CN103607997B - 用于预防和/或治疗头皮的头皮屑病症的有益活性剂 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及关于在完全发酵培养基中的透明颤菌属细菌(尤其物种:线状透明颤菌)的细菌裂解物作为用于预防和/或治疗头皮的头皮屑病症的活性剂的美容用途,该头皮屑病症包括与头皮上的病原微生物的流行和/或头皮生态菌群的不平衡相关的头皮上的头皮屑病症。
Description
技术领域
本发明涉及来源于透明颤菌属(Vitreoscilla)的微生物(尤其物种:线状透明颤菌,Vitreoscilla filiformis)的活性剂作为用于预防和/或治疗头皮的头皮屑病症的活性剂的美容用途,该头皮屑病症包括与头皮上的病原微生物的增殖和/或头皮生态菌群的不平衡相关的头皮屑病症。
背景技术
皮肤是一种组织,其中,细胞连接到一起并且彼此一体地附着。皮肤组织形成包括皮脂腺或汗腺和毛囊的外层。皮肤、特别是头皮是经历持续再生的表皮。再生或脱屑是协调的且精细调节的过程,该过程导致表层细胞的察觉不到的且看不见的去除。
然而,由于各种原因造成的角质层的细胞的异常的或者不规律的脱落,可以导致形成肉眼可以看见的且对于头皮而言或者在角质层变薄的其他情形中被称为“鳞片”或“头皮屑”的大的、厚的细胞团。由异常的或者不规律的脱落造成的脱屑失调可以导致表皮的脆性或者甚至缺失表皮的屏障性能。
就促进鳞片或头皮屑的出现的因素举例来说,可以提到的是压力、寒冬期、过量的皮脂、保湿缺陷、或者由马拉色氏霉菌属(Malassezia)的酵母菌造成的皮肤或毛囊的真菌群集。这些因素尤其具有导致和/或促使皮肤炎症的共同特征。该炎症增强了鳞片或头皮屑的出现或甚至增加了鳞片或头皮屑的存在。具体而言,马拉色氏霉菌属类型的酵母菌构成没有头皮屑的个体中的头皮表面处的正常共生菌的一部分,在头皮屑的情况下或者在有关脂溢性皮炎的情况下,它们所占的比例大幅增加。头皮生物菌群的不平衡是促进或甚至增强头皮屑的出现的一个因素。
鳞片或头皮屑病症的出现可以是复发的、频繁发生的慢性病症,该慢性病症由于其明显不雅的性质而对社交不利。此外,头皮的头皮屑病症或皮肤的异常脱屑可反映为表皮的屏障功能受损、或产生发痒的感觉或导致瘙痒症,瘙痒症导致扩大了鳞片或头皮屑的出现的现象的损伤,从而刺激头皮或皮肤。
头皮的头皮屑病症可以是油脂类型或干燥类型。在皮肤保湿障碍期间,尤其是在头皮表皮的基本上干燥期间,头皮的干燥的头皮屑病症较频繁地出现并且扩大。此外,由于头皮富有皮脂腺,故头皮屑病症在过量存在皮脂下更容易发展且更容易引起痒疹。因此,皮脂的过度分泌或者皮脂分泌过多促使头皮的油腻的头皮屑病症或油腻头皮屑出现,这通常与悲伤、不适感、美学失调或甚至皮肤病理学相关。
头皮屑病症通常对应于各种局部治疗或全身治疗。然而,这些治疗的功效仅是中止性的并且需要用户方面的严格坚持(足够的使用频率和足够的应用时间)。然而,这些治疗的每日和长期使用可以导致成瘾的现象、减少它们的功效,成瘾通常当治疗停止时与反弹现象出现相关。该现象通过皮脂分泌过多而显现,这加重了头皮屑病症且损害头皮的屏障功能。此外,关于表皮细胞或头皮生物菌群的一些抗头皮屑活性剂的攻击性也可以影响头皮的屏障功能并且导致加重头皮屑病症。最后,抗头皮屑治疗的功效通常减缓发展并且长期需要严格应用。该滞后时间通常导致不能坚持治疗。因此,在使用这些治疗中产生很多失败。
已知在头皮的再生或脱屑的过程中直接或间接地涉及很多表皮因子,这些表皮因子的表达、生物活性或成熟被改动、降低或增强。
这些因子可以用作头皮的生物标记、作为筛选靶点、或甚至作为美容活性剂。
然而,关于在皮肤的脱屑中涉及的内在机制和因子,且特别是头皮屑发作时涉及的内在机制和因子,还存在很多未知因素。
还需要用于预防和/或治疗皮肤脱屑失调、尤其是头皮的头皮屑病症的新的活性剂或新的治疗。
还需要用于预防、降低和/或治疗头皮的头皮屑病症的新的美容治疗,其有效并且没有易于不利地影响坚持治疗的负面影响。
还需要用于头皮的头皮屑病症的治疗,该治疗没有负面影响头皮的生物菌群、或甚至增强了健康的生物菌群的存在。
需要用于头皮屑病症的美容治疗,该治疗能够保持或者甚至增强头皮的屏障性能。
需要用于头皮屑病症的治疗,该治疗没有上述负面影响,且尤其不导致皮脂分泌过多、脂溢性皮炎或痒疹疾病。
还需要对于头皮屑病症的治疗,该治疗不引起炎症。
发明内容
本发明的目的是为了满足这些需要。
因此,本发明的目的尤其是提供一种新的活性剂,其满足上述需求且尤其表现出在面对病原性微生物菌群时头皮的屏障功能的失调方面的效果。如下文的详细描述,本发明的新的活性剂有利地用在用于头皮的头皮屑病症的美容治疗过程的实施中。
更具体地,本发明涉及在完全发酵培养基中属于透明颤菌属的一种或多种细菌(尤其物种:线状透明颤菌)的裂解物作为用于预防和/或治疗头皮的头皮屑病症的活性剂的美容用途,该头皮屑病症尤其与头皮生态菌群的不平衡相关。
头皮屑病症的预防和/或治疗包括:头皮屑的预防和/或治疗,和/或与头皮屑的出现有关的头皮瘙痒的治疗。
出于本发明的目的,表述“在完全发酵培养基中的裂解物”是指,裂解物被使用且出现在含有其的美容或皮肤病用组合物中,在如下文所限定的来源的完全培养基中配制,完全培养基是这样的培养基:其中细菌被培养到在培养基中开始出现已经导致使用营养基质的微生物生长期之后。
出于本发明的目的,表述“完全发酵培养基”旨在表示源于已经用于微生物的生长和细胞裂解的培养过程的培养基,此外,所述培养基没有经受目的在于分离和/或去除其全部或部分的非水性组分的附加操作。
出于本发明的目的,术语“预防”是指全部消除或部分减少给定现象(即,在本发明中头皮的头皮屑病症)发生的风险。“部分减少”意味着,风险保持存在但是比实施本发明之前的程度小。
含有根据本发明的活性剂的组合物可以局部施用。
在文献FR 2 879 452中,已经提出作为用于调节且优选抑制病原性微生物在皮肤和头皮上的粘附和/或增殖的活性剂的非光合活性、非结实的丝状细菌(如同透明颤菌属的细菌(尤其是种:线状透明颤菌))的提取物的应用。
然而,在该文献中考虑的提取物包括所述细菌的发酵培养基的上清液或者在培养所述细菌之后获得的生物质,或者外膜或外膜碎片或者在生物质的补充处理之后获得的其他提取物。因此,仅在出于分离考虑的提取物与该发酵培养基的其他成分的目的而将补充操作(例如,过滤或离心分离)应用到发酵培养基之后,来获得所有的上述提取物。
因此,根据本发明考虑的活性剂完全不同于在文献FR 2 879 452中描述且考虑的提取物。
