CN103610742A

CN103610742A - 一种具有抗肿瘤功效的灵芝孢子油组合物及其制备工艺

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Publication number: CN103610742A
Application number: CN201310615632.4A
Authority: CN
Inventors: 周禹辰; 余萍; 林琼
Original assignee: TIANJIN HANCHEN GROUP YUYANGTANG BIOLOGICAL TECHNOLOGY DEVELOPMENT Co Ltd
Current assignee: TIANJIN HANCHEN GROUP YUYANGTANG BIOLOGICAL TECHNOLOGY DEVELOPMENT Co Ltd
Priority date: 2013-11-26
Filing date: 2013-11-26
Publication date: 2014-03-05

Abstract

一种具有抗肿瘤功效的灵芝孢子油组合物及其制备工艺，制成软胶囊剂型，其特征在于软胶囊内所含物质的重量百分比是：a）灵芝孢子油：85.5%～88%，b）核桃油：10%～12.5%,c)明胶：0.5%～1%；d甘油：0.25%～0.5%；e）纯化水：0.5%～1%。灵芝孢子油软胶囊的剂型规格：内容物500mg/粒。制备工艺是：将所述比例的灵芝孢子油与核桃油混合，按照常规软胶囊的工艺进行制作；将合格的软胶囊进行包装，即为成品-含核桃油的灵芝孢子油组合物。优点是：将具有抗氧化功效的新型植物油-核桃油与灵芝孢子油混合制剂，灵芝孢子油的三萜含量为25%-27%，辅以核桃油中的抗氧化和抗肿瘤等功效成分，可以协助肿瘤患者放化疗前后缩小肿瘤体积，达到使其顺利完成手术并抑制肿瘤复发的目的。

Description

一种具有抗肿瘤功效的灵芝孢子油组合物及其制备工艺

技术领域

本发明属于中药领域的天然植物提取物，具体涉及一种可以提高灵芝孢子油抗肿瘤作用的组合物及其制备方法。

背景技术

柞木为大风子科柞木属植物，常绿灌木或小乔木，分布于秦岭以南和长江以南各地。柞木属包括凿子木、凿头木、红檬、柞树、檬子树、葫芦莿、鼠木、刺柞和凿树。柞木作为中草药，其叶入药，味苦、涩，性寒；具有清热利湿、散瘀止血、消肿止痛之功效。秋末，经常在柞木、枫朽木桩旁采到野生灵芝。据民间用药所传，柞木枝叶同时具有良好的抗肺癌活性。柞木中含有多种抗癌化学成分，如三萜类化合物、二萜类化合物、木质素苷类、生物碱以及多种脂肪酸。本发明即采用柞木人工栽培灵芝，可以提高成熟灵芝子实体中的总三萜含量，进而大大提高灵芝的抗肿瘤功效。

抗氧化是抗衰老、抗癌、抗心血管疾病的机理之一。人体细胞电子被抢夺是万病之源，活性氧自由基ORS是一种缺乏电子的物质（不饱和电子物质），它对人体健康的影响很大，如肿瘤发生、辐射致癌、心脑血管疾病、器官的缺血再灌流、药物中毒、人体衰老等过程都涉及活性氧等自由基。自由基进入人体后争夺电子，如果夺去细胞蛋白分子的电子，使蛋白质接上支链发生烷基化，形成畸变的分子就会致癌。该畸变分子由于自己缺少电子，又要去夺取邻近分子的电子，因而使邻近分子也发生畸变而致癌。这样，恶性循环就会形成大量畸变的蛋白分子。这些畸变的蛋白分子繁殖复制时，因基因突变而形成大量癌细胞，最后出现癌症。而当自由基或畸变分子抢夺了基因的电子时，人就会直接得癌症。人体得到负离子后，由于负离子带负电荷，有多余的电子，可提供细胞缺失的电子，从而阻断恶性循环，癌细胞就可防止或被抑制。”而最近的研究结果也表明抗氧化治疗对于肿瘤治疗有非常重要的临床意义。

当患者认识到肿瘤发生后，肿瘤细胞已开始不断自瘤体脱落并进入血液循环，其中的大多数虽能被身体的免疫防御系统所消灭，但少数未被消灭的肿瘤细胞却会成为复发转移的根源。因此，当临床发现肿瘤并进行手术的大部分患者事实上已有肿瘤远处转移。仅以手术或放疗消灭局部病变，不可能根治肿瘤。因而辅助肿瘤治疗的药物研制对提高肿瘤患者的治愈率，降低肿瘤复发率，提高肿瘤患者的生存质量有着重要作用。

