CN103755591A

CN103755591A - 碱性嫩黄o标准检测样品的制备方法

Info

Publication number: CN103755591A
Application number: CN201410032980.3A
Authority: CN
Inventors: 苏锡辉; 李乃洁; 张凯
Original assignee: SHENYANG PRODUCT QUALITY SUPERVISION AND INSPECTION INSTITUTE
Current assignee: SHENYANG PRODUCT QUALITY SUPERVISION AND INSPECTION INSTITUTE
Priority date: 2014-01-23
Filing date: 2014-01-23
Publication date: 2014-04-30
Anticipated expiration: 2034-01-23
Also published as: CN103755591B

Abstract

碱性嫩黄O标准检测样品的制备方法，涉及一种标准检测样品的制备方法，所述方法包括：碱性嫩黄O的合成与纯化：在三口反应瓶内加入乙二醇作溶剂，加入4,4一二甲氨基二苯甲烷、硫磺，通氨气进行搅拌反应，反应后，加入氯化氨，继续通氨气反应后，冷却、结晶、过滤、然后加盐水进行重结晶、过滤、干燥得成品，经过硅胶柱净化，淋洗液为二氯甲烷和甲醇，洗脱液经过避光、低温干燥后得到粗品；该方法制得纯度高、含量准确、均匀性和稳定性均符合要求的标准样品，解决我国检测用标准品依赖进口，为我国食品安全检验检测提供全面实物标准保障，为我国各级政府食品安全监控提供了技术支撑。

Description

碱性嫩黄O标准检测样品的制备方法

技术领域

本发明涉及一种标准检测样品的制备方法，特别是涉及一种碱性嫩黄O标准检测样品的制备方法。

背景技术

标准样品是具足够均匀的一种或多种化学的、物理的、生物学的、工程技术的或感官的等性能特征，经技术鉴定，并附有说明有关性能数据证书的一批样品。是以其性质与供试样品进行比较的质量均一的实物样品，并且有适合使用目的的纯度。

碱性嫩黄O是一种工业染料，主要用主要用于麻、纸、皮革、草编织品、人造丝等的染色，也用于印染棉织品。其色淀用于制墙纸、色纸、油墨和油漆等。也可用于皮革、纸、麻和粘胶的染色。由于能起染色作用，一些不法商贩把碱性嫩黄加入到腐竹中，这对皮肤黏膜有轻度刺激，可引起结膜炎、皮炎和上呼吸道刺激症状，人接触或者吸入碱性嫩黄都会引起中毒。

因此，及时准确判断食品中是否存在这三种非食用色素，建立快速、准确的食品中非食用色素碱性嫩黄O的测定方法是非常必要的。而进行定量方法的开发就需要高纯度的标准品，采用标准样品，才能保证检测结果在国际交往中的准确性、可比性、可溯源性。

发明内容

本发明的目的在于提供一种碱性嫩黄O标准检测样品的制备方法，该方法制得纯度高、含量准确、均匀性和稳定性均符合要求的标准样品，解决我国检测用标准品依赖进口，为我国食品安全检验检测提供全面实物标准保障，为我国各级政府食品安全监控提供了技术支撑。

本发明的目的是通过以下技术方案实现的：

碱性嫩黄O标准检测样品的制备方法，所述方法包括：碱性嫩黄O的合成与纯化：在三口反应瓶内加入乙二醇作溶剂，加入4,4一二甲氨基二苯甲烷、硫磺，通氨气进行搅拌反应，反应后, 加入氯化氨, 继续通氨气反应后, 冷却、结晶、过滤、然后加盐水进行重结晶、过滤、干燥得成品，经过硅胶柱净化，淋洗液为二氯甲烷和甲醇，洗脱液经过避光、低温干燥后得到粗品；粗品经过重结晶分离后，采用薄层色谱进行分离，甲醇与三氯甲烷比列为1：13时，样品进行硅胶柱净化，甲醇与三氯甲烷混合液梯度洗脱，洗脱液氮吹后干燥的纯品；取粗品与硅胶搅拌均匀后，装柱后依次用石油醚润洗、二氯甲烷洗涤后，用二氯甲烷/甲醇洗脱目的物，洗脱液在避光条件下挥干待测；碱性嫩黄O的合成与纯化：在三口反应瓶内加入30 g乙二醇作溶剂，加入4,4一二甲氨基二苯甲烷（甲烷贝司）15 g、硫磺6 g，通氨气进行搅拌反应，反应温度控制在140±5℃，反应5 h后, 加入氯化氨8 g, 继续通氨气反应16 h后, 冷却、结晶、过滤、然后加入30%盐水进行重结晶、过滤、干燥得成品约15 g，粗品含量在80%左右，经过硅胶柱净化，淋洗液为二氯甲烷和甲醇，洗脱液经过避光、低温干燥后得到粗品。

所述的碱性嫩黄O标准检测样品的制备方法，所述碱性嫩黄O的合成与纯化：粗品经过重结晶分离后，采用薄层色谱进行分离，甲醇与三氯甲烷比列为1：13时，在薄层上主产物与其他杂质得到很好的分离；样品进行硅胶柱净化，甲醇与三氯甲烷混合液梯度洗脱，洗脱液氮吹后干燥的纯品，取1.2 g粗品与25 g硅胶100-140目搅拌均匀后，装柱后依次用100 mL石油醚润洗、200 mL二氯甲烷洗涤后，用200 mL的二氯甲烷/甲醇13:1洗脱目的物，洗脱液在避光条件下挥干待测。

