CN103613641A - 一种分离提纯多抗菌素的方法 - Google Patents
一种分离提纯多抗菌素的方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN103613641A CN103613641A CN201310556551.1A CN201310556551A CN103613641A CN 103613641 A CN103613641 A CN 103613641A CN 201310556551 A CN201310556551 A CN 201310556551A CN 103613641 A CN103613641 A CN 103613641A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- solution
- centrifugal
- organic solvent
- gauze
- gained
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 23
- 229930182764 Polyoxin Natural products 0.000 title abstract description 8
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 claims abstract description 17
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 claims abstract description 17
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 claims abstract description 16
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 claims abstract description 13
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 claims abstract description 11
- KXGVEGMKQFWNSR-LLQZFEROSA-N deoxycholic acid Chemical compound C([C@H]1CC2)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(O)=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 KXGVEGMKQFWNSR-LLQZFEROSA-N 0.000 claims abstract description 10
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 claims abstract description 5
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims abstract description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 40
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 claims description 26
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 25
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 15
- 241001655322 Streptomycetales Species 0.000 claims description 14
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 11
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 claims description 9
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 claims description 9
- 239000011734 sodium Substances 0.000 claims description 9
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 8
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 claims description 6
- 238000010790 dilution Methods 0.000 claims description 6
- 239000012895 dilution Substances 0.000 claims description 6
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 claims description 5
- 235000012054 meals Nutrition 0.000 claims description 5
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims description 5
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 claims description 5
- 238000007865 diluting Methods 0.000 claims description 2
- 238000007789 sealing Methods 0.000 claims description 2
- YNJBWRMUSHSURL-UHFFFAOYSA-N trichloroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(Cl)(Cl)Cl YNJBWRMUSHSURL-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 2
- 241000187747 Streptomyces Species 0.000 abstract 1
- 229960003964 deoxycholic acid Drugs 0.000 abstract 1
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 abstract 1
