CN103520031A - 一种用作天然防腐剂的植物配方 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一组用作天然防腐剂的植物提取物配方，它包含具有较强的抗菌活性植物黄藤、罗勒和苦参。本发明的配方具有良好的抑菌作用，避免了化学防腐剂对人体的危害。此天然防腐剂为液体形式，可安全有效地广泛应用于食品、药品、化妆品、生化制品等领域的防腐用途。

Description

一种用作天然防腐剂的植物配方

技术领域

本发明属于天然防腐剂领域，具体涉及一组具有天然防腐效果的植物配方。

背景技术

因化学合成抗菌剂对人类健康具有潜在的威胁，因而，从蔬菜、水果或传统、民间食用药用植物资源中发现高效天然抗菌防腐剂，是现代食品、药品、化妆品、生化制品等领域的的一个重要方向与目标。

黄藤（Fibraurea recisa Pierre.）为防己科（Menispermaceae）天仙藤属植物,又名天仙藤、大黄藤、伸筋藤、山大王、金锁匙等,为我国的一种传统中药。该植物分布于广东、广西、云南等地的山谷密林中或石壁上,常用作消炎解毒、利尿药,可用来治疗妇科炎症、伤口感染、菌痢、肠炎、呼吸道和泌尿系统感染,以及眼结膜炎等。藤茎和根部均可药用，始载于《本草纲目》，收录于1974年版《云南省药品标准》、2005版和2010版《中华人民共和国药典》。根据文献报导黄藤根及茎主要含掌叶防己碱(巴马汀palmatine)达3%，及药根碱(jatrorrhizine)、小檗碱(berberine)、黄藤素甲(fibranine)、黄藤素乙(fibraminine)等生物碱、黄藤内酯(fibralactone)和甾醇（stero1)。而黄藤中主要成分黄藤素,早已生产用于治疗各种炎症，尤其是妇科炎症的消炎制剂。体外抑菌表明，黄藤生物碱对柯氏表皮癣菌等12种真菌有不同程度的抑菌作用；动物试验中，对白色念球菌浅部或深部感染均有良好的疗效。

罗勒(Ocimun basilicum L.)，为唇形科植物罗勒的全草，其味辛、甘，性温，有疏风解表，化湿和中、行气活血、解毒消肿的功效。研究证明，罗勒具有强大的抗氧化、防癌、抗病毒和抗微生物性能。在古医药学中，罗勒还可以被用于治疗青春痘。罗勒中含0.02-0.04%的挥发油成分，罗勒精油展现了促进新陈代谢，加强洁净并紧实肌肤，避免皮肤红肿、晒伤、过敏，使肌肤恢复活力，改善皮肤毛孔阻塞问题，减少粉刺的形成，保持肌肤水分，避免干燥及老化，淡化肌肤黑色素，消除黑斑及黑眼圈，达到美白功效，和天然的防腐特质的魅力。

苦参为豆科槐属植物苦参(Sophora flavescens Ait.)的干燥根。又名水槐、地槐、白茎，始载于《神农本草经》，列为中品，是我国常用传统中药。其味苦、性寒，具有清热燥湿、杀虫、利尿之功效；用于热痢，便血，黄疸尿闭，赤白带下，阴肿阴痒，湿疹，湿疮，皮肤瘙痒，疥癣麻风等病症；外用亦治滴虫性阴道炎。李时珍谓：“苦以味名，参以功名。”临床研究也证实，苦参含有多种化学成分并具有广泛的生物活性。其传统药理作用以抑菌、抗心律失常为主，其对痢疾杆菌、金色葡萄球菌、维白痢沙门氏杆菌均有显著的抑制作用，对瑾色毛癣菌等十多种皮肤真菌亦有不同程度的抑制作用。

发明内容

本发明的目的在于提供一组具有天然防腐效果的植物配方提取液，特别是涉及一组以黄藤、罗勒、苦参为原料可以应用于化妆品领域的天然植物防腐剂配方。

为了实现上述发明目的，本发明所采用的技术方案是：通过现有提取技术，采用水和有机溶剂提取，提取温度为50-99℃，提取时间为1-8h，提取溶剂比例为6-10倍生药质量。其中，最佳提取方式为30-70wt%乙醇提取，最佳提取温度为80-99℃，最佳提取时间为2-4h，最佳提取溶剂比例为6-10倍生药质量。植物配方提取液通过各种生药按照不同配比所制和各植物单独提取，所具备的防腐效果对比明显可见,本发明的提取液组合具备更优的防腐效果。其中最优配比为黄藤：罗勒：苦参为3:5:2，抗菌活性显著高于各单独植物提取液单独使用，并增加了抗菌谱的广度。

