试剂量明显改善大鼠关节炎症浸润,与模型对照组相比有显著性差异(表20)。结果表明组合物A对滑膜炎具有治疗作用。
1.3组合物A、B对大鼠佐剂性关节炎的影响
试验方法选取160-180g雄性大鼠,按体重随机分为6组,分别为正常对照组、模型对照组、组合物B组和组合物A高、中、低三个剂量组,每组10只。试验前,先用足趾容积测量仪测定大鼠左、右后足趾容积(ml)为基础值。于大鼠右后足垫皮内注射Freund’s完全佐剂0.1ml/只致炎,致炎第二天测量足趾容积后开始灌胃给药,连续24天,每日一次,灌胃容积为1ml/100g体重。分别于给药后4小时、第四天及以后每四天药后2小时测量各组大鼠右后足容积,药后第8天开始,每四天测量致炎对侧足容积,按下列公式计算各时间点肿胀值和抑制率,采用t检验分别比较各时间点给药组与模型对照组之间差异的显著性,并每8天称体重一次,计算体重增长值。给药24天后,大鼠眶静脉丛取血,离心,检测血清IL-6和TNF-α,并处死大鼠,摘取胸腺、脾脏器称重,计算重量指数,并分别按下式计算肿胀值(ml)和抑制率(%):
肿胀值(ml)=致炎后足趾容积(ml)-致炎前足趾容积(ml)
注:与模型对照组相比*P<0.05,**P<0.01。
表27组合物A、B对佐剂性关节炎大鼠血清IL-6和TNF-α含量的影响
注:与模型对照组相比较*P<0.05,**P<0.01。
试验结果表23结果可见,注射佐剂后大鼠体重增长缓慢,组合物A各剂量组药后可不同程度地改善由佐剂引起的体重增长缓慢的状况,高剂量组体重增长与模型对照组相比有显著性差异。表24、25、26结果显示,模型对照组在致炎后12天左右踝关节肿胀达高峰,此后逐渐消退;组合物A高、中剂量给药组,在给药当天开始起效,与模型对照组相比有显著性差异,一直持续到实验结束;对致炎对侧足踝关节继发肿胀亦有不同程度的抑制作用;对胸腺、脾脏器指数无明显影响。由表27可见,组合物A高、中剂量对佐剂性关节炎大鼠血清TNF-α的升高有明显的抑制作用。结果提示:组合物A对大鼠佐剂性关节炎具有一定的治疗作用,可能是通过抑制炎症细胞因子TNF-α发挥作用。
2.组合物A、B对一般炎症的影响
2.1对小鼠耳壳巴豆油性炎症的影响
试验方法小鼠按体重随机分组(见表28),用2%巴豆油0.05ml涂于右耳前后两面,左耳为对照,致炎后半小时,分别灌胃给予组合物A三个剂量和组合物B,模型对照组给予相同体积的蒸馏水。致炎后4小时将小鼠处死,沿耳廓基线剪下两耳,用直径8mm的不锈钢冲子在同一部位分别冲下耳片,称重。以左右耳片的重量差为肿胀值,用t检验进行统计学处理。
注:与模型对照组相比*P<0.05,**P<0.01。
试验结果组合物A高、中剂量对巴豆油引起的小鼠耳肿胀均有较强的抑制作用(表28)。提示组合物A具有一定的抗炎作用。
2.2对大鼠角叉菜胶性足肿胀的影响
试验方法160-180g SD健康大鼠50只,按体重随机分为5组,分别为模型对照组、组合物B组和组合物A高、中、低三个剂量组,每组10只。实验开始时,用足趾容积测量仪测定大鼠右后足容积(ml)为基础值,每组分别灌胃给予大鼠相应药液,灌胃容积为10ml/kg体重,模型对照组给予相同容积的蒸馏水。给药后1小时,于每只大鼠右侧后足跖中央皮下注射1%角叉菜胶溶液0.1ml,分别于致炎后1、2、4、6小时各测一次右后足跖容积,计算出肿胀值(致炎后与致炎前容积之差),分别比较各时间点给药组与模型对照组之间的差异性,按下列公式计算各时间点给药组的肿胀抑制率(%):
表29组合物A、B对大鼠角叉菜胶性足肿胀的影响(n=10)
注:与模型对照组相比*P<0.05,**P<0.01。
实验结果由表29可见,在6小时的观察期间,组合物A三个剂量对角叉菜胶性足肿胀均有不同程度的抑制作用,高、中剂量作用明显。提示组合物A具有一定的抗炎作用。
3.组合物A、B的镇痛作用
3.1组合物A、B对醋酸刺激致小鼠疼痛反应的影响(扭体法)
试验方法取健康小鼠,按体重随机分为5组,分别为模型对照组、组合物B组、组合物A三个剂量组,每组10只,每日灌胃给药一次,灌胃容积为0.2ml/10g体重(模型对照组给予相同容积的蒸馏水),连续三天。末次药后1小时,每鼠腹腔注射0.6%醋酸溶液0.2ml,记录致痛5分钟后15分钟内小鼠扭体次数,扭体数以t检验进行统计学处理。
表30组合物A、B对醋酸致小鼠扭体反应的影响
注:与模型对照组相比*P<0.05。
结果表30结果表明,组合物A可显著减少醋酸引起的小鼠扭体发生数,高、中剂量组小鼠扭体次数与模型对照组相比,有显著性差异。提示组合物A具有一定的镇痛作用。
3.2组合物A、B对热刺激致小鼠疼痛反应的影响(热板法)
实验方法选取体重20-21g小鼠,用热板测痛仪,记录小鼠自放入热板至出现舔足所需时间(秒),该时间作为小鼠的痛阈值,凡小鼠舔足时间小于5秒或大于30秒或跳跃者均弃之不用。将合格小鼠随机分为5组,分别为正常对照组、组合物B组和组合物A高、中、低三个剂量组,各组分别灌胃给予药物,每日一次,灌胃容积为0.2ml/10g体重,正常对照组给予相同容积的蒸馏水,连续3天。末次药后1小时和2小时,以前述方法测定痛阈值。以t检验进行统计学处理。
