CN104224625A - 头花蓼提取物在美白用品中的应用及美白用品 - Google Patents

Abstract

本发明涉及头花蓼提取物在美白用品中的应用及包含头花蓼提取物的美白用品。本发明发现头花蓼提取物是一种新的美白活性成分，该美白活性成分具有明显抑制酪氨酸酶活性和减少B16小鼠黑素细胞产生黑色素的效果，同时该美白活性成分来源于植物，安全性好，具有非常高的开发美白，祛斑等外用药物或者是美容化妆品的可行性。

Description

头花蓼提取物在美白用品中的应用及美白用品

技术领域

本发明涉及头花蓼提取物的新用途和美白用品。

背景技术

近年来，由于人们压力的增大以及对高热量、高蛋白、高脂食物摄取的增加，使得人皮肤的颜色由多种因素决定，包括产生黑色素的黑素细胞(melanocytes)的活性、血管的分布、皮肤的厚度、色素如类胡萝卜素和胆红素的存在或缺乏等。在这些因素中，深色的色素黑色素是最主要的因素。黑色素通过包括酪氨酸酶(tyrosinase)的多种酶的作用由黑素细胞产生。黑色素的产生受遗传因素、如荷尔蒙分泌的生理因素、应激等以及如UV辐射的环境因素的影响。存在于皮肤中的黑色素在保护皮肤免受UV等刺激中起着重要的作用。然而，已知的是黑色素过量产生在加速色素沉着和皮肤老化且包括皮肤癌中发挥主要的作用。

长久以来，抗坏血酸(ascorbic acid)、曲酸(Kojic acid)、熊果苷(arbutin)、氢醌(hydroquinone)、谷胱甘肽(glutathione)以及它们的衍生物，或者具有酪氨酸酶抑制活性的组合物已被用于化妆品或药品中以治疗或改善由暴露于UV中引起的异常的皮肤色素沉着和过量的黑色素沉着。然而，由于皮肤增白效果不足、在皮肤上的安全问题、用于化妆品中时成分的不稳定性等问题，它们的应用是受到限制的。

头花蓼(Polygonumcapitatum)是蓼科蓼属植物，全草入药，有“清热解湿，活血解毒之功效”，是苗药中的常用药用植物，民间用于泌尿系统疾病。化学成分主要有黄酮类、有机酸类、挥发油类，酚酸类等。现代药理研究表明,头花蓼具有抗菌抗感染、解热抗炎、镇痛、利尿作用等多种生物活性。根据我们的文献调研，尚未发现头花蓼提取物在美白，祛斑方面的应用和研究。

发明内容

我们在研究中意外发现，头花蓼提取物中的多酚类物质具有明显抑制酪氨酸酶活性和减少B16小鼠黑素细胞产生黑色素的效果，具有非常高的开发美白，祛斑等外用药物或者是美容化妆品的可行性。

本发明具体涉及头花蓼提取物在美白用品中的应用。

根据本发明，所述美白用品可以是任何具有美白功能的产品。进一步地，美白用品优选为具有美白和/或祛斑功能的化妆品或药品，其中药品优选为外用药品。

根据本发明，所述的头花蓼提取物中总多酚是美白活性物质，总多酚的含量越高越好。头花蓼提取物中总多酚的含量优选在10％以上更优选在30％以上，进一步优选在40％以上，最优选在60％以上。

本发明同时提供一种植物来源，具有突出的美白效果，同时又具有较高安全性的美白用品。

本发明采取的美白用品的方案是：

一种美白用品，其包含美白活性成分，该美白活性成分至少包括头花蓼提取物。

根据本发明，美白用品优选为具有美白和/或祛斑功能的化妆品或药品，其中药品优选为外用药品。

所述美白用品中的美白活性成分可以是仅为头花蓼提取物，也可以是头花蓼提取物与其他美白活性成分的组合。

根据本发明，所述的头花蓼提取物中总多酚是美白活性物质，总多酚的含量越高越好。头花蓼提取物中总多酚的含量优选在10％以上更优选在30％以上，进一步优选在40％以上，最优选在60％以上。