- 239000008055 phosphate buffer solution Substances 0.000 abstract 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 abstract 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 abstract 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 abstract 1
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 abstract 1
- 230000001186 cumulative effect Effects 0.000 description 5
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 4
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 3
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 3
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 description 3
- 239000000047 product Substances 0.000 description 3
- 238000011160 research Methods 0.000 description 3
- 239000013049 sediment Substances 0.000 description 3
- 229930182536 Antimycin Natural products 0.000 description 2
- 229920002101 Chitin Polymers 0.000 description 2
- 102000003960 Ligases Human genes 0.000 description 2
- 108090000364 Ligases Proteins 0.000 description 2
- CQIUKKVOEOPUDV-IYSWYEEDSA-N antimycin Chemical compound OC1=C(C(O)=O)C(=O)C(C)=C2[C@H](C)[C@@H](C)OC=C21 CQIUKKVOEOPUDV-IYSWYEEDSA-N 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 2
- YEBIHIICWDDQOL-YBHNRIQQSA-N polyoxin Polymers O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](C(C=O)N)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C(C(O)=O)=C1 YEBIHIICWDDQOL-YBHNRIQQSA-N 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 2
- 241000208340 Araliaceae Species 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 241000221785 Erysiphales Species 0.000 description 1
- 241000896238 Oidium Species 0.000 description 1
- 235000005035 Panax pseudoginseng ssp. pseudoginseng Nutrition 0.000 description 1
- 235000003140 Panax quinquefolius Nutrition 0.000 description 1
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 238000003916 acid precipitation Methods 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 230000000845 anti-microbial effect Effects 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 239000003899 bactericide agent Substances 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 1
- 230000006957 competitive inhibition Effects 0.000 description 1
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 1
- YPHMISFOHDHNIV-FSZOTQKASA-N cycloheximide Chemical compound C1[C@@H](C)C[C@H](C)C(=O)[C@@H]1[C@H](O)CC1CC(=O)NC(=O)C1 YPHMISFOHDHNIV-FSZOTQKASA-N 0.000 description 1
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 1
- 230000001934 delay Effects 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 238000011010 flushing procedure Methods 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 229940084434 fungoid Drugs 0.000 description 1
- 235000008434 ginseng Nutrition 0.000 description 1
- 230000008676 import Effects 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002777 nucleoside Substances 0.000 description 1
- 125000003835 nucleoside group Chemical group 0.000 description 1