注:与正常对照组相比*P<0.05,**P<0.01。
试验结果采用小鼠热板法试验结果显示,组合物A所试剂量明显提高热刺激致小鼠疼痛的痛阈值,与正常对照组相比有显著性差异。提示组合物A具有一定的镇痛作用。
4.组合物A、B对肾上腺素结合冰水浸泡致大鼠血粘度增高的影响
实验方法选取Wistar大鼠,体重200-220g,按体重随机分为6组,分别为正常对照组、模型对照组、组合物A高、中、低三个剂量组和组合物B组,每组10只。分别灌胃给予药物,正常和模型对照组给予相同体积的蒸馏水,灌胃容积为10ml/kg,连续7天。末次药后1小时,除正常对照组外,其余大鼠皮下注射肾上腺素10μg/ml(0.08ml/100g体重)共2次,两次间隔4小时,在两次注射肾上腺素之间(前后各间隔2小时)将大鼠浸入冰水内5分钟,处置后禁食16小时,股动脉取血,肝素钠抗凝,测定1s-1、5s-1、50s-1、100s-1和200s-1切变率下的全血粘度。
试验结果组合物A所试剂量明显抑制皮下注射肾上腺素结合冰水浸泡致大鼠全血粘度增高,高、中剂量组大鼠在不同切变率下全血粘度值均明显低于模型对照组(表32)。提示组合物A具有一定的活血化瘀作用。
具体实施方式
实施例1:片剂
取上述原料药,加入常规辅料,按照常规工艺制成片剂。
实施例2:颗粒剂
取上述原料药,加入常规辅料,按照常规工艺制成颗粒剂。
实施例3:丸剂
取上述原料药,加入常规辅料,按照常规工艺,制成丸剂。
实施例4:胶囊剂
取上述原料药,加入常规辅料,按照常规工艺制成胶囊剂。
实施例5:口服液
取上述原料药,加入常规辅料,按照常规工艺制成口服液。
Claims (9)
4.如权利要求1所述的药物组合物,其特征在于该药物组合物的原料药组成为:
6.如权利要求1-5任一所述的药物组合物,其特征在于加入常规辅料,按照常规工艺,制成药学上可接受的各种剂型,包括但不限于片剂、胶囊剂、颗粒剂、丸剂、口服液体制剂。
7.如权利要求1-6任一所述的药物组合物在制备治疗滑膜炎和骨性关节炎的药物中的应用。
8.如权利要求7所述的应用,其特征在于所述滑膜炎为膝关节创伤性滑膜炎。
9.如权利要求7所述的应用,其特征在于所述骨性关节炎为膝骨性关节炎。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201210519959.7A CN103845571B (zh) | 2012-12-07 | 2012-12-07 | 一种治疗滑膜炎和骨性关节炎的药物组合物 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201210519959.7A CN103845571B (zh) | 2012-12-07 | 2012-12-07 | 一种治疗滑膜炎和骨性关节炎的药物组合物 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN103845571A true CN103845571A (zh) | 2014-06-11 |
CN103845571B CN103845571B (zh) | 2016-12-21 |
Family
ID=50853975
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201210519959.7A Active CN103845571B (zh) | 2012-12-07 | 2012-12-07 | 一种治疗滑膜炎和骨性关节炎的药物组合物 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN103845571B (zh) |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN104096142A (zh) * | 2014-07-16 | 2014-10-15 | 刘斌 | 一种治疗关节炎、关节疼痛的药物 |
CN104721462A (zh) * | 2013-12-20 | 2015-06-24 | 亚宝药业集团股份有限公司 | 一种治疗滑膜炎和骨性关节炎的药物组合物及其制备方法 |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1562308A (zh) * | 2004-04-09 | 2005-01-12 | 梁玉青 | 一种治疗滑膜炎的中药及其制备方法 |
WO2011048221A1 (de) * | 2009-10-22 | 2011-04-28 | Bionorica Se | Entzündungshemmendes mittel enthaltend hydrolysate aus pflanzenextrakten |
-
2012
