CN103784357B

CN103784357B - 一种芒果活性部位在制备美白化妆品中的应用

Info

Publication number: CN103784357B
Application number: CN201210422231.2A
Authority: CN
Inventors: 金家宏; 夏增华; 曹平
Original assignee: JALA CORP
Current assignee: Shanghai Natural Hall Group Co ltd
Priority date: 2012-10-29
Filing date: 2012-10-29
Publication date: 2016-05-18
Anticipated expiration: 2032-10-29
Also published as: CN103784357A

Abstract

本发明涉及植物提取物及所述植物提取物在具有美白作用的化妆品领域中的应用，公开了一种芒果活性部位，制备方法为取芒果干燥粉末，以乙醇提取，滤液合并，减压回收溶剂，得到芒果粗提物；芒果粗提物经大孔吸附树脂吸附，以乙醇洗脱，收集流份，蒸干，得到芒果活性部位。通过上述方法得到的芒果活性部位，是一种天然的具有抑制酪氨酸酶作用的植物提取物，对人体无副作用，可用于制备具有美白作用的化妆品。

Description

一种芒果活性部位在制备美白化妆品中的应用

技术领域

本发明涉及植物提取物和日化领域，具体为芒果活性部位及其在制备美白化妆品中的应用。

背景技术

近年来，随着人们生活水平和审美标准的提高，越来越多的人追求、渴望白皙及洁润的肌肤。因此，具有防止由太阳光线及其它原因引起的色斑、色素沉着作用的美白类化妆品以及皮肤美白制剂的研究与开发，正日益受到各国化妆品生产商和研究者的重视，美白和抗氧化化妆品已成为护肤类化妆品的主流品种之一。

然而，随着化学合成化妆品中毒事件的频频发生，人们开始热衷于植物化妆品及回归自然的美容方法。

造成皮肤黑色素生成的原因有：遗传因素；紫外线、废气、活性氧等环境因素；体内氧化与抗氧化平衡失调；内分泌失调；微生态失衡；代谢紊乱；机体微量元素含量异常等。祖国医学则认为色素沉着的主要病因是：①肝气郁结；②肾阴不足；③气血淤阻；④劳伤脾土。在治疗上，全身疗法以疏肝、补肾、活血、益气健脾为主，外用以中药面膜和霜、膏剂居多。但此类资料多以临床报道为主，缺乏严密的科研设计、实验室研究和统计学处理。至今为止，也尚末发现开发出治疗“黄褐斑”中药搽剂的文献报道。因此，寻找高效且对人体无副作用或副作用小的美白祛斑制剂已成为目前药学及化妆品领域的一个研究热点。

美白机理美白剂的作用是通过抑制酪氨酸酶活性或者阻断酪氨酸生成黑色素的氧化途径，从而减少黑色素生成达到美白皮肤的效果。皮肤美白剂就是作用于皮肤黑色素生成、代谢过程中，抑制黑色素生成且符合规范的物质，但传统的皮肤美白剂，往往采用化学性物质，如具有增白作用的汞盐和祛斑作用的氢醌。这些化合物虽然有快速达到美白之功效，但对皮肤有毒副作用，长期使用会引起接触性皮炎或引起永久脱色等不良作用，在许多国家已被禁用。目前要求的皮肤美白剂应该符合两个标准：一是对酪氨酸酶活性有较高的抑制率，能显著的减少黑色素的生成；二是有较高的安全性，以人体皮肤无毒无刺激。熊果苷、VC及其衍生物和曲酸是目前国内外美白化妆品中较常使用的美白成分。为了开发符合“回归大自然”要求的化妆品，特别是安全，无副作用的美白产品，一些具有很好美白效果的中草药目前越来越受到消费者的青睐。在国际上化妆品发展最有代表性的国家美国、日本、法国和德国等国家中，中草药因其天然药效温和且不良作用少而被广泛认同，从中了解到近年来崇尚自然，远离化学污染的理念。特别是日本化妆品工业的发展趋势看，各化妆品公司使用的中草药已达200余种，目前，在日本含天然中草药的化妆品已占整个化妆品市场的50％以上。因此，寻找开发高效且对人体无副作用或副作用小的天然中草药皮肤美白祛斑制剂已成为目前化妆品领域的一个较被重视的课题。

芒果为漆树科植物芒果(MangiferaindicaLinn)的果实，为著名热带水果之一，素有“热带果王”之誉称。芒果品质极佳，营养价值很高，每100g鲜果含维生素C56mg，含糖11％，还含有丰富的维生素A、维生素B、维生素B2、蛋白质、胡萝卜素、淀粉、叶酸等。芒果含有多酚、黄酮和萜类化合物，具有抗脂质过氧化、抗病毒、抗肿瘤、抗菌、调节免疫、抗炎、祛痰、保肝利胆等作用，可用于治疗热滞腹痛、气胀、小儿疳积、消渴等症。