根据本发明，头花蓼提取物是已知的，可以是头花蓼全草提取物或其中某个部位的提取物。头花蓼提取物可以是初提物(粗提物)或进一步分离纯化所得总多酚富集的提取物。头花蓼提取物可以根据常规手段制备，也可以商购获得。

优选地，头花蓼提取物为初提物经进一步分离纯化所得总多酚富集的提取物。

所述头花蓼提取物可应用于皮肤外用剂、保健食品和医药，尤其是可应用于化妆品中，根据制剂的不同类型添加不同的用量。

所述皮肤外用剂组合物是通常用于皮肤外部的所有成分的统称概念，例如可以是化妆料组合物或药学组合物。所述化妆料组合物中可以是基础化妆料、面部妆容化妆料、身体用化妆料等，对其剂型无特殊限制，根据不同目的可合理选择。

所述化妆料组合物中根据剂型和目的的不同还含有不同的化妆品学层面允许的介质或基质赋形剂。

可以用于本发明皮肤外用剂组合物的化妆品、皮肤病学或药学上可接受的赋形剂包括，但不限于一种或多种含水系统、甘油、C2-4醇类、多元醇类、二元醇类、植物油、矿物油、硅油、水或其任意组合。

可以将本发明的组合物配制成任何合适的产品形式。这类产品形式包括，但不限于气溶胶型喷雾剂、霜剂、乳液、固体、液体、分散体、泡沫、凝胶、化妆水、摩丝、软膏、粉剂、贴剂、润发油、溶液、手按泵型喷雾剂、棒状物、面膜和湿纸巾。可以将本发明的组合物通过本领域众所周知的各种方法便利地用于制备或作为化妆品、皮肤病学或药物局部施用产品。

本发明的皮肤外用剂组合物可以包括一种或多种下列成分：抗过敏剂、抗微生物剂、抗氧化剂、螯合剂、着色剂去色素剂、润肤剂、乳化剂、表皮脱落剂、成膜剂、香料、保湿剂、昆虫驱避剂、润滑剂、药物活性剂、增湿剂、耐光剂、防腐剂、护肤剂、皮肤渗透增强剂、防晒剂、稳定剂、表面活性剂、增稠剂、粘度调节剂、维生素或其任意组合。

由于以上技术方案的采用，本发明与现有技术相比具有如下优势：

本发明提供了一种新的美白活性成分，该美白活性成分具有明显抑制酪氨酸酶活性和减少B16小鼠黑素细胞产生黑色素的效果，同时该美白活性成分来源于植物，安全性好。

具体实施方式

实施例1 头花蓼初提物(代号PCE)的制备

取5公斤头花蓼全草(头花蓼采集自贵州，将全草晒干)，粉碎，用70升70％乙醇室温浸泡一天后，回流提取60分钟，滤出提取液之后，向滤渣中再加入60升70％乙醇，回流提取40分钟，过滤。合并两次提取液，真空浓缩至干，得到800g头花蓼全草初提物，得率为16％。

实施例2 头花蓼初提物进一步分离纯化制备各部位提取物

取实施例1中制备的头花蓼全草初提物200g，加水溶解，上AB-8大孔吸附树脂进行层析。提取物的量跟树脂量质量比为大约1：20。依次用水，30％乙醇，60％乙醇和95％乙醇进行洗脱，每个梯度洗脱4-5个柱体积，流速为2-3个柱体积/小时。洗脱结束后，30％乙醇部位，60％乙醇部位和95％乙醇部位分别浓缩至干，其中，30％乙醇部位(代号PC30)共40g，60％乙醇部位(代号PC60)共95g，95％乙醇部位(代号PC95)共33g。