灵芝三萜（灵芝酸）是灵芝孢子油中的最主要的抗肿瘤成分。能够抑制癌细胞的生长，具有保肝、抗肿瘤、抗HIV-1及HIV-1蛋白酶活性，抗组织胺释放，抑制血管紧张素、抗氧化等作用。但是,“灵芝三萜类物质”性质不稳定，在空气中极易氧化、挥发而失效，因此防止灵芝三萜类物质被氧化是提高灵芝有效成分含量和纯度的主要办法。本发明的灵芝孢子油是从灵芝的精华部分－破壁灵芝孢子粉中采用超临界CO₂萃取技术提取出来，灵芝孢子油中的灵芝三萜、有机锗、硒、麦角甾醇等抗肿瘤成分的含量比灵芝孢子粉中更高,因而抗肿瘤作用强于孢子粉。由于是低温萃取并辅以软胶囊的制剂形式，因而使得孢子油中的灵芝三萜可以不被氧化。

核桃又名胡桃、羌桃，属胡桃科胡桃属植物，是我国重要经济树种之一。核桃油是一种珍贵营养油，具有多重保健和药用功效。其中含有多种对人体有益的维生素、矿物元素及其它植物油少有的功效成分，如神经酸、鳕油酸、EPA、角鲨烯、黄酮、胡萝卜素、褪黑素、DHA、前体ɑ-亚麻酸、多酚化合物和抗癌之王“硒元素”。核桃油中还含有丰富的ω-3脂肪酸，能与ω-6脂肪酸一起争夺癌肿在代谢作用中所需要的酶，使癌细胞的细胞膜变得易于破坏，从而抑制肿瘤细胞生长，降低肿瘤发病率，并可增加放疗及化疗的功效(放疗及化疗是通过自由基-高活性分子的爆发攻击细胞膜来杀死细胞，当细胞膜受到足够的伤害时，癌细胞就会发生凋亡)。

核桃油中的鳕油酸是脑白质的重要成分，有治疗脑血栓，促进皮肤成纤维细胞生长，对血管有舒通作用。DHA和EPA能延长萎缩的大脑神经，使被破坏的神经网络再生，从而防止大脑功能的衰退、老年痴呆症和癌症的发生。神经酸又称鳖鱼酸，神经酸是能修复疏通受损的大脑神经纤维，促使神经细胞再生的双效物质，是大脑神经纤维和神经细胞的核心天然成分。

核桃油中含角鲨烯0.94mg/100g。角鲨烯是深海鳖鱼肝油的主要成分，在植物中的分布也十分广泛。植物中的角鲨烯多分布于核桃油中。随着年龄的增长，人体的角鲨烯逐渐减少。角鲨烯能向细胞供应大量氧气，使细胞恢复活力，提高身体的自然治愈能力。具有促进血液循环，衰老、降血脂、防癌抗癌活化身体机能细胞，延缓调节免疫功能等。

核桃油中的褪黑素除了具有保护细胞免受氧化损伤外，尚有抗癌、调节神经活动、抗衰老等多种生物学功能。Texas大学的研究表明核桃含有相当数量的褪黑素，平均含量为3.5士1.0ug/kg。

相比于其他植物油，核桃油还含有较多的黄酮，含量为2618mg/kg，比常见的大豆油、菜籽油和葵花籽油高数倍。黄酮是具有广泛生理活性的一类物质，如抗炎症、抗敏症、抑制细菌、抑制病毒、预防肝病、防止血栓形成、预防心脑血管病、抗肿瘤，增强血管扩张力、调节血脂、降低胆固醇、降血糖、减少血栓，并具有护肝抗癌、有效活化细胞、增强人体免疫力、抗氧化、延缓衰老、对心脑血管疾病有防止和改善微循的作用。

核桃油中含有大量的维生素E和多酚抗氧化物。其中，维生素E含量为385.2μg/g，人体每天会产生大量的自由基，二者具有很强的清除氧自由基的能力，其抑制邻苯三酚自氧化率高达53.3%，仅次于抗氧化剂和维生素C的活性。维生素E可通过消除自由基、阻止脂褐质色素来延缓细胞衰老，防癌抗癌。

核桃油中的硒元素含量是7.2μg/100g。硒是人类生命必需的元素之一，有抗癌和延迟衰老等功效。人类的四十多种疾病与缺硒有关，特别是硒与人类衰老等问题密切相关。因此,硒被誉为“生命火种”、“心脏的守护神”、“抗癌之王”。长期食用核桃油对防癌抗癌有重要作用。

目前，多数西医领域的抗癌药物都会对机体带来一定的损伤，长期服用的患者还会在后期出现诸如不育、第二原发肿瘤等病灶。而中药治疗恶性肿瘤,无论是在减轻临床症状,提高生存质量,防止复发转移,延长生存期,还是在与放化疗配合,增效减毒等方面都有很好的效果。

