CN103734187B - 一种预防或防治杨梅树凋萎病的方法和试剂 - Google Patents
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Abstract
本发明提供一种防治或预防杨梅凋萎病的试剂，其中该试剂包括硫酸亚铁。通过本发明的试剂，可以有效预防或防治杨梅凋萎病，而且安全可靠，对人或环境安全，无污染。
Description
技术领域
本发明属于植物病害防治领域，特别的，属于防治杨梅凋萎病的方法和试剂。
背景技术
杨梅（Myrica rubra Sieb. Et Zucc.）是我国南方特有的珍稀水果，果实甜酸适口，风味独特，在国内外享有盛誉，因其显著的经济与生态效益，已成为浙江省主要水果种类，其产值已稳居各类水果首位。杨梅凋萎病是近年来新发现的一种病害，发病初期，杨梅部分嫩梢干枯，随病情加重，嫩梢干枯数量逐渐增多并蔓延至全树，发病后3-5年整株死亡。杨梅凋萎病在浙江省杨梅主产区呈迅速蔓延趋势，严重影响杨梅产业的可持续发展。杨梅凋萎病病原菌为异色拟盘多毛孢（Pestalotiopsis versicolor）和/或小孢拟盘多毛孢（P. microspora）（参见文献：Haiying Ren, Gang Li, Xingjiang Qi, Li Fang, HanrongWang,Jiguang Wei, Shaobin Zhong. Identification and characterization ofPestalotiopsis spp. causing twig blight disease of bayberry (Myrica rubra Sieb. & Zucc) in China. European Journal of Plant Pathology, 2013, 173(3):451-461以及中国发明专利ZL201010537036.6）。
杨梅凋萎病一直缺乏有效防治方法，5月底到6月中旬是其分生孢子的释放高峰期，而这个时候是杨梅果实坐果后的成熟期，不适合使用任何农药，目前浙江省的要求是成熟前40天不允许再喷任何农药。
这就需要提供一个适合防治或预防杨梅凋萎病的方法和试剂。
发明内容
为了解决该问题，本发明提供一种防治或预防杨梅凋萎病的试剂，其中该试剂包括硫酸亚铁。
在一些优选的方式中，硫酸亚铁的浓度为0.1-0.4%,或，硫酸亚铁的浓度为0.1%，0.2%或0.4%。
硫酸亚铁，又名绿矾、七水硫酸亚铁、铁矾、七水皂矾或青矾，用于制铁盐、氧化铁颜料、媒染剂、净水剂、防腐剂、消毒剂等；医药上作抗贫血药、局部收敛剂及补血剂；分析试剂及制铁氧体原料；作为饲料添加剂的铁强化剂；农业上可用作农药，能防治小麦黑穗病，苹果和梨的疤痂病、果树的腐烂病；食用级用作营养增补剂，如铁质强化剂、果蔬发色剂；也可用作肥料，作为植物铁元素的补充剂，防治植物应缺铁而发生生理性病害，使植物叶色失绿；能除去树干的青苔及地衣。
本研究就凋萎病菌分生孢子在七水硫酸亚铁溶液里的萌发及其杨梅枝条的水培病害预防实验进行了研究，惊讶地发现低浓度七水硫酸亚铁溶液无毒、无味，可以作为杨梅果实坐果期的凋萎病预防的有效方法。
在一些优选的实施方式中，硫酸亚铁为七水硫酸亚铁。
另一方面，本发明涉及一种七水硫酸亚铁作为预防或防治杨梅凋萎病的用途。
本发明的术语“防治”的意思是指等某种植物已经具有某种病害的时候，采用试剂对该病害进行治疗的行为。这种病害一般是通过肉眼或其他方式可以明显识别的症状，可以通过公知的方法来判断杨梅树是否具有某种具体的病害。例如，通过外部观察和结合微生物培养，可以判断杨梅树得了凋萎病害，然后再给杨梅树施加一定浓度的试剂进行该病的治疗和防治。
发明的术语“预防”的意思是指某种植物不具有某种病害之前，就施加试剂对该种病害进行预防。例如，在杨梅不具有凋萎病的症状前对杨梅施加试剂，对凋萎病进行预防而不让杨梅具有或将来出现凋萎病的症状。
在一些优选的方式中，在杨梅树上不具有引起凋萎病的病原菌（例如，孢子或菌丝或病原菌的其他形式，例如分生孢子器，例如异色拟盘多毛孢（Pestalotiopsis versicolor）和/或小孢拟盘多毛孢（P. microspora）的孢子、菌丝或分生孢子器）的时候或之前，施加硫酸亚铁溶液进行预防。