实施例3 头花蓼初提物和各部位总多酚的测定

头花蓼提取物和部位总多酚的测定参考国标GBT 8313-2008茶叶中茶多酚含量的检测方法，用福林酚(Folin-Ciocalteu)试剂检测多酚含量。

(1)10％福林酚试剂(现配)：将20mL福林酚试剂转移到200mL容量瓶中，用水定容并摇匀。

(2)7.5％Na₂CO₃(质量浓度)溶液配制：称取37.50gNa2CO3加适量水溶解，转移至500mL容量瓶中，定容至刻度，摇匀。

(3)没食子酸标准储备溶液(1000μg/mL)制备：称取0.100g没食子酸，于100mL容量瓶中溶解并定容至刻度，摇匀。

(4)没食子酸工作液制备：用移液管分别移取1.0,2.0,3.0,4.0,5.0mL的没食子酸标准储备液于100mL容量瓶中，分别用水定容至刻度，摇匀，浓度分别为10，20，30，40，50μg/mL。

(5)没食子酸标准曲线：用移液管分别移取没食子酸工作液1.0mL于刻度管内，在每个试管内分别加入5.0mL10％福林酚试剂，摇匀。反应3-8分钟内，加入4.0mLNa2CO3溶液，加水定容至刻度，摇匀。室温下放置60min，用10mm比色皿，在765nm波长条件下用分光光度计测定吸光度，根据没食子酸工作液浓度和相对应吸光度，制作标准曲线。

(6)取头花蓼提取物和各个部位，配成0.2mg/mL溶液。取样品溶液1mL，按照上述的制作方法，测定其吸光度，每个样品做三个平行试验，取平均值，计算样品中的多酚含量，结果参见下表：

样品	PCE	PC30	PC60	PC95
					总多酚	35.2％	45.5％	67％	12.4％

根据结果，头花蓼提取物经过富集工艺之后，总多酚含量均有非常大的提高，其中60％乙醇洗脱部位总多酚含量最高。

实施例4 头花蓼初提物和各部位清除自由基活性

试验原理：根据DPPH自由基有单电子，在517nm处有一强吸收，其醇溶液呈紫色的特性，当有自由基清除剂存在时，由于与其单电子配对而使其吸收逐渐消失，其褪色程度与其接受的电子数量成定量关系，因而可用分光光度计进行快速的定量研究，来检测自由基清除情况，从而判断样品是否具有抗氧化能力。

试验方法：将不同稀释度、不同配比的待测样品溶液2ml加入试管中，再加入2ml76μmol/LDPPH乙醇溶液，混匀，室温下避光在黑暗处反应30min。在525nm处测定吸光度Abs。每个浓度重复三次，取平均值作为拟合数据，以保证实验结果的准确性。

清除率I(％)＝[1-(T-T0)/(C-C0)]×100％

式中：T0：2ml水或DMSO加2mlDPPH溶液的吸光度；

T：2ml样品液加2mlDPPH溶液的吸光度；

C0：2ml水或DMSO加2ml 95％乙醇的吸光度；

C：2ml样品液加2ml 95％乙醇的吸光度。

按照上面公式计算清除率。试验结果如下表所示：

样品

浓度(mg/ml)

清除率(％)

PCE	0.05	70.2
			PC30	0.05	84.5
PC60	0.05	92.3
			PC95	0.05	51.0
Vc	0.05	92.1

从表中数据可见，头花蓼提取物及活性富集部位具有非常强的清除自由基活性，其活性可以与Vc相当。

实施例5 头花蓼初提物和各部位抑制酪氨酸酶活性

试验方法：在样品管和样品对照管中各加入1ml不同浓度的样品溶液，阳性和阴性对照管以磷酸缓冲液代替。在样品管和阳性对照管中加入0.5ml酪氨酸酶溶液(酶活单位125u/ml)，样品对照和阴性对照管以0.5ml磷酸缓冲液(pH＝6.8)代替，振摇所有试管，使样品和酪氨酸酶充分混匀，37℃水槽孵育10分钟，加入2ml的0.03wt％酪氨酸溶液，反应10分钟，即刻在475nm处测定吸光度。