发明目的

本发明的目的是提供一种具有抗肿瘤作用的灵芝孢子油组合物及其制备方法，将具有抗癌作用的灵芝孢子油与核桃油组合制剂成软胶囊，该制剂提高人体免疫力、防癌治癌的功效更突出，是肿瘤患者手术前后的辅助药物。

发明内容

本发明是具有抗肿瘤作用的灵芝孢子油组合物，以市售的核桃油和自主提取的灵芝孢子油为原料，制成软胶囊剂型，其特征在于软胶囊内所含物质的重量百分比是：

a）灵芝孢子油：85.5%～88%，灵芝总三萜含量25%～27%；

b）核桃油：10%～12.5%，所含亚油酸≥60%，亚麻酸≥12%；

c)明胶：0.5%～1%；

d）甘油：0.25%～0.5%；

e）纯化水：0.5%～1%。

灵芝孢子油软胶囊的剂型规格：内容物500mg/粒。

此灵芝孢子油软胶囊的制备工艺是：将所述比例的灵芝孢子油与核桃油混合，按照常规软胶囊的工艺进行制作；将合格的软胶囊进行包装，即为成品-含核桃油的灵芝孢子油组合物。

本发明的优点是：（1）上述配方中所用灵芝孢子油是将赤灵芝菌种在柞木上进行断面接种法进行培养，并经超临界CO₂提取工艺而来。由于是熟材短柞木进行断面接种和室内培菌，灵芝菌丝体对本栽木材的分解利用率高，加上是在大棚内进行覆土栽培，病虫害发生危害极少且防治容易，因此产量有保证。相比于传统的袋料栽培或液体栽培，此方法栽培的灵芝质地厚实、坚硬、营养及药效齐全；（2）本发明将具有抗氧化功效的新型植物油-核桃油与灵芝孢子油混合制剂，灵芝孢子油的三萜含量为25%-27%，辅以核桃油中的抗氧化和抗肿瘤等功效成分，可以协助肿瘤患者放化疗前后缩小肿瘤体积，达到使其顺利完成手术并抑制肿瘤复发的目的。相比于西药，该组合制剂对人体的正常组织细胞没有损害作用，肿瘤患者可用于术前术后的放化疗辅助药物。在放化疗的前后服用达到术前调理患者身体状态、提高患者身体免疫力和缩小肿瘤的目的，可使其顺利完成手术，以及手术后控制残余癌细胞的蔓延和再次复发转移的作用。

具体实施方式

具有抗肿瘤功效的灵芝孢子油组合物，其特征在于组分重量百分比是：

a）灵芝孢子油：85.5%～88%，灵芝三萜含量25%-27%；

b）核桃油：10%～12.5%；所含亚油酸≥60%，亚麻酸≥12%

b)明胶：0.5%～1%；

c）甘油：0.25%～0.5%；

d）纯化水：0.5%～1%。

如表1中注解“e”的比例所示，其特征在于主要成分的配比还可以是：核桃油：孢子油=1:8～9。

根据上述的具有抗肿瘤功效的灵芝孢子油组合物，制备软胶囊的工艺，所用主料灵芝孢子油的质量指标如表4～7所示。所购买的核桃油应符合GB/T22327《核桃油》质量标准，如表3核桃油的特征指标；其工艺步骤特征如下：

a）按上述的具有抗肿瘤功效的灵芝孢子油组合物的比例备料，先将灵芝孢子油和核桃油混合置于夹套搅拌罐中，温度控制30℃～35℃；

b）将上述物料进行均质后，倒入真空罐进行搅拌脱气处理2～3小时，在-0.09MPa下脱真空，将主料调配完毕，作为胶囊内容物备用；

c）将明胶、甘油和纯化水在配胶罐内混配，水浴加热至温度≤70℃；在-0.09MPa下抽真空，并同时搅拌3～4小时，放出明胶液至保温桶，在60℃下保温4～8小时备用；

