CN103609939B - 一种黄芪多糖和枸杞多糖组合物及其制备方法和应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种黄芪多糖和枸杞多糖组合物，以黄芪和枸杞为原料，经水提取和乙醇处理后制备获得，还公开了上述黄芪多糖和枸杞多糖组合物的制备方法，并公开了上述黄芪多糖和枸杞多糖组合物在制备具有预防肾阳虚功能的保健食品中的应用。
Description
技术领域
本发明属于多糖技术领域，具体涉及一种黄芪多糖和枸杞多糖组合物及其制备方法和应用。
背景技术
黄芪甘温补气、健脾益肺，兼能利水、消痈，枸杞滋补肝肾，益精养血，善阴中求阳，二药合用，温补脾肾，益精气之力著。但目前未见有人仅凭此二药，尤其是功效成分多糖，用于预防肾阳虚功能的保健食品中。
中医认为肾为脏腑之本，是机体阴阳消长之枢纽；肾阳是人体生命活动的原动力，为人体生命活动之根本。随着现代医学的深入研究，学者创立了多种肾阳虚证的造模方法（包括常用的氢化可的松诱导的肾阳虚模型），并采用代谢组学、基因组学等方法研究。然而，目前未见利用代谢组学方法评价植物多糖温补肾阳的效果。
发明内容
本发明所要解决的第一个技术问题是提供一种黄芪多糖和枸杞多糖组合物，该组合物具有预防肾阳虚功能。
本发明所要解决的第二个技术问题是提供上述黄芪多糖和枸杞多糖组合物的制备方法，该制备方法工艺简单，提取效率高。
本发明所要解决的第三个技术问题是提供上述黄芪多糖和枸杞多糖组合物在制备具有预防肾阳虚功能的保健食品中的应用。
本发明所要解决的第一个技术问题是通过如下技术方案来实现的：一种黄芪多糖和枸杞多糖组合物，以黄芪和枸杞为原料，经水提取和乙醇处理后制备获得。
本发明所述黄芪和枸杞的重量份配比优选为300:100～500；最佳为300:200。
本发明水提取时，每次提取时水的用量优选为原料总重量的5～30倍，提取优选为1～3次，每次提取时间优选为1.5～4h。
本发明水提取后，过滤，将滤液浓缩，得浓缩液，将浓缩液采用乙醇处理，所述乙醇处理为采用体积百分含量优选为70～95%的乙醇水溶液进行醇沉处理，所得沉淀物即得黄芪多糖和枸杞多糖组合物。其中浓缩采用真空浓缩较好。
本发明所要解决的第二个技术问题是通过如下技术方案来实现的：上述黄芪多糖和枸杞多糖组合物的制备方法，以黄芪和枸杞为原料，经水提取和乙醇处理后制备获得。
在上述制备方法中：
本发明所述黄芪和枸杞的重量份配比优选为300:100～500；最佳为300:200。
本发明水提取时，每次提取时水的用量为原料总重量的5～30倍，提取1～3次，每次提取时间为1.5～4h。
本发明水提取后，过滤，将滤液浓缩，所得浓缩液采用体积百分含量为70～95%的乙醇水溶液进行醇沉处理，取沉淀物即得黄芪多糖和枸杞多糖组合物。其中浓缩采用真空浓缩较好。
本发明所要解决的第三个技术问题是通过如下技术方案来实现的：上述黄芪多糖和枸杞多糖组合物在制备具有预防肾阳虚功能的保健食品中的应用。
其中黄芪多糖和枸杞多糖组合物，可以直接口服，也可以制成药剂学上所说的多种剂型，如颗粒剂、胶囊剂、口服液、糖浆剂等，食用后具有预防肾阳虚功能的作用。
本发明具有以下优点：
（1）本发明黄芪多糖和枸杞多糖组合物可以药食两用；
（2）黄芪多糖和枸杞多糖组合物的制备方法简单科学，能充分保留黄芪多糖和枸杞的多糖有效成分，保证其制备的保健食品具有预防肾阳虚的功效；
（3）本发明不但为黄芪多糖和枸杞多糖的应用提供了一定的科学依据，而且为开发预防肾阳虚的功能性食品提供了新的资源。
附图说明
图1是具体实施方式第二部分4.2多糖干预组的代谢模式分析实验第25天正常组、多糖干预组与模型组内源性代谢物PLS-DA分析，其中◆代表实验第25天多糖干预大鼠“肾阳虚”模型(CPS1-HC1)；■代表模型组(HC1)；●代表正常组(N1)；