近年来对芒果的化学成分和生物活性研究发现芒果核含抗坏血酸、鞣花酸、没食子酸、没食子酸甲酯、儿茶素等化合物，具有行气散结,化痰消滞功效，可用于外感食滞引起的咳嗽痰多、胃脘饱胀和疝气痛，在体外对志贺痢疾杆菌、福氏痢疾杆菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯菌、伤寒沙门菌等肠道与呼吸道致病细菌有抑制作用，此外，还对香蕉黑星病菌、番木瓜疫霉病菌和番木瓜炭疽病菌等水果真菌显示抑制活性；芒果皮含有挥发油、黄烷醇类、花色苷类、黄酮类、类黄酮类、黄酮醇类和酚酸类、类胡萝卜素、没食子酸和芒果苷等成分，具有抗氧化、增强免疫调节、止咳、化痰和促进气管分泌的作用，其中的多酚对由H₂O₂引起的小鼠红血球的氧化危害具有保护作用，对其引起的红血球氧化溶血和膜蛋白质降级具有抑制作用，可保护由过氧化氢引起的红血球膜的改变。

综合现有文献资料，未发现芒果及其所含成分具有美白作用和抗氧化作用的文献和专利报道。

发明内容

本发明旨在提供一种芒果活性部位及其在美白化妆品领域中的应用。

本发明所要解决的技术问题是在于寻找开发高效且对人体无副作用或副作用小的天然植物抗氧化和美白制剂。本发明提供了一种芒果活性部位的制备方法及在抗氧化和美白领域有应用潜能的芒果活性部位。

一种芒果活性部位的提取方法，步骤包括：

(1)取干燥的芒果粉末，加入乙醇溶液冷浸后提取2～5次，取滤液；

提取方法为常温下(10～30℃)用体积浓度为30％～95％乙醇溶液(优选为60％～75％)冷浸、超声提取10～60分钟；每次提取时，乙醇溶液与芒果粉末的用量比为5～15ml/g；

(2)合并滤液，去除乙醇后用大孔吸附树脂吸附，再用体积浓度为30％～90％的乙醇溶液(优选为30％～70％，最优选50％)洗脱，收集流分干燥；所述的大孔吸附树脂优选为AB-8树脂。

本发明的技术方案为，取芒果，干燥、粉碎成粗粉，取干燥粉末，以乙醇提取，滤液合并，减压回收溶剂，得到芒果粗提物；芒果粗提物经大孔吸附树脂吸附，以乙醇洗脱，收集流份，蒸干，得到芒果活性部位。测定所得到的活性部位酪氨酸酶抑制作用，其中30％～70％(体积浓度)乙醇溶液洗脱部位具有良好的美白的作用，尤其是50％(体积浓度)乙醇溶液洗脱部位，效果最佳。

通过上述方法得到的芒果活性部位，是一种天然的植物美白提取物，对人体无副作用，在美白化妆品领域有应用潜能。这种芒果活性部位可用于制备具有美白作用的化妆品：如化妆水、爽肤水、乳液、霜膏、洁面霜等。

具体实施方式

实施例1

芒果干燥粉末20g，室温下(10～30℃)以体积浓度为30％乙醇200ml冷浸、超声提取2次，每次10min(500W)，取滤液合并，减压回收溶剂至干，取提取物适量，配制成0.5mg/ml溶液备用，测定其酪氨酸酶抑制作用，以便与后续制得的芒果活性部位的活性作比较。

结果：芒果粗提物的酪氨酸酶抑制作用IC₅₀为2.8mg/ml。

实施例2

芒果干燥粉末20g，室温下以体积浓度为60％乙醇200ml冷浸、超声提取2次，每次30min(500W)，取滤液合并，减压回收溶剂至干，取提取物适量，配制成0.5mg/ml溶液备用，测定其酪氨酸酶抑制作用，以便与后续制得的芒果活性部位的活性作比较。

结果：芒果粗提物的酪氨酸酶抑制作用IC₅₀为2.9mg/ml。

实施例3

芒果干燥粉末20g，室温下以体积浓度为70％乙醇200ml冷浸、超声提取2次，每次30min(500W)，取滤液合并，减压回收溶剂至干，取提取物适量，配制成0.5mg/ml溶液备用，测定其酪氨酸酶抑制作用，以便与后续制得的芒果活性部位的活性作比较。

结果：芒果粗提物的酪氨酸酶抑制作用IC₅₀为1.2mg/ml。

实施例4

芒果干燥粉末20g，室温下以体积浓度为75％乙醇200ml冷浸、超声提取2次，每次30min(500W)，取滤液合并，减压回收溶剂至干，取提取物适量，配制成0.5mg/ml溶液备用，测定其酪氨酸酶抑制作用，以便与后续制得的芒果活性部位的活性作比较。