在欧洲专利申请No.EP 1 400 237中已经描述了包括线状透明颤菌的总提取物的美容和/或皮肤病用组合物。专利申请EP 1 400 237分别描述了线状透明颤菌的多种提取物:(i)例如通过离心分离从生物质分离的细菌细胞,(ii)可含有细菌残骸的非细胞悬浮液的生物质,和(iii)该生物质的上清液部分。
与在FR 2 879 452中描述或者在EP 1 400 237中描述的提取物相反,根据本发明考虑的活性剂包括在发酵培养基中出现的所有组分。因此,根据本发明的用途的令人惊讶的效果来自于发明人首次将其完全发酵培养基中的微生物裂解物用作活性剂的用途。
事实上,如下文的实施例所显现的,发明人已经注意到,根据本发明的活性剂显示出在头皮微生物菌群上的调节活性,该调节活性大于针对相同细菌的生物质类型的提取物所指出的调节活性。具体地,发明人已经观测到,在本发明的治疗之后,加强了微生物菌群的平衡与头皮的屏障性能。
不希望束缚于下文的描述,在效果上的这种增益可以是在细菌的发酵培养基中在其增殖期间所产生的且常规地出现在水性上清液中的细菌的成分(这些成分通常彼此分离,例如,其水溶性代谢物)和其构成其培养基的所有或部分生物质的组分(诸如非水溶性细胞外膜或者细胞外膜碎片、或甚至其分离的裂解物)之间的协同效应的结果。
因此在实施例中已经表明,包括根据本发明的活性剂(在完全发酵培养基中属于透明颤菌属种的细菌的裂解物)的美容组合物具有减少头皮的头皮屑病症的性能,该性能等于或甚至大于已知的诸如吡罗克酮乙醇胺(octopirox)或吡啶硫酮锌(ZnPT)的抗头皮屑活性剂的性能。具体地,在实施例中已经表明,包括本发明的活性剂的美容制剂,以远小于对于在头皮的头皮屑上获得相同的效果所需的常规抗头皮屑活性剂的剂量的剂量抵抗头皮的头皮屑病症是有效的。
还已经表明,根据本发明的活性剂也具有减少由头皮屑病症引起的头皮瘙痒的性能。
与所有的预期相反,另一方面,根据本发明的活性剂表现出:如实施例中所显示的,对于所研究的马拉色氏霉菌属(球形马拉色菌(Malassezia globosa)和限制马拉色菌(Malassezia restricta))的多种株系,没有任何抑制活性。
根据本发明的另一实施方式,本发明涉及一种用于预防和/或治疗头皮的头皮屑病症的美容方法,该头皮屑病症包括与个体的头皮上的病原性微生物的流行和/或头皮生态菌群的不平衡相关的头皮的头皮屑病症,该美容方法包括将有效量的在完全发酵培养基中的透明颤菌属的一种或多种细菌(尤其物种:线状透明颤菌)的至少一种裂解物施用到所述个体的至少一个步骤,尤其是口服。
出于本发明的目的,术语“有效量”是指对于获得所需的效果考虑的化合物的足够的且必要的用量。这样的用量可以通过本领域的技术人员已知的任一方法来确定,例如,通过初步的实验测试。
根据本发明的另一方面,本发明涉及一种冲洗型或者驻留型的美容和/或皮肤病用组合物,该组合物在在生理上可接受的介质中包含在完全发酵培养基中的透明颤菌属的一种微生物或多种微生物(尤其物种:线状透明颤菌)的至少一种裂解物。
完全发酵培养基
如上文所述,表述“完全发酵培养基”旨在表示发酵培养基或培养基,其至少在非水性成分方面具有与根据本发明的其中连续地同时实施致力于形成根据本发明所需的裂解物的微生物的发酵和细胞裂解的发酵培养基相同的组成或甚至与其具有完全相同的组成。
换句话说,此外,该培养基没有经受旨在分离和/或去除所有或部分的其非水性成分的二次操作。
更具体地,根据本发明考虑的活性剂由微生物的裂解物形成,且在用量方面,该活性剂由已经用于所述细菌的发酵且在其中连续进行细菌的细胞裂解的培养基(即完全发酵培养基)的全部或一部分形成。
从上述观点来看,可以看出,根据本发明从裂解物和从“完全”发酵培养基形成的活性剂包含在所述微生物的细胞裂解期间所形成和/或释放的胞浆部分和胞质部分、细胞壁碎片和代谢物;以及,在细胞发酵期间进而在所述细菌的细胞裂解之前已经存在于发酵培养基中的能够由细菌自发地产生和释放的全部生物实体。
因此,根据本发明的活性剂,即,根据本发明的从在完全发酵培养基中透明颤菌属的细菌(尤其物种:线状透明颤菌)的裂解物所形成的活性剂,明显不同于属于透明颤菌属的细菌(尤其物种:线状透明颤菌)的发酵培养基的上清液。
事实上,与上清液相反,根据本发明考虑的活性剂含有由裂解物表征的所述细菌的细胞碎片。
根据本发明的活性剂,即,根据本发明的从在完全发酵培养基中透明颤菌属的细菌(尤其物种:线状透明颤菌)的裂解物所形成的活性剂,也不同于从透明颤菌属的细菌(尤其物种:线状透明颤菌)的发酵培养基分离出的生物质或生物质片段、或者甚至裂解物或裂解物片段。
事实上,与该生物质或生物质片段、或者该裂解物或裂解物片段相反,根据本发明考虑的活性剂含有在所述细菌增殖期间自然释放进入培养基中的大量水溶性代谢物。
出于本发明的目的,表述“非水性成分”是指作为常规发酵培养基的主要成分的水,在根据本发明的完全培养基中不是必须同样(即,等量)保持的成分的部分。
因此,表述“完全培养基”也应该理解成由于以下事实而集中定义的完全培养基的形式:在构成发酵培养基的水的部分蒸发结束时获得,在该培养基中相应的微生物的培养和其细胞裂解连续地进行。当然,在调整的操作条件下进行该蒸发以便不损害形成该完全培养基的非水性成分的完整性。
发酵培养基组成
通过定义,发酵培养基或其他培养基是能够培养且因此合适地生长细胞、细菌和酵母菌的载体。原则上,在该培养基中,细胞发现对于它们大量快速地繁殖必要的成分、以及有时能够促进特定细菌种的生长或特定家族的细菌、在该情况下属于透明颤菌属的细菌(尤其物种:线状透明颤菌)生长的元素。
因此,培养基的组成必须满足考虑的微生物以及该微生物增殖所必需的营养需求。
更具体地,该培养基的组成必须:
-覆盖在矿物离子和生长因子方面的需求,且提供碳源和能源;
-具有接近最佳pH值的pH值;和
-具有最佳的离子强度(培养基可以是等渗的,但这不是必须的)。
因此,适于本发明的发酵培养的组成至少包括:
-通常由糖和有利地葡萄糖表示的碳源和能源,
-钾源和磷源,例如,K2HPO4,
-可以通过化合物(NH4)2SO4表示的氮源和硫源,
-镁源,例如,MgCl2,
-钙源,例如,CaCl2,
-铁源,尤其是柠檬酸铁、柠檬酸盐的作用是使铁保持在溶液中,
-尤其选自Cu、Zn、Co、Ni、B、Ti的盐的痕量元素源,
-水源,通常是无菌的,对于所有形式的生命是必须的,
-可以由KH2PO4表示的pH值缓冲液。
如果这些组分中的一种不存在,因为细菌本身不能补充这一种组分,故细菌不生长。
为了说明根据本发明的适于微生物的生长的发酵培养基,尤其可以提到的是下文实施例1中示出的培养基。