图2是具体实施方式第二部分4.2多糖干预组的代谢模式分析实验第25天正常组、多糖干预组与模型组内源性代谢物PLS-DA分析，其中◆代表实验第25天多糖金匮肾气丸干预大鼠“肾阳虚”模型(PC1-HC1)；■代表模型组(HC1)；●代表正常组(N1)；
图3是具体实施方式第二部分4.2多糖干预组与模型组内源性代谢物PLS-DA分析，其中●代表多糖干预大鼠“肾阳虚”模型(CPS1-HC1)，■代表模型组(HC1)；
图4是具体实施方式第二部分4.2多糖干预组与模型组内源性代谢物PLS-DA分析，其中●代表金匮肾气丸干预大鼠“肾阳虚”模型(PC1-HC1)，■代表模型组(HC1)。
具体实施方式
以下实施例中采用的各原料，如无特殊说明，均为市售产品。
第一部分黄芪多糖和枸杞多糖组合物及其制备方法
实施例1
将干燥的黄芪药材300g粉碎后，与枸杞药材100g混匀，水浴法提取两次，第一次加药材总重量10倍的水，煮沸3h；第二次加药材总重量5倍的水，煮沸2h；滤过，滤液真空浓缩，浓缩液用体积百分比浓度为70%的乙醇水溶液醇沉，取沉淀物得黄芪多糖和枸杞多糖组合物。
实施例2
将干燥的黄芪药材300g粉碎后，与枸杞药材100g混匀，水浴法提取一次，加药材总重量30倍的水，煮沸4h；滤过，滤液真空浓缩，浓缩液用体积百分比浓度为70%的乙醇水溶液醇沉，取沉淀物得黄芪多糖和枸杞多糖组合物。
实施例3
将干燥的黄芪药材300g粉碎后，与枸杞药材200g混匀，提取三次，第一次加药材总重量30倍的水，煮沸4h；第二次加药材总重量20倍的水，煮沸3h；第三次加药材总重量15倍的水，煮沸2h；滤过，滤液真空浓缩，浓缩液用体积百分比浓度为75%的乙醇水溶液醇沉，取沉淀物得黄芪多糖和枸杞多糖组合物。
实施例4
将干燥的黄芪药材300g粉碎后，与枸杞药材200g混匀，提取两次，第一次加药材总重量30倍的水，煮沸4h；第二次加药材总重量20倍的水，煮沸3h；滤过，滤液真空浓缩，浓缩液用体积百分比浓度为75%的乙醇水溶液醇沉，取沉淀物得黄芪多糖和枸杞多糖组合物。
实施例5
将干燥的黄芪药材300g粉碎后，与枸杞药材300g混匀，提取三次，第一次加药材总重量20倍的水，煮沸2.5h；第二次加药材总重量10倍的水，煮沸2h；第三次加药材总重量5倍的水，煮沸2h；滤过，滤液真空浓缩，浓缩液用体积百分比浓度为90%的乙醇水溶液醇沉，取沉淀物得黄芪多糖和枸杞多糖组合物。
实施例6
将干燥的黄芪药材300g粉碎后，与枸杞药材400g混匀，提取三次，第一次加药材总重量25倍的水，煮沸3.5h；第二次加药材总重量15倍的水，煮沸1.5h；第三次加药材总重量10倍的水，煮沸1.5h；滤过，滤液真空浓缩，浓缩液用体积百分比浓度为80%的乙醇水溶液醇沉，取沉淀物得黄芪多糖和枸杞多糖组合物。
实施例7
将干燥的黄芪药材300g粉碎后，与枸杞子药材450g混匀，提取三次，第一次加药材总重量15倍的水，煮沸2h；第二次加药材总重量10倍的水，煮沸1.5h；第三次加药材重量5倍的水，煮沸2h；滤过，滤液真空浓缩，浓缩液用体积百分比浓度为85%的乙醇水溶液醇沉，取沉淀物得黄芪多糖和枸杞多糖组合物。
实施例8
将干燥的黄芪药材300g粉碎后，与枸杞子药材500g混匀，提取量次，第一次加药材总重量30倍的水，煮沸4h；第二次加药材总重量20倍的水，煮沸3h；滤过，滤液真空浓缩，浓缩液用体积百分比浓度为95%的乙醇水溶液醇沉，取沉淀物得黄芪多糖和枸杞多糖组合物。
第二部分黄芪多糖和枸杞多糖组合物具有预防肾阳虚功能的药效试验
1.实验目的
建立氢化可的松诱导的肾阳虚大鼠模型，初探黄芪多糖和枸杞多糖组合物对肾阳虚大鼠代谢组学的影响，并与补肾阳经典药剂金匮肾气丸进行参照比较。
2.实验材料
2.1药物及主要试剂
（1）采用上述实施例3中获得的黄芪多糖和枸杞多糖组合物（以下简称多糖），申请人进行了药物干预肾阳虚模型的试验。