- -1 phosphorus-2-Acetamido-2-deoxy-D-glucose structure Chemical group 0.000 description 1
- 210000004896 polypeptide structure Anatomy 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 1
- 230000003449 preventive effect Effects 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 239000002718 pyrimidine nucleoside Substances 0.000 description 1
- 238000012827 research and development Methods 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
Landscapes
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
本发明公开了一种分离提纯多抗菌素的方法，属于生物工程领域。利用自主筛选的金色产色链霉菌NJYHWG66382发酵后，将发酵液用纱布过滤，滤出液加入脱氧胆酸钠静置，然后高速离心，取上清液加入三氯乙酸来沉淀蛋白质，用有机溶剂进行超滤离心，离心后的沉淀在用冻干机冻干，最终得到的粉状物即为多抗菌素，该物质可用磷酸盐缓冲溶液溶解后低温保存。本发明是一种操作程序简单，设备要求低，收率高的方法。
Description
技术领域
本发明公开了一种分离提纯多抗菌素的方法，属于生物工程领域，具体涉及发酵产物的提取、分离纯化的方法。
背景技术
多抗菌素（Polyoxins）也被称为多抗菌素、多抗霉素、多氧霉素，是一种肽嘧啶核苷酸类的农用抗生素，研究表明，多抗菌素由至少14种（Polyoxins A-N）单体结构组成。从链霉菌发酵产生的多抗菌素主要是多抗菌素A和多抗菌素B两种成分，其中多抗菌素B活性远大于多抗菌素A，起主要抗菌作用。多抗菌素B熔点大约在160℃左右；常温下易溶于水，不溶于有机溶剂；在pH2.5～3.0的酸性条件下稳定，在碱性条件下不稳定，对紫外光稳定。
多抗菌素各种单体结构都由一个核苷结构和一个多肽结构通过肽键连接起来，由于该结构与几丁质合成酶的底物脲二磷-N-乙酰氨基葡萄糖结构相类似，因此对几丁质合成酶有强效的竞争性抑制作用，从而产生对灰霉病、霜霉病、早疫病、叶霜病、白粉病、枯萎病等多种真菌性植物病害的防治作用，是一种广谱性抗生素类杀菌剂，具有较好的内吸性。其主要特点是：菌种资源多，制剂剂型多，作用对象多，无毒，无刺激，无残留。
自从日本理化研究所为首的科研机构开发，并于1967年获得农用抗生素登记以来，多抗菌素为日本Kaken制药株式会社所垄断，虽然国内也有厂家研发和生产，但无论从产品质量上，还是发酵产量上，都远达不到国外水品，甚至不能满足国内市场的需求，而进口国外的同类产品成本过高，导致这种高效的广谱农用抗生素迟迟不能在国内大规模推广应用。目前，国内对于多抗菌素的研究主要集中在发酵调控以及检测分析方法上，对于从发酵液中分离提取多抗菌素的报道较少。因此，开发一种新型的操作程序简单，设备要求低，收率高的多抗菌素提取方法是迫在眉睫的。
发明内容
本发明的目的是为了改进现有技术的不足而提供一种分离提纯多抗菌素的方法，采用三氯乙酸沉淀法结合多次有机溶剂清洗、离心纯化从发酵液中提取高纯度的多抗菌素，操作程序简单，设备要求低，收率高。
为了实现上述目的，本发明的技术方案如下：一种分离提纯多抗菌素的方法，其具体步骤如下：
（1）取链霉菌发酵液，用纱布过滤，发酵液过滤后继续用冰水清洗纱布，收集滤过液，向滤过液中加入脱氧胆酸钠溶液，静置10～20min；
（2）将步骤（1）所得的滤过液进行离心，收集上清液；
（3）将步骤（2）所得的上清液体转移到容器中，加入三氯乙酸溶液，将容器密封后，0～4℃下静置8～16h；
（4）将步骤（3）得到的溶液离心，弃上清液，用有机溶剂冲洗沉淀后移入超滤管内；
（5）向步骤（4）的超滤管内加4～6倍体积步骤（4）中的有机溶剂，稀释；
（6）将步骤（5）得到的液体离心后，继续添加有机溶剂稀释到步骤（5）中稀释后溶液的体积数；
（7）重复步骤（6）3～5次，最终离心浓缩至步骤（5）稀释后溶液体积的1/8～1/12；
（8）将步骤（7）所得的浓缩液体转移出，用冻干机冻干后，得到的粉状物即为多抗菌素。
优选步骤（1）中所述的纱布为80～120目，层数为3-6层，所述的清洗用的冰水与发酵液体积比为0.15～0.20:1；所述的冰水温度为0～4℃。优选步骤（1）中所述的脱氧胆酸钠溶液的浓度为0.015～0.025g/mL；添加的脱氧胆酸钠溶液与最初链霉菌发酵液体积比为0.008～0.012:1。
优选步骤（2）和（4）中所述的离心转速为8000～10000rpm，离心时间为20～30min，离心温度为2～6℃。
优选步骤（3）中所述的三氯乙酸溶液的浓度为0.8～1.2g/mL，添加的溶液与最初链霉菌发酵液体积比为0.10～0.15:1。
优选步骤（4）中所述的用于清洗的有机溶剂与步骤（1）中最初链霉菌发酵液的体积比为0.01～0.02：1。
优选步骤（4）、（5）和（6）中所述的有机溶剂均为甲醇、乙醇或丙酮。
优选步骤（5）中所述的超滤管的滤膜截留分子量为1～3kDa。
优选步骤（6）中所述的离心转速为4000～5000rpm，离心时间为30～40min，离心温度为2～6℃。
本发明采用的链霉菌其分类命名为金色产色链霉菌，参据的微生物（株）为：NJYHWG66382，该菌株是本课题组自主筛选并保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心（北京朝阳区大屯路甲3号，中国科学院微生物研究所）。其简称为CGMCC，保藏日期是2012年2月14日，登记入册的编号是CGMCCNo.5756。
有益效果：
本发明所提供的方法操作程序简单，设备要求低，收率高。
具体实施方式
以下结合实例来进一步解释本发明，但实施案例并不对本发明做任何形式的限定。
实施例1
（1）取链霉菌发酵液100mL，用3层80目纱布过滤，过滤完成后用15mL0℃冰水清洗纱布，收集滤过液，向滤过液中加入0.015g/mL脱氧胆酸钠溶液0.8mL，常温下静置10min；
（2）将步骤（1）所得的滤过液以8000rpm在6℃下离心20min，收集上清液；
（3）将步骤（2）所得的上清液体转移到烧杯中，加入0.8g/mL三氯乙酸溶液10mL，用保鲜膜将烧杯密封后，在4℃下静置8h；
（4）将步骤（3）烧杯中的溶液以8000rpm在6℃下离心20min，弃上清液，用1mL乙醇冲洗沉淀后转移到滤膜截留分子量为1Da超滤管内；