根据本发明有效量的考虑的微生物被引入培养基中,整个混合物被置于适于所述微生物的增殖的条件下。
为了获得在完全发酵培养基中透明颤菌属的细菌的裂解物,根据包括培养所述细菌的步骤的方法,本领域的技术人员尤其可以参考实施例1。
有利地,为了获得根据本发明的活性剂,即,在完全发酵培养基中透明颤菌属的细菌的裂解物,生物质(在培养细菌的培养基中出现的在生长期之后的细菌细胞)被冻结(例如,在-20℃的温度下),然后进行杀菌,优选通过加热、尤其是通过使先前冻结的生物质经受在高于100℃的温度下的加热的步骤。为了说明,通过高压灭菌法可以进行生物质杀菌(例如,在121℃的温度下)。
如上文所呈现的,在所述微生物的该培养结束时,所述微生物在用来培养其的发酵培养基中直接转化成裂解物的形式。
为了获得根据本发明的活性剂的细胞裂解
裂解物通常表示这样的材料:在借助称为细胞裂解的现象破坏或溶解生物细胞后、因此引起所考虑微生物的细胞内自然含有的细胞内的和细胞的生物成分释放所获得的材料。
出于本发明的目的,术语“裂解物”是指所涉及的微生物(即,透明颤菌属的细菌(尤其物种:线状透明颤菌))的裂解获得的全部裂解物。
因此,所用的裂解物由全部的微生物的细胞内生物成分形成,尤其是其代谢物以及在微生物细胞裂解期间产生的细胞壁和细胞膜的成分。
出于本发明的目的,术语“代谢物”表示来源于根据本发明考虑的微生物的代谢产生的任何物质。
可以借助各种技术完成该细胞裂解,例如渗透性冲击、热冲击、超声破碎法或选择性地在离心分离类型的机械应力下。
更具体地,该裂解物可以根据专利US 4,464,362中描述的技术、且尤其是根据以下方案来获得。
已经用来培养所考虑的微生物且因此含有所述微生物的发酵培养基通过超声波进行分解以便在其中释放细胞浆部分和细胞质部分、细胞壁碎片和来自该微生物的代谢作用的产物。所有这些组分随后在“完全”发酵培养基中以稳定的形式以他们的天然分布在其中保存。
因此,借助下列方法可以获得根据本发明考虑的活性剂:
-在适于所述细菌的增殖的条件下,在发酵培养基上培养至少一种透明颤菌属的细菌(尤其物种:线状透明颤菌),和
-在所述发酵培养基中细胞裂解所述细菌。
透明颤菌属的细菌(尤其物种:线状透明颤菌)
如上文指出,以裂解物形式的根据本发明所考虑的微生物是如在伯杰氏系统细菌学手册(Bergey’s Manual of Systematic Bacteriology,第3卷,第22和第23节,第9版,1989年)的分类中所定义的非合成的丝状细菌,且为透明颤菌属的细菌(尤其物种:线状透明颤菌)。
如下文呈现的实施例可以看出,发明人出人意料地发现,在本发明的含义内的在完全发酵培养基中配制的以其裂解物形式使用的这样的细菌在有效性方面比从同样的发酵培养基获得的生物质具有更好的性能。
更具体地,它是属于贝日阿托氏菌属(Beggiatoa)、透明颤菌属(Vitreoscilla)、柔性菌属(Flexithrix)或亮发菌属(Leucothrix)的细菌。
在可以使用的细菌中,例如,可以提到的是线状透明颤菌(ATCC 15551)。
根据本发明的一个优选变型,细菌是线状透明颤菌。
应用
如上文指出,从关于与头皮的头皮屑病症(其与头皮上病原性微生物的流行和/或头皮生态菌群的不平衡相关)有关的一些美容病症的有效性的观点来看,根据本发明考虑的活性剂是特别有利的。
根据本发明的活性剂有利地用于治疗和/或预防头皮屑病症和有关头皮病症的目的。
因此,出现过度干燥或皮脂的过度分泌的头皮可以显现头皮屑病症,根据情况,其可以通过干燥的或油性的头皮屑片、或甚至表皮的瘙痒和/或发炎的出现来表征。
干燥的头皮屑病症反映出头皮的干燥,其可以与头皮的角质层的过快更新相结合。
干燥的头皮屑片通常是小的且白色的或灰色的,且散布在头皮和衣服上,这引起不雅的视觉效果。
关于油性头皮屑病症,它们本身以脂溢性皮炎的一种亚病变形式呈现。
在头皮的头皮屑病症期间,皮肤屏障是不平衡的,其完整性和保湿性被破坏且其生态菌群被扰乱。头皮的皮肤受刺激且似痒疹、变脆、较不湿润且对感染敏感。
如下文的实施例可以看出,本发明有利地可以得到一种新的活性剂,其对于头皮屑病症是特别有效的。
有利地,根据本发明的活性剂能够减少发生副反应的风险。
根据本发明考虑的活性剂还有利地可以以完美的稳态恢复健康的头皮,且重建平衡的生态菌群。
因此,根据本发明的美容用途、美容方法和组合物对于以下方面证实是特别有效的:
-用于改善头皮的卫生和/或护理,且特别是,
-用于预防和/或治疗头皮的头皮屑病症,而不管这些病症是干燥的还是油性的,
-用于预防和/或治疗与皮脂的过度排泄和/或分泌关联的头皮的失调、尤其是审美障碍,
-用于给予头皮健康的感觉,
-用于改善头皮的舒适度,
-用于改善和/或重建头皮的内源性抗菌防御,
-用于维持和/或加强头皮的屏障功能的完整性,
-用于重建平衡的头皮的生态菌群,和/或,
-用于预防和/或治疗与头皮的头皮屑病症关联的脂溢性来源的瘙痒。
通常,本发明旨在一种组合物,该组合物包括单一的抗头皮屑活性剂、在完全发酵培养基中的透明颤菌属的一种细菌或多种细菌的裂解物。
然而,本发明还旨在一种组合物,除了在完全发酵培养基中根据本发明的裂解物之外,还包括,至少一种不同的另外的抗头皮屑活性剂和/或至少一种另外的美容活性剂。
另外的美容活性剂
除了施用可选地以与抗头皮屑活性剂组合的形式的根据本发明的活性剂以外,根据本发明的方法还可以包括,施用至少一种第三美容活性剂。
有利地,这样的另外的美容活性剂可以用于对头皮施加美容、护理或卫生的效果,或甚至用于加强头皮的皮肤屏障。
这样的另外的美容活性剂可以特别涉及益生菌微生物和/或其片段和/或其代谢物,该益生菌不同于在根据本发明的活性剂中考虑的所述细菌和/或不同于该微生物的完全培养物。
益生菌微生物
出于本发明的目的,术语“益生菌微生物”表示活的微生物,当以合适的量被消耗时,其对其宿主的健康具有正面效应(粮农组织/世卫组织联合专家对包括具有活性乳酸菌的奶粉的食品中的益生菌的健康和营养性能的评估的咨询,2001年,10月6日),以及其尤其可改善肠道的微生物平衡。
根据一个实施方式,在本发明中适合使用的益生菌微生物可选自乳酸杆菌属(Lactobacillus)细菌、双歧杆菌属(Bifidobacterium)细菌、球菌、酵母菌、形成孢子的细菌和它们的混合物。
根据一个实施方式,适于本发明中的微生物优选地选自:
-乳酸菌:通过糖的发酵,该乳酸菌可以产生乳酸。根据它们的形态,可以分为两类:
乳杆菌物种:嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)、嗜淀粉乳杆菌(Lactobacillus amylovorus)、干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)、鼠李糖乳酸杆菌(Lactobacillus rhamnosus)、短乳杆菌(Lactobacillus brevis)、卷曲乳杆菌(Lactobacillus crispatus)、德氏乳杆菌保加利亚亚种(Lactobacillus delbrueckiisubsp.bulgaricus)、德氏乳杆菌乳酸亚种(Lactobacillus delbrueckii subsp.lactis)、发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentum)、瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus)、鸡乳杆菌(Lactobacillus gallinarum)、格氏乳杆菌(Lactobacillus gasseri)、约氏乳杆菌(Lactobacillus johnsonii)、植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)、罗伊氏乳杆菌(Lactobacillus reuteri)、唾液乳杆菌(Lactobacillus salivarius)、消化乳杆菌(Lactobacillus alimentarius)、弯曲乳杆菌(Lactobacillus curvatus)、干酪乳杆菌干酪亚种(Lactobacillus casei subsp.casei)、清酒乳杆菌(Lactobacillus sake),和
球菌(Cocci):粪肠球菌(Enterococcus faecalis)、屎肠球菌(Enterococcusfaecium)、乳酸乳球菌乳酸亚种(Lactococcus lactis subsp lactis)或乳酸乳球菌乳脂亚种(Lactococcus lactis subsp cremoris)、肠膜明串珠菌右旋葡聚糖亚种(Leuconostoc mesenteroides subsp dextranicum)、乳酸片球菌(Pediococcusacidilactici)、菊糖芽孢乳杆菌(Sporolactobacillus inulinus)、唾液链球菌嗜热亚种(Streptococcus salivarius subsp.thermophilus)、嗜热链球菌(Streptococcusthermophilus)、肉葡萄球菌(Staphylococcus carnosus)、木糖葡萄球菌(Staphylococcusxylosus),
-双歧杆菌或双歧杆菌属(Bifidobacterium)物种:青春双岐杆菌(Bifidobacterium adolescentis)、动物双歧杆菌(Bifidobacterium animalis)、两歧双歧杆菌(Bifidobacterium bifidum)、短双歧杆菌(Bifidobacterium breve)、乳双歧杆菌(Bifidobacterium lactis)、长双歧杆菌(Bifidobacterium longum)、婴儿双歧杆菌(Bifidobacterium infantis)、假链状双歧杆菌(Bifidobacterium pseudocatenulatum),
-酵母菌:酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)或布拉氏酵母菌(Saccharomyces boulardii),
-其他产生孢子的细菌:蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus var toyo)或枯草芽孢杆菌(Bacillus cereus var subtilis)、凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)、地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)、大肠埃希杆菌(Escherichia coli nissle)菌株、费氏丙酸杆菌(Propionibacterium freudenreichii);和
-和它们的混合物。
适合本发明的微生物尤其可以选自子囊菌纲(ascomycetes):例如,酵母菌属(Saccharomyces)、亚罗酵母属(Yarrowia)、克鲁维酵母菌属(Kluyveromyces)、有孢圆酵母属(Torulaspora)、粟酒裂殖酵母(Schizosaccharomyces pombe)、德巴利氏酵母属(Debaromyces)、假丝酵母属(Candida)、毕赤酵母属(Pichia)、曲霉菌属(Aspergillus)和青霉属(Penicillium);双歧杆菌属(Bifidobacterium)、拟杆菌属(Bacteroides)、梭形杆菌属(Fusobacterium)、蜜蜂球菌属(Melissococcus)、丙酸菌属(Propionibacterium)、肠球菌属(Enterococcus)、乳球菌属(Lactococcus)、葡萄球菌属(Staphylococcus)、消化链球菌属(Peptostrepococcus)、芽孢杆菌属(Bacillus)、片球菌属(Pediococcus)、微球菌属(Micrococcus)、明串珠菌属(Leuconostoc)、魏斯氏菌属(Weissella)、气球菌属(Aerococcus)、酒球菌属(Oenococcus)、和乳杆菌属(Lactobacillus)的细菌;和其混合物。
作为在本发明中适合使用的益生菌微生物的示例,可以提到的有青春双岐杆菌、动物双歧杆菌、两歧双歧杆菌、短双歧杆菌、乳双歧杆菌、长双歧杆菌、婴儿双歧杆菌、假链状双歧杆菌、嗜酸乳杆菌NCFB 1748、嗜淀粉乳杆菌、干酪乳杆菌代田株(Shirota)、鼠李糖乳杆菌GG株系、短乳杆菌、卷曲乳杆菌、保加利亚乳杆菌、德氏乳杆菌乳酸亚种、发酵乳杆菌、瑞士乳杆菌、鸡乳杆菌、格氏乳杆菌、约氏乳杆菌CNCM I-1225、植物乳杆菌、罗伊氏乳杆菌、唾液乳杆菌、消化乳杆菌、弯曲乳杆菌、干酪乳杆菌干酪亚种、清酒乳杆菌、粪肠球菌、屎肠球菌、乳酸乳球菌乳酸亚种、乳酸乳球菌乳脂亚种、肠膜明串珠菌右旋葡聚糖亚种、乳酸片球菌、菊糖芽孢乳杆菌、唾液链球菌嗜热亚种、嗜热链球菌、肉葡萄球菌、木糖葡萄球菌、啤酒酵母、布拉氏酵母菌、蜡样芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、大肠埃希杆菌菌株、和费氏丙酸菌;和它们的混合物。