（2）试剂名称和厂商
2.2主要仪器
3.试验方法
3.1模型建立和药物干预
氢化可的松（HC）诱导的“肾阳虚”模型的建立和药物干预实验设计如表1所示。
表1实验设计
3.1.1给药剂量
多糖组合物0.18g/kg·d，阳性对照药（金匮肾气丸）4.5g/kg·d，均相当于成人剂量的30倍。
3.1.2预防性给药及肾阳虚模型的建立
雄性SD大鼠（180～200g），饲养于上海交通大学药学院实验动物中心SPF级屏障动物实验室。动物日常护理及实验条件均符合《中华人民共和国卫生部实验动物环境及设施标准》。
动物经合笼饲养两周后，随机分成两组，空白对照组18只，给药组40只。给药组分为两组，包括：①阳性药对照组（金匮肾气丸组+空白组10只，金匮肾气丸+造模组10只）；②多糖组（多糖+空白组10只，多糖+造模组10只）。给药组每天12:00灌胃给药，1次/天，连续15天，各给药组给药剂量见3.1.1。不给药组每天相同时间灌胃等量体积的生理盐水。
实验第16天，将两个给药组和空白对照组均分别随机平均分成2组，每组9～10只。其中三组（两个给药组和一个不给药组）建立肾阳虚大鼠模型，于每日16:00右后腿肌肉注射50mg/kg的5%氢化可的松（1mLNS稀释，肌注体积为：体重×10-3mL），连续7天，剩余三组肌注等量体积的生理盐水。
3.1.3样本收集
尿样：实验第0、15、22、25、29、36天，收集大鼠24h尿样，记录尿液体积，并迅速离心（4℃，2800rpm），取上清分装，于-80℃冰箱保存。
血样：实验第0、15、25、36天眼眶取血，分离血清于-80℃冰箱保存。
组织：实验第37天处死动物，取下丘脑、垂体、肾上腺、肾、胸腺和脾，称重，并于-80℃冰箱保存。
3.2观察项目和指标
分别记录实验第0、15、22、25、29、36天的大鼠尿量。
使用ELISA试剂盒分别检测各组尿17-羟皮质类固醇（17-OHCS）水平，以及血清促肾上腺皮质激素（ACTH）、皮质酮（CORT），结果以mean±SD表示。采用SPSS统计软件（12.0）对结果进行ANOVA分析。
3.3血清代谢组学研究
3.3.1血清样本处理
血清溶解，涡旋混匀后精密移取100μL。加入甲醇溶解的1mg/mL的十七酸10μL和水溶解的0.3mg/mL氯苯丙氨酸10μL，混匀后加入混合溶剂300μL（氯仿:甲醇1:3，v/v），涡旋混匀，-20℃静置10min，4℃离心10min（10,000rpm）。取300μL上清液于1.5mL高回收进样瓶中，室温下真空干燥。
抽干后用氮气对样品再次干燥，以保证样品中无水并排除空气中湿气对衍生的影响（衍生时，空气湿度≤35％）。氮气吹干后加入15mg/mL吡啶溶解的甲氧胺80μL，密封后振荡30s，30℃摇床（220rpm）反应90min；反应结束后，在反应瓶中加入80μL的BSFTA（含1％TMCS），密封后振荡30s，70℃反应60min。反应结束后，振荡10s，室温下放置1h后进样分析。
3.3.2GC-TOFMS分析
色谱条件：色谱柱DB-5MS毛细管柱（5%Diphenylcross-linked95%dimethylpolysiloxane：30m×250μmi.d.，0.25μm；AgilentJ&WScientific，Folsom，CA）；不分流进样，进样量1μL；进样口温度280℃；程序升温条件：起始温度80℃；保持2min，以10℃/min升至180℃，以6℃/min升至230℃，再以40℃/min升至295℃，保持8min。载气为氦气(99.9999%)，载气流速1mL/min。
质谱条件：溶剂延时4.5分钟，电离方式EI，电子能量-70eV，质谱扫描范围40～600（m/z）；接口温度260℃，离子源温度210℃。
3.3.3数据处理和统计分析