d）通过压丸机，将所配制的明胶液对内容物压制成所需要的形状和装量的软胶囊，并干燥成型；

e）将上述干燥成型的软胶囊用95%的乙醇清洗，再干燥5～6小时，温度24℃～28℃；

f）将合格的软胶囊进行包装，即为成品，软胶囊所含灵芝孢子油组合物的内容物500mg/粒。

具有抗肿瘤功效的灵芝孢子油组合物的效果试验：

效果实验例1：选取健康小鼠（中国人民解放军军事医学科学院实验动物中心提供）80只，将80只小鼠随机分成八组，每组10只：对照组、试验组1核桃油组、试验组2灵芝孢子油组和实验组3核桃油+灵芝孢子油（试验组3按表1所注中的两种油的不同比例分别饲喂Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组），以全价配合饲料进行喂养，饮水和食量不限。接种肿瘤前对小鼠进行适应性饲喂5天，具体为：饲喂每个试验组的试验用油0.2mL/次、每天2次，对照组给予同样剂量的生理盐水。适应性饲喂后，接种肝癌细胞株H22菌悬液于小鼠右腋窝皮下0.2mL，进行常规饲喂并停止用油，待肿瘤生长5天后，对各组小鼠进行试验性饲喂，2.0mL/次，每天2次，对照组给予相同剂量的生理盐水。一共连续12天试验性饲喂，饲水和食物不限。接种肿瘤后第5天开始，每天用游标卡尺测量肿瘤相互垂直的直径，计算肿瘤的抑制率。试验结果见表1.

表1 不同治疗物质对肿瘤的抑制作用

由表1可以看出，Ⅴ组灵芝孢子油组合物对肿瘤的抑制率最高，因而核桃油和孢子油的比例=1:8～9为最佳制剂配比。

效果实验例2：试验目的是观察制剂对肿瘤的抑制效果，试验期为12天。选取健康小鼠（中国人民解放军军事医学科学院实验动物中心提供）40只，将40只小鼠随机分成四组：对照组、试验组1（低剂量组）、试验组2（中剂量组）和试验组3（高剂量组），接种前进行适应性饲喂5天，按核桃油：灵芝孢子油=1:9制备软胶囊。接种后常规全价配合饲料喂养5天后，按低剂量（0.5mL/次）、中剂量（1.0mL/次）、高剂量（2.0mL/次）饲喂，每日2次给予灵芝孢子油组合物，对照组给予相同剂量的生理盐水，连续12天常规饲喂，饲水和食物不限，并于第5天开始，每天用游标卡尺测量肿瘤相互垂直的直径，计算肿瘤的抑制率。

试验结果：试验结果表明该灵芝孢子油组合物可显著抑制荷瘤在小鼠体内的生长，抑制率和对照组相比差异显著，抑制率达52.7%，肿瘤抑制率=（对照组平均瘤重-试验组平均瘤重）/对照组平均瘤重×100%。试验结果见表2。

表2 灵芝孢子油组合物对荷瘤小鼠肿瘤的抑制作用

注：与对照组相比较.表示p<0.05，料表示p<0.01

核桃油应符合GB/T22327《核桃油》的质量标准，如表3所示

表3 核桃油的特征指标

项目	范围
		折光指数n²⁰	1.467～1.782
相对密度	0.902～0.929
		碘值（以I计）/(g/100g)	140～174
皂化值（以氢氧化钾计）/mg/g	183～197
		不皂化物/（g/kg）≤	20
棕榈酸	6.0～10.0
		棕榈油酸	0.1～0.5
硬脂酸	2.0～6.0
		油酸	11.5～25.0
亚油酸	50.0～69.0
		亚麻酸	6.5～18.0

灵芝孢子油应符合如下质量要求：

表4 灵芝孢子油感官指标

表5 灵芝孢子油功效成分指标

表6 灵芝孢子油理化指标

表7 灵芝孢子油微生物指标

Claims

1.一种具有抗肿瘤功效的灵芝孢子油组合物，其特征在于组合物中的各组分重量百分比如下：

a）灵芝孢子油：85.5%～88%，灵芝三萜含量为25%～27%；

b）市售核桃油：10%～12.5%，所含亚油酸≥60%，亚麻酸≥12%

c)明胶：0.5%～1%；

d）甘油：0.25%～0.5%；

e）纯化水：0.5%～1%。

2.根据权利要求1所述的具有抗肿瘤功效的灵芝孢子油组合物，其特征在于主要成分的配比分别是：核桃油：孢子油=1:8～9。

3.制备如权利要求1所述的具有抗肿瘤功效的灵芝孢子油组合物的工艺，按所述组合物的重量百分比备料，其特征如下：

a）按权利要求1的比例，将灵芝孢子油和核桃油混合置于夹套搅拌罐中，加热物料，温度控制30℃～35℃；

b）将上述物料放入均质机进行均质后，倒入真空罐进行脱真空（-0.09MPa），搅拌脱气罐处理2～3小时，胶囊内容物调配完毕，备用；

d）通过压丸机，将所配制的明胶对内容物压制成所需要的形状和装量的软胶囊，并干燥成型；

e）将上述干燥成型的软胶囊用95%的乙醇清洗，再干燥5～6小时，温度为24℃～28℃；

f）将合格的软胶囊进行包装，即为成品，软胶囊内容物500mg/粒。