本发明的优点在于：（1）提供一组天然防腐植物配方，用以替代化学防腐剂，该发明能解决化学合成防腐剂潜在威胁人体健康的问题，且安全、高效；（2）提供一组天然防腐剂植物配方，解决了单一植物组方很难具备天然植物防腐剂的问题，通过复配及协同作用，该发明能同时抑制金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌、白色念珠球菌和黑曲霉，按一定比例添加到日化产品中，能很好的替代化学防腐剂，能通过防腐挑战实验。

具体实施方式

下面通过实施例的方式进一步说明本发明，但并不因此将本发明限制在所述的实施例范围之中。

实施方式一：

按照以下表一中，各配方以不同药材比例配备（总药材质量为100g），粉碎，装入2L的圆底烧瓶，加入30%乙醇溶液，在60℃水浴恒温提取2h，提取液经过旋转蒸发仪浓缩到60g，分别加入40%丙二醇、1,3-丁二醇或者丙三醇40g,将不溶解成分过滤，即制得各配方1-4。

表一：

抑菌试验：

（1）试验菌株

金黄色葡萄球菌（ATCC8739），大肠杆菌（ATCC6538），绿脓杆菌（ATCC9027），白色念珠球菌（ATCC10231），黑曲霉菌（ATCC16404）。

（2）培养基

TSB固体培养基：蛋白胨10g/L，NaCl10g/L，K₂HPO₄2.5g/L，酵母提取物3g/L，琼脂15g/L，蒸馏水溶解，调节pH为7.2±0.2，115℃高压灭菌20min；TSB液体培养基：蛋白胨10g/L，NaCl10g/L，K₂HPO₄2.5g/L，酵母提取物3g/L，蒸馏水溶解，调节pH为7.2±0.2，115℃高压灭菌20min；

SDB固体培养基：蛋白胨10g/L，葡萄糖20g/L，K₂HPO₄3g/L，酵母提取物5g/L，琼脂15g/L，蒸馏水溶解，115℃高压灭菌20min；SDB液体培养基：蛋白胨10g/L，葡萄糖20g/L，K₂HPO₄3g/L，酵母提取物5g/L，蒸馏水溶解，115℃高压灭菌20min。

（3）菌悬液制备及接种

取甘油保藏的金黄色葡萄球菌，大肠杆菌，绿脓杆菌100μL涂布于TSB固体培养基上，37℃培养2d，用生理盐水重悬，得到菌悬液，并用平板培养法计数，将测试菌浓度调整为10⁵～10⁶CFU/mL。

白色念珠球菌和黑曲霉菌100μL涂布于SDB固体培养基上，30℃培养2d，用生理盐水重悬，得到菌悬液，并用平板培养法计数，将测试菌浓度调整为10⁵～10⁶。

（4）样品抑菌作用的测定

杯碟法

在培养皿中倒入TSB或SDB固体培养基，待凝固后，在此培养基上均匀涂布测试菌100μL。在培养基上等距离放2个无菌牛津杯[内径(6.0±0.1)mm，外径(8.0±0.1)mm，高(10.0±0.1)mm，在杯内分别注入200μL待测样品，用生理盐水或含一定量的DMSO的生理盐水作为对照。37℃或30℃恒温箱中培养2d后，用直尺测量各种药品的抑菌圈直径，取其平均值。

微孔板法

在微孔中加入100μL待测样品（初始浓度），再加入含测试菌浓度1.0×105CFU/mL为2×TSB或2×SDB液体培养基100μL，混匀，即待测样品的测试浓度为初始浓度的50%。30℃或37℃恒温箱中培养2d后，观察有无菌生长。结果判断的前提是生长对照良好，空白对照无菌生长清晰。

