CN103768348A - 治疗心脑血管疾病的药物组合物、药物制剂及应用和制法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种治疗心脑血管疾病的药物组合物、药物制剂及应用和制备方法。该药物组合物及药物制剂含有大果木姜子、川芎、薤白及艾片单体成分。按重量份计算，优选含有大果木姜子单体64.1-104.7份、川芎单体44.4-68.7份、薤白单体6.3-9.5份、艾片单体64-96份。选取上述各中药药材提取物和艾片单体，加入辅料，按照常规制剂工艺制成药物制剂。本发明的药物组合物及其制成的药物制剂应用于治疗心阳不足、心血瘀阻所致的胸痹心痛，以及缺血性脑血管病等各种心脑血管病时，取得了意料不到的治疗效果，解决了治疗心脑血管病同时毒性较低的技术难题。

Description

治疗心脑血管疾病的药物组合物、药物制剂及应用和制法

技术领域

本发明涉及治疗心脑血管疾病的药物制剂技术领域，特别是涉及一种治疗心脑血管疾病的药物组合物、药物制剂及应用和制备方法。

背景技术

近年来，心脑血管疾病的发病率逐年上升，已成为严重危害人类健康的四大疾病之一，给我们的社会、经济、生活带来诸多不变。目前市面上有很多治疗心脑血管疾病的产品，包括化学药和中成药。化学药治疗作用明显，但是其副作用也比较多，且用药有依赖性，不宜长期服用，一段时间后需更换药物。而中成药通过对人体机能进行调节，以达到阴阳的平衡，药物内的一些成份能增强免疫力，从而达到治疗心脑血管疾病的目的，占领较大的市场份额，但是由于其疗效不够迅速、有效成分作用机理不明确、服用剂量大等特点使得其在市场上应用有一定局限性，因此，研制和开发出疗效迅速、服用剂量小、有效成分明确的中药制剂已越来越受到人们的重视，有着广阔的市场前景。

现有技术中，四味大果木姜子滴丸即米槁心乐滴丸是利用贵州省苗族民间常用于治疗胸痹心痛的药物米槁为君药，根据苗族用药习惯和中医理论合理组方，以米槁挥发油、薤白、川芎、冰片组成的纯中药制剂，具有芳香温通、理气止痛的功效，主治由阴寒凝结、气失温煦所致胸痹心痛（冠心病心绞痛），症见胸闷、气短、心悸、畏寒，甚则胸痛彻背、感寒痛甚，呼吸不畅等。

现有文献报道，四种药材中分别以某一成分或某些成分起主导作用，这些成分共同协调增效，使四种组合物对治疗心脑血管疾病有一定效果。

米槁，又名大果木姜子，是樟科植物米槁migao H．W．Li的干燥果实，分布于云南、贵州、广西等省。米槁性味甘、辛，温，功能温中散寒，理气止痛，是贵州少数民族民间常用治疗胸痹心痛的中草药。系统的药理实验初步表明，米槁挥发油能对抗高钾及NE所致的家免离体主动脉条收缩，对家兔离体主动脉有明显的扩张作用，能改善心肌缺血，降低心肌耗氧量，并对支气管平滑肌、肠道平滑肌有广泛药理活性，且毒性很低，是理想的新药源。研究表明，米槁精油中含有的主要成分为1,8-桉叶素、香桧烯、柠檬烯和α-松油醇。

川芎Ligusticumchuanxiong Holt．为伞形科藁本属植物川芎的干燥根茎，《神农本草经》中收载芎，列为上品。其原植物自古以来就有数种，产地不同植物名异，因此芎一名常冠以地名，以示区别，古今用药以产于四川的川芎为正品。川芎在我国有悠久的药用历史，历代医家均作为治头痛、活血行气、祛风止痛药使用；现代临床上主要用于治疗心脑血管系统的疾病。具有活血行气，祛风止痛的功能，为活血化瘀常用的中药。研究表明，川芎含有内酯类，生物碱类，酚类，以及挥发油等多种化合物。其中以川芎嗪、阿魏酸和蒿本内酯为主要药用成分。

薤白是一味传统的中药，始载于《神农本草经》，为百合科葱属植物小根蒜Allium macmstemonBge．或薤Allium chinensis G．Don的干燥鳞茎。性味辛、苦、温，有温中通阳，理气宽胸，通阳散结之功效。薤白临床常用于胸痹、心痛彻背等。研究表明，薤白的极性成分中含有薤白甙A—I等10多种甾体皂甙，以及腺苷、胸苷等含氮化合物。挥发性成分中主要是含硫化合物，其中含有对血小板聚集有强烈抑制作用的甲基烯丙基三硫醚。此外薤白中还含有丰富的氨基酸和多种人体所需的元素。其中有效成分以薤白总皂苷为主。

艾片为菊科植物艾纳香叶提取的半透明的结晶，主要含85%以上的左旋龙脑(L．Borneo1) 。艾片气清凉，味辛凉浓烈，燃烧时有浓黑烟。归心、脾、肺经，具有通窍散火、祛翳明目的功能。在传统中医学中，常作为“佐使药”、“引经药”配伍应用。从现代药理学角度看，该作用可能与影响其他药物的药代动力学包括吸收、分布、代谢、排泄有关。综合多项研究发现，艾片对其他药物有促进吸收、影响分布、抑制代谢的作用，有利于减少用药量，延长药物作用时间，从而提高药物疗效。

