CN1038454A - 硒化卡拉胶的制法 - Google Patents

Abstract

本发明是关于硒化卡拉胶的制法。硒化卡拉胶系水溶胶状态卡拉胶，在强酸性条件下部分硫为硒取代形成硒酸酯，其未端单元的3.6-内醚-D-半乳糖在C-1开环形成C-Se-H结构。经动物试验证明硒化Kappa-卡拉胶较之当前可供应用的最佳硒化物—亚硒酸钠毒性低数百倍，且具有更好的生物可利用性和生理增益效应。可望在保健和临床治疗方面有广阔的应用前景。

Description

本发明属于有机硒化物的制备方法。硒是人和动物的必需微量元素。目前最引人关注的是硒的抗氧化，抑制化学物质致突变和增强机体免疫能力等作用，及其在人类防癌、抗衰老、预防和治疗心血管病患、克山病、大骨节病以及家畜白肌病等的应用。

使用亚硒酸钠对克山病急性发作，预防大骨节病及降低肝癌发病率均取得了良好效果，但无机硒的毒性高于有机硒。近年来，采取喷洒于植物株或对土壤施用无机硒以作为人体及牲畜增加有机硒的来源，但其生物效应有待进一步阐明（徐辉碧编著《生物微量元素一硒》华中工学院出版社，1983年）。一种有机硒化合物-硒酵母已有制剂（《微量元素》1985，no.4        P.28）但产品组成不稳定，含硒量较低，生物利用度也不理想（刘曼西等“硒酵母成分的研究”《华中工学院学报》1985年no.3）.因之人们正致力于寻求低毒而生物可利用性良好的其他有机硒化物。

本发明的目的是制备一类低毒而具有良好生物利用度的有机硒化物，以供医疗保健的安全应用。

本发明的硒化卡拉胶的制备步骤如下：

（1）以浓硝酸溶解硒粉后，用无离子水配制成浓度为0.5-1.0毫克/毫升的硒液。

（2）按0.5-5%的配比量（重量/体积）将卡拉胶（指kappa-卡拉胶或Lambda-卡拉胶）加入到0.5克分子浓度的氯化钠水溶液中控制在75-100℃温度下加热搅拌，使成均一的卡拉胶溶胶液。

（3）将上述卡拉胶均匀溶胶液在pH0.5-2.5条件下于50-80℃反应2-4小时后，继续于25-30℃反应12-24小时。

（4）按反应液1-2倍量（体积）加95%乙醇沉析硒化产物，过滤后对滤出物依次用95%乙醇、无水乙醇洗涤。在75℃以下通风干燥，经粉碎，φ0.2mm过筛，得到产物硒化卡拉胶。

产物的红外光谱，¹³C-核磁共振、x-光电子能谱、激光拉曼光谱及紫外吸收特性测定表明，硒化产物仍保持硫酸酯多糖的基本构型。其中硒以两个不同价态存在，即卡拉胶中的部分硫为硒取代形成硒酸酯;而其末端单元的3.6-内醚-D-半乳糖在C-1开环形成C-Se-H结构。

产物的含硒量是2500-15000ppm.

产物分子量分级及标定：待分级的硒化卡拉胶用无离子水配成5%溶液，4000转/每分钟离心20分钟后，取上层清液

凝胶柱上分离，柱温25℃，洗脱液为5毫克分子磷酸钠，0.2克分子氯化钠，pH7.0，分部收集后测定[α]18_D。分子量以0.2% Dextran标定。

本发明的制取有机硒化物-硒化卡拉胶的方法，由于所用原料-卡拉胶来源于我国海南岛可大量采取到的两种沙菜红藻中，原料易得，而且硒化卡拉胶的制备工艺简单，因此生产成本低。尤其是由本发明方法制得的硒化卡拉胶，经动物试验证明较之当前应用最佳的硒化物-亚硒酸钠具有更好生物可利用性和生理增益效应：如含硒1100ppm的硒化Kappa-卡拉胶，小鼠口服LD₅₀的95%可信限为4.98-2.66克/公斤，毒性仅为亚硒酸钠的数百分之一，比已有的有机硒化合物毒性也低[J.A.Vinson，硒在生物学与医学中的作用-第三届国际专题讨论会，1984，北京）。经动物试验证明，饲用硒化Kappa-卡拉胶较之亚硒酸钠血硒水平增高23%，红细胞对过氧化氢的稳定性增高50%，血红蛋白增高22%，红细胞抑制自由基能力增高55%（如表1、表2）。

