CN103575911A - 唾液稳定液 - Google Patents

Abstract

本发明公开一种唾液稳定液，包括缓冲液、防腐剂、蛋白稳定剂、钾盐和钠盐，所述防腐剂的质量与缓冲液体积的比例为0.01%-4%W/V，所述蛋白稳定剂的质量与缓冲液体积的比例为0.1%-5%W/V，所述钠盐的质量与缓冲液体积的比例为0.5%-5%W/V，所述钾盐的质量与缓冲液体积的比例为0.5%-5%W/V。本发明通过唾液稳定液来改变唾液的粘度，在缓冲液中加入一定的防腐剂可以有效抑制唾液样本中的细菌生长；在唾液样本保存中，为了提高被分析物质的活性，本发明中加入一定量的氯化钠或氯化钾可以保持免疫球蛋白的原始结构不被破坏；本发明中的蛋白稳定剂是为了保护唾液中的蛋白质不被降解，以达到长期保存唾液中蛋白质活性、便于临床检测的目的。

Description

唾液稳定液

技术领域

本发明涉及一种蛋白质稳定试剂，尤其涉及一种唾液中的蛋白质稳定液。

背景技术

唾液是人体重要体液之一，其成分相对稳定，获取方便，其中某些特异成分，比如：微生物、抗体、生物酶、药物和某些特殊介质，均可作为疾病诊断、疗效观察、药物监测的参考指标，在疾病的诊断中具有潜在的应用价值。但唾液同时也受全身各种因素和状态的影响，当唾液脱离人体存在以后容易发生变质、降解。

中国专利（CN 1439314A）公开一种蛋白质稳定剂，主要涉及稳定酸性水成液如汁液中蛋白质悬浮体的稳定，应用于营养健康饮料中添加的蛋白质的稳定，应用环境明显有别于唾液。

中国专利（CN 101822820A）公开一种稳定蛋白质制剂，提供治疗免疫系统紊乱的制剂，采用给予受试者CTLA41g分子的方式，包括静脉注射、皮下的低压冻干和液体制剂，使用和保存环境也明显区别于唾液环境。

目前得到的稳定剂包括JP-A-10-45794中具有磷酰胆碱的聚合物、JP-A-10-279594中的脂肪酸酯，如三酰基甘油的膜，以及JP-A-7-255477中含有葡萄糖苷衍生物作为单体单元的聚合物，然而这些稳定剂在保持蛋白活性方面是不足的。

自1901年Michaels首先用检查唾液成分作为疾病的辅助工具以来，由于唾液容易采集、对病人无侵入性，其作为疾病诊断标本方面的价值已收到广泛重视。如今，美国FDA及卫生部已经明确提出，鼓励美国的科研机构发展采用人体口腔唾液，来测试人体的各种肿瘤、传染性疾病等。然而，从口腔中分离的唾液蛋白质含量较低又易于迅速降解，从而危及其平移于临床实用程序。因此，迫切需要开发一种便于人类唾液样本储存的简单、可靠、实用的方法。

有鉴于上述现有的唾液蛋白稳定剂存在的缺陷，本发明人基于从事此类产品设计制造多年丰富的实务经验及专业知识，并配合学理的运用，积极加以研究创新，以期创设一种新型唾液稳定液，使其更具有实用性。经过不断的研究、设计，并经反复试作样品及改进后，终于创设出确具实用价值的本发明。

发明内容

本发明的主要目的在于，克服现有的唾液蛋白稳定剂存在的缺陷，而提供一种新型唾液稳定液，长期保存唾液蛋白活性、便于临床检测，从而更加适于实用，且具有产业上的利用价值。

本发明的目的及解决其技术问题是采用以下技术方案来实现的。依据本发明提出的一种唾液稳定液，包括缓冲液、防腐剂、蛋白稳定剂、钾盐和钠盐，所述防腐剂的质量与缓冲液体积的比例为0.01%-4%W/V,所述蛋白稳定剂的质量与缓冲液体积的比例为0.1%-5%W/V，所述钠盐的质量与缓冲液体积的比例为0.5%-5%W/V，所述钾盐的质量与缓冲液体积的比例为0.5%-5%W/V。