现有技术中，四味大果木姜子滴丸的制备方法为，大果木姜子用水蒸气蒸馏法提取出精油；川芎采用乙醇回流提取法提取，然后采用氯仿萃取的方法得到川芎提取物；薤白采用乙醇浸渍后回流提取的方法得到薤白浸膏；最后将川芎提取物、薤白浸膏和艾片研均，加到熔融的聚乙二醇中，再加入大果木姜子挥发油，混混，滴制成型，即得滴丸剂。该制备过程中，对大果木姜子、川芎、薤白药材采用常规的水蒸气蒸馏、乙醇回流提取等方法，得到药材的提取物，并进一步对提取物进行制剂制备。但，不论使用何种药材提取方法，得到的是药材的总提取物，不光含有效的成分，如生物碱类、黄酮类，还有其他无效成分，这必将导致药物的使用剂量大，并且各种成分的作用机理也不明确，这正是该类药物在市场上应用的局限性所在。而且，各种有效成分如总苷甚至单体的用量配比也不清楚。因此，对上述药材的有效成分单体的研究作进一步的深入，是对四味大果木姜子滴丸产品的又一开发，也是我们研究人员的职责所在。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是克服现有治疗心脑血管疾病的中药制剂中服用量大、有效成分及其作用机理不明确的缺陷，提供一种疗效迅速、安全、质量可控的治疗心脑血管疾病的药物组合物及其制备方法。

为解决上述技术问题，本发明直接采用大果木姜子、川芎、薤白三味中药药材的提取物（优选用大果木姜子挥发油单体、川芎单体、薤白苷类单体）以及艾片的主要成分左旋龙脑，在治疗心阳不足、心血瘀阻所致的胸痹心痛以及缺血性脑血管病，包括冠心病心绞痛、脑血栓和脑梗塞等各种心脑血管疾病方面取得了意料不到的治疗效果。

具体来说，本发明提供了如下的技术方案：

（1） 一种治疗心脑血管疾病的药物组合物，含有大果木姜子、川芎、薤白及艾片单体成分，所述各组分重量配比为：大果木姜子单体64.1-104.7份、川芎单体44.4-68.7份、薤白单体6.3-9.5份、艾片单体64-96份。

（2） 根据技术方案1所述的药物组合物，按重量份计算，含有大果木姜子单体76.0-92.8份、川芎单体50.9-62.2份、薤白单体7.1-8.7份、艾片单体72-88份；优选含有大果木姜子单体84.4份、川芎单体56.5份、薤白单体7.9份、艾片单体80份。

（3） 根据技术方案1所述的药物组合物，前述的大果木姜子单体为大果木姜子挥发油类单体成分，是指1,8-桉叶素、香桧烯、柠檬烯和α-松油醇；前述的川芎单体成分为蒿本内酯、川芎嗪和阿魏酸；前述的薤白单体成分为薤白总皂苷；前述的艾片单体成分为左旋龙脑。

（4）根据技术方案3所述的药物组合物，按重量份计算，含有1,8-桉叶素30.6-49.5份、香桧烯14.0-23.4份、柠檬烯11.2-18.4份、α-松油醇8.3-13.4份、蒿本内酯41.4-64.1份、川芎嗪1.3-2.0份、阿魏酸1.7-2.6份、薤白总皂苷6.3-9.5份和左旋龙脑64-96份。

（5）根据技术方案3所述的药物组合物，按重量份计算，含有1,8-桉叶素36.0-44.0份、香桧烯 16.8-20.6份、柠檬烯13.3-16.3份、α-松油醇9.7-11.9份、蒿本内酯47.4-58.0份、川芎嗪1.5-1.9份、阿魏酸1.9-2.3份、薤白总皂苷7.1-8.7份和左旋龙脑72-88份。

（6） 根据技术方案3所述的药物组合物，按重量份计算，含有1,8-桉叶素40.0份、香桧烯 18.7份、柠檬烯14.8份、α-松油醇10.8份、蒿本内酯52.7份、川芎嗪1.7份、阿魏酸2.1份、薤白总皂苷7.9份和左旋龙脑80份。

（7）一种治疗心脑血管疾病的药物制剂，由技术方案1-6任一项所述的药物组合物和辅料制成。

（8） 根据技术方案7所述的治疗心脑血管疾病的药物制剂，其剂型为滴丸剂、片剂或胶囊剂。

（9） 技术方案1-6任一项所述的药物组合物或技术方案7或8所述的药物制剂在制备治疗心脑血管疾病的药物中的应用，所述心脑血管疾病为心阳不足、心血瘀阻所致的胸痹心痛以及缺血性脑血管病，包括冠心病心绞痛、脑血栓和脑梗塞。

（10）一种治疗心脑血管疾病的滴丸的制备方法，取技术方案4或5或6所述的药物组合物中，除大果木姜子挥发油类成分和左旋龙脑外的各原料，加入到熔融的聚乙二醇中，其中聚乙二醇为聚乙二醇4000和聚乙二醇6000，两者比例为3:2，再加入大果木姜子挥发油类成分和左旋龙脑，混匀，滴制成型，制得滴丸剂。