抑制率I(％)＝[1-(T-T0)/(C-C0)]×100％

式中：T0：样品溶剂对照；

T：样品对照；

C：阳性对照；

C0：阳性对照溶剂对照。

试验结果如下表所示：

样品	浓度(mg/ml)	抑制率(％)
			PCE	0.20	64.3
PC30	0.20	67.4
			PC60	0.20	90.5
PC95	0.20	46.2
			熊果苷	0.20	50.5

从表中数据看，头花蓼提取物的抑制酪氨酸酶活性要远远强于阳性对照熊果苷。

实施例6 头花蓼初提物和各部位对黑色素抑制作用研究

采用Hosoi等改良方法测定提取物对对黑色素抑制作用。B16黑色素细胞以1×105密度培养在96孔板中，经24h后换液，添加不同浓度的药物，72h后,经PBS洗涤两次，样品经空气干燥,溶于200μl 1N NaOH(含1％DMSO)，经加热80℃至1h后冷却，选择475nm波长在酶联免疫检测仪上读取吸光度值。

黑色素含量抑制率＝[1-(药物孔吸光度值/药物孔细胞密度)(对照孔吸光度值/照孔细胞密度)]×100％，试验结果见下表：

样品	浓度(mg/ml)	抑制率(％)
			PCE	0.20	43.5
PC30	0.20	56.8
			PC60	0.20	80.5
PC95	0.20	54.2
			熊果苷	0.20	50.5

上表的数据证明，头花蓼提取物具有非常明显的美白皮肤活性，特别是多酚含量最高的PC60样品，其抑制率达到80％以上。

实施例7 含有上述头花蓼提取物的皮肤外用剂

含有头花蓼提取物的美白霜的组分如表所示：

综上所述，不同多酚含量的头花蓼提取物均表现出美白皮肤活性，提取物的清除自由基活性和抑制酪氨酸酶活性随着多酚含量的提高而提高。对于黑色素抑制作用而言，进一步提纯的各部位提取物的抑制效果均优于初步提纯的头花蓼初提物。各部位的提取物的抑制效果随着多酚含量的提高而提高。当部位提取物中总多酚含量在60％以上时，提取物的自由基清除率、酪氨酸酶抑活性抑制率以及黑色素含量抑制率均达到90％以上，具有非常高的开发美白，祛斑等外用药物或者是美容化妆品的可行性。

以上对本发明做了详尽的描述，其目的在于让熟悉此领域技术的人士能够了解本发明的内容并加以实施，并不能以此限制本发明的保护范围，凡根据本发明的精神实质所作的等效变化或修饰，都应涵盖在本发明的保护范围内。

Claims (10)

1.头花蓼提取物在美白用品中的应用。

2.如权利要求1所述的应用，其特征在于：所述美白用品为具有美白和/或祛斑功能的化妆品或药品。

3.如权利要求1或2所述的应用，其特征在于：所述的头花蓼提取物中总多酚的含量在10％以上。

4.如权利要求3所述的应用，其特征在于：所述的头花蓼提取物中总多酚的含量在40％以上。

5.如权利要求3所述的应用，其特征在于：所述的头花蓼提取物为头花蓼初提物或进一步分离纯化头花蓼初提物所得头花蓼总多酚富集的提取物。

6.如权利要求5所述的应用，其特征在于：所述的头花蓼提取物中总多酚的含量在60％以上。

7.一种美白用品，其包含美白活性成分，其特征在于：所述的美白活性成分至少包括头花蓼提取物。

8.如权利要求7所述的美白用品，其特征在于：所述美白用品为具有美白和/或祛斑功能的化妆品或药品。

9.如权利要求7或8所述的美白用品，其特征在于：所述的头花蓼提取物中总多酚的含量在10％以上。

10.如权利要求9所述的美白用品，其特征在于：所述的头花蓼提取物中总多酚的含量在60％以上。