CN102961281B - 一种雪菊活性部位及其在制备美白化妆品中的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及植物提取物及所述植物提取物在具有美白作用的化妆品领域中的应用,公开了一种雪菊活性部位,制备方法为取雪菊干燥粉末,以乙醇提取,滤液合并,减压回收溶剂,得到雪菊粗提物;雪菊粗提物经大孔吸附树脂吸附,以乙醇洗脱,收集流份,蒸干,得到雪菊活性部位。通过上述方法得到的雪菊活性部位,是一种天然的具有抑制酪氨酸酶作用的植物提取物,对人体无副作用,可用于制备具有美白作用的化妆品。
Description
技术领域
本发明涉及植物提取物和日化领域,具体为雪菊活性部位及其在制备美白化妆品中的应用。
背景技术
近年来,随着人们生活水平和审美标准的提高,越来越多的人追求、渴望白皙及洁润的肌肤。因此,具有防止由太阳光线及其它原因引起的色斑、色素沉着作用的美白类化妆品以及皮肤美白制剂的研究与开发,正日益受到各国化妆品生产商和研究者的重视,美白化妆品已成为护肤类化妆品的主流品种之一。
然而,随着化学合成化妆品中毒事件的频频发生,人们开始热衷于植物化妆品及回归自然的美容方法。
美白机理美白剂的作用是通过抑制酪氨酸酶活性或者阻断酪氨酸生成黑色素的氧化途径,从而减少黑色素生成达到美白皮肤的效果。皮肤美白剂就是作用于皮肤黑色素生成、代谢过程中,抑制黑色素生成且符合规范的物质,但传统的皮肤美白剂,往往采用化学性物质,如具有增白作用的汞盐和祛斑作用的氢醌。这些化合物虽然有快速达到美白之功效,但对皮肤有毒副作用,长期使用会引起接触性皮炎或引起永久脱色等不良作用,在许多国家已被禁用。目前要求的皮肤美白剂应该符合两个标准:一是对酪氨酸酶活性有较高的抑制率,能显著的减少黑色素的生成;二是有较高的安全性,以人体皮肤无毒无刺激。熊果苷、VC及其衍生物和曲酸是目前国内外美白化妆品中较常使用的美白成分。
为了开发符合“回归大自然”要求的化妆品,特别是安全,无副作用的美白产品,一些具有很好美白效果的中草药目前越来越受到消费者的青睐。在国际上化妆品发展最有代表性的国家美国、日本、法国和德国等国家中,中草药因其天然药效温和且不良作用少而被广泛认同,从中了解到近年来崇尚自然,远离化学污染的理念。特别是日本化妆品工业的发展趋势看,各化妆品公司使用的中草药已达200余种,目前,在日本含天然中草药的化妆品已占整个化妆品市场的50%以上。因此,寻找开发高效且对人体无副作用或副作用小的天然中草药皮肤美白祛斑制剂已成为目前化妆品领域的一个较被重视的课题。
雪菊不是一个独立的物种,其实是生长在新疆的蛇目菊(Coreopsis tinctoria)的商品名称,其学名是:蛇目菊、双色金鸡菊。在新疆人们称之为雪菊、昆仑雪菊、昆仑血菊、天山雪菊、高寒雪菊、高寒香菊等。《新华本草纲要》记载雪菊味甘,性平。有清热解毒、化湿的功能。用于急、慢性痢疾,目赤肿痛、湿热痢、痢疾等。
目前,已从雪菊中分离鉴定出300多种天然成分,其中包括30多种黄酮类物质,30多种人体必需的矿物元素,20多种氨基酸,数十种芳香族化合物,还有丰富的有机酸、萜烯类、维生素、木脂体、酶类、多糖等具有生物活性的天然成分。现代药理研究表明,雪菊中的挥发油、总皂苷、氨基酸、黄酮类物质,可抵抗病原体,增强毛细血管抵抗力,其中,总黄酮含量达到12%,远远超过了其他各种菊类。黄酮的功效是多方面的,它是一种很强的抗氧化剂,可有效地清除体内的氧自由基,这种阻止氧化的能力是维生素E的10倍以上,可以阻止细胞的退化、衰老及癌变的发生,雪菊中富含的这些生物总黄酮、萜类物质、含硫化合物,被统称为具免疫调节功能的因子,是降血压、降血脂、调节血糖、抗肿瘤与抗衰老相关药物中重要的元素。
综合现有文献资料,未发现雪菊及其所含成分具有美白作用的文献和专利报道。