本发明的前述治疗心脑血管疾病的药物组合物制成药物制剂的制备方法为：取药物原料中药材提取物：大果木姜子单体优选大果木姜子挥发油类单体、川芎单体、薤白单体优选薤白苷类单体和艾片单体，加入辅料，按常规制剂工艺制成药物学意义上的各种剂型。

其中，大果木姜子、川芎、薤白、艾片四味中药药材的提取物诸如大果木姜子挥发油类单体、川芎单体、薤白苷类单体和艾片单体均可以从市场上商购得到。本发明所称的常规制剂工艺以及辅料等是指在教科书、国家标准、地方标准上已经公开的方法、技术及辅料。

具体来说，例如，本发明的滴丸剂的制备可以采用如下方法：将上述药物组合物中各原料，除大果木姜子挥发油类成分和左旋龙脑外，加入到熔融的聚乙二醇中，其中聚乙二醇为聚乙二醇4000和聚乙二醇6000，比例为3:2，再加入大果木姜子挥发油类成分和左旋龙脑，混匀，滴制成型，制得滴丸剂。

本发明的药物组合物和药物制剂主要用于治疗心脑血管疾病，主要是心阳不足、心血瘀阻所致的胸痹心痛以及缺血性脑血管病，包括冠心病心绞痛、脑血栓和脑梗塞。

本发明的药物组合物和药物制剂通过明显的抑制血栓形成和抗心绞痛作用，对治疗心脑血管疾病取得了良好的效果，而且直接采用药物的有效提取物作为制剂原料，解决了采用传统提取工艺制得的药物使用剂量大、不完全等问题，并改善了单独使用任一种药物可能导致的副作用，使药物疗效更快、更强。

具体实施方式

本发明的药物组合物或药物制剂，通过直接采用大果木姜子、川芎、薤白、艾片四味中药药材的提取物，优选大果木姜子挥发油类单体、川芎单体、薤白单体以及左旋龙脑，在治疗心阳不足、心血瘀阻所致的胸痹心痛以及缺血性脑血管病，包括冠心病心绞痛、脑血栓和脑梗塞等各种心脑血管疾病方面取得了意料不到的治疗效果。

通过药理实验证明，三种药材提取物和艾片有效成分之间的相互作用具有协同性相互作用，申请人在研究中发现，低剂量的1,8-桉叶素、香桧烯、蒿本内酯、阿魏酸即有明显的心脑血管作用，而低剂量的柠檬烯、α-松油醇、川芎嗪和薤白总皂苷通过抑制血小板聚集、缓解血管痉挛等机制而发挥抗血栓、中风等作用，加入适量的左旋龙脑，促进其他单体的吸收、分布，加强了几种单体之间的协调性相互作用，更强于单独药物的加合效应。

采用本发明的药物组合物所制备的各药物制剂用于治疗心脑血管疾病时，给药方案如下：

滴丸剂：口服或舌下含服，一次10丸，一日3次，4周为一疗程；每日活性成分给药剂量约为171.6-207.0mg。

片剂：口服，一次1片，一日3次，4周为一疗程；每日活性成分给药剂量约为134.1-160.3mg。

胶囊剂：口服，一次1粒，一日3次，4周为一疗程；每日有效给药剂量约为154.3-182.8mg。

实施例

为了使本领域普通技术人员更好的理解本发明，本申请人进行了一系列药效学实验研究，以证明本发明的效果。

下面，举出实施例对本发明进一步描述，但本发明并不限于下述的实施例。

药物制备实施例：

下面制备实施例中制备各注射剂型的试剂所用的方法、仪器和操作方式均是本领域常规的方法、仪器和操作方式。

实施例1：A1滴丸剂的制备

取1,8-桉叶素40.0g、香桧烯 18.7g、柠檬烯14.8g、α-松油醇10.8g、蒿本内酯52.7g、川芎嗪1.7g、阿魏酸2.1g、薤白总皂苷7.9g和左旋龙脑80g，将蒿本内酯、川芎嗪、阿魏酸、薤白总皂苷和左旋龙脑混合研匀，加入到熔融的770g聚乙二醇中，其中聚乙二醇为聚乙二醇4000和聚乙二醇6000，比例为3:2，再加入1,8-桉叶素、香桧烯、柠檬烯和α-松油醇，混匀，滴制成型，制得滴丸剂1000g，每丸重25mg，即每丸活性成分约5.72mg。

实施例2：A2滴丸剂的制备

取1,8-桉叶素49.5g、香桧烯 23.4g、柠檬烯18.4g、α-松油醇13.4g、蒿本内酯64.1g、川芎嗪2.0g、阿魏酸2.6g、薤白总皂苷9.5g和左旋龙脑96g，将蒿本内酯、川芎嗪、阿魏酸、薤白总皂苷和左旋龙脑混合研匀，加入到熔融的720g聚乙二醇中，其中聚乙二醇为聚乙二醇4000和聚乙二醇6000，比例为3:2，再加入1,8-桉叶素、香桧烯、柠檬烯和α-松油醇，混匀，滴制成型，制得滴丸剂1000g，每丸重25mg，即每丸活性成分约6.90mg。