动物试验还证明，饮水添饲硒化Kappa-卡拉胶，有显著的抗r-射线电离辐射效应和拮抗真菌毒素毒性的作用，长期低剂量添饲硒化Kappa-卡拉胶对小鼠有显著延缓衰老的作用。

因此，硒化卡拉胶可望代替亚硒酸钠在保健和临床治疗等方面有着广阔的应用前景。

实例1：

甲、硒粉20克，加100毫升浓硝酸，硒粉完全溶解后加无离子水1800毫升，50%        NaoH调pH至1.0，定容至2000毫升;乙，40克Kappa-卡拉胶或Lambda-卡拉胶于2000毫升0.5克分子氯化钠水溶液中溶胶化后。加入甲液，充分混合后于50℃反应2小时后，继续于30℃反应24小时，冷却后，加1-2倍95%乙醇沉析硒化产物，过滤后，依次用95%乙醇、无水乙醇洗涤滤出物，然后在75℃以下通风干燥，粉碎，φ0.2毫米目过筛，得产物硒化卡拉胶。

实例2：

甲、硒粉2.5克，加12.5毫升浓硝酸，硒粉完全溶解后，加无离子水1500毫升;乙，50克Kappa-卡拉胶或Lambda-卡拉胶，加1000ml        0.5克分子氯化钠水溶胶化后，加入甲液，充分混合后，于70℃反应4小时后，继续于30℃反应12小时以后，加入1-2倍95%乙醇沉析硒化产物，按实例1、方法洗涤、干燥、粉碎、过筛得产物。

实例3：

甲、硒粉400毫克，加50毫升浓硝酸，硒粉完全溶解后，加无离子水1800毫升，用50%        NaoH调pH至2.0，定量至2000毫升;乙、40克Kappa-卡拉胶或Lambda-卡拉胶，于2000毫升0.5克分子氯化钠水溶液中溶胶化后，加入甲液，充分混合后，于60℃反应3小时，继续在25℃反应20小时后，按实例1、方法处理得产物。

实例4：

甲、硒粉2.5克，加62.5毫升浓硝酸，硒粉完全溶解后，加无离子水定容至1500毫升，以50%        NaoH调pH至1.0;乙、25克Lambda-卡拉胶，于1000毫升0.5克分子氯化钠水溶胶化后，加入甲液，充分混合后，于60℃反应2小时，继续于25℃反应22小时后按实例1方法处理制得硒化Lambda-卡拉胶。

实例5：

甲、硒粉10克，加50毫升浓硝酸，硒粉完全溶解后以无离子水定容至6000毫升;乙、100克Kappa-卡拉胶，于4000毫升0.5克分子氯化钠水溶液中溶胶化后，加入甲液，充分混合后，于50℃反应4小时后，继续在25℃反应12小时后，按实例1的方法制得硒化Kappa卡拉胶。

实例6：

乙、取Kappa-卡拉胶200克于4000毫升氯化钠水溶液中溶胶化，其他条件同实例5。

Claims (1)

1. 一种制备含硒有机化合物的方法，其特征在于用卡拉胶和硒制取硒化卡拉胶，其合成步骤是：

   1、以浓硝酸溶解硒粉后，用无离子水配制成浓度为0.5-1.0毫克硒/毫升的硒液；

   2、按0.5-5%的量（重量/体积）将卡拉胶加入到0.5克分子浓度的氯化钠溶液中，然后

   （2.1）在75-100℃下加热搅拌，使成均匀的卡拉胶溶胶液;

   （2.2）所述的卡拉胶是Kappa-卡拉胶，也可以是（Lambda-卡拉胶;

   3、将（2）均匀的卡拉胶溶胶液在pH＝0.5-2.5条件下，于50-80℃反应2-4小时后，

   （3.1）继续在25-30℃下反应12-24小时;

   4、按（3.1）反应液的1-2倍量（体积）加入95%乙醇沉析硒化产物;

   （4.1）过滤，然后

   （4.2）依次用95%乙醇，无水乙醇洗涤滤出物;

   （4.3）将滤出物在75℃通风干燥;

   （4.4）粉碎，经φ0.2毫米目过筛。