（5）最低抑菌浓度(MIC值)的测定

最低抑制金黄色葡萄球菌浓度（MIC）、最低抑制大肠杆菌浓度（MIC）、最低抑制绿脓杆菌浓度（MIC）、最低抑制白色念珠球菌浓度（MIC）的测定方法如下：

（1）药液制备

将待测样品用生理盐水稀释成实验浓度。

（2）菌液制备用2×TSB或2×SDB液体培养基稀释菌悬液，使其最终菌浓度为l0⁵CFU/mL。

（3）培养及结果判读在微孔中加入菌液100μL和药液100μL，同时设不加菌的阴性对照和不加药液的正常生长对照，每种药做3个平行，取平均值。置37℃或30℃湿盒孵育，48h后观察结果，采用直接法读取数据。结果判断的前提是生长对照良好，空白对照无菌生长清晰，其它孔随药物浓度梯度升高而菌的生长受到抑制。

②最低抑制黑曲霉浓度（MIC）测定

采用杯碟法，在培养皿中倒入SDB固体培养基，待凝固后，在此培养基上加入黑曲霉菌（10⁵CFU/ml）100μL，均匀涂布。在培养基上等距离放3个无菌牛津杯[内径(6.0±0.1)mm，外径(8.0±0.1)mm，高(10.0±0.1)mm，在杯内分别注入200μL不同浓度的样品（用生理盐水稀释）。同时设不加测试样品的正常生长对照和生理盐水对照。结果判断的前提是生长对照和生理盐水对照生长良好，其它随药物浓度梯度升高而菌的生长受到抑制。

不同药材比例所制配方抑菌试验所得MIC值见表二

表二

由表二可知，各单个植物提取液抑菌效果不佳，且抗菌谱较窄。以三种提取物组成的配方4的抑菌效果较佳。

实施方式二：

按照以下表三中，各配方以不同药材比例配备（总药材质量为100g），粉碎，装入2L的圆底烧瓶，其中配方1-4加入30%乙醇溶液，配方5-7加入50%乙醇溶液，配方8-10加入70%乙醇溶液，分别在60℃水浴恒温提取2h，提取液经过旋转蒸发仪浓缩到60g，分别加入40%丙二醇、1,3-丁二醇或者丙三醇40g,将不溶解成分过滤，即制得各配方1-10。

表三：

通过与实施方式一相同的抑菌实验，不同药材比例所制配方抑菌试验所得MIC值见表四

表四

由表四可知，天然植物防腐剂配方6，配方中黄藤：罗勒：苦参的重量配比为3:5:2时，抑菌效果最优。

应当理解的是，本发明所述%或wt%均指的是质量百分含量。

以上对本发明的具体实施例进行了详细描述，但其只是作为范例，本发明并不限制于以上描述的具体实施例。对于本领域技术人员而言，任何对本发明进行的等同修改和替代也都在本发明的范畴之中。因此，在不脱离本发明的精神和范围下所作的均等变换和修改，都应涵盖在本发明的范围内。

Claims (9)

1.一种用作天然防腐剂的植物配方，包含黄藤、罗勒和苦参。

2.根据权利要求1所述的植物配方，其特征在于，所述黄藤的质量百分比为0.33-99wt%，所述罗勒的质量百分比为0.33-99wt%，所述苦参的质量百分比为0.33-99wt%。

3.根据权利要求2所述的植物配方，其特征在于，所述植物配方的组分质量比为，黄藤：罗勒：苦参为3:5:2。

4.根据权利要求2所述的植物配方，其特征在于，所述黄藤、罗勒、苦参按不同比例提取。

5.根据权利要求1-4任一项所述的植物配方，其特征在于，该植物配方以30-70wt%乙醇提取，提取温度为60℃，提取时间为2h。提取溶剂量为10倍生药质量。

6.根据权利要求5所述的植物配方，其特征在于，所述乙醇提取的质量百分比为50%。

7.根据权利要求1-4任一项所述的植物配方，其特征在于，提取后的植物配方以植物提取物溶剂体系作为溶剂。

8.根据权利要求7所述的植物配方，其特征在于，所述植物提取物溶剂体系为40wt%丙二醇/60wt%水、40wt%丙三醇/60wt%水和/或40wt%1,3-丁二醇/60wt%水。

9.根据权利要求1-4任一项所述的植物配方，其特征在于：该植物配方具有抑制金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌、白色念珠球菌、黑曲霉的作用。