实施例3：A3滴丸剂的制备

取1,8-桉叶素44.0g、香桧烯 20.6g、柠檬烯16.3g、α-松油醇11.9g、蒿本内酯58.0g、川芎嗪1.9g、阿魏酸2.3g、薤白总皂苷8.7g和左旋龙脑88g，将蒿本内酯、川芎嗪、阿魏酸、薤白总皂苷和左旋龙脑混合研匀，加入到熔融的750g聚乙二醇中，其中聚乙二醇为聚乙二醇4000和聚乙二醇6000，比例为3:2，再加入1,8-桉叶素、香桧烯、柠檬烯和α-松油醇，混匀，滴制成型，制得滴丸剂1000g，每丸重25mg，即每丸活性成分约6.29mg。

实施例4：B1片剂的制备

取1,8-桉叶素30.6g、香桧烯 14.0g、柠檬烯11.2g、α-松油醇8.3g、蒿本内酯41.4g、川芎嗪1.3g、阿魏酸1.7g、薤白总皂苷6.3g和左旋龙脑64g，将蒿本内酯、川芎嗪、阿魏酸、薤白总皂苷和左旋龙脑混合均匀，干燥，粉碎，再喷入1,8-桉叶素、香桧烯、柠檬烯和α-松油醇，混匀，制粒，用16目筛整粒，加药物组合物1%重量的硬脂酸镁为润滑剂，加药物组合物15%重量的微晶纤维素、20%重量的可压性淀粉，充分混匀，压片，包薄膜衣，即得片剂4000片，每片活性成分约44.7mg。

实施例5：B2片剂的制备

取1,8-桉叶素36.0g、香桧烯 20.6g、柠檬烯13.3g、α-松油醇11.9g、蒿本内酯47.4g、川芎嗪1.9g、阿魏酸1.9g、薤白总皂苷8.7g和左旋龙脑72g，将蒿本内酯、川芎嗪、阿魏酸、薤白总皂苷和左旋龙脑混合均匀，干燥，粉碎，再喷入1,8-桉叶素、香桧烯、柠檬烯和α-松油醇，混匀，制粒，用16目筛整粒，加药物组合物2%重量的硬脂酸镁为润滑剂，加药物组合物10%重量的微晶纤维素、15%重量的可压性淀粉充分混匀，压片，包薄膜衣，即得片剂4000片，每片活性成分约53.4mg。

实施例6：C1胶囊剂的制备

取1,8-桉叶素44.0g、香桧烯 16.8g、柠檬烯16.3g、α-松油醇9.7g、蒿本内酯58.0g、川芎嗪1.5g、阿魏酸2.3g、薤白总皂苷7.1g和左旋龙脑88g，将蒿本内酯、川芎嗪、阿魏酸、薤白总皂苷和左旋龙脑混合均匀，干燥，粉碎，加入1,8-桉叶素、香桧烯、柠檬烯和α-松油醇，搅拌混合后，过100目筛，混匀，再过100目筛，用80%乙醇制成软材，过14目筛，制粒，于60℃左右干燥，整粒，装胶囊，得胶囊剂4000粒，每粒活性成分约60.9mg。

实施例7：C2胶囊剂的制备

取1,8-桉叶素36.0g、香桧烯 16.8g、柠檬烯13.3g、α-松油醇9.7g、蒿本内酯47.4g、川芎嗪1.5g、阿魏酸1.9g、薤白总皂苷7.1g和左旋龙脑72g，将蒿本内酯、川芎嗪、阿魏酸、薤白总皂苷和左旋龙脑混合均匀，干燥，粉碎，加入1,8-桉叶素、香桧烯、柠檬烯和α-松油醇，搅拌混合后，过100目筛，混匀，再过100目筛，用80%乙醇制成软材，过14目筛，制粒，于60℃左右干燥，整粒，装胶囊，得胶囊剂4000粒，每粒活性成分约51.4mg。

实施例8 低组分用量制得的滴丸剂  药物D1

取1,8-桉叶素28.5g、香桧烯 13.4g、柠檬烯10.6g、α-松油醇7.8g、蒿本内酯39.5g、川芎嗪1.2g、阿魏酸1.6g、薤白总皂苷6.1g和左旋龙脑60g，将蒿本内酯、川芎嗪、阿魏酸、薤白总皂苷和左旋龙脑混合研匀，加入到熔融的830g聚乙二醇中，其中聚乙二醇为聚乙二醇4000和聚乙二醇6000，比例为3:2，再加入1,8-桉叶素、香桧烯、柠檬烯和α-松油醇，混匀，滴制成型，制得滴丸剂1000g，每丸重25mg，即每丸活性成分约4.22mg。

实施例9 高组分用量制得的滴丸剂  药物D2

取1,8-桉叶素51.4g、香桧烯 24.5g、柠檬烯19.2g、α-松油醇14.5g、蒿本内酯65.0g、川芎嗪2.1g、阿魏酸2.7g、薤白总皂苷9.8g和左旋龙脑100g，将蒿本内酯、川芎嗪、阿魏酸、薤白总皂苷和左旋龙脑混合研匀，加入到熔融的770g聚乙二醇中，其中聚乙二醇为聚乙二醇4000和聚乙二醇6000，比例为3:2，再加入1,8-桉叶素、香桧烯、柠檬烯和α-松油醇，混匀，滴制成型，制得滴丸剂1000g，每丸重25mg，即每丸活性成分约7.23mg。