发明内容
本发明旨在提供一种雪菊活性部位及其在美白化妆品领域中的应用。
本发明所要解决的技术问题是在于寻找开发高效且对人体无副作用或副作用小的天然植物抗氧化和美白制剂。本发明提供了一种雪菊活性部位的制备方法及在抗氧化和美白领域有应用潜能的雪菊活性部位。
一种雪菊活性部位的提取方法,步骤包括:
(1)取干燥的雪菊粉末,加入乙醇溶液冷浸后提取2~5次,取滤液;
提取方法为常温下(5~30℃)用体积浓度为30%~95%乙醇溶液(优选为60%~75%)冷浸、超声提取10~60分钟;每次提取时,乙醇溶液与雪菊粉末的用量比为5~15ml/g;
(2)合并滤液,去除乙醇后用大孔吸附树脂吸附,再用体积浓度为30%~90%的乙醇溶液(优选为50%~80%,最优选70%)洗脱,收集流分干燥;所述的大孔吸附树脂优选为AB-8树脂。
本发明的技术方案为,取雪菊,干燥、粉碎成粗粉,取干燥粉末,以乙醇提取,滤液合并,减压回收溶剂,得到雪菊粗提物;雪菊粗提物经大孔吸附树脂吸附,以乙醇洗脱,收集流份,蒸干,得到雪菊活性部位。测定所得到的活性部位酪氨酸酶抑制作用,其中50%~80%(体积浓度)乙醇溶液洗脱部位具有良好的美白的作用,尤其是70%(体积浓度)乙醇溶液洗脱部位,效果最佳。
通过上述方法得到的雪菊活性部位,是一种天然的植物美白提取物,对人体无副作用,在美白化妆品领域有应用潜能。这种雪菊活性部位可用于制备具有美白作用的化妆品:如化妆水、爽肤水、乳液、霜膏、洁面霜等。
具体实施方式
实施例1
雪菊干燥粉末20g,室温下(5~30℃)以体积浓度为30%乙醇200ml冷浸、超声提取2次,每次30min(500W),取滤液合并,减压回收溶剂至干,取提取物适量,配制成0.5mg/ml溶液备用,测定其酪氨酸酶抑制作用,以便与后续制得的雪菊活性部位的活性作比较。
结果:雪菊粗提物的酪氨酸酶抑制作用IC50为1.85mg/ml。
实施例2
雪菊干燥粉末20g,室温下以体积浓度为60%乙醇200ml冷浸、超声提取2次,每次30min(500W),取滤液合并,减压回收溶剂至干,取提取物适量,配制成0.5mg/ml溶液备用,测定其酪氨酸酶抑制作用,以便与后续制得的雪菊活性部位的活性作比较。
结果:雪菊粗提物的酪氨酸酶抑制作用IC50为1.07mg/ml。
实施例3
雪菊干燥粉末20g,室温下以体积浓度为70%乙醇200ml冷浸、超声提取2次,每次30min(500W),取滤液合并,减压回收溶剂至干,取提取物适量,配制成0.5mg/ml溶液备用,测定其酪氨酸酶抑制作用,以便与后续制得的雪菊活性部位的活性作比较。
结果:雪菊粗提物的酪氨酸酶抑制作用IC50为0.92mg/ml。
实施例4
雪菊干燥粉末20g,室温下以体积浓度为75%乙醇200ml冷浸、超声提取2次,每次30min(500W),取滤液合并,减压回收溶剂至干,取提取物适量,配制成0.5mg/ml溶液备用,测定其酪氨酸酶抑制作用,以便与后续制得的雪菊活性部位的活性作比较。
结果:雪菊粗提物的酪氨酸酶抑制作用IC50为1.28mg/ml。
实施例5
雪菊干燥粉末20g,室温下以体积浓度为95%乙醇200ml冷浸、超声提取2次,每次30min(500W),取滤液合并,减压回收溶剂至干,取提取物适量,配制成0.5mg/ml溶液备用,测定其酪氨酸酶抑制作用,以便与后续制得的雪菊活性部位的活性作比较。
结果:雪菊粗提物的酪氨酸酶抑制作用IC50为1.67mg/ml。
实施例6活性部位富集
取雪菊干燥粉末50g,室温下(5~30℃)以体积浓度为70%的乙醇500ml冷浸、超声提取2次,每次30min(500W),取滤液合并,减压回收溶剂至无醇味;经AB-8大孔吸附树脂吸附,依次以体积浓度为30%乙醇、40%乙醇、50%乙醇、60%乙醇、70%乙醇、80%乙醇和90%乙醇洗脱,分别收集各流份、蒸干,分别得到30%乙醇洗脱部位、40%乙醇洗脱部位、50%乙醇洗脱部位、60%乙醇洗脱部位、70%乙醇洗脱部位、80%乙醇洗脱部位和90%乙醇洗脱部位的雪菊活性部位,并配制成不同浓度的溶液备用。
