CN103734198A - 一种防治农业害螨紫茉莉提取物的制备方法及其应用 - Google Patents

Abstract

一种防治农业害螨紫茉莉提取物的制备方法及其应用，涉及一种防治农害螨提取物的制备方法及其应用，包括如下制备过程：将紫茉莉全草阴干，用植物粉碎机粉碎，过滤，得浸提液；滤渣、乙醇浸提，用旋转蒸发仪减压浓缩，得黑褐色浓膏状物即得本发明紫茉莉提取物；将紫茉莉全草阴干，用植物粉碎机粉碎，过40目筛，加2～10倍量95%乙醇，回流提取5～15小时，过滤，得回流提取液，用旋转蒸发仪减压浓缩，得黑褐色浓膏状物即得本紫茉莉提取物。为一种杀螨活性的植物源农药，紫茉莉提取物或作为农药制剂所需常规辅料，制备成农药常规制剂，常规制剂是乳油、微乳剂、悬浮剂、水剂做为防治农害螨提取物的应用。

Description

一种防治农业害螨紫茉莉提取物的制备方法及其应用

技术领域

    本发明涉及一种防治农业害螨紫茉莉提取物的制备方法及其应用，特别是涉及一种防治农害螨提取物的制备方法及其应用。

背景技术

植食性螨类属于最常见的植物害螨，可使许多重要经济作物，如水果、棉花、蔬菜和观赏植物严重减产，是公认的最难防治的有害生物群落。化学农药对控制农业生产中的有害螨类，保护作物不受损伤和保障农业经济起到了重要作用，但化学农药的长期使用带来了种种弊端，如农产品中农药残留超标，人畜中毒事件增加，害虫产生抗药性，天敌数量骤减，生态平衡遭破坏等等。因此，高效、广谱、安全的杀螨剂的研制开发已成为当务之急。作为生物农药中的植物源农药，具有高效、低毒或无毒、低残留、选择性高、害螨一般很难对其产生抗性、又易和其他农药相混配等优点,倍受全世界农药研究及应用部门的广泛重视，为此开发绿色环保的植物源杀螨剂成为防治农业害螨，促进农业可持续发展的重要措施。

紫茉莉(Mirabilis jalapa Linnaeus)俗称胭脂花、野茉莉、地雷花、草茉莉等，属紫茉莉科，为一年生草本植物，性寒、味甘，根、茎、叶、花、种子均可入药。有清热解毒、利湿消肿、活经通络的功效。经药理研究证明紫茉莉的根有抗癌、抑菌成分，叶有利尿、儿茶酚胺作用，种子有避孕、溶血和凝血成分。目前，尚未发现紫茉莉提取物在防治农业害螨中的用途。

发明内容

本发明的目的在于提供一种防治农业害螨紫茉莉提取物的制备方法及其应用，该方法提出的紫茉莉为自然界中的植物，其为具有杀螨活性的植物源农药，紫茉莉提取物是一种多成分的混合物，对农业害螨有多个作用位点，因此不易产生抗药性，在自然条件下易于分解，对环境和周围的生态系统安全。

本发明的目的是通过以下技术方案实现的：

一种防治农业害螨紫茉莉提取物的制备方法，所述方法包括如下制备过程：

①将紫茉莉全草阴干，用植物粉碎机粉碎，过40目筛，加2～10倍量95%乙醇，室温静置浸提1～7天，中间时常搅拌，过滤，得浸提液；滤渣再次加入2～10倍量95%乙醇浸提，如此提取三次，合并三次浸提液，用旋转蒸发仪减压浓缩，得黑褐色浓膏状物即得本发明紫茉莉提取物；

②将紫茉莉全草阴干，用植物粉碎机粉碎，过40目筛，加2～10倍量95%乙醇，回流提取5～15小时，过滤，得回流提取液，用旋转蒸发仪减压浓缩，得黑褐色浓膏状物即得本紫茉莉提取物。

一种防治农业害螨紫茉莉提取物的制备方法，所述方法还包括如下制备过程：

①将紫茉莉全草洗净，阴干，植物粉碎机粉碎，过40目筛，加5～10倍量95%乙醇,室温静置浸提5～7天，中间时常搅拌，过滤，得浸提液；滤渣加入4～6倍量95%乙醇浸提，按上述方法再提取两次，合并三次浸提液；然后用旋转蒸发仪减压浓缩，得黑褐色浓膏状物即得紫茉莉提取物；

②将紫茉莉全草阴干，用植物粉碎机粉碎，过40目筛，加5～10倍量95%乙醇，加热回流提取10～15小时，过滤，得回流提取液，用旋转蒸发仪减压浓缩，得黑褐色浓膏状物即得本紫茉莉提取物。

所述的一种防治农业害螨紫茉莉提取物的制备方法，所述紫茉莉提取物制备方法中，所用溶剂或选用石油醚、乙酸乙酯、环己烷、氯仿、正丁醇、苯、丙酮、甲醇、水中的一种。

一种防治农害螨提取物的应用，所述防治农害螨提取物为一种杀螨活性的植物源农药，紫茉莉提取物或作为农药制剂所需常规辅料，制备成农药常规制剂，常规制剂是乳油、微乳剂、悬浮剂、水剂做为防治农害螨提取物的应用。

本发明的优点与效果是：

1．本发明发现紫茉莉提取物具有杀螨活性，可以开发应用于农药生产，从而扩大了入侵植物紫茉莉的应用范围。

2．本发明提供了一种具有杀螨活性的植物源农药。与化学制备的农药相比，本发明紫茉莉提取物具有高效、低残留、与环境及与其它生物和谐的优点。由于紫茉莉为自然界中的植物，因此其提取物在自然条件下易于分解，对环境和周围的生态系统安全，没有环境污染问题；紫茉莉提取物是一种多成分的混合物，对农业害螨有多个作用位点，因此不易产生抗药性。

3．植物紫茉莉野生和种植资源丰富，紫茉莉中活性成分的提取简单易行，十分有利于进行工业化生产。

具体实施方式

下面结合实验及实施例，对本发明作进一步详述。

下面通过实验来说明紫茉莉提取物在防治农业害螨中的应用效果。

实验例1. 

紫茉莉提取物对二斑叶螨和朱砂叶满的杀螨活性测定实验，采用FAO推荐的杀螨标准方法---玻片浸渍法进行害螨的触杀生物活性测定。

实验材料：

按如下方法得到95%乙醇的紫茉莉提取物：将干燥紫茉莉全草500克粉碎，过40目筛，用5倍量的95%乙醇室温浸提4天，过滤，得浸提液。滤渣重新加5倍量的95%乙醇浸提，过滤。如此三次，将三次浸提液合并，减压浓缩，即得本发明紫茉莉提取物，收率为10.8%。然后称取0.5g上述紫茉莉提取物，加入提取物总体积1 %的丙酮溶解，用0.5%吐温-80搅拌，混合均匀，用蒸馏水稀释, 配成浓度为10毫克/毫升的紫茉莉提取物溶液，实验时根据要求进行稀释。

二斑叶螨和朱砂叶螨为豇豆苗饲养的敏感品系，智能人工气候箱内饲养，养虫的温度为25 ±1 ℃，相对湿度50 ±10 %，每日光照时间为18小时。

实验方法：

用双面胶带纸将健康活泼、大小一致的雌成螨背部向下粘于载玻片的一端，保证螨足、口器及须肢自由活动，并在解剖镜下剔除死亡或受伤和粘的不合格的个体，保证每玻片叶螨数为30 头。将粘有处理试螨的玻片在不同浓度的紫茉莉提取液中浸5秒后取出，用滤纸轻轻吸掉浮药， 置于温度25 ±1 ℃，相对湿度50 ±10 % ，每日光照时间为18小时的智能人工气候箱内培养。于给药24小时、48小时、72小时后在双目解剖镜下观察其死亡情况，用毛笔轻触试螨不动者为死亡。等体积少量溶剂和少量0.5%吐温-80的水溶液为空白对照。每处理组设3次重复。计算平均死亡率并用Abbott公式校正。

实验结果见表1、表2。

表1. 紫茉莉提取物对二斑叶螨雌成螨的触杀活性

表2. 紫茉莉提取物对朱砂叶螨雌成螨的触杀活性

由表1和表 2可见，三种浓度的紫茉莉提取物对二斑叶螨和朱砂叶螨均有一定的触杀作用，并且随着紫茉莉提取物浓度增大杀螨活性增强。三种浓度的紫茉莉提取物在24、48和72小时对二斑叶螨和朱砂叶螨的触杀校正死亡率随给药时间延长而升高。10 毫克/毫升浓度的紫茉莉提取物杀螨活性较高，在48小时对二斑叶螨和朱砂叶螨的触杀校正死亡率均达到100%。

实验例2.