药物性能评价实验

下面，对上述制备实施例1-9制备的各药物，进行治疗冠心病心绞痛、脑血栓、脑梗死、缺血再灌注损伤等作用实验以及急性毒性、稳定性的评价实验。

实验例1 本发明药物组合物治疗冠心病心绞痛作用试验

1、实验材料：

药物：A1-A3：实施例1-3制得的滴丸；B1-B2：实施例4-5制得的片剂；C1-C2: 实施例6-7制得的胶囊剂；D1：实施例8低组分用量制得的滴丸；D2：实施例9高组分用量制得的滴丸；E：米槁心乐滴丸，规格25mg/丸，按照专利ZL 03135734.2中实施例1的方法制备。

动物：昆明种小鼠，18-24g，雌雄各半；Wistar大鼠，80～100g、雌雄各半。购于贵阳医学院实验动物中心。

2、方法与结果：

①对小鼠的镇痛作用(热板法，扭体法)：取雌性昆明种小鼠，逐只放入G-8402型热板测痛仪内，测定并记录小鼠出现舔后足所需时间(s)作为该鼠痛阈值，连测三次，取平均值作为该鼠正常值或药前痛阈值。选用痛阈值在5s-30s以内的小鼠110只，随机分为11组，给药剂量为：药物A1-A3、B1-B2、C1-C2、D1-D2和E各组均分别为0.20g/kg，生理盐水组给予等容积生理盐水，于药后30、60、90min测定各鼠痛阈值，若小鼠在热板仪60S仍无痛觉反应即取出，痛阈值按60s计，结果见表1。

另取昆明种小鼠110只，随机分为11组，按前述给药剂量给药，分别于给药后lh各鼠腹腔注射0.7% 醋酸溶液O.2ml/只，观察15min内各组小鼠由醋酸引起的扭体反应次数，结果见表1。

表1 本发明组合物对小鼠镇痛作用(热板法 扭体法) ()  n=10)

本发明制剂组与生理盐水组比较，*P＜0.01，具有显著差异性；与药物E即米槁心乐滴丸比较，#P＜0.05。

结论：以上实验结果可知，在相同的药物剂量下，本发明制剂镇痛效果较现有公开的米槁心乐滴丸好，证明本发明制剂有明显镇痛作用，并呈良好量效关系；另外，采用本发明所述单体的低组分制得的滴丸剂，其治疗效果与现有公开的米槁心乐滴丸相当，高组分疗效没有明显增加，表明采用本发明所述的用量范围，镇痛效果良好。

②耐缺氧作用：以常压缺氧小鼠存活时间为观察指标，取昆明种小鼠110只，雌雄各半，体重20±2g，随机分为11组，每组10只，给药剂量同①，每日1次，连续3次。末次药后lh，取每组l0只小鼠，逐只放入250m]广口瓶内密闭(瓶内放钠石灰20g，瓶口涂凡士林)，观察各组小鼠死亡时间。以呼吸停止为死亡时间，取剩下各组小鼠逐只腹腔注射异丙肾上腺索7．5mg/kg，30min后，同上述方法将各组小鼠分别放入广口瓶。结果见表2。

表2  本发明组合物抗小鼠缺氧作用(

  n=10 )

组别	常压缺氧存活时间（min）	另用异丙肾上腺素存活时间（min）
			药物A1	29.8±6.5*#	26.7±5.9*#
药物A2	30.6±5.9*#	27.4±6.2*#
			药物A3	30.3±6.6*#	27.1±5.4*#
药物B1	29.1±7.1*#	25.9±6.8*#
			药物B2	29.6±8.0*#	26.4±7.3*#
药物C1	30.1±7.5*#	26.8±7.7*#
			药物C2	29.3±8.3*#	26.1±5.6*#
药物D1	25.8±7.8*	22.7±6.0*
			药物D2	30.7±6.7*#	27.4±6.4*#
药物E	26.4±8.1*	23.0±5.3*
			生理盐水组	16.1±5.6	13.2±4.8

本发明制剂组与生理盐水组比较，*P＜0.01，具有显著差异性；与药物E即米槁心乐滴丸比较，#P＜0.05。

结论：以上实验结果可知，在相同的药物剂量下，本发明制剂耐缺氧作用较现有公开的米槁心乐滴丸好，证明本发明制剂能够明显延长小鼠缺氧存活时间，并呈良好量效关系；另外，采用本发明所述单体的低组分制得的滴丸剂，其治疗效果与现有公开的米槁心乐滴丸相当，高组分疗效没有明显增加，表明采用本发明所述的用量范围，抗缺氧效果良好。

3、结论：根据以上实验结果，在相同药物剂量下，本发明制剂镇痛和抗缺氧作用效果较现有公开的米槁心乐滴丸好；另外，采用本发明所述的用量范围，治疗效果良好。说明本发明的组合物及其制剂，在治疗心阳不足、心血瘀阻所致的胸痹心痛尤其是冠心病心绞痛方面具有良好效果。进一步考察本发明制剂的脑血管疗效以及急性毒性作用。

