CN103548681A

CN103548681A - 一种春石斛组织培养中快速诱导不定芽的培养基

Info

Publication number: CN103548681A
Application number: CN201310527533.0A
Authority: CN
Inventors: 李兴彪
Original assignee: TIANMU COLLEGE OF ZHEJIANG A&F UNIVERSITY
Current assignee: TIANMU COLLEGE OF ZHEJIANG A&F UNIVERSITY
Priority date: 2013-10-31
Filing date: 2013-10-31
Publication date: 2014-02-05
Anticipated expiration: 2033-10-31
Also published as: CN103548681B

Abstract

一种春石斛组织培养中快速诱导不定芽的培养基，属于植物培育技术领域。其特征在于含有重量百分含量的以下物质：水45-80%、无机物3-17%、有机物2-15%，植物生长调节剂0.1-7%，增效成分5-30%。上述一种春石斛组织培养中快速诱导不定芽的培养基，利用春石斛在组织培养过程中对营养成分的需求和其生长发育特点，制成的培养基能明显促使春石斛愈伤组织分化出不定芽，同时能提高其不定芽的生根率和生根数；具有生产成本低廉、使用方便、储运安全，有较高的应用和经济价值，稳定高效且根系发育快捷等优点。

Description

一种春石斛组织培养中快速诱导不定芽的培养基

技术领域

本发明属于植物培育技术领域，具体涉及一种春石斛组织培养中快速诱导不定芽的培养基。

背景技术

春石斛（Dendrobium）为兰科（Orchidaceae）石斛属多年生草本植物，具有色彩丰富、香味清新、观赏期较长、管理粗放等优点，近几年市场份额逐渐增大，成为年宵花的新星，得到从业者的高深关注。 20 世纪 90 年代，韩国、日本等国家生产的春石斛开始进入我国市场，由于售价高且国产化技术没有及时跟上，以致目前年宵花市场上的春石斛处于高价位状态，数量供不应求。国产的优质春石斛种苗更是难以满足市场需求，因而加大春石斛种苗生产技术研究显得非常迫切，具有广阔的市场前景。

据相关资料显示，我国较系统地从事春石斛研究的单位寥寥无几，见诸报道的只有中国林科院花卉中心、浙江森禾种业有限公司以及深圳农科中心等几家。2002年，在国家“948”项目的支持下，以中国林科院花卉中心彭镇华教授为首的课题组开展了春石斛商品化生产技术的系统研究并取得重大突破，“春石斛优质成品培育出花的方法”等 5 项技术已获国家专利。浙江森禾种业有限公司生产的春石斛2006年度获中国盆栽花卉最高奖——金花奖，目前森禾公司生产的春石斛产品质量达到国际标准，产量均稳居世界前列，深圳市农业科学研究中心花卉技术应用研究所的技术成果“春石斛引进与试管苗快繁和栽培技术研究”2003年4月获得深圳市科技成果鉴定，已全面掌握春石斛试管苗快繁和栽培技术，已形成具有20多万盆中小苗和近5万盆开花株的生产规模。

春石斛生长强健，繁殖率高，通过有性繁殖和无性繁殖均可得到新的植株。有性繁殖由于生产出来的种苗性状有一定分离，多在科研领域使用，较少应用于生产。目前生产上主要采用无性繁殖方式取得种苗，有高芽繁殖、茎段扦插、压条、组织培养和分株等，规模化生产主要采用茎段扦插、高芽繁殖和组织培养3种方法。中国从 20 世纪 70年代中期开始, 对石斛的组织培养进行深入研究,进展很快。据报道,目前已在霍山石斛、金钗石斛、铁皮石斛等9种石斛属植物成功诱导出无性繁殖系和离体种子苗,并已进入规模生产阶段。作为观赏花卉的春、秋石斛的组培研究工作,自20世纪80年代开展以来,取得可喜的进展,离体种子的发芽率在90%以上,秋石斛组培苗已进入工厂化生产。春石斛品种间差异很大, 不定芽的诱导有一定难度,目前仍处于探索阶段。

发明内容

针对现有技术中存在的上述问题，本发明的目的在于设计提供一种春石斛组织培养中快速诱导不定芽的培养基的技术方案，得到的培养基显著提高春石斛愈伤组织分化出不定芽，同时能提高不定芽生根率和生根数，其生产成本低廉、使用方便、储运安全，具有较高的应用和经济价值。

所述的一种春石斛组织培养中快速诱导不定芽的培养基，其特征在于含有重量百分含量的以下物质：水45-80%、无机物3-17%、有机物2-15%，植物生长调节剂0.1-7%，增效成分5-30%；

所述的无机物为硫酸铁、乙二胺四乙酸二钠盐、硼酸、氯化钙、碘化钾、硝酸、D-泛酸、硫酸铜、硝酸胺、结晶硫酸镁、硫酸亚铁、硫酸锰、硫酸锌、三氧化钼、二氧化钛中的一种或一种以上混合物；