作为优选，前述的唾液稳定液，所述缓冲液的浓度为0.01-0.1mol/L。

作为优选，前述的唾液稳定液，所述缓冲液的pH值为7.1-7.3。

作为优选，前述的唾液稳定液，所述缓冲液为磷酸盐缓冲液、Tris-HCl缓冲液、HEPES缓冲液、枸橼酸缓冲液中的一种。

作为优选，前述的唾液稳定液，所述防腐剂为苯甲酸、苯甲酸钠、山梨酸、山梨酸钾、丙酸钙、对羟基苯甲酸酯中的一种或几种。

作为优选，前述的唾液稳定液，所述蛋白稳定剂为葡萄糖、麦芽糖、牛血清白蛋白中的一种或几种。

作为优选，前述的唾液稳定液，所述蛋白稳定剂为葡萄糖或者牛血清白蛋白中的一种或两者的混合物。

前述的唾液稳定液，用于分析唾液中的蛋白质的种类为具有临床诊断意义的分析物质，来治愈HIV、乙肝、丙肝、梅毒、麻疹、风疹、心脏病、肿瘤。

前述的唾液稳定液，用于分析的物质为免疫球蛋白或心脏疾病标志物或肿瘤标志物。

借由上述技术方案，本发明唾液稳定液至少具有下列优点：

唾液来源于口腔中各种腺体分泌的复杂混合物，其中很多组分是各种酶、免疫球蛋白、粘蛋白以及细胞碎片和细菌，由于唾液粘稠度高，不利于检测时抗原抗体的结合，甚至导致错误的检测结果，为了不影响唾液中被分析物质如特异性的IgG或肿瘤标志物的检测，本发明通过唾液稳定液来改变唾液的粘度，并将缓冲液的pH值控制在7.1-7.3之间；唾液中含有的细菌和酶类不利于唾液的长期保存，会使唾液中的蛋白质发生降解，本发明在缓冲液中加入一定的防腐剂可以有效抑制唾液样本中的细菌生长；在唾液样本保存中，为了提高被分析物质的活性，本发明中加入一定量的氯化钠或氯化钾可以保持免疫球蛋白的原始结构不被破坏；本发明中的蛋白稳定剂是为了保护唾液中的蛋白质不被降解，以达到长期保存唾液中蛋白质活性、便于临床检测的目的。

上述说明仅是本发明技术方案的概述，为了能够更清楚了解本发明的技术手段，并可依照说明书的内容予以实施，以下以本发明的较佳实施例详细说明如后。

具体实施方式

为更进一步阐述本发明为达成预定发明目的所采取的技术手段及功效,对依据本发明提出的唾液稳定液其具体实施方式、特征及其功效，详细说明如后。

实施例1

按照常规方法配置浓度为0.05mol/L，pH值为7.2的磷酸盐缓冲液500ml，然后称取5g氯化钠加入到已配置好的磷酸盐缓冲液中，使氯化钠质量和缓冲液的体积比为1%W/V,再在其中加入0.5克的苯甲酸钠（含量为0.1%W/V）、1克的牛血清白蛋白干粉（含量为0.2%W/V），最后用NaOH或HCl调节溶液的pH值至7.2，即得到pH为7.2的唾液稳定液。

本发明的唾液稳定液于室温保存，与唾液按体积比1:1作用后，唾液中的蛋白质（免疫球蛋白、心脏病标志物或肿瘤标记物）可在室温中保存1个月或者4℃冰箱保存半年。

为了检测唾液稳定液的效果，我们以生理盐水+HBV表面抗体阳性唾液和HBV表面抗体阳性唾液作对照试验，用ELISA方法检测了唾液稳定液在室温下保存30天内对唾液中HBV表面抗体的稳定情况，其结果如表1所示：

表1

由实验结果可见：HBV表面抗体阳性唾液在加入唾液稳定液后其抗体的活性得到了很好的保护。

实施例2

按照常规方法配置浓度为0.05mol/L，pH值为7.2的Tris-HCl缓冲液500ml，然后称取10g氯化钠加入到已配置好的磷酸盐缓冲液中，使氯化钠质量和缓冲液的体积比为2%W/V，再在其中加入0.5克的苯甲酸钠（含量为0.1%W/V）、1克的牛血清白蛋白干粉（含量为0.2%W/V），最后用NaOH或HCl调节溶液的pH值至7.2，即得到pH为7.2的唾液稳定液。

实施例3

按照常规方法配置浓度为0.05mol/L，pH值为7.2的枸橼酸-磷酸盐缓冲液500ml，然后称取20g氯化钠加入到已配置好的枸橼酸-磷酸盐缓冲液中，使氯化钠质量和缓冲液的体积比为4%W/V,再在其中加入0.5克的山梨酸钾（含量为0.1%W/V）、1克的葡萄糖（含量为0.2%W/V），最后用NaOH或HCl调节溶液的pH值至7.2，即得到pH为7.3的唾液稳定液。

以上所述，仅是本发明的较佳实施例而已，并非对本发明作任何形式上的限制，虽然本发明已以较佳实施例揭露如上，然而并非用以限定本发明,任何熟悉本专业的技术人员，在不脱离本发明技术方案范围内,当可利用上述揭示的技术内容做出些许更动或修饰为等同变化的等效实施例,但凡是未脱离本发明技术方案的内容，依据本发明的技术实质对以上实施例所作的任何简单修改、等同变化与修饰，均仍属于本发明技术方案的范围内。

Claims (7)

1.一种唾液稳定液，其特征在于：包括缓冲液、防腐剂、蛋白稳定剂、钾盐和钠盐，所述防腐剂的质量与缓冲液体积的比例为0.01%-4% W/V,所述蛋白稳定剂的质量与缓冲液体积的比例为0.1%-5% W/V，所述钠盐的质量与缓冲液体积的比例为0.5%-5% W/V，所述钾盐的质量与缓冲液体积的比例为0.5%-5% W/V。

2.根据权利要求1所述的唾液稳定液，其特征在于：所述缓冲液的浓度为0.01-0.1mol/L。

3.根据权利要求1所述的唾液稳定液，其特征在于：所述缓冲液的pH值为7.1-7.3。

4.根据权利要求1~3任一项所述的唾液稳定液，其特征在于：所述缓冲液为磷酸盐缓冲液、Tris-HCl缓冲液、HEPES缓冲液、枸橼酸缓冲液中的一种。

5.根据权利要求1所述的唾液稳定液，其特征在于：所述防腐剂为苯甲酸、苯甲酸钠、山梨酸、山梨酸钾、丙酸钙、对羟基苯甲酸酯中的一种或几种。

6.根据权利要求1所述的唾液稳定液，其特征在于：所述蛋白稳定剂为葡萄糖、麦芽糖、牛血清白蛋白中的一种或几种。

7.根据权利要求6所述的唾液稳定液，其特征在于：所述蛋白稳定剂为葡萄糖或者牛血清白蛋白中的一种或两者的混合物。