更具体地,所述益生菌微生物可以选自乳杆菌属、芽孢乳杆菌属(Sporolactobacillus)、肠球菌属、乳酸球菌属、芽孢杆菌属、链球菌属(Streptococcus)、片球菌属(Pediococcus)、明串珠菌属和双歧杆菌属,尤其选自乳杆菌属和双歧杆菌属、和其混合物。
为了说明这些益生菌微生物,尤其可以提到约氏乳酸杆菌、罗伊氏乳杆菌、鼠李糖乳酸杆菌、副干酪乳杆菌、干酪乳杆菌、两歧双歧杆菌、短双歧杆菌、长双歧杆菌、动物双歧杆菌、乳双歧杆菌、婴儿双歧杆菌、青春双岐杆菌、和假链状双歧杆菌、以及它们的混合物。
在本发明中特别适合使用的物种为约氏乳酸杆菌、副干酪乳杆菌、青春双岐杆菌和长双歧杆菌,其根据布达佩斯条约,分别于1992年6月30日、1999年1月12日、1999年4月15日和1999年4月15日在巴斯德研究所(28rue du Docteur Roux,F-75024Paris cedex 15)按名称CNCM I-1225、CNCM I-2116、CNCM I-2168和CNCM I-2170被保藏;以及乳酸双歧杆菌(Bb 12)(ATCC27536)或长双歧杆菌(BB536)。乳酸双歧杆菌(ATCC27536)的菌株可以从Hansen(Chr.Hansen A/S,10-12Boege Alle,P.O.Box 407,DK-2970,郝斯霍尔姆,丹麦)获得。
有利地,作为辅助的活性剂,适于本发明的微生物可以为乳酸益生菌微生物。
根据一个优选的实施方式,适于本发明的益生菌微生物尤其可以为乳酸杆菌属的微生物。
优选地,适于本发明的乳酸杆菌属的微生物可以选自约氏乳杆菌、罗伊氏乳杆菌、副干酪乳杆菌、干酪乳杆菌和它们的混合物。
根据一个优选的实施方式,适于本发明的微生物可以为副干酪乳杆菌。
适于本发明的微生物可尤其为根据布达佩斯条约于1999年1月12日在巴斯德研究所(28rue du Docteur Roux,F-75024Paris cedex 15)以名称CNCM I-2116保藏的副干酪乳杆菌菌株ST11、和/或其片段(fraction)和/或其代谢物。
根据另一个优选的实施方式,适于本发明的微生物尤其可以是双歧杆菌属的微生物,尤其是长双歧杆菌、尤其是长双歧杆菌(BB536)。
相对于含有该微生物的组合物的总重量,该微生物按重量计可以至少0.0001%(以干重表示),尤其从0.0001%到20%、更尤其从0.001%到15%、尤其从0.01%到10%、以及尤其从0.1%到2%的比例配制在该组合物中。
剂型配制
含有根据本发明的活性剂的组合物可以口服给药或局部给药。
以所述组合物的干提取物的总重量计,根据本发明的组合物有利地包括用量为0.001%至10%(重量)的在完全发酵培养基中透明颤菌属的一种或多种细菌的裂解物。在某些实施方式中,以所述组合物的干提取物的总重量计,根据本发明的组合物有利地包括用量为0.01%至5%(重量)的在完全发酵培养基中透明颤菌属的一种或多种细菌的裂解物。在其他实施方式中,以所述组合物的干提取物的总重量计,根据本发明的组合物有利地包括用量为0.1%至1%(重量)的在完全发酵培养基中透明颤菌属的一种或多种细菌的裂解物。
因此,根据本发明的组合物可以是可正常用于所选定的给药模式的任一种剂型(galenical form)。
根据考虑的组合物的类型,载体可以具有多种性质。
更具体地,关于用于外部局部应用的组合物,它们可以为:水溶液;含水的乙醇溶液或油性溶液;洗液或精华液类型的溶液或分散体;通过使油相分散在水相中(O/W)或使水相分散在油相中(W/O)而获得的乳剂类型的液体稠度或半液体稠度的乳液;乳膏类型的的柔软的、半固态稠度或固态稠度的悬浮液或乳液;水性凝胶(gel)或无水凝胶;微乳液;微胶囊;微粒;离子类型或非离子类型的泡状分散体。
根据常用的方法制备这些组合物。
这些组合物可尤其构成有清洁霜、防护霜、药用霜或护理霜、头皮护理洗液、凝胶或摩丝、例如,头皮清洁洗液或杀菌洗液。
它们还可以以溶液、面霜、凝胶、乳液或摩丝的形式或者可选地以也含有受压推进剂的气溶胶组合物的形式用于头皮。
根据本发明用于局部应用的组合物可有利地以适合头发护理的剂型进行配制,尤其是发液、洗发剂的形式,尤其是抗头皮屑洗发剂、护发素、清理剂、洗发膏或凝胶、造型凝胶、固发液、治疗液、可选地以着色洗发剂形式的染料组合物(尤其是用于氧化染色)、头发重构洗液、永久卷发组合物、用于防止头发减少的洗液或凝胶、抗寄生虫洗发剂、药用洗发剂、尤其是抗脂溢洗发剂,或头皮护理产品,尤其是抗刺激、抗衰老或重构的或者活化血液循环的头皮护理产品。
当本发明的组合物为乳液时,相对于组合物的总重量,脂肪相的比例按重量计可以从5%到80%,优选地从10%到50%。在乳液形式的组合物中使用的油类、乳化剂和共乳化剂选自在化妆品和/或皮肤病学上常规使用的那些油类、乳化剂和共乳化剂。相对于组合物的总重量,乳化剂和共乳化剂在组合物中存在的比例按重量计可以从0.3%到30%,优选地从0.5%到20%。
当本发明的组合物为油性溶液或油性凝胶时,脂肪相可占组合物的总重的大于90%。
以已知的方式,旨在局部给药的剂型还可以含有常见于化妆领域、医药领域和/或皮肤病学领域中的佐剂,例如亲水或亲油的胶凝剂、亲水或亲油的活性剂、防腐剂、抗氧化剂、溶剂、芳香剂、填充剂、遮蔽剂、吸味剂和着色剂。这些各种佐剂的量为在考虑的领域中传统上使用的量,例如为组合物的总重的0.01%到20%。根据它们的特性,这些佐剂可以被引入脂肪相和/或水相中。
作为可以在本发明中使用的脂肪物质,可以提到的有:矿物油,例如氢化聚异丁烯和液态凡士林;植物油,例如乳果木(shea butter)的液体馏分、葵花油和杏仁油;动物油,例如角鲨烷;合成油,尤其是鸭子尾脂腺油(purcellin oil)、十四酸异丙酯和棕榈酸乙基己酯;不饱和脂肪酸;和氟代油,例如全氟聚醚。还可以使用脂肪醇、脂肪酸(例如硬脂酸)和例如尤其为石蜡、巴西棕榈蜡和蜂蜡的蜡。还可以使用硅酮化合物,例如硅酮油(例如环甲硅脂和二甲聚硅氧烷)和硅酮蜡、硅酮树脂和硅酮树胶。
关于可以在本发明中使用的乳化剂,可以提到的示例包括硬脂酸甘油酯、聚山梨醇酯60、由德国汉高(Henkel)公司以名称Sinnowax 销售的鲸蜡硬脂醇/用33mol的氧化乙烯氧乙烯化的鲸蜡硬脂醇的混合物、由公司Gattefossé以名称63销售的PEG-6/PEG-32/硬脂酸乙二醇酯的混合物、PPG-3肉豆蔻基醚、例如为鲸蜡基二甲基硅氧烷共聚醇的硅酮乳化剂、和山梨醇酐单硬脂酸酯或山梨醇酐三硬脂酸酯、PEG-40硬脂酸酯和氧乙烯化的(20OE)山梨醇酐单硬脂酸酯。
关于可以在本发明中使用的溶剂,可以提到的有低级醇,尤其是乙醇、异丙醇和丙二醇。
本发明的组合物还可以有利地含有泉水和/或矿泉水,尤其选自Vittel水、Vichybasin的水和Roche Posay水。
可以提到的亲水胶凝剂包括:羧酸聚合物,例如卡波姆胶;丙烯酸共聚物,例如丙烯酸酯/烷基丙烯酸酯共聚物、聚丙烯酰胺且尤其是SEPPIC公司以Sepigel商标销售的聚丙烯酰胺、C13-14的异链烷烃和月桂醇聚醚-7(Laureth-7)的混合物;多聚糖,例如纤维素的衍生物,比如羟烷基纤维素且尤其是羟丙基纤维素与羟乙基纤维素;天然树胶,例如瓜尔豆胶、刺槐豆胶和黄原胶;和粘土。
可以提到的亲脂胶凝剂包括:改性粘土,例如膨润土;脂肪酸的金属盐,例如硬脂酸铝;疏水性二氧化硅;或可替选地乙基纤维素和聚乙烯。
美容治疗方法
如上文指出,通过将在完全发酵培养基中的透明颤菌属(尤其物种:线状透明颤菌)的细菌的至少一种裂解物作为用于预防和/或治疗头皮的头皮屑病症的活性剂应用至头皮、并且更具体地将如上文限定的美容组合物应用至头皮,可以局部实施根据本发明的方法,所述头皮屑病症尤其是与头皮上的病原微生物的增殖和/或头皮生态菌群的不平衡相关的头皮屑病症。
有利地,本发明的方法借助局部应用可以包括应用根据本发明的组合物,例如以以下形式应用:清洁霜、头皮治疗或护理洗液或凝胶、头皮护理凝胶或摩丝,例如,清洁或杀菌洗液,或洗发剂。根据一个实施方式变型,本发明的方法可以包括,例如,以洗发剂、凝胶、精华液或洗液的形式将根据本发明的至少一种活性剂局部施用到头皮。
例如,根据本发明的局部美容方法可每日进行,例如以每天施用一次或每天施用两次(例如早上一次和晚上一次)的速率。
根据本发明的局部美容方法可以在一周到数周、或甚至数月的时间段中进行,而且,该时间段在未治疗的时间段之后可以重复持续数月或甚至数年。
例如,根据本发明的益生菌微生物的局部施用可反复进行,例如一周两次到三次或更多,且通常在至少4周、或甚至4周到15周的长时间段中,在适当地情况下,停用一个时间段或多个时间段。
在该描述和下文的实施例中,除非另外说明,否则百分比为重量百分比以及以“在…和…之间”的形式表述的值的范围包括所述下限和上限。
具体实施方式
以下实施例作为本发明的范围的非限制性说明示出。
实施例
实施例1
根据本发明的活性剂的制备
通过在其完全培养基中培养线状透明颤菌菌株来制备完全发酵培养基。
用于获得完全发酵培养基的初始培养基具有下表1中描述的组成。
表1
为了获得根据本发明的美容活性剂,即,在该实施例中的在完全发酵培养基中的线状透明颤菌的裂解物,进行如下文所述的方法。
从ATCC获取线状透明颤菌菌株(菌株15551)。该菌株在特定的培养基2BHG2中培养,该培养基的组成是上文给出的组成。
通过在具有3000升的工作容量的生物反应器中连续的培养,获得生物质。在连续生产阶段期间记录μmax(μ=0.12H-1)的约70%的生长率。在该步骤期间,控制pH值(7.00)、温度(26℃)和所溶解的氧气(0.5%)。通过离心分离(10 000g/20分钟)实现细胞的提取和分离。生物质在-20℃下冷冻,随后被包装到小袋内(破坏不育性)且通过在121℃下杀菌30分钟被稳定化。生物质随后被称为Vfe。
生物质具体分析如下:
-在105℃下固定的残余物(g/100g):4.0%至4.5%
-相对于AM的总含氮量:10.0%至14.0%
-微生物学:0微生物/g
-3-羟基丁酸含量:2g/l至10g/l(<10g/l)
-溶液的pH值如:4至5。
发酵培养基是在连续发酵期间获得的完全培养基。与开始时提供的蛋白胨和酵母提取物的各种成分一样,在初始培养基中的葡萄糖通过微生物消耗(通过碳源微控制)。当前测试的发酵培养基直接从发酵罐中去除,随后进行杀菌方案。
同裂解物一样(DM的4.0%至4.5%),FM(是未浓缩的完全培养基(DM的0.7%至0.9%))被高压灭菌(30分钟,121℃)。
在随后的实施例中,根据本发明的活性剂(在完全发酵培养基中的线状透明颤菌细菌的裂解物,也称为"FM")以及由在没有完全发酵培养基情况下的分离的细菌裂解物构成的比较活性剂首先是临床测试的主题,以便与参照抗头皮屑洗发剂制剂相比验证它们的抗头皮屑活性。尤其测试了两个参照抗头皮屑洗发剂制剂,分别是包括吡罗克酮乙醇胺的第一参照抗头皮屑洗发剂制剂和包括ZnPT的第二参照抗头皮屑洗发剂制剂。
实施例2
在实施例2中,比较了(i)包括根据本发明的抗头皮屑活性剂(根据实施例1所制备的在完全发酵培养基中的线状透明颤菌细菌的裂解物)的洗发剂制剂和(ii)不含根据本发明的抗头皮屑活性剂且包括常规的抗头皮屑活性剂(ZnPT)的参照抗头皮屑洗发剂制剂对头皮的头皮屑病症的效果。
因此,如实施例1中获得的在完全发酵培养基中的细菌的裂解物(根据本发明的抗头皮屑活性剂)被用作在洗发剂制剂中的抗头皮屑活性剂,该洗发剂制剂的基本组成如下表2所述。
进行了多个临床研究,
临床研究1,对应于图1,
临床研究2,对应于图2,
临床研究3,对应于图3至图11。
表2
相对于组合物的总重计,在临床研究3中所用的表2的洗发剂制剂包括重量百分比为2%的根据本发明的抗头皮屑活性剂(在完全发酵培养基中的细菌的裂解物,浓度为160g/l),即,相对于所述组合物的干提取物的总重量,重量百分比为0.32%的所述抗头皮屑活性剂。
以同样的方式,在临床研究3中所用的洗发剂制剂包括重量百分比为1%的根据本发明的抗头皮屑活性剂(在完全发酵培养基中的细菌的裂解物,浓度为160g/l浓度),即,相对于所述组合物的干提取物的总重量,重量百分比为0.16%的所述抗头皮屑活性剂。
以同样的方式,在临床研究1中所用的洗发剂制剂包括重量百分比为2.5%和5%的细菌裂解物活性剂(不含完全发酵培养基的细菌的裂解物),即,相对于所述组合物的干提取物的总重量,重量百分比分别为0.1075%和0.215%的所述活性剂。
以同样的方式,在临床研究2中所用的洗发剂制剂包括重量百分比为20%的根据本发明的抗头皮屑活性剂(在完全发酵培养基中的细菌的裂解物,浓度为7.5g/l),即,相对于所述组合物的干提取物的总重量,重量百分比为0.14%的所述抗头皮屑活性剂。
应该指出,基于干提取物,在其完全发酵培养基中以重量百分比表示的裂解物的用量范围从0.1%至0.5%。
为了比较,测试了在下表3中描述的参照洗发剂制剂,相对于组合物的总重量,其包括重量百分比为2%的吡啶硫酮锌(ZnPT)抗头皮屑活性剂,即,相对于所述组合物的干提取物的总重量,包括重量百分比为1%的吡啶硫酮锌干提取物
表3
方案
治疗在于局部应用所测试的制剂持续4周。
临床研究1:
进行该研究以便比较(i)以重量百分比2.5%(对应于0.1075%的干提取物)使用的不含完全发酵培养基但包含分离的细菌裂解物的洗发剂;(ii)以重量百分比5%(对应于0.215%的干提取物)使用的不含完全发酵培养基但包含分离的细菌裂解物的洗发剂;和(iii)参照抗头皮屑洗发剂制剂。
对60个年龄在18岁至60岁之间的成年男性对象进行研究,随后对他们的头皮屑病症的临床评估进行鉴别,分为适度至严重,在头的至少二分之一出现附着鳞片时以及出现头皮红斑时,分数为大于或等于5(分数从0到9)。
60个对象被分成3个并列的20个对象的组,两个组分别用两种组合物中的仅一种组合物治疗以及一个对照组。
临床研究2:
进行该研究以便比较(i)包含重量百分比20%(对应于0.14%的干提取物)的本发明的活性剂的洗发剂,和(ii)参照洗发剂制剂。本发明的活性剂以7.5g/l的形式存在。
对42个年龄在18岁至60岁之间的成年男性对象进行该研究,随后对他们的头皮屑病症的临床评估进行鉴别,分为适度至严重,在头的至少二分之一出现附着鳞片时以及出现头皮红斑时,分数为大于或等于5(级别从0至9)。
42个对象被分成2个并列的21个对象的组,其中,一个组用具有本发明的活性剂的组合物治疗、以及对照组利用参照抗头皮屑活性剂。
临床研究3:
进行该研究以便比较(i)包含基于干提取物的重量百分比0.16%的本发明的活性剂的洗发剂;(ii)包含基于干提取物的重量百分比0.32%的本发明的活性剂的洗发剂;和(iii)包括基于干提取物的重量百分比1%的吡啶硫酮锌的参照洗发剂制剂。本发明的活性剂以160g/l的形式存在。
对67个年龄在18岁至60岁之间的成年男性对象进行研究,随后对他们的头皮屑病症的临床评估进行鉴别,分为适度至严重,在头的至少二分之一出现附着鳞片时以及出现头皮红斑时,分数为大于或等于5(级别从0至9)。
67个对象被分成3个并列的22个对象的组,两个组分别用两种组合物中的仅一种组合物治疗、以及一个对照组。
头皮的头皮屑病症的临床评估(分数)
通过进行关于下列参数(游离头皮屑片、附着鳞片和红斑)的临床评估,通过在D2(第二天)、D7、D15、D21和D28比较这些组来测试和评价对头皮屑的效果,且计算总分数。
根据本领域中常用的技术,通过合格的皮肤科专家进行这些评估。
在每次视察中,调查者使用0至9的级别针对每个个体对头皮屑状态、游离头屑片和附着鳞片评分,0分是指没有头皮屑的状态,9分是指非常严重的头皮屑状态。
通过在(i)在治疗开始前的分数值和(ii)每次测试时的分数值之间的差异表示结果。
对象的头皮的头皮屑状态的自我评估
通过对象本身进行的临床自我评估,在D2、D7、D15、D21和D28比较这些组,测试和评价对头皮屑的效果。这些自我评估表示“对象的观点”。
通过对象本身给出的头皮屑分数的值表示结果。
头皮瘙痒的临床评估
通过根据常规方案进行的临床评估,在D2、D7、D15、D21和D28比较这些组,来测试和评价对头皮瘙痒的效果。
根据本领域中常用的技术通过合格的皮肤科专家进行这些评估。
在每次视察中,调查者使用0至9的级别对头皮瘙痒评分,0分是指没有头皮瘙痒,9分是指存在非常严重的头皮瘙痒。
通过在(i)在治疗开始前的分数值和(ii)每次测试时的分数值之间的差异表示结果。
结果
图1至图4示出得到的结果。
图1示出(i)以重量百分比2.5%(对应于0.1075%的干提取物)使用的不含完全发酵培养基但包含分离的细菌裂解物的洗发剂、(ii)以重量百分比5%(对应于0.215%的干提取物)使用的不含完全发酵培养基但包含分离的细菌裂解物的洗发剂、和(iii)参照抗头皮屑洗发剂制剂对头皮屑的效果的比较结果。
从图1的结果的比较看出,基于干提取物以0.1075%和0.215%使用的包括分离的细菌裂解物的两种洗发剂制剂分别给出的总评分明显低于参照洗发剂制剂获得的总评分。因此,图1的结果表明,与参照洗发剂制剂相比,不含发酵培养基但含有分离的细菌裂解物的洗发剂制剂产生非常小的且甚至基本上为零的抗头皮屑效果。
图2示出(i)包含重量百分比20%(对应于干提取物的0.14%)的本发明的活性剂的洗发剂和(ii)参照洗发剂制剂对头皮屑的效果的比较结果。
图2的结果表明,根据本发明的洗发剂制剂显示出与参照制剂相当的抗头皮屑活性,在等效的干提取物的0.14%下,就是这种情况,即,在该活性剂浓度下,采用不含完全发酵培养基但含有分离的细菌裂解物的比较洗发剂制剂观察到弱的效果或没有效果(见图1的结果)。
图3示出(i)包含基于干提取物的重量百分比0.16%的本发明的活性剂的洗发剂;(ii)包含基于干提取物的重量百分比0.32%的本发明的活性剂的洗发剂;和(iii)包括基于干提取物的重量百分比1%的吡啶硫酮锌的参照洗发剂制剂的对头皮屑的效果的比较结果。
图3的结果表明,包含基于干提取物的重量百分比0.16%的本发明的活性剂的洗发剂制剂产生抗头皮屑效果,其相当于包括重量百分比为1%的常规活性剂的参照洗发剂制剂的抗头皮屑效果(还参见实施例6的统计研究)。
图4示出(i)包含基于干提取物的重量百分比0.16%的本发明的活性剂的洗发剂;(ii)包含基于干提取物的重量百分比0.32%的本发明的活性剂的洗发剂;和(iii)包括重量百分比1%的吡啶硫酮锌的参照洗发剂制剂的对头皮瘙痒的效果的比较结果。
图4的结果表明,包含基于干提取物的重量百分比0.16%和0.32%的本发明的活性剂的洗发剂制剂产生抗头皮瘙痒的效果,其相当于包括重量百分比为1%的常规活性剂的参照洗发剂制剂的抗头皮瘙痒的效果。
实施例3
用于表明没有抗真菌效果的负的MIC数据
使测试产品接触马拉色氏霉菌悬浮液。该混合物沉积在琼脂培养基的表面。铺展开该混合物且在培养之前回收过量的混合物。在30℃下培养持续至少5天。
产物被置于液态改性Leeming和Notman培养基(LNm)中,且重复进行测试。基于干物质,完全培养物为7.5g/l或150g/l(浓缩形式)。
在10%(对于在7.5g/l下的浓度)和1%(对于在150g/l时下浓度)下测试完全培养物。
阳性参照是1%的吡啶硫酮锌。
产物的溶液被浓缩两次以便考虑在与马拉色氏霉菌悬浮液接触期间稀释到1/2。
表4
在琼脂斜面上收集球形马拉色氏菌和限制马拉色氏菌菌株且在30℃下继代培养,并培育到测试为止。
在15ml的缓冲溶液中制备悬浮液(ref AEB611294,AES)。
在550nm下获得悬浮液的密度。
通过不存在所测试的马拉色氏菌菌株生长的情况下,评估参照产品的抗真菌效果。相对于生长对照评估该抑制。
与对于菌株的生长对照相比,借助在琼脂的表面处培养物的密度的评价,从3至0对该抑制作用评分。
表5
分数 | 解释 |
3 | 没有生长 |
2 | 生长<在对照盘中 |
1 | 生长<在对照盘中 |
0 | 与对照盘相当的生长 |
表6
产物对限制马拉色氏菌或球形马拉色氏菌没有显示出任何抗真菌抑制作用。
实施例4
对头皮屑病症的效果:关于总头皮屑分数的观点和对象关于头皮屑的观点
在该实施例中,与参照洗发剂制剂(包括吡啶硫酮锌活性剂)比较,评估根据本发明的洗发剂制剂的抗头皮屑效果。
在完全发酵培养基中的线状透明颤菌的裂解物以蒸发浓缩的形式被使用,基于干提取物以0.16%和0.32%的干提取物的裂解物浓度使用。
头皮的头皮屑病症的临床评估(分数)
通过进行关于下列参数(游离头皮屑片、附着鳞片和红斑)的临床评估,通过在D0、D7、D15、D21和D28比较这些组来测试和评价对头皮屑的效果,且计算总分数。
根据本领域中常用的技术通过合格的皮肤科专家进行这些评估。
在每次视察中,调查者使用0至9的级别针对每个个体对头皮屑状态、游离头皮屑片和附着鳞片评分,0分是指没有头皮屑的状态,9分是指非常严重的头皮屑状态。
各个组的对象还被要求进行自我评估。这些自我评估被称为“对象的观点”。
在图5至图9给出了结果。
在图5、图6、图8和图9中,在每次测量中以分数的绝对值表示结果。
在图7中,通过在(i)在治疗开始前的分数值和(ii)每次测试时的分数值之间的差值表示结果。
图5示出,使用根据本发明的洗发剂制剂获得的比较的总分数结果,该洗发剂制剂包括以相对于制剂的干提取物的总重量计的重量百分比为0.16%的活性剂(在完全发酵培养基中的细菌裂解物)。参照比较制剂包括以相对于干提取物的总重量计的重量百分比为1%的ZnPT活性剂。
图6示出,使用根据本发明的洗发剂制剂获得的比较的总分数结果,该洗发剂制剂包括以相对于制剂的干提取物的总重量计的重量百分比为0.32%的活性剂(在完全发酵培养基中的细菌裂解物)。参照比较制剂包括以相对于干提取物的总重量计的重量百分比为1%的ZnPT活性剂。
图8示出,使用根据本发明的洗发剂制剂获得的所治疗的患者的观点的比较结果,该洗发剂制剂包括以相对于制剂的干提取物的总重量计重量百分比为0.16%的活性剂(在完全发酵培养基中的细菌裂解物)。参照比较制剂包括以干提取物的总重量计的重量百分比为1%的ZnPT活性剂。
图9示出,使用根据本发明的洗发剂制剂获得的所治疗的患者的观点的比较结果,该洗发剂制剂包括以相对于制剂的干提取物的总重量计重量百分比为0.32%的活性剂(在完全发酵培养基中的细菌裂解物)。参照比较制剂包括以相对于干提取物的总重量计的重量百分比为1%的ZnPT活性剂。
图7示出,使用(i)包括以相对于制剂的干提取物的总重量计重量百分比为0.16%的活性剂(在完全发酵培养基中的细菌裂解物)的根据本发明的洗发剂制剂和(ii)包括以相对于制剂的干提取物的总重量计重量百分比为0.32%的活性剂(在完全发酵培养基中的细菌裂解物)的根据本发明的洗发剂制剂而获得的总分数的差值的比较结果。参照比较制剂包括以相对于干提取物的总重量计的重量百分比为1%的ZnPT活性剂。
实施例6的所有结果表明,包括0.16%的抗头皮屑活性剂的根据本发明的洗发剂制剂的活性至少等于或甚至略微大于包括1%常规抗头皮屑活性剂的参照洗发剂制剂。
实施例6的所有结果表明,包括0.32%的抗头皮屑活性剂的根据本发明的洗发剂制剂的活性至少等于或甚至略微大于包括1%常规抗头皮屑活性剂的参照洗发剂制剂。
统计分析:
0.32%干提取物下的完全培养物从不明显不同于在1%干提取物下的ZnPT。
一旦调整到考虑测试的多样性(3个比较),在0.16%干提取物下的完全培养物从不明显不同于在1%干提取物下的ZnPT。
在0.32%干提取物和0.16%干提取物下的两个完全培养物制剂没有明显不同。
实施例5
对头皮屑病症的效果:对象关于瘙痒的观点
在该实施例中,与参照洗发剂制剂(包括吡啶硫酮锌活性剂)比较,评估根据本发明的洗发剂制剂的抗头皮屑效果。
在完全发酵培养基中的线状透明颤菌细菌的裂解物以蒸发浓缩的形式被使用,基于干提取物以0.16%和0.32%的干提取物的裂解物浓度使用。
根据常规方案进行的临床评估,通过在D2、D7、D15、D21和D28比较这些组,测试和评估对头皮瘙痒的效果。
根据本领域中常用的技术通过合格的皮肤科专家进行这些评估。
在图10和图11中给出了结果。
图10示出,使用根据本发明的洗发剂制剂获得的对头皮瘙痒的效果(对象的观点)的比较结果,该洗发剂制剂包括以相对于制剂的干提取物的总重量计的重量百分比为0.32%的活性剂(在完全发酵培养基中的细菌裂解物)。参照比较制剂包括以相对于干提取物的总重量计的重量百分比为1%的ZnPT活性剂。
图11示出,使用根据本发明的洗发剂制剂获得的对头皮瘙痒的效果(对象的观点)的比较结果,该洗发剂制剂包括以相对于制剂的干提取物的总重量计的重量百分比为0.16%的活性剂(在完全发酵培养基中的细菌裂解物)。参照比较制剂包括以相对于干提取物的总重量计的重量百分比为1%的ZnPT活性剂。
Claims (6)
1.属于线状透明颤菌物种的细菌的裂解物以及完全发酵培养基作为活性剂在制备用于预防和/或治疗与头皮的头皮屑病症有关的一些美容病症的组合物中的用途,
其中,所述裂解物和所述完全发酵培养基的混合物含有在所述细菌的细胞裂解期间形成和/或释放的细胞质部分、细胞壁碎片和代谢物以及在所述细菌的发酵过程期间细菌自发地产生和释放的水溶性代谢物。
2.根据权利要求1所述的用途,其中,所述细菌是线状透明颤菌ATCC 15551菌株。
3.一种美容组合物和/或皮肤病用组合物,所述组合物包括在生理上可接受的介质中的属于线状透明颤菌物种的细菌的至少一种裂解物以及其完全发酵培养基,相对于所述组合物的干提取物的总重量,所述裂解物和所述完全发酵培养基按重量计以0.001%至10%的量包括在所述美容组合物中,
其中,所述裂解物和所述完全发酵培养基的混合物含有在所述细菌的细胞裂解期间形成和/或释放的细胞质部分、细胞壁碎片和代谢物以及在所述细菌的发酵过程期间细菌自发地产生和释放的水溶性代谢物。
4.根据权利要求3所述的组合物,所述组合物具有发液、洗发剂或护发素的形式。
5.根据权利要求3所述的组合物,其中,所述细菌是线状透明颤菌ATCC15551菌株。
6.根据权利要求3所述的组合物,所述组合物是外用组合物的形式。
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