（5）向步骤（4）的超滤管中加乙醇至总体积为4mL，以4000rpm在6℃离心30min后，继续添加乙醇至4mL，重复此操作3次，最终离心直到液体剩余0.5mL，收集离心沉淀物；
（6）将步骤（5）所得的沉淀物转移到平板上，用冻干机冻干后，得到的粉状物即为多抗菌素，并用2mL pH=7.4的磷酸盐缓冲溶液溶解，测得其浓度为1.26mg/mL，随后在-20℃下保存。
实施例2
（1）取链霉菌发酵液100mL，用5层100目纱布过滤，过滤完成后用25mL2℃冰水清洗纱布，收集滤过液，向滤过液中加入0.020g/mL脱氧胆酸钠溶液1mL，常温下静置15min；
（2）将步骤（1）所得的滤过液以9000rpm在2℃下离心25min，收集上清液；
（3）将步骤（2）所得的上清液体转移到烧杯中，加入1g/mL三氯乙酸溶液13mL，用保鲜膜将烧杯密封后，在2℃下静置12h；
（4）将步骤（3）烧杯中的溶液以9000rpm在2℃下离心25min，弃上清液，用2mL甲醇冲洗沉淀后转移到滤膜截留分子量为2kDa超滤管内；
（5）向步骤（4）的超滤管中加甲醇至总体积为10mL，以4500rpm在2℃离心35min后，继续添加甲醇至总体积为10mL，重复此操作4次，最终离心直到液体剩余1mL，收集离心沉淀物；
（6）将步骤（5）所得的沉淀物转移到平板上，用冻干机冻干后，得到的粉状物即为多抗菌素，并用2mL pH=7.4的磷酸盐缓冲溶液溶解，测得其浓度为1.33mg/mL，随后在-20℃下保存。
实施例3
（1）取链霉菌发酵液100mL，用6层120目纱布过滤，过滤完成后用30mL4℃冰水清洗纱布，收集滤过液，向滤过液中加入0.025g/mL脱氧胆酸钠溶液1.2mL，常温下静置20min；
（2）将步骤（1）所得的滤过液以10000rpm在4℃下离心30min，收集上清液；（3）将步骤（2）所得的上清液体转移到烧杯中，加入1.2g/mL三氯乙酸溶液15mL，用保鲜膜将烧杯密封后，在0℃下静置16h；
（4）将步骤（3）烧杯中的溶液以10000rpm在4℃下离心30min，弃上清液，用2mL丙酮冲洗沉淀后转移到滤膜截留分子量为3kDa超滤管内；
（5）向步骤（4）的超滤管中加丙酮总体积为12mL，以5000rpm在4℃离心40min后，继续添加丙酮至总体积为12mL，重复此操作5次，最终离心直到液体剩余1mL，收集离心沉淀物；
（6）将步骤（5）所得的沉淀物转移到平板上，用冻干机冻干后，得到的粉状物即为多抗菌素，并用2mL pH=7.4的磷酸盐缓冲溶液溶解，测得其浓度为1.52mg/mL，随后在-20℃下保存。
Claims (9)
1.一种分离提纯多抗菌素的方法，其具体步骤如下：
（1）取链霉菌发酵液，用纱布过滤，发酵液过滤后继续用冰水清洗纱布，收集滤过液，向滤过液中加入脱氧胆酸钠溶液，静置10～20min；
（2）将步骤（1）所得的滤过液进行离心，收集上清液；
（3）将步骤（2）所得的上清液体转移到容器中，加入三氯乙酸溶液，将容器密封后，0～4℃下静置8～16h；
（4）将步骤（3）得到的溶液离心，弃上清液，用有机溶剂冲洗沉淀后移入超滤管内；
（5）向步骤（4）的超滤管内加4～6倍体积步骤（4）中的有机溶剂，稀释；
（6）将步骤（5）得到的液体离心后，继续添加有机溶剂稀释到步骤（5）中稀释后溶液的体积数；
（7）重复步骤（6）3～5次，最终离心浓缩至步骤（5）稀释后溶液体积的1/8～1/12；
（8）将步骤（7）所得的浓缩液体转移出，用冻干机冻干后，得到的粉状物即为多抗菌素。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：在步骤（1）中所述的纱布为80～120目，层数为3-6层，所述的清洗用的冰水与发酵液体积比为0.15～0.20:1；所述的冰水温度为0～4℃。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：在步骤（1）中所述的脱氧胆酸钠溶液的浓度为0.015～0.025g/mL；添加的脱氧胆酸钠溶液与最初链霉菌发酵液体积比为0.008～0.012:1。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：在步骤（2）和（4）中所述的离心转速为8000～10000rpm，离心时间为20～30min，离心温度为2～6℃。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：在步骤（3）中所述的三氯乙酸溶液的浓度为0.8～1.2g/mL，添加的溶液与最初链霉菌发酵液体积比为0.10～0.15:1。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：在步骤（4）中所述的用于清洗的有机溶剂与步骤（1）中最初链霉菌发酵液的体积比为0.01～0.02：1。
7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：在步骤（4）、（5）和（6）中所述的有机溶剂均为甲醇、乙醇或丙酮。
8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：在步骤（5）中所述的超滤管的滤膜截留分子量为1～3kDa。
9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：在步骤（6）中所述的离心转速为4000～5000rpm，离心时间为30～40min，离心温度为2～6℃。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201310556551.1A CN103613641B (zh) | 2013-11-11 | 2013-11-11 | 一种分离提纯多抗菌素的方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201310556551.1A CN103613641B (zh) | 2013-11-11 | 2013-11-11 | 一种分离提纯多抗菌素的方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN103613641A true CN103613641A (zh) | 2014-03-05 |
| CN103613641B CN103613641B (zh) | 2015-07-08 |
Family
ID=50164370
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201310556551.1A Active CN103613641B (zh) | 2013-11-11 | 2013-11-11 | 一种分离提纯多抗菌素的方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN103613641B (zh) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN106885778A (zh) * | 2017-03-24 | 2017-06-23 | 依科赛生物科技（太仓）有限公司 | 一种提高蛋白浓度测定准确性的快速测定试剂及其测定方法 |