另一方面，本发明提供一种预防杨梅凋萎病的方法，该方法包括：当杨梅不具有凋萎病的症状前，对杨梅树施加0.1-0.4%的硫酸亚铁溶液。优选的，硫酸亚铁溶液的浓度为0.4%。
在一些优选的方式中，引为杨梅凋萎病的病菌为异色拟盘多毛孢（Pestalotiopsis versicolor）和/或小孢拟盘多毛孢（P. microspora）的孢子、菌丝或分生孢子器。
本发明的浓度，没有特别说明，都属于质量百分比浓度。
有益效果
本发明发现一种可以有效预防和防治杨梅凋萎病的试剂以及方法，这种试剂对环境和人安全、环保。
具体实施方式
实验1 凋萎病菌分生孢子溶液制备
凋萎病菌菌株P. versicolor XJ27和P. microspora YS26（两种菌株分别在发生凋萎病的杨梅树上组织分离法分离得到，采集地点都为浙江仙居和浙江药山，采集时间都为2009年9月，采集人都为任海英，目前都在浙江省农业科学院园艺研究所杨梅组保存）在PDA平板上25℃12 h/12 h（光照/黑暗，1000 lux）培养5天，用无菌水洗下2菌株的孢子配成两个菌株的混合孢子溶液，其浓度为2×105孢子/ml溶液。
实验2：凋萎病菌分生孢子萌发实验
分别配制葡萄糖（0.2%、0.4%、0.8%）、七水硫酸亚铁（0.2%、0.4%、0.8%）溶液，灭菌蒸馏水做对照，与分生孢子溶液按体积比1:1混合。吸取500 µl混合液至凹形载玻片的凹槽内，盖上盖玻片，25℃暗培养48小时，观察200个分生孢子，芽管长度大于孢子直径算作萌发，统计萌发的孢子数目，计算孢子萌发率，萌发率=（萌发分生孢子数/200）×100。
结果
从以上实验获得的数据来看，凋萎病菌的分生孢子在0.1%的葡萄糖溶液内培养48小时萌发率最高，萌发率达到71%，在0.2%葡萄糖和0.4%的葡萄糖溶液内萌发率在20-50%之间，但是在0.1%、0.2%和0.4%的三个七水硫酸亚铁溶液内凋萎病菌的分生孢子都不能萌发（表1）。这说明硫酸亚铁溶液能强烈抑制凋萎病菌分生孢子的萌发，对病害的预防有利用价值。
表1 不同溶液内凋萎病菌分生孢子的萌发率
| 溶液种类（浓度） | 萌发率（%） |
| 葡萄糖（0.1%） | 71 |
| 葡萄糖（0.2%） | 48.1 |
| 葡萄糖（0.4%） | 20.6 |
| 七水硫酸亚铁（0.1%） | 0 |
| 七水硫酸亚铁（0.2%） | 0 |
| 七水硫酸亚铁（0.4%） | 0 |
实验3：杨梅凋萎病预防离体实验
采集临海的东魁杨梅嫩枝条，长约30cm。每个枝条在叶片及其嫩枝的表皮上用大头针各刺5下（叶片刺穿，表皮大约刺1-2毫米深），然后，第1次喷雾完成2天后再进行第2次喷雾处理，每次喷雾处理按照表3进行。每个枝条算1个重复，实验重复6次。
杨梅枝条用250 ml三角瓶盛150 ml水25℃保持98%相对湿度水培，每天更换新鲜的自来水，并且每天把枝条基部小心剪掉0.5 cm左右，保持枝条吸水功能正常。病菌孢子接种后15天按照表2分级标准调查杨梅凋萎病的病情级数，计算病情指数（病情指数（DI）=∑[病级枝数×该级代表数值]×100/（调查总枝数×发病最高一级代表数值）。防效（%）=(对照1的DI-处理的DI）×100/对照1的DI。
表2 杨梅种质凋萎病抗病性分级标准
| 病情级数 | 病症 |
| 0 | 没有叶片干枯或者掉落 |
| 1 | 枝段上叶片干枯或者掉落占总叶片数≤10% |
| 3 | 10%＜枝段上叶片干枯或者掉落占总叶片数≤25% |
| 5 | 25%＜枝段上叶片干枯或者掉落占总叶片数≤50% |
| 7 | 50%＜枝段上叶片干枯或者掉落占总叶片数≤75% |
| 9 | 75%＜枝段上叶片干枯或者掉落占总叶片数≤100% |
由表3可见，硫酸亚铁溶液喷雾2天后再喷凋萎病菌的分生孢子溶液，与接种病菌喷清水相比，病情指数大大降低，其中0.4%的硫酸亚铁溶液防效最好，达到88%，0.1%的硫酸亚铁溶液其防效也达到了45%。而先喷病菌孢子再喷硫酸亚铁的处理有一定防效，但是大大低于先喷硫酸亚铁溶液处理，防效在11-42%（表3）。这说明硫酸亚铁溶液在杨梅凋萎病的预防上有重要的利用潜力。
从以上室内实验可以得出这样的结论：等到杨梅树上还没有凋萎病的时候可以施加硫酸亚铁溶液，这样可以显著预防杨梅凋萎病的发生。当杨梅已经发生了凋萎病的时候，可以用硫酸亚铁溶液来进行防治，但是没有预防的效果好。