- 2012-12-07 CN CN201210519959.7A patent/CN103845571B/zh active Active
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1562308A (zh) * | 2004-04-09 | 2005-01-12 | 梁玉青 | 一种治疗滑膜炎的中药及其制备方法 |
WO2011048221A1 (de) * | 2009-10-22 | 2011-04-28 | Bionorica Se | Entzündungshemmendes mittel enthaltend hydrolysate aus pflanzenextrakten |
Non-Patent Citations (3)
Title |
---|
徐元贞等: "《中华方药宝典》", 31 March 2012, 河南科学技术出版社 * |
沈洪等: "《中医临证膏方指南》", 31 October 2009, 东南大学出版社 * |
高学敏等: "《临床中药学》", 31 January 2006, 河北科学技术出版社 * |
Cited By (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN104721462A (zh) * | 2013-12-20 | 2015-06-24 | 亚宝药业集团股份有限公司 | 一种治疗滑膜炎和骨性关节炎的药物组合物及其制备方法 |
CN104721462B (zh) * | 2013-12-20 | 2018-11-27 | 亚宝药业集团股份有限公司 | 一种治疗滑膜炎和骨性关节炎的药物组合物及其制备方法 |
CN104096142A (zh) * | 2014-07-16 | 2014-10-15 | 刘斌 | 一种治疗关节炎、关节疼痛的药物 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN103845571B (zh) | 2016-12-21 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN103263659B (zh) | 一种治疗风湿骨病的中药组合物 | |
CN103933410A (zh) | 一种中药组合物的医药用途及其制备方法 | |
CN103405582B (zh) | 改善类风湿关节炎关节肿痛的中药组合物 | |
CN101537159B (zh) | 一种中药组合物及其制备方法和应用 | |
CN103845571A (zh) | 一种治疗滑膜炎和骨性关节炎的药物组合物 | |
CN100420454C (zh) | 用于治疗中风病的药物组合物和其制备方法 | |
CN101254186A (zh) | 一种杨梅素的医药新用途 | |
CN103316166B (zh) | 一种治疗痔疮的藏药及其制备方法 | |
CN101007044A (zh) | 一种治疗溃疡病的药物组合物及其制备方法和用途 | |
CN104721462B (zh) | 一种治疗滑膜炎和骨性关节炎的药物组合物及其制备方法 | |
CN103585539A (zh) | 一种治疗更年期综合症的中药组合物 | |
CN103006832B (zh) | 一种升血小板中药组合物及其制备方法 | |
CN102068585A (zh) | 一种治疗慢性肾炎、肾病综合症的中药复方制剂 | |
CN102488821B (zh) | 一种治疗骨折的中药组合物及其制备方法 | |
CN102357232B (zh) | 治疗乳腺疾病的中药及其制备方法 | |
CN101884756B (zh) | 祛风除湿、活络止痛的药物组合物及制法、制剂与用途 | |
CN104352633A (zh) | 一种治疗骨关节病的药物组合物的制备方法 | |
CN104274720A (zh) | 一种排石通淋的中药组合物 | |
CN103830464A (zh) | 一种用于治疗中风的中药组合物及其制备方法 | |
CN103479814A (zh) | 一种治疗痛风的中药组合物 | |
CN103768305A (zh) | 一种治疗脾虚腹泻型肠易激综合症的药物及其制造方法 | |
CN104208263B (zh) | 一种中药组合物、制备方法及应用 | |
CN101897766B (zh) | 抗炎镇痛药物组合物及其制备方法和用途 | |
CN103386010B (zh) | 一种治疗疮疡的药物及其制备方法 | |
CN101884664A (zh) | 一种防治类风湿性关节炎的药物组合物及其制备方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
C14 | Grant of patent or utility model | ||
GR01 | Patent grant |