评价实验例2 本发明的药物组合物治疗脑血管疾病作用实验

1、实验材料：

药物： A1-A3：实施例1-3制得的滴丸；B1-B2：实施例4-5制得的片剂；C1-C2: 实施例6-7制得的胶囊剂；D1：实施例8低组分用量制得的滴丸；D2：实施例9高组分用量制得的滴丸；E：复方丹参滴丸，规格25mg/丸，天士力制药集团股份有限公司生产。上述药物实验时用蒸馏水配制成混悬液。

动物：Wistar大鼠，体重250±20g，雌雄兼用，由中国人民解放军第三军医大学实验动物中心提供。

2、方法与结果：

2.1对血管通透性的影响

取120只健康大鼠，随机分为12组：空白对照组，缺血模型组，药物A1-A3、B1-B2、C1-C2、D1-D2和E各组。给药剂量为：药物A1-A3、B1-B2、C1-C2、D1-D2和E各组均分别为0.15g/kg，生理盐水组给予等容积生理盐水，每天一次，灌胃给药三天。末次给药前，先将动物腹腔注射水合氯醛300mg/kg麻醉，分离双侧颈总动脉，穿线以被结扎。药后15min于动物舌下静脉注射伊文思蓝50mg/kg，5min后结扎，逐层缝合皮肤。空白对照组只将颈总动脉分离后不结扎。4小时后处死大鼠，取同样重量脑组织，置于3ml、0.5% Na₂SO₃生理盐水溶液—丙酮（3：7）溶液中，捣碎，充分浸泡24小时，离心，上清液于650nm处比色，计算其中伊文思蓝含量。结果见下表3：

表3  对不完全性脑缺血大鼠脑组织中伊文思蓝含量的影响（x±s）

组别	动物数（只）	伊文思蓝含量（mg）
			空白对照组	10	27.3±8.54
缺血模型组	10	29.1±5.75
			药物A1	10	22.1±5.14**
药物A2	10	21.4±7.35**
			药物A3	10	21.6±4.47**
药物B1	10	23.2±8.23**
			药物B2	10	22.4±9.05**
药物C1	10	21.7±6.08**
			药物C2	10	22.7±5.10**
药物D1	10	26.7±5.36
			药物D2	10	21.2±6.33**
药物E	10	23.6±4.32**

注：本发明制剂组与模型对照组比较**P<0.01。

由上表可知，本发明制剂和复方丹参滴丸可明显降低脑中伊文思蓝含量，且组间无显著差异，表明两者治疗效果相当；另外，采用本发明所述单体的低组分制得的滴丸剂，其作用效果欠佳，高组分作用没有明显增加，表明采用本发明所述的用量范围，提高血管通透性的作用良好。

2.2对脑组织超氧化物歧化酶（SOD）活性及丙二醛（MDA）含量的影响

同样取120只健康大鼠，随机分为12组：空白对照组，缺血模型组，药物A1-A3、B1-B2、C1-C2、D1-D2和E各组。给药剂量为：药物A1-A3、B1-B2、C1-C2、D1-D2和E各组均分别为0.15g/kg，生理盐水组给予等容积生理盐水，每天一次，灌胃给药三天。末次给药后15min，同样进行双侧颈总动脉结扎，造成大鼠不完全性脑缺血。4小时后断头处死大鼠，立即取脑，匀浆、离心，提取SOD，并测定其活性；同时测定MDA含量。结果见下表4：

表4 对不完全性脑缺血大鼠脑组织中MDA含量及SOD活性的影响（x±s）

组别	动物数（只）	MDA（nmol/g组织）	SOD（U/g组织）
				空白对照组	10	3.3±0.67	23.4±2.47
缺血模型组	10	6.1±1.15△	15.6±2.83△
				药物A1	10	3.2±0.93**	23.8±1.97**
药物A2	10	3.0±1.56**	24.3±2.58**
				药物A3	10	3.1±1.64**	24.1±3.76**
药物B1	10	3.3±1.81**	23.2±3.12**
				药物B2	10	3.2±1.35**	23.6±4.25**
药物C1	10	3.1±1.78**	23.9±3.77**
				药物C2	10	3.2±1.77**	23.4±2.65**
药物D1	10	4.8±1.63	19.3±4.56
				药物D2	10	3.0±1.22**	24.6±2.27**
药物E	10	2.9±1.40**	24.5±3.41**

注：与缺血模型组比较**P<0.01；与空白对照组比较△P<0.01。

由上表可知，大鼠脑缺血后，其中MDA含量明显升高，SOD活性显著降低，与空白对照组比P<0.01；而复方丹参滴丸和本发明制剂组的动物脑组织中MDA含量明显较模型组降低，同时SOD活性明显升高。另外，采用本发明所述单体的低组分制得的滴丸剂，其作用效果欠佳，高组分作用没有明显增加，表明采用本发明所述的用量范围，作用良好。

2.3对局灶性缺血的影响

2.3.1动物模型的建立：健康成年大鼠随机分为11组，每组10只，其中缺血对照组用生理盐水灌胃；E组复方丹参滴丸0.10g/kg剂量给药；药物A1-A3、B1-B2、C1-C2、D1-D2各组均分别为0.15g/kg剂量给药。采用两血管闭塞合并放血法，造成急性脑缺血。实验动物先麻醉后固定在手术台上。经颈正中切口，钝性分离两侧颈总动脉，丝线结扎悬挂30min，同时断尾放血0.8ml，然后松开丝带结扎线10min，再结扎两侧颈总动脉30min后松开。术后给予进食进水。