 紫茉莉提取物对二斑叶螨和朱砂叶螨的杀卵活性测定实验，实验用提取物及叶螨准备同实验例1。

实验方法：

参考FAO推荐杀卵标准方法—叶片残毒法对二斑叶螨进行杀卵生物活性测定并稍有修改。采集新鲜的豇豆叶片，叶柄截去0.2 cm，并在叶柄上包上湿棉球，放在垫有一层湿棉花的培养皿中，叶片的两侧用湿棉花覆盖使叶片紧贴棉花，用零号软毛笔向每片叶片接雌成螨10头，置于25±1℃下任其产卵， 4小时后去除雌成螨，检查记录卵粒数，每叶保留30只螨卵，置于25℃智能人工气候箱内，当卵龄达到24～36 小时进行测定，将带卵的叶片浸入各处理药液5秒，然后放在吸水纸上阴干，放回垫有一层湿棉花的培养皿中， 置于温度25 ±1 ℃，相对湿度50 ±10 % ，每日光照为18 小时的人工气候箱中培养，每日往培养皿中加水保湿，并观察卵孵化情况。待对照组卵孵化并发育至若螨阶段，处理卵还没有孵化视为判断死亡的标准，记录7 天卵孵化数，仍不孵化卵作为死亡卵，计算死亡率。每处理设3个重复，等体积少量溶剂加0.5%吐温-80为空白对照。实验结果见表3和表4。表3. 紫茉莉提取物对二斑叶螨的杀卵活性

表4. 紫茉莉提取物对朱砂叶螨的杀卵活性

由表3和表4可见，三种不同浓度的紫茉莉提取物对二斑叶螨和朱砂叶螨卵都有一定的触杀活性，且杀卵活性随着紫茉莉提取物浓度的增高而增强，10毫克/毫升浓度的紫茉莉提取物对二斑叶螨和朱砂叶螨的杀卵校正死亡率分别达到75.56%和78.34%，杀卵作用较强。

实验例3. 

紫茉莉提取物对二斑叶螨和朱砂叶螨雌成螨的产卵忌避作用实验：

采集新鲜的豆叶洗净晾干，将2片干净的豆叶片分别用测试药液和对照液浸泡10s，取出叶片，自然晾干后将叶面向下平展并平行放置于垫有一层湿棉花的培养皿中，叶柄用脱脂棉包裹,自来水保湿。两叶片间隙约0.5～1厘米。用盖玻片连接两片豆叶，叶片与盖玻片四周用湿脱脂棉条围住，以防止二斑叶螨逃逸，同时保证盖玻片上干燥无水。用零号软毛笔取15头雌成螨放置于盖玻片上，保证其可以在盖玻片上正常爬行，任其自由选择左右两片豆叶产卵。将培养皿放入25 ±1 ℃，相对湿度50 ±10 % ，每日光照为18 小时的人工气候箱中培养。于24、48、72小时分别统计两叶片卵数，计算产卵忌避率，产卵忌避率( %) = ( 对照产卵量－处理产卵量) /对照产卵量×100。每个处理重复3次。实验结果见表5、表6。

表5. 紫茉莉提取物对二斑叶螨产卵忌避作用

表6. 紫茉莉提取物对朱砂叶螨产卵忌避作用

由表5和表6可见，三种不同浓度的紫茉莉提取物对二斑叶螨和朱砂叶螨都有一定的产卵忌避作用，1毫克/毫升浓度时产卵忌避作用较弱，5毫克/毫升和10毫克/毫升浓度的紫茉莉提取物的产卵忌避作用较强。随着处理时间的延长，三组产卵忌避作用均有一定程度的减弱，但10毫克/毫升浓度组的忌避作用还可达到72 %以上。