所述的有机物为烟酸、肌醇、盐酸吡哆辛、甘氨酸、叶酸、核黄素、抗坏血酸、柠檬酸、精氨酸、蛋白胨中的一种或一种以上混合物；

所述的植物生长调节剂为 3-吲哚乙酸、6-糠氨基嘌呤、氯吡苯脲、反玉米素、塞苯隆、α-萘乙酸、2，4-二氯苯氧乙酸、赤霉素、表油菜素内脂、青鲜素、三十烷醇、乙烯利中的一种或一种以上混合物；

所述的增效成分为红薯粉、苹果汁、番茄汁中的一种或一种以上混合物。

所述的一种春石斛组织培养中快速诱导不定芽的培养基，其特征在于水的含量为50-75%，优选为55-60%。

所述的一种春石斛组织培养中快速诱导不定芽的培养基，其特征在于无机物含量为6-15%，优选为9-12%。

所述的一种春石斛组织培养中快速诱导不定芽的培养基，其特征在于有机物含量为5-13%，优选为8-10%。

所述的一种春石斛组织培养中快速诱导不定芽的培养基，其特征在于植物生长调节剂含量为0.8-5%，优选为2-3%。

所述的一种春石斛组织培养中快速诱导不定芽的培养基，其特征在于增效成分含量为9-25%，优选为15-20%。

上述一种春石斛组织培养中快速诱导不定芽的培养基，利用春石斛在组织培养过程中对营养成分的需求和其生长发育特点，制成的培养基能明显促使春石斛愈伤组织分化出不定芽，同时能提高其不定芽的生根率和生根数；具有生产成本低廉、使用方便、储运安全，有较高的应用和经济价值，稳定高效且根系发育快捷等优点。

本申请文件中涉及的百分含量除另有说明外，其它的均为纯物质的重量百分含量。

具体实施方式

下面再结合具体实施例和对比试验对本发明作进一步的说明。

实施例1

向100L反应釜内投入73.2kg水，再投入1kg氯化钙、1kg碘化钾、1kg硝酸、1kg D-泛酸、1kg硫酸铜、1kg硝酸胺、1kg结晶硫酸镁、0.5kg硫酸亚铁、0.5kg硫酸锰、0.3kg硫酸锌、0.3kg三氧化钼和0.4kg二氧化钛，搅拌溶解后再慢慢投入1kg烟酸、1kg肌醇、1kg盐酸吡哆辛、1kg精氨酸和1kg蛋白胨，搅拌混合均匀，然后加入0.1kg 3-吲哚乙酸、0.1kg6-糠氨基嘌呤、0.1kg氯吡苯脲、0.1kg反玉米素、0.1kg塞苯隆、0.1kgα-萘乙酸、0.1kg2，4-二氯苯氧乙酸、0.1kg赤霉素、0.1kg表油菜素内脂、0.1kg青鲜素、0.4kg三十烷醇和0.4kg乙烯利，最后加入11kg苹果汁，搅拌混合均匀即成最终产品。

实施例2

向100L反应釜内投入49.7kg水，再投入1kg硫酸铁、1kg乙二胺四乙酸二钠盐、1kg硼酸、1kg D-泛酸、1kg硫酸铜、1kg硝酸胺、1kg结晶硫酸镁、1kg硫酸亚铁、1kg硫酸锰、1kg硫酸锌、2kg三氧化钼和2kg二氧化钛，搅拌溶解后再慢慢投入2kg盐酸吡哆辛、2kg甘氨酸、2kg叶酸、2kg核黄素、2kg抗坏血酸、0.5kg柠檬酸和0.5kg精氨酸，搅拌混合均匀，然后加入0.5kg反玉米素、0.5kg塞苯隆、0.5kgα-萘乙酸、0.5kg2，4-二氯苯氧乙酸、0.5kg赤霉素、0.5kg表油菜素内脂、0.5kg青鲜素、0.5kg三十烷醇和0.3kg乙烯利，最后加入10kg苹果汁和11kg番茄汁，搅拌混合均匀即成最终产品。

实施例3

向100L反应釜内投入69kg水，再投入0.5kg硫酸铁、0.5kg乙二胺四乙酸二钠盐、1kg硼酸、1kg氯化钙、1kg碘化钾、1kg硝酸、1kg结晶硫酸镁、1kg硫酸亚铁、1kg硫酸锰、1kg硫酸锌、0.5kg三氧化钼和0.5kg二氧化钛，搅拌溶解后再慢慢投入0.5kg烟酸、0.5kg肌醇、0.5kg盐酸吡哆辛、0.5kg甘氨酸、0.5kg叶酸、0.5kg核黄素、0.5kg抗坏血酸、0.5kg柠檬酸、0.5kg精氨酸和1.5kg蛋白胨，搅拌混合均匀，然后加入0.2kg 3-吲哚乙酸、0.2kg6-糠氨基嘌呤、0.2kg氯吡苯脲、0.2kg2，4-二氯苯氧乙酸、0.2kg赤霉素、0.25kg表油菜素内脂、0.25kg青鲜素、0.25kg三十烷醇和0.25kg乙烯利，最后加入13kg红薯粉，搅拌混合均匀即成最终产品。