结果：芒果粗提物的酪氨酸酶抑制作用IC₅₀为1.8mg/ml。

实施例5

芒果干燥粉末20g，室温下以体积浓度为95％乙醇200ml冷浸、超声提取2次，每次30min(500W)，取滤液合并，减压回收溶剂至干，取提取物适量，配制成0.5mg/ml溶液备用，测定其酪氨酸酶抑制作用，以便与后续制得的芒果活性部位的活性作比较。

结果：芒果粗提物的酪氨酸酶抑制作用IC₅₀为2.2mg/ml。

实施例6活性部位富集

取芒果干燥粉末50g，室温下(10～30℃)以体积浓度为70％乙醇500ml冷浸、超声提取2次，每次30min(500W)，取滤液合并，减压回收溶剂至无醇味；经AB-8大孔吸附树脂吸附，依次以体积浓度为30％乙醇、50％乙醇、70％乙醇和90％乙醇洗脱，分别收集各流份、蒸干，分别得到30％乙醇洗脱部位、50％乙醇洗脱部位、70％乙醇洗脱部位和90％乙醇洗脱部位的芒果活性部位，并配制成不同浓度的溶液备用。

实施例7酪氨酸酶抑制活性能力测试

在本领域中通常美白性能的优劣是用酪氨酸酶抑制活性能力测试来表征的。酪氨酸酶抑制活性能力测试原理如下：

近年的研究证明色素沉着是由紫外线激活表皮中的黑色素细胞内的黑色素生成酶，产生色素所引起的。在黑色素生成过程中，酪氨酸酶将酪氨酸转化成多巴，多巴醌，经非酶氧化而聚合生成大分子的黑色素。因此通过抑制酪氨酸酶的活性可以限制黑色素生成，改善皮肤的色素沉着。

试验方法：

1)设立样品管，样品对照管，阳性对照，阴性对照。

2)在样品管和样品对照管中各加入1ml不同浓度的样品溶液，阳性和阴性对照管以磷酸缓冲液代替。

3)在样品管和阳性对照管中加入0.5ml酪氨酸酶溶液(酶活单位125u/ml)，样品对照和阴性对照管以0.5ml磷酸缓冲液(pH＝6.8)代替，振摇所有试管，使样品和酪氨酸酶充分混匀，37℃水槽孵育10分钟。

4)加入2ml的0.03wt％酪氨酸溶液，反应10分钟。即刻在475nm处测定吸光度。

抑制率I(％)＝[1－(T－T0)/(C-C0)]×100％

式中：

T0：样品溶剂对照；

T：样品对照；

C：阳性对照

C0：阳性对照溶剂对照

半数抑制率(IC₅₀)的计算：

IC₅₀值定义为清除率为50％时所需酪氨酸酶抑制剂的浓度。以样品的浓度对酪氨酸酶的抑制率作图并进行拟合，读取计算IC₅₀值。

表2芒果各部位酪氨酸酶抑制作用测试结果

30％乙醇、50％乙醇、70％乙醇和90％乙醇洗脱得到的芒果活性部位，酪氨酸酶抑制作用的IC₅₀分别为0.47mg/mL、0.075mg/mL、0.83mg/mL和0.64mg/mL。而芒果粗提物酪氨酸酶抑制作用的IC₅₀为1.21mg/mL，由此可见，50％乙醇洗脱部位酪氨酸酶抑制作用最强。

从上述结果可以看出，芒果粗提物经AB-8大孔吸附树脂吸附并用梯度乙醇洗脱得到的部位，较粗提物相比，酪氨酸酶抑制作用大幅提高，尤其是经50％乙醇洗脱后获得的芒果活性部位酪氨酸酶抑制作用的IC₅₀为0.075mg/mL，显示了非常高的酪氨酸酶抑制活性。亦即本发明所公开的芒果活性部位有良好的美白作用。

实施例6中，分别用30％、60％、75％和95％乙醇溶液冷浸和超声提取芒果干燥粉末，其余步骤操作相同。检测不同浓度乙醇洗脱部位的活性，结果与实施例7相似，50％乙醇洗脱部位的抑制酪氨酸酶活性的能力最强，IC₅₀为粗提物的约二十分之一。

Claims

1.一种芒果活性部位在制备具有美白作用的化妆品中的应用，其特征在于，所述芒果活性部位通过以下步骤制备：

(1)取干燥的芒果粉末，加入乙醇溶液冷浸后提取2～5次，取滤液；每次提取时，乙醇溶液与芒果粉末的用量比为5～15ml/g；

(2)合并滤液，去除乙醇后用AB-8大孔吸附树脂吸附，再用体积浓度为50％的乙醇溶液洗脱，收集流分干燥。

2.根据权利要求1所述芒果活性部位在制备具有美白作用的化妆品中的应用，其特征在于，步骤(1)中，所述乙醇溶液的体积浓度为30％～95％，提取方法为超声提取10～60分钟。

3.根据权利要求1或2所述芒果活性部位在制备具有美白作用的化妆品中的应用，其特征在于，步骤(1)中，所述乙醇溶液的体积浓度为60％～75％。