附图说明

图1为本发明碱性嫩黄O标准样品的液相色谱图。

具体实施方式

下面结合附图所示实施例，对本发明作进一步详述。

实施例1：

碱性嫩黄O的合成与纯化：在三口反应瓶内加入30 g乙二醇作溶剂，加入4,4一二甲氨基二苯甲烷（甲烷贝司）15 g、硫磺6 g，通氨气进行搅拌反应，反应温度控制在140±5℃，反应5 h后, 加入氯化氨8 g, 继续通氨气反应16 h后, 冷却、结晶、过滤、然后加入30%盐水进行重结晶、过滤、干燥得成品约15 g。粗品含量在80%左右，经过硅胶柱净化，淋洗液为二氯甲烷和甲醇，洗脱液经过避光、低温干燥后得到粗品。

粗品经过重结晶分离后，采用薄层色谱进行分离，甲醇与三氯甲烷比列为1：13时，在薄层上主产物与其他杂质得到很好的分离；样品进行硅胶柱净化，甲醇与三氯甲烷混合液梯度洗脱，，洗脱液氮吹后干燥的纯品。取1.2 g粗品与25 g硅胶（100-140目）搅拌均匀后，装柱后依次用100 mL石油醚润洗、200 mL二氯甲烷洗涤后，用200 mL的二氯甲烷/甲醇（13:1）洗脱目的物，洗脱液在避光条件下挥干待测。

将上述制得碱性嫩黄O标准品，用棕色瓶进行分装，编号后置于室温、通风密封保存。

进行纯度检查及含量测定：薄层色谱纯查， HPLC 纯度检查：在碱性嫩黄O标准样品的制备中，选择HPLC峰面积归一法进行含量测定。

所用仪器及条件：高效液相色谱仪（岛津LC-20A），配二极管阵列检测器或可变波长紫外检测器；色谱柱： C₁₈（250 mm×4.6mm, 5 μm）或相当者。

操作条件：碱性嫩黄O：流动相：甲醇/（20 mM）醋酸铵=70/30；流速：1.0 mL/min；柱温：25 ℃；检测波长：436 nm；进样量：10 μL。

定量测定：测试液配置：准确称取1.0 g的样品，经50 mL乙醇溶解，水稀释定容后，配制成10 mg/L的样液，在上述液相色谱法条件下进行面积归一法定量。色谱条件应保证试样中所有杂质能够与待测物分离，并且碱性嫩黄O的保留时间合适。进样测定，计算试样中碱性嫩黄O的纯度。在所选择的色谱条件下，碱性嫩黄O的保留时间为4.77 min。

仪器与设备：高效液相色谱仪（日本岛津公司LC-20A），紫外-可见分光光度仪（日本岛津公司），液质质联用仪（美国AB公司），INOVA-600核磁共振仪（Varian公司）。

材料与试剂：浓盐酸、苯胺、亚硝酸钠、尿素、间苯二胺、对氨基苯磺酸钠、2-萘酚、氯化钠、乙二醇、4,4一二甲氨基二苯甲烷、硫磺、氯化氨、分析纯95%乙醇、分析纯甲醇（上海安谱科学仪器有限公司）。液相用甲醇（色谱纯，TEDIA COMPANY ）；水为去离子水。

Claims

1.碱性嫩黄O标准检测样品的制备方法，其特征在于，所述方法包括：碱性嫩黄O的合成与纯化：在三口反应瓶内加入乙二醇作溶剂，加入4,4一二甲氨基二苯甲烷、硫磺，通氨气进行搅拌反应，反应后, 加入氯化氨, 继续通氨气反应后, 冷却、结晶、过滤、然后加盐水进行重结晶、过滤、干燥得成品，经过硅胶柱净化，淋洗液为二氯甲烷和甲醇，洗脱液经过避光、低温干燥后得到粗品；粗品经过重结晶分离后，采用薄层色谱进行分离，甲醇与三氯甲烷比列为1：13时，样品进行硅胶柱净化，甲醇与三氯甲烷混合液梯度洗脱，洗脱液氮吹后干燥的纯品；取粗品与硅胶搅拌均匀后，装柱后依次用石油醚润洗、二氯甲烷洗涤后，用二氯甲烷/甲醇洗脱目的物，洗脱液在避光条件下挥干待测；碱性嫩黄O的合成与纯化：在三口反应瓶内加入30 g乙二醇作溶剂，加入4,4一二甲氨基二苯甲烷（甲烷贝司）15 g、硫磺6 g，通氨气进行搅拌反应，反应温度控制在140±5℃，反应5 h后, 加入氯化氨8 g, 继续通氨气反应16 h后, 冷却、结晶、过滤、然后加入30%盐水进行重结晶、过滤、干燥得成品约15 g，粗品含量在80%左右，经过硅胶柱净化，淋洗液为二氯甲烷和甲醇，洗脱液经过避光、低温干燥后得到粗品。

2.根据权利要求1所述的碱性嫩黄O标准检测样品的制备方法，其特征在于，所述碱性嫩黄O的合成与纯化：粗品经过重结晶分离后，采用薄层色谱进行分离，甲醇与三氯甲烷比列为1：13时，在薄层上主产物与其他杂质得到很好的分离；样品进行硅胶柱净化，甲醇与三氯甲烷混合液梯度洗脱，洗脱液氮吹后干燥的纯品，取1.2 g粗品与25 g硅胶100-140目搅拌均匀后，装柱后依次用100 mL石油醚润洗、200 mL二氯甲烷洗涤后，用200 mL的二氯甲烷/甲醇13:1洗脱目的物，洗脱液在避光条件下挥干待测。