| CN109765315A (zh) * | 2019-01-30 | 2019-05-17 | 陕西麦可罗生物科技有限公司 | 一种多抗霉素c组分的制备方法及检测方法 |
| CN109781886A (zh) * | 2019-01-30 | 2019-05-21 | 陕西麦可罗生物科技有限公司 | 一种多抗霉素n组分的制备方法及检测方法 |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103232525A (zh) * | 2013-04-17 | 2013-08-07 | 南京工业大学 | 一种从链霉菌发酵液中提取多抗菌素的方法 |
-
2013
- 2013-11-11 CN CN201310556551.1A patent/CN103613641B/zh active Active
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103232525A (zh) * | 2013-04-17 | 2013-08-07 | 南京工业大学 | 一种从链霉菌发酵液中提取多抗菌素的方法 |
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| CHAN J.等: "Facile separation and identification of polyoxins from fermentation sources using high-performance liquid chromatography, ultraviolet spectroscopy and fast atom bombardment mass spectrometry", 《JOURNAL OF CHROMATOGRAPHY》 * |
| LUO S.等: "Measurement of low level membrane proteins using bicinchoninic acid: modified procedures to eliminate interfering substances", 《FUKUOKA IGAKU ZASSHI》 * |
| 吴家全 等: "多抗霉素研究现状与市场前景", 《农药研究与应用》 * |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN106885778A (zh) * | 2017-03-24 | 2017-06-23 | 依科赛生物科技（太仓）有限公司 | 一种提高蛋白浓度测定准确性的快速测定试剂及其测定方法 |
| CN106885778B (zh) * | 2017-03-24 | 2019-12-27 | 依科赛生物科技（太仓）有限公司 | 一种提高蛋白浓度测定准确性的快速测定试剂及其测定方法 |
| CN109765315A (zh) * | 2019-01-30 | 2019-05-17 | 陕西麦可罗生物科技有限公司 | 一种多抗霉素c组分的制备方法及检测方法 |
| CN109781886A (zh) * | 2019-01-30 | 2019-05-21 | 陕西麦可罗生物科技有限公司 | 一种多抗霉素n组分的制备方法及检测方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN103613641B (zh) | 2015-07-08 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN104031158B (zh) | 一种从海带中提取硫酸酯多糖的工艺 | |
| CN1302013C (zh) | 一种活性小球藻多糖的制备方法 | |
| CN100491381C (zh) | 一种从银杏叶或银杏叶提取物中提取银杏内酯b的制备方法 | |
| CN102731666A (zh) | 一种从蛹虫草培养基中提取多糖的方法 | |
| US10835552B2 (en) | Method for preparing linseed polysaccharide having antiviral activity and immunological activity, and use of the linseed polysaccharide | |
| CN103613641B (zh) | 一种分离提纯多抗菌素的方法 | |
| CN103451137B (zh) | 一种新的盐单胞菌及其生产四氢嘧啶的方法 | |
| CN101353382B (zh) | 一种抗氧化活性虫草多糖的提取方法 | |
| CN101701013A (zh) | 一种用水作溶剂从松树皮中提取原花青素的方法 | |
| CN104561223A (zh) | 一种蓝莓花青素高效合成提取方法 | |
| CN1850979A (zh) | 络石藤的木脂素苷元总提取物及其提取工艺 | |
| CN101108871A (zh) | 从大枣中提取环磷酸腺苷的工艺方法 | |
| CN104098637B (zh) | 一种纯化非达霉素的方法 | |
| CN111471732A (zh) | 一种新型富硒茶源ace抑制肽及其制备方法 | |
| CN104277135A (zh) | 一种虎奶菇多糖及其提取方法 | |
| CN102618601A (zh) | 利用生物发酵和固定化酶法制备蔗糖-6-乙酯的方法 | |
| CN105153321A (zh) | 一种具有益生元效应的莲子低聚糖单体的快速分离方法 | |
| CN104450822A (zh) | 一种以茶多酚生产废水为原料生产茶黄素的方法 | |
| CN102977172A (zh) | 一种提取虫草素的方法 | |
| CN104531822A (zh) | 一种紫甘薯花青素高效合成提取方法 | |
| CN1785308A (zh) | 具有抗肿瘤作用的植物总生物碱提取物的提取工艺及制剂 | |
| CN102174617B (zh) | 一种糖基化萝卜红色素的合成及纯化方法 | |
| CN101280333B (zh) | 一种利用灰玫瑰青霉制备青霉源性抗菌肽的方法 | |
| CN102174194B (zh) | 从发酵液中提取γ-聚二氨基丁酸和聚赖氨酸的方法 | |
| CN102863433A (zh) | 莫匹罗星的一种纯化方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant |