CN103622904B - 加替沙星脂质体眼用凝胶及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种加替沙星脂质体眼用凝胶及其制备方法，所述的加替沙星脂质体眼用凝胶是由加替沙星、磷脂、胆固醇、十八胺制备的阳离子脂质体和水性凝胶基质组成。该制剂粒径分布均匀，且稳定性良好，易与带负电的眼角膜结合，增加角膜的透过性，可持续在眼部定位释药，降低药物的毒副作用，提高药物生物利用度。所述的制备方法工艺可行，质量可控，有非常广阔的产业化前景。

Description

加替沙星脂质体眼用凝胶及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种药物制剂，特别是涉及一种加替沙星脂质体眼用凝胶及其制备方法。

背景技术

据统计，眼科就诊的患者中80％以上为眼部感染，眼部感染包括结膜炎、角膜炎和全球炎等。其中细菌性结膜炎是一种多发于夏秋季节的传染性结膜炎症，为眼科门诊的常见病和多发病。目前治疗细菌性结膜炎的滴眼液主要有环丙沙星和氧氟沙星滴眼液。但其滴眼液对革兰阳性菌、厌氧菌、支原体、衣原体和分枝杆菌作用不强。加替沙星抗菌谱广，除具有环丙沙星和氧氟沙星抗菌特点外，对这些病原体也有较好的抗菌作用。所以加替沙星很有可能在未来成为治疗结膜炎的临床一线药物。

加替沙星最早由日本杏林公司开发，1999年12月获得美国FDA批准，在美国上市。Allergan公司的加替沙星滴眼液于2003年3月31日在美国上市。加替沙星作为第四代喹诺酮类合成抗菌药物，抗菌谱较广，对G⁺菌如葡球菌属、链球菌属及粪肠球菌等的抗菌活性显著增强，强于诺氟沙星、氧氟沙星和环丙沙星，对多种G^-菌株如肠杆菌科、流感嗜血杆菌都有较高的抗菌活性。加替沙星目前国内已有滴眼液上市。但是随着生物药剂学和药物动力学的深入研究，发现常规的滴眼液存在眼部药物滞留时间段、生物利用度低等问题，仅有少于5％的药物通过角膜到达眼内发挥治疗作用。这是由于眼睛具有流泪和眨眼反射等非常有效的保护机制，使滴入到眼内的药液迅速从眼角膜前区域消除。大大影响了眼部给药的治疗效果。此外，大量药物经鼻泪管进入鼻腔或者消化道最终被全身吸收，增加诱发因素毒性风险。

目前，针对加替沙星滴眼液缺陷，专利CN1215844C公开了一种加替沙星眼凝胶及其制备方法，采用加替沙星与凝胶基质卡波姆、三乙醇胺、丙二醇、甘油按照一定的比例制成眼用凝胶剂。专利CN100427091C公开了一种以HPMC为基质的加替沙星眼用凝胶剂及其制备方法，采用加替沙星与凝胶基质、防腐剂、氯化钠、羟丙基-β-环糊精、pH调节剂按照一定的比例制成眼用凝胶剂型。以上发明均采用亲水性高分子材料为载体，与传统滴眼液相比，眼用凝胶能相对较长时间与眼部结合，减少使用频率，但给药剂量不易控制，眼内药物浓度波动较大。

发明内容

为克服上述加替沙星眼用剂型的缺陷，本发明提供一种加替沙星脂质体眼用凝胶及其制备方法。脂质体眼用凝胶作为眼部释药载体具有增加角膜渗透性、延缓药物消除、提高药物眼部生物利用度的特点。本发明的上述目的是采用以下技术方案来实现的。

一方面，本发明提供一种加替沙星脂质体眼用凝胶，包括由加替沙星、磷脂、胆固醇、十八胺制备的阳离子脂质体和水性凝胶基质组成。按重量份数计，加替沙星1份，磷脂10～50份，胆固醇2～10份，十八胺0.1～1份，阳离子脂质体与水溶性凝胶基质的重量比为1：1～5，

本发明中，所述的磷脂选自大豆卵磷脂、氢化大豆卵磷脂、蛋黄卵磷脂、氢化蛋黄卵磷脂中的一种或几种；

本发明中，所述水溶性凝胶基质选自卡波姆、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、甘油明胶、淀粉明胶、海藻酸钠中的一种或几种。

本发明说述的加替沙星脂质体眼用凝胶，按重量份数计，优选加替沙星1份，磷脂10～20份，胆固醇5～10份，十八胺0.1～0.5份，阳离子脂质体与水溶性凝胶基质的重量比为1：1～3。

本发明所述的加替沙星脂质体眼用凝胶包含渗透压调节剂和防腐剂，其中，渗透压调节剂包括氯化钠、葡糖糖、甘露糖、半乳糖、麦芽糖、甘露醇、山梨醇、甘氨酸、赖氨酸，占加替沙星眼用凝胶的0.01％～0.03％；

所述的防腐剂包括苯扎溴铵、苯扎氯胺、硫柳汞、氯已定、三氯叔丁醇、苯甲酸、苯甲醇、乙醇、苯乙醇、苯酚、山梨酸、羟丙甲酯、羟丙乙酯、羟丙丙脂，占加替沙星眼用凝胶的0.01％～0.05％。

另一方面，本发明提供一种加替沙星脂质体眼用凝胶的制备方法，该制备方法包括：

(1)将处方量的磷脂、胆固醇、十八胺置于玻璃瓶中，加入适量的乙醚溶解，然后将乙醚溶液在玻璃瓶中旋转蒸发，使在玻璃瓶内壁上形成薄膜；

(2)将处方量的加替沙星溶解于pH至为6～7的磷酸缓冲液中，加入玻璃瓶中不断搅拌，得到加替沙星脂质体初乳，将初乳经高压匀质机在1.4×10⁶kPa压力下，经50nm膜挤压乳匀3～10次，即得加替沙星脂质体溶液。和/或加入适量的防腐剂和/或渗透压调节剂，并调节pH值至6.0～6.5，搅拌使其均匀，得到脂质体溶液I；

(3)将处方量的水溶性凝胶基质加入到80％煮沸的注射用水中，分散均匀后，121℃热压灭菌20～40min，冷却后，得到无菌凝胶基质II；

(4)将I和II混合均匀，用已过滤除菌的注射用水定量，灌装即得。

与现有技术相比，本发明具有以下有益技术效果：

经过大量的实验，我们惊喜的发现通过调节十八胺的加入量，既可以使加替沙星脂质体的包封率达85％左右，又使其粒径分布均匀，稳定性良好。最后，将加替沙星阳离子脂质体制成水溶性凝胶剂，增加药物与角膜接触的时间，进一步提高加替沙星的生物利用度。且工艺可行，质量可控，有非常广阔的产业化前景。

具体实施方式

下面结合具体实施方式对本发明进行进一步的详细描述，给出的实施例仅为了阐明本发明，而不是为了限制本发明的范围。

实施例1

按照表1中所示单位剂型中所含成分制备制剂。

1、样品1至7制备工艺：

(1)将处方量的磷脂、胆固醇、十八胺置于玻璃瓶中，加入适量的乙醚溶解，然后将乙醚溶液在玻璃瓶中旋转蒸发，使在玻璃瓶内壁上形成薄膜；

(2)将处方量的加替沙星溶解于pH至为6的磷酸缓冲液中，加入玻璃瓶中不断搅拌，得到加替沙星脂质体初乳，将初乳经高压匀质机在1.4×10⁶kPa压力下，经50nm膜挤压乳匀5次，即得加替沙星脂质体溶液。加入防腐剂和渗透压调节剂，并调节pH值至6.5，搅拌使其均匀，得到脂质体溶液I；

(3)将处方量的水溶性凝胶基质加入到80％煮沸的注射用水中，分散均匀后，121℃热压灭菌20min，冷却后备用，得到无菌凝胶基质II；

(4)将I和II混合均匀，用已过滤除菌的注射用水定量，灌装即得。

2、包封率的测定方法：

(1)加替沙星含量测定的色谱条件：色谱柱为DiamonsilC₁₈柱(250mm×4.6mm，5μm)；流动相：0.01mol/L柠檬酸-乙腈(84：16)；流速：1.0ml/min；检测波长：325nm；柱温：40℃；进样量20mL。