实施例7酪氨酸酶抑制活性能力测试
在本领域中通常美白性能的优劣是用酪氨酸酶抑制活性能力测试来表征的。酪氨酸酶抑制活性能力测试原理如下:
近年的研究证明色素沉着是由紫外线激活表皮中的黑色素细胞内的黑色素生成酶,产生色素所引起的。在黑色素生成过程中,酪氨酸酶将酪氨酸转化成多巴、多巴醌,经非酶氧化而聚合生成大分子的黑色素。因此通过抑制酪氨酸酶的活性可以限制黑色素生成,改善皮肤的色素沉着。
试验方法:
1)设立样品管,样品对照管,阳性对照,阴性对照。
2)在样品管和样品对照管中各加入1ml不同浓度的样品溶液,阳性和阴性对照管以磷酸缓冲液代替。
3)在样品管和阳性对照管中加入0.5ml酪氨酸酶溶液(酶活单位125u/ml),样品对照和阴性对照管以0.5ml磷酸缓冲液(pH=6.8)代替,振摇所有试管,使样品和酪氨酸酶充分混匀,37℃水槽孵育10分钟。
4)加入2ml的0.03wt%酪氨酸溶液,反应10分钟。即刻在475nm处测定吸光度。
抑制率I(%)=[1-(T-T0)/(C-C0)]×100%
式中:
T0:样品溶剂对照;
T:样品对照;
C:阳性对照
C0:阳性对照溶剂对照
半数抑制率(IC50)的计算:
IC50值定义为清除率为50%时所需酪氨酸酶抑制剂的浓度。以样品的浓度对酪氨酸酶的抑制率作图并进行拟合,读取计算IC50值。结果如表1。
表1 雪菊各部位酪氨酸酶抑制作用测试结果
30%乙醇、40%乙醇、50%乙醇、60%乙醇、70%乙醇、80%乙醇和90%乙醇洗脱得到的雪菊活性部位,酪氨酸酶抑制作用的IC50分别为1.58mg/mL、1.12mg/mL、0.58mg/mL、0.44mg/mL、0.042mg/mL、0.35mg/mL和1.07mg/mL。而雪菊粗提物酪氨酸酶抑制作用的IC50为0.92mg/mL,由此可见,70%乙醇洗脱部位酪氨酸酶抑制作用最强。
从上述结果可以看出,雪菊粗提物经AB-8大孔吸附树脂吸附并用梯度乙醇洗脱得到的部位,较粗提物相比,酪氨酸酶抑制作用大幅提高,尤其是经70%乙醇洗脱后获得的雪菊活性部位酪氨酸酶抑制作用的IC50为0.042mg/mL,显示了非常高的酪氨酸酶抑制活性。亦即本发明所公开的雪菊活性部位有良好的美白作用。
实施例6中,分别用30%、60%、75%和95%乙醇溶液冷浸和超声提取雪菊干燥粉末,其余步骤操作相同。检测不同浓度乙醇洗脱部位的活性,结果与实施例7相似,70%乙醇洗脱部位的抑制酪氨酸酶活性的能力最强,IC50为粗提物的约5%。
Claims (5)
1.雪菊活性部位在制备具有美白作用的化妆品中的应用,其特征在于,所述的雪菊活性部位通过以下步骤制备:
(1)取干燥的雪菊粉末,加入乙醇溶液冷浸后提取2~5次,取滤液;所述乙醇溶液的体积浓度为60%~75%,提取方法为超声提取10~60分钟;
(2)合并滤液,去除乙醇后用大孔吸附树脂吸附,再用体积浓度为50%~80%的乙醇溶液洗脱,收集流分干燥。
2.根据权利要求1所述雪菊活性部位的应用,其特征在于,步骤(1)中,所述乙醇溶液的体积浓度为70%。
3.根据权利要求1所述雪菊活性部位的应用,其特征在于,步骤(1)中,每次提取时,乙醇溶液与雪菊粉末的用量比为5~15ml/g。
4.根据权利要求1所述雪菊活性部位的应用,其特征在于,步骤(2)中,所述乙醇溶液的体积浓度为70%。
5.根据权利要求1所述雪菊活性部位的应用,其特征在于,步骤(2)中,所述的大孔吸附树脂为AB-8大孔吸附树脂。
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