表3：硫酸亚铁溶液对凋萎病的预防作用（XJ27和YS26混合孢子溶液的浓度为2×105孢子/ml溶液，与实验1中的浓度一样）
| 第1次喷雾 | 第2次喷雾 | 病情指数 | 防效（%） | |
| 处理1 | 0.1%七水硫酸亚铁 | XJ27和YS26混合孢子溶液 | 55 | 45 |
| 处理2 | 0.2%七水硫酸亚铁 | XJ27和YS26混合孢子溶液 | 24 | 76 |
| 处理3 | 0.4%七水硫酸亚铁 | XJ27和YS26混合孢子溶液 | 12 | 88 |
| 处理4 | XJ27和YS26混合孢子溶液 | 0.1%七水硫酸亚铁 | 89 | 11 |
| 处理5 | XJ27和YS26混合孢子溶液 | 0.2%七水硫酸亚铁 | 76 | 24 |
| 处理6 | XJ27和YS26混合孢子溶液 | 0.4%七水硫酸亚铁 | 58 | 42 |
| 对照1 | XJ27和YS26混合孢子溶液 | 蒸馏水 | 100 | 0 |
| 对照2 | 蒸馏水 | 蒸馏水 | 0 | / |
实验4：利用硫酸亚铁溶液对杨梅树凋萎病的预防和防治的田间实验
为了验证上述实验的有效性，本发明在实际田间对杨梅凋萎病进行实验。采用10株无病的杨梅做对照（清水喷洒），另一组10株无病害的杨梅树先喷洒0.4%的七水硫酸亚铁溶液2天后，再喷洒XJ27和YS26混合孢子溶液（浓度为2×105孢子/ml）；另一组10株无病害的杨梅树先喷洒XJ27和YS26混合孢子溶液（浓度为2×105孢子/ml）2天后，再喷洒0.4%的七水硫酸亚铁溶液。获得的结果见下表4。
表4：硫酸亚铁溶液对凋萎病的预防作用（XJ27和YS26混合孢子溶液的浓度为2×105孢子/ml溶液）
| 第1次喷雾 | 第2次喷雾 | 病情指数 | 防效（%） | |
| 处理1 | 0.4%七水硫酸亚铁 | XJ27和YS26混合孢子溶液 | 12 | 88 |
| 处理2 | XJ27和YS26混合孢子溶液 | 0.4%七水硫酸亚铁 | 58 | 42 |
| 对照1 | 蒸馏水 | 蒸馏水 | 0 | / |
同样，对于处理1的第一次喷洒和第二次喷洒的间隔天数为3天，4天、7天、10天和15天，发现间隔的天数为2-7天对于预防效果没有显著差异，当间隔10天以上，预防效果逐渐减弱，但是仍然高于对照（具体数据略）。对于处理2的第一次喷洒和第二次喷洒的间隔天数为3天，4天、7天、10天和15天，发现防治效果在间隔2-5天的防治效果最好，当间隔10-15天的时候，防治效果要相对差一些，但是仍然高于对照（具体数据略）。
Claims (7)
1.一种把硫酸亚铁作为预防或防治杨梅凋萎病的用途。
2.根据权利要求1所述的用途，所述的凋萎病是由异色拟盘多毛孢(Pestalotiopsisversicolor)和/或小孢拟盘多毛孢(P.microspora)引起的。
3.根据权利要求1所述的用途，其中,所述的硫酸亚铁的浓度为0.1-0.4％。
4.根据权利要求1所述的用途，所述的硫酸亚铁为七水硫酸亚铁。
5.一种预防杨梅凋萎病的方法，该方法包括：当杨梅不具有凋萎病的症状前，对杨梅树施加0.1-0.4％的硫酸亚铁溶液。
6.根据权利要求5所述的方法，其中，硫酸亚铁溶液的浓度为0.4％。
7.根据权利要求5所述的方法，所述的凋萎病是由异色拟盘多毛孢(Pestalotiopsisversicolor)和/或小孢拟盘多毛孢(P.microspora)引起的。
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|---|
| "两种化合物联合诱导黄瓜的抗性效应及田间防治试验";赵建方等;《中国植保导刊》;20090630;第29卷(第6期);第9-12页 * |
| "硫酸亚铁-防病又肥田";胡卫国;《北京农业》;19941231;第21页 * |
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| CN103734187A (zh) | 2014-04-23 |
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