(2)加替沙星脂质体的处理方法：

a：加替沙星脂质体与游离药物的分离采用葡聚糖凝胶G-50柱(25cm×1cm)分离加替沙星脂质体与游离的加替沙星。精密量取加替沙星脂质体0.2ml上柱，以水为洗脱液，流速为1ml·min^-1。收集洗脱液，每份2ml，共30份，分别测定洗脱液在325nm处的吸光度，测定结果表明，加替沙星脂质体与加替沙星游离药物可以达到良好的分离效果，加替沙星游离药物在26～40min时，全部被洗脱下来。

b：加替沙星脂质体包封率测定准确吸取0.2ml加替沙星脂质体于10ml量瓶中，加入0.2ml10％Triton-X100破膜后，水定容至刻度，为A液。另取0.2ml载药脂质体经上述凝胶柱分离，将分离出的游离药部合并为B液，将A液和B液分别用0.2μm微孔滤膜过滤，采用(1)项下的色谱条件，测定加替沙星含量，A和B分别对应总药量和游离药量，按照，脂质体包封率的计算公式计算包封率：

包封率＝(W_总-W_游)/W_总×100％

其中，W_总为总药量，W_游为游离药物量。

3、Zeta电位的测定方法：取脂质体样品适量，缓冲液稀释，加入磷钨酸染色，混匀，用铜网蘸取混合液，干燥，分别用Zetasizer型激光粒度测定仪和ZetasizerNanoZS型Zeta电位测定仪测定样品的粒径及Zeta表面电位。

表1加替沙星脂质体处方设计及测试结果

结论：按重量份数计，加替沙星1份，磷脂10～50份，胆固醇2～10份，当十八胺0.05份时，ξ电位平均约为40mV，性质稳定，但是平均包封率约为40％；当十八胺0.1～1.0份时，ξ电位平均约为45mV，平均包封率约为79％；当十八胺1.5份时，ξ电位平均约为12mV，性质不稳定，平均包封率约为65％。由此可见，按重量份数计，加替沙星1份，磷脂10～50份，胆固醇2～10份，十八胺0.1～1.0份时，得到的加替沙星阳离子脂质体包封率高，性质稳定。

实施例2

处方：

制备方法：

(1)将处方量的磷脂、胆固醇、十八胺置于玻璃瓶中，加入适量的乙醚溶解，然后将乙醚溶液在玻璃瓶中旋转蒸发，使在玻璃瓶内壁上形成薄膜；

(2)将处方量的加替沙星溶解于pH至为6的磷酸缓冲液中，加入玻璃瓶中不断搅拌，得到加替沙星脂质体初乳，将初乳经高压匀质机在1.4×10⁶kPa压力下，经50nm膜挤压乳匀5次，即得加替沙星脂质体溶液。加入防腐剂和渗透压调节剂，并调节pH值至6.5，搅拌使其均匀，得到脂质体溶液I；

(3)将处方量的水溶性凝胶基质加入到80％煮沸的注射用水中，分散均匀后，121℃热压灭菌20min，冷却后备用，得到无菌凝胶基质II；

(4)将I和II混合均匀，用已过滤除菌的注射用水定量，灌装即得。

实施例3

处方：

制备方法：

(1)将处方量的磷脂、胆固醇、十八胺置于玻璃瓶中，加入适量的乙醚溶解，然后将乙醚溶液在玻璃瓶中旋转蒸发，使在玻璃瓶内壁上形成薄膜；

(2)将处方量的加替沙星溶解于pH至为7的磷酸缓冲液中，加入玻璃瓶中不断搅拌，得到加替沙星脂质体初乳，将初乳经高压匀质机在1.4×10⁶kPa压力下，经50nm膜挤压乳匀3次，即得加替沙星脂质体溶液。加入防腐剂和渗透压调节剂，并调节pH值至6，搅拌使其均匀，得到脂质体溶液I；

(3)将处方量的水溶性凝胶基质加入到80％煮沸的注射用水中，分散均匀后，121℃热压灭菌30min，冷却后备用，得到无菌凝胶基质II；

(4)将I和II混合均匀，用已过滤除菌的注射用水定量，灌装即得。

实施例4

处方：

制备方法：

(1)将处方量的磷脂、胆固醇、十八胺置于玻璃瓶中，加入适量的乙醚溶解，然后将乙醚溶液在玻璃瓶中旋转蒸发，使在玻璃瓶内壁上形成薄膜；

(2)将处方量的加替沙星溶解于pH至为6的磷酸缓冲液中，加入玻璃瓶中不断搅拌，得到加替沙星脂质体初乳，将初乳经高压匀质机在1.4×10⁶kPa压力下，经50nm膜挤压乳匀6次，即得加替沙星脂质体溶液。加入防腐剂和渗透压调节剂，并调节pH值至6.5，搅拌使其均匀，得到脂质体溶液I；