2.3.2观测指标：（1）凝血系统凝血酶时间（TT）、凝血酶原时间（PT）、活化部分凝血酶时间（APTT）、纤维蛋白原测定（FIB）。

（2）脑梗死面积的测定 术后一定时间采血后处死，取一定量大鼠大脑，去掉小脑和脑干，冠状切为0.3cm的脑片，观察有无出血灶。将脑片浸入TTC中，恒温后甲醛固定，利用图像病理分析系统测定梗死面积。

2.3.3病理学检测：脑片经染色后，在光镜下观察脑组织病理变化。

2.3.4结果

（1）凝血纤溶系统的检测结果：如下表5

表5  凝血纤溶系统的检测结果（x±s）

注：与缺血对照组比较**P<0.01。

结论：本发明制剂组和复方丹参滴丸组给药后可以看到FIB含量较对照组明显降低，当双侧颈总动脉结扎造成前脑缺血性损伤后，可使TT、APTT延长，且FBG的降低与对照组相比均有显著差异性，但两治疗组相比无显著差异性，表明本发明制剂治疗作用与复方丹参滴丸相当。另外，采用本发明所述单体的低组分制得的滴丸剂，其作用效果欠佳，高组分作用没有明显增加，表明采用本发明所述的用量范围，作用良好。

（2）大鼠局灶性脑缺血一定时间后脑梗死面积及药物的影响结果：如下表6

表6  脑梗死范围（x±s）

组别	例数	梗死面积/%
			药物A1	10	5.51±2.16*
药物A2	10	5.42±2.47*
			药物A3	10	5.47±1.03*
药物B1	10	5.62±2.05*
			药物B2	10	5.56±1.88*
药物C1	10	5.48±1.90*
			药物C2	10	5.59±1.74*
药物D1	10	7.61±2.33
			药物D2	10	5.37±2.50*
药物E	10	5.43±1.85*
			缺血对照组	10	10.58±2.61

注：治疗组与对照组比较*P<0.05。

结论：两个治疗组的脑梗死面积明显低于对照组，且组间无显著差异性。证明本发明制剂能减少脑缺血动物的脑梗死面积。

（3）病理学改变：对照组光镜下观察，发现组织间隙增宽，水肿，有空泡形成，神经元细胞核缩小，甚至溶解消失。而本发明制剂治疗组可以看到组织间隙水肿较对照组轻，细胞间隙改变不明显，神经元细胞核大小基本正常，核较深染，病灶中心区有少许空泡形成。另外，采用本发明所述单体的低组分制得的滴丸剂，其作用效果欠佳，高组分作用没有明显增加。

2.4对体内血小板血栓形成的影响

将大鼠随机分为10组，每组10只，给予四味大果木姜子提取物2.5g/kg。最后一次给药1小时后麻醉，固定，分离气管插入气管导管，分离右颈总动脉和左颈外静脉。在聚乙烯管仲放入一根已称重的丝线，用含肝素的生理盐水充满聚乙烯管，将管的一端插入右颈总动脉，另一端插入左颈外静脉。打开血流15min后中断，取出丝线称重，计算血栓重量。

试验结果：对照组血栓重37.5±5.43mg，药物治疗组血栓重分别为：A1（20.3±5.17mg）；A2（19.5±5.02mg）；A3（19.7±4.66mg）；B1（20.8±5.23mg）；B2（20.4±4.55mg）；C1（20.1±3.27mg）；C2（20.6±3.85mg）；D1（28.5±4.06mg）；D2（19.3±4.87mg）。其中A1-A3、B1-B2、C1-C2和D2与对照组相比有显著性差异，说明本发明制剂可抑制体内血栓的形成；另外，采用本发明所述单体的低组分制得的滴丸剂，其作用效果不理想，高组分作用没有明显增加。表明采用本发明所述的用量范围，作用良好。

评价实验例3 本发明的药物组合物毒理实验研究

1、实验材料：

药物：A1-A3：实施例1-3制得的滴丸；B1-B2：实施例4-5制得的片剂；C1-C2：实施例6-7制得的胶囊剂；D1：实施例8低组分用量制得的滴丸；D2：实施例9高组分用量制得的滴丸；E：米槁心乐滴丸，规格25mg/丸，按照专利ZL 03135734.2中实施例1的方法制备。

动物：昆明小鼠220只，体重20±2g，雌雄兼用。

2、方法：急性毒性试验：取昆明小鼠220只，随机分为11组，每组20只，雌雄各半。试验前将动物禁食16小时，不限制饮水，然后各组小鼠分别灌胃给予药物0.4ml/10g和等量生理盐水溶液，给药剂量为：药物A1：1.52g活性成分/kg；A2：1.82g活性成分/kg；B1：1.22g活性成分/kg；B2：1.67g活性成分/kg；C1：1.37g活性成分/kg；C2：1.79g活性成分/kg；D1：1.16g活性成分/kg；D2：1.91g活性成分/kg；药物E：2.1g/kg。观察14天，正常饮食，饮水，观察小鼠的一般情况（体重变化、饮食、皮毛、行为、分泌物、排泄物等）及中毒、死亡情况。