实施例1  紫茉莉提取物的制备：

将干燥紫茉莉全草500克粉碎，过40目筛，用5倍量的95%乙醇室温浸提3～5天，过滤，得浸提液。滤渣重新加5倍量的95%乙醇浸提，过滤。如此三次，将三次浸提液合并，减压浓缩，即得本发明紫茉莉提取物，收率为10.8%。

实施例2  紫茉莉提取物的制备：

将干燥紫茉莉全草500克粉碎，过40目筛，用5倍量的氯仿室温浸提3～5天，过滤，得浸提液。滤渣重新加5倍量的氯仿浸提，过滤。如此三次，将三次浸提液合并，减压浓缩，即得本发明紫茉莉提取物，收率为8.26%。

实施例3  紫茉莉提取物的制备：

将干燥紫茉莉全草500克粉碎，过40目筛，用5倍量的30-60℃石油醚35℃回流提取10～15小时，过滤，得回流提取液，减压浓缩，即得本发明紫茉莉提取物，收率为3.37%。

实施例4  紫茉莉提取物溶液的制备：

称取0.5g实施例1中的紫茉莉提取物，加入提取物总体积1 %的丙酮溶解，用0.5%吐温-80搅拌，混合均匀，用蒸馏水稀释, 配成浓度为10毫克/毫升的紫茉莉提取物溶液。

实施例5  紫茉莉提取物乳油剂的制备：

紫茉莉提取物10克，用二甲苯溶解，加入乳化剂浓乳500、浓乳600和吐温-80配成透明均相液体。各组分的比例为：紫茉莉提取物：二甲苯：浓乳500：浓乳600：吐温-80=20:70:3:2:5即配成20%的乳油剂。

实施例6 紫茉莉提取物微乳剂的制备：

紫茉莉提取物10克，用有机溶剂甲醇、表面活性剂吐温-80与Termul2507配制。各组分的比例为：紫茉莉提取物：甲醇：吐温-80：Termul2507=10：10：7.5：7.5，自来水补足100%。

Claims (4)

1.一种防治农业害螨紫茉莉提取物的制备方法，其特征在于，所述方法包括如下制备过程：

①将紫茉莉全草阴干，用植物粉碎机粉碎，过40目筛，加2～10倍量95%乙醇，室温静置浸提1～7天，中间时常搅拌，过滤，得浸提液；滤渣再次加入2～10倍量95%乙醇浸提，如此提取三次，合并三次浸提液，用旋转蒸发仪减压浓缩，得黑褐色浓膏状物即得本发明紫茉莉提取物；

②将紫茉莉全草阴干，用植物粉碎机粉碎，过40目筛，加2～10倍量95%乙醇，回流提取5～15小时，过滤，得回流提取液，用旋转蒸发仪减压浓缩，得黑褐色浓膏状物即得本紫茉莉提取物。

2.一种防治农业害螨紫茉莉提取物的制备方法，其特征在于，所述方法还包括如下制备过程：

①将紫茉莉全草洗净，阴干，植物粉碎机粉碎，过40目筛，加5～10倍量95%乙醇,室温静置浸提5～7天，中间时常搅拌，过滤，得浸提液；滤渣加入4～6倍量95%乙醇浸提，按上述方法再提取两次，合并三次浸提液；然后用旋转蒸发仪减压浓缩，得黑褐色浓膏状物即得紫茉莉提取物；

②将紫茉莉全草阴干，用植物粉碎机粉碎，过40目筛，加5～10倍量95%乙醇，加热回流提取10～15小时，过滤，得回流提取液，用旋转蒸发仪减压浓缩，得黑褐色浓膏状物即得本紫茉莉提取物。

3.根据权利要求1或2所述的一种防治农业害螨紫茉莉提取物的制备方法，其特征在于，所述紫茉莉提取物制备方法中，所用溶剂或选用石油醚、乙酸乙酯、环己烷、氯仿、正丁醇、苯、丙酮、甲醇、水中的一种。

4.一种防治农害螨提取物的应用，其特征在于，所述防治农害螨提取物为一种杀螨活性的植物源农药，紫茉莉提取物或作为农药制剂所需常规辅料，制备成农药常规制剂，常规制剂是乳油、微乳剂、悬浮剂、水剂做为防治农害螨提取物的应用。