(3)将处方量的水溶性凝胶基质加入到80％煮沸的注射用水中，分散均匀后，121℃热压灭菌40min，冷却后备用，得到无菌凝胶基质II；

(4)将I和II混合均匀，用已过滤除菌的注射用水定量，灌装即得。

实施例5

处方：

制备方法：

(1)将处方量的磷脂、胆固醇、十八胺置于玻璃瓶中，加入适量的乙醚溶解，然后将乙醚溶液在玻璃瓶中旋转蒸发，使在玻璃瓶内壁上形成薄膜；

(2)将处方量的加替沙星溶解于pH至为7的磷酸缓冲液中，加入玻璃瓶中不断搅拌，得到加替沙星脂质体初乳，将初乳经高压匀质机在1.4×10⁶kPa压力下，经50nm膜挤压乳匀8次，即得加替沙星脂质体溶液。加入防腐剂和渗透压调节剂，并调节pH值至6，搅拌使其均匀，得到脂质体溶液I；

(3)将处方量的水溶性凝胶基质加入到80％煮沸的注射用水中，分散均匀后，121℃热压灭菌40min，冷却后备用，得到无菌凝胶基质II；

(4)将I和II混合均匀，用已过滤除菌的注射用水定量，灌装即得。

Claims (4)

1.一种加替沙星脂质体眼用凝胶，其特征在于，包含加替沙星、磷脂、胆固醇、十八胺制备的阳离子脂质体和水性凝胶基质，按重量份数计，加替沙星1份，磷脂10～50份，胆固醇2～10份，十八胺0.1～1份，阳离子脂质体与水溶性凝胶基质的重量比为1∶1～5，

所述的磷脂选自大豆卵磷脂、氢化大豆卵磷脂、蛋黄卵磷脂、氢化蛋黄卵磷脂中的一种或几种；

所述水溶性凝胶基质选自卡波姆、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、甘油明胶、淀粉明胶、海藻酸钠中的一种或几种。

2.根据权利要求1所述的加替沙星脂质体眼用凝胶，其特征在于，按重量份数计，加替沙星1份，磷脂10～20份，胆固醇5～10份，十八胺0.1～0.5份，阳离子脂质体与水溶性凝胶基质的重量比为1∶1～3。

3.根据权利要求1至2中任意一项所述的加替沙星脂质体眼用凝胶，其特征在于，所述的加替沙星脂质体眼用凝胶包含渗透压调节剂和防腐剂，其中，渗透压调节剂包括氯化钠、葡萄糖、甘露糖、半乳糖、麦芽糖、甘露醇、山梨醇、甘氨酸、赖氨酸，占加替沙星眼用凝胶的0.01％～0.03％；

所述的防腐剂包括苯扎溴铵、苯扎氯胺、硫柳汞、氯已定、三氯叔丁醇、苯甲酸、苯甲醇、乙醇、苯乙醇、苯酚、山梨酸、羟丙甲酯、羟丙乙酯，占加替沙星眼用凝胶的0.01％～0.05％。

4.制备根据权利要求1至3中任一项所述的加替沙星脂质体眼用凝胶的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

(1)将处方量的磷脂、胆固醇、十八胺置于玻璃瓶中，加入适量的乙醚溶解，然后将乙醚溶液在玻璃瓶中旋转蒸发，使在玻璃瓶内壁上形成薄膜；

(2)将处方量的加替沙星溶解于pH值为6～7的磷酸缓冲液中，加入玻璃瓶中不断搅拌，得到加替沙星脂质体初乳，将初乳经高压匀质机在1.4×10⁶kPa压力下，经50nm膜挤压乳匀3～10次，即得加替沙星脂质体溶液，加入适量的防腐剂和渗透压调节剂，并调节pH值至6.0～6.5，搅拌使其均匀，得到脂质体溶液I；

(3)将处方量的水溶性凝胶基质加入到80％煮沸的注射用水中，分散均匀后，121℃热压灭菌20～40min，冷却后，得到无菌凝胶基质II；

(4)将I和II混合均匀，用已过滤除菌的注射用水定量，灌装即得。