3、结果：本发明各组动物活动正常，14天内无一死亡。其中空白组试验期间小鼠体重均增加，饮食及活动正常，皮毛光滑，口、鼻、眼等未见异常分泌物尿、便正常；药物各组给药后14d内，除D2组外，其余各组饮食及活动正常，皮毛光滑，口、鼻、眼等未见异常分泌物，仅给药后第1天呈褐色软便，小便未见异常；药物D2组给药后2天内，有少数小鼠皮毛蓬乱，出现萎靡少动等毒性反应，但此后逐渐恢复正常。由此可知，采用本发明所述单体的高组分制得的胶囊剂，具有一定毒性。

4、结论：根据本实验结果可知，本发明组合物及其制剂对小鼠急性毒性较作用甚低，考虑到本发明所述单体的高组分用量会导致一定毒性，因此，临床上不建议采用本发明单体的高组分用量。

评价实验例4  本发明的药物制剂稳定性考察

加速稳定性试验：随机选取实施例1、4、6中制得的样品各一份，编号1-3，在温度40℃±2℃，相对湿度75％±5％的条件下放置，分别在试验期间第1个月、2个月、3个月、6个月末取样一次进行考察。

考察以产品性状、鉴别、D-龙脑限度检查、有效成分1,8-桉叶素含量和左旋龙脑含量为指标，检查产品的稳定性。结果见表。

表 加速稳定性试验结果

结论：本发明制备的治疗心脑血管疾病的组合物在加速试验条件下贮存，从加速考察结果来看，各考察项目均不见异常，有效成分含量也未发生明显变化，均符合质量标准要求。

通过上述心脑血管疗效、急性毒性、稳定性实验，可以看出，采用本发明组合物制备的滴丸、片剂和胶囊，治疗效果优于现有公开的米槁心乐滴丸，且毒性低，同时能治疗缺血性脑血管疾病，制剂的稳定性良好，是治疗心脑血管疾病的又一良好选择。另外，由上述实施例可以看出，低用量配比虽然毒性低但是治疗效果不理想，而高用量配比虽然疗效提高，但是毒性大，因此，当各组分的用量处于本发明的药物组合物的范围内时，解决了既能治疗疾病同时又毒性较低的技术难题。

Claims (10)

1.一种治疗心脑血管病的药物组合物，含有大果木姜子、川芎、薤白及艾片单体成分，所述各组分重量配比为：大果木姜子单体64.1-104.7份、川芎单体44.4-68.7份、薤白单体6.3-9.5份、艾片单体64-96份。

2.根据权利要求1所述的药物组合物，按重量份计算，含有大果木姜子单体76.0-92.8份、川芎单体50.9-62.2份、薤白单体7.1-8.7份、艾片单体72-88份；优选含有大果木姜子单体84.4份、川芎单体56.5份、薤白单体7.9份、艾片单体80份。

3. 根据权利要求1所述的药物组合物，前述的大果木姜子单体为大果木姜子挥发油类单体成分，是指1,8-桉叶素、香桧烯、柠檬烯和α-松油醇；前述的川芎单体成分为蒿本内酯、川芎嗪和阿魏酸，前述的薤白单体成分为薤白总皂苷；前述的艾片单体成分为左旋龙脑。

4.根据权利要求3所述的药物组合物，按重量份计算，含有1,8-桉叶素30.6-49.5份、香桧烯14.0-23.4份、柠檬烯11.2-18.4份、α-松油醇8.3-13.4份、蒿本内酯41.4-64.1份、川芎嗪1.3-2.0份、阿魏酸1.7-2.6份、薤白总皂苷6.3-9.5份和左旋龙脑64-96份。

5. 根据权利要求3所述的药物组合物，按重量份计算，含有1,8-桉叶素36.0-44.0份、香桧烯 16.8-20.6份、柠檬烯13.3-16.3份、α-松油醇9.7-11.9份、蒿本内酯47.4-58.0份、川芎嗪1.5-1.9份、阿魏酸1.9-2.3份、薤白总皂苷7.1-8.7份和左旋龙脑72-88份。

6.根据权利要求3所述的药物组合物，按重量份计算，含有1,8-桉叶素40.0份、香桧烯 18.7份、柠檬烯14.8份、α-松油醇10.8份、蒿本内酯52.7份、川芎嗪1.7份、阿魏酸2.1份、薤白总皂苷7.9份和左旋龙脑80份。

7.一种治疗心脑血管疾病的药物制剂，由权利要求1-6任一项所述的药物组合物和辅料制成。

8.根据权利要求7所述的治疗心脑血管疾病的药物制剂，其剂型为滴丸剂、片剂或胶囊剂。

9.权利要求1-6任一项所述的药物组合物或权利要求7或8所述的药物制剂在制备治疗心脑血管疾病的药物中的应用，所述心脑血管疾病为心阳不足、心血瘀阻所致的胸痹心痛以及缺血性脑血管病，包括冠心病心绞痛、脑血栓和脑梗塞。

10.一种治疗心脑血管疾病的滴丸的制备方法，取权利要求4或5或6所述的药物组合物中除大果木姜子挥发油类成分和左旋龙脑外的各原料，加入到熔融的聚乙二醇中，其中聚乙二醇为聚乙二醇4000和聚乙二醇6000，两者比例为3:2，再加入大果木姜子挥发油类成分和左旋龙脑，混匀，滴制成型，制得滴丸剂。