实施例4

向100L反应釜内投入64.5kg水，再投入1kg硫酸铁、1kg乙二胺四乙酸二钠盐、1kg硼酸、1kg氯化钙、1kg碘化钾、1kg硝酸、1kg D-泛酸、0.5kg硫酸铜、0.5kg硝酸胺、0.5kg结晶硫酸镁、0.5kg硫酸亚铁、0.5kg硫酸锰、0.5kg硫酸锌、0.5kg三氧化钼和0.5kg二氧化钛，搅拌溶解后再慢慢投入1kg烟酸、1kg肌醇、1kg盐酸吡哆辛、2kg甘氨酸和2kg蛋白胨，搅拌混合均匀，然后加入0.5kg 3-吲哚乙酸、0.2kg6-糠氨基嘌呤、0.2kg氯吡苯脲、0.2kg反玉米素、0.2kg塞苯隆、0.2kgα-萘乙酸、0.3kg青鲜素、0.3kg三十烷醇和0.4kg乙烯利，最后加入15kg番茄汁，搅拌混合均匀即成最终产品。

实施例5

向100L反应釜内投入59kg水，再投入0.5kg硫酸铁、0.5kg乙二胺四乙酸二钠盐、1kg硼酸、2kg氯化钙、2kg碘化钾、2kg硝酸、1kg D-泛酸、1kg硫酸铜、0.5kg硝酸胺、0.5kg硫酸锌、0.5kg三氧化钼和0.5kg二氧化钛，搅拌溶解后再慢慢投入1kg烟酸、1kg肌醇、1kg叶酸、1kg核黄素、1kg抗坏血酸、1kg柠檬酸、1kg精氨酸和1kg蛋白胨，搅拌混合均匀，然后加入0.3kg 3-吲哚乙酸、0.3kg6-糠氨基嘌呤、0.3kg反玉米素、0.3kg塞苯隆、0.3kgα-萘乙酸、0.3kg2，4-二氯苯氧乙酸、0.3kg赤霉素、0.3kg表油菜素内脂和0.6kg乙烯利，最后加入6kg红薯粉、6kg苹果汁和6kg番茄汁，搅拌混合均匀即成最终产品。

实施例6

向100L反应釜内投入53kg水，再投入1.5kg硫酸铁、1.5kg乙二胺四乙酸二钠盐、1kg硼酸、1kg氯化钙、1kg碘化钾、1kg硝酸、1kg D-泛酸、1kg硫酸铜、1kg硝酸胺、1kg结晶硫酸镁和2kg硫酸亚铁，搅拌溶解后再慢慢投入2kg盐酸吡哆辛、1kg甘氨酸、1kg叶酸、1kg核黄素、1kg抗坏血酸、1kg柠檬酸、1kg精氨酸和2kg蛋白胨，搅拌混合均匀，然后加入0.5kg 3-吲哚乙酸、0.5kg氯吡苯脲、0.5kg反玉米素、0.5kg塞苯隆、0.5kgα-萘乙酸、0.5kg表油菜素内脂、0.5kg青鲜素和0.5kg三十烷醇，最后加入10kg红薯粉和10kg番茄汁，搅拌混合均匀即成最终产品。

以下通过试验进一步说明本发明的有益效果。

Figure 2013105275330100002DEST_PATH_IMAGE001

表1表明：实施例1-6对春石斛愈伤组织不定芽均有较好的诱导效果，其中实施例1优于实施例2，实施例3优于实施例4，实施例5优于实施例6。

表2 实施例1-6对春石斛兰生根情况的影响

处理	平均根数	生根率（%）
			实施例1	7.28	100
实施例2	7.36	100
			实施例3	7.54	100
实施例4	7.75	100
			实施例5	7.57	100
实施例6	7.69	100
			CK（清水）	5.43	47.2

表2表明：实施例1-6对春石斛兰生根均有较好的促进作用，其中实施例2优于实施例1，实施例4优于实施例3，实施例6优于实施例5。

Claims

1. 一种春石斛组织培养中快速诱导不定芽的培养基，其特征在于含有重量百分含量的以下物质：水45-80%、无机物3-17%、有机物2-15%，植物生长调节剂0.1-7%，增效成分5-30%；

2. 如权利要求1所述的一种春石斛组织培养中快速诱导不定芽的培养基，其特征在于水的含量为50-75%，优选为55-60%。

3. 如权利要求1所述的一种春石斛组织培养中快速诱导不定芽的培养基，其特征在于无机物含量为6-15%，优选为9-12%。

4. 如权利要求1所述的一种春石斛组织培养中快速诱导不定芽的培养基，其特征在于有机物含量为5-13%，优选为8-10%。

5. 如权利要求1所述的一种春石斛组织培养中快速诱导不定芽的培养基，其特征在于植物生长调节剂含量为0.8-5%，优选为2-3%。

6. 如权利要求1所述的一种春石斛组织培养中快速诱导不定芽的培养基，其特征在于增效成分含量为9-25%，优选为15-20%。