GC-TOFMS仪器检测的原始数据经ChromaTOF和上海交通大学开发的软件进行基线校正、平滑和去噪等预处理以及峰提取和峰对齐等操作。使用Excel软件以及基于MATLABR2010a(MathWorks,Inc.Natick,MA)、R10.2(LucentTechnologies)和JavaSE1.6(SunMicrosystems)平台上海交通大学开发的工具包完成数据的批内、批间校正和内标校正。
使用公共数据库和上海交通大学建立的标准品库进行物质鉴定。公共数据库主要包括NISTlibrary2005、LECO/FiehnMetabolomicsLibraryforGC-TOFMSmetabolomedata(similaritythresholdof70%)等；上海交通大学建立的标品库涵盖内源性代谢物近900种。
使用SPSS（SPSS,Chicago,IL）、SIMCA-P12.0.1+(Umetrics,Sweden)、Excel（Microsoft，USA）、R（GNU）以及上海交通大学开发的软件包等对数据进行单维和多维统计分析。
4.实验结果
4.1生化指标分析
实验中第25天，即停止造模后3天，各组大鼠上述生化指标水平变化见表2。与正常对照组相比，模型组大鼠尿17-OHCS（肾阳虚研究的关键指标）、血清CORT和ACTH水平均比正常组显著或极显著下降（P＜0.05或P＜0.01），提示连续的外源性糖皮质激素作用导致大鼠自身的肾上腺皮质功能减弱，呈现与临床“肾阳虚证”相似的症状，表明实验造模的成功。阳性对照药（金匮肾气丸）干预组对上述指标在模型组中的改变有改善作用。多糖干预组对由“肾阳虚证”引起的上述生化指标下降表现出一定程度的抑制作用，初步提示多糖对氢化可的松诱导的“肾阳虚证”具有一定的预防干预作用。
表2各组大鼠尿液和血清生化指标分析
注：§与空白组比，P＜0.05；§§与空白组比，P＜0.01；
*与模型组比，P＜0.05；**与模型组比，P＜0.01。
4.2代谢组学分析
4.2.1多糖干预组的代谢模式分析
实验采用多维统计方法对实验第25天正常组、模型组和多糖干预组的代谢谱数据进行PLD-DA分析，结果提示，多糖组、阳性对照药金匮肾气丸均有与模型组分离、向正常组靠近的趋势，结果见图1和图2。主要模型参数见表3。
表3主要模型参数1
| 序号 | 组别 | 成分a | R2Xb | R2Yc | Q2Yd | 对应图 |
| 1 | CPS1-HC1,HC1,N1 | 3 | 0.382 | 0.782 | 0.319 | 图1 |
| 2 | PC1-HC1,HC1,N1 | 3 | 0.366 | 0.82 | 0.316 | 图2 |
注：a：模型成分个数；b：模型对原始数据的解释能力（提取了数据中的信息量的百分比的平方）；c：模型对指导变量的拟合能力；d：建模的预测能力。
进一步对药物干预组与模型组代谢谱数据进行PLS-DA分析，结果发现，模型组与各药物干预组动物间的血清代谢轮廓均有明显的差异，且模型具有较好的解释率和预测率，见图3和图4，以及表4。
表4主要模型参数2
| 序号 | 组别 | 成分a | R2Xb | R2Yc | Q2Yd | 对应图 |
| 1 | CPS1-HC1,HC1 | 3 | 0.445 | 0.974 | 0.671 | 图3 |
| 2 | PC1-HC1,HC1 | 3 | 0.431 | 0.995 | 0.851 | 图4 |
注：同表3。
4.2.2差异代谢物在药物干预组的变化分析
基于模型组和正常组大鼠血清PLS-DA分析结果，在两组间共找到96个差异性变量（PLS-DA模型提供的变量权重值（Variableimportanceintheprojection），VIP>1）。通过与公认的商业化谱库（如Willy和NIST质谱库）及上海交通大学建立的标准品谱库对照，共鉴定其中43个化合物。结合T检验分析（P<0.05），最终筛选得到14个差异性代谢物，对这14个差异代谢物在模型组和各药物干预组的变化倍数进行比较，并对这些代谢物在药物干预组与正常组的差异进行T检验分析，结果见表5。结果表明，在模型组变化非常明显（FC均>1.2或<0.8）的14个差异表达代谢物，在多糖和阳性药干预下，均有向正常水平靠近的趋势；同时，T检验结果表明在实验第25天时14个差异代谢物与正常组的差异均已无显著性（P>0.05）。这个结果提示多糖对氢化可的松诱导的肾阳虚具有一定的预防保护作用。
表5通过正常组与模型组比较选定的14个差异代谢物在中药干预组的变化情况
注：a.模型组、各给药组与正常组相比；b.各给药组与正常组的T检验结果。
上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围。
Claims (1)
1.黄芪多糖和枸杞多糖组合物在制备具有预防肾阳虚功能的保健食品中的应用，所述的黄芪多糖和枸杞多糖组合物通过以下方法制备获得：以黄芪和枸杞为原料，经水提和乙醇处理后制备获得；所述黄芪和枸杞的重量份配比为300:100~500；水提取时，每次提取时水的用量为原料总重量的5~30倍，提取1~3次，每次提取时间为1.5~4h；水提取后，过滤，将滤液浓缩，得浓缩液，将浓缩液采用乙醇处理，所述乙醇处理为采用体积百分含量为70~95%的乙醇水溶液进行醇沉处理，所得沉淀物即得黄芪多糖和枸杞多糖组合物。
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Families Citing this family (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104119575A (zh) * | 2014-06-19 | 2014-10-29 | 无限极（中国）有限公司 | 一种具有调节肿瘤微环境功效的党参和枸杞复合多糖及其制备方法和应用 |
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Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101401898A (zh) * | 2008-11-11 | 2009-04-08 | 于山 | 一种提高免疫力的中药组合物 |
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Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101401898A (zh) * | 2008-11-11 | 2009-04-08 | 于山 | 一种提高免疫力的中药组合物 |
| CN102948748A (zh) * | 2012-11-02 | 2013-03-06 | 江苏吉贝尔药业有限公司 | 一种抗疲劳的保健品 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| 枸杞、黄芪对大鼠睾丸支持细胞功能的影响;赵龙坡等;《中华男科学杂志》;20070131;第13卷(第1期);82-86 * |
| 黄芪枸杞子口服液的试制和研究;毕春红;《齐齐哈尔医学院学报》;20061231;第27卷(第7期);835 * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN110604769A (zh) * | 2018-06-17 | 2019-12-24 | 罗建平 | 一种多功能复合植物多糖 |
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