CN103479616A - 牛蒡苷元用于制备治疗动脉粥样硬化或心肌梗死药物中的用途 - Google Patents

Abstract

本发明公开了牛蒡苷元在制备治疗动脉粥样硬化或心肌梗死药物中的用途，属于医药领域。本发明所公开的牛蒡苷元的新医药用途中，牛蒡苷元的每日给药量为0.001～200mg/kg，牛蒡苷元可以制备成口服制剂、注射制剂或外用制剂，其中以牛蒡苷元的口服微乳制剂效果最佳；牛蒡苷元用于动脉粥样硬化或心肌梗死的治疗时，具有副作用小、治疗优势明显、患者用药依从性高等优点，具有十分广阔的医学应用前景。

Description

牛蒡苷元用于制备治疗动脉粥样硬化或心肌梗死药物中的用途

技术领域

本发明属于医药领域，具体涉及一种治疗动脉粥样硬化或心肌梗死疾病的药物。

背景技术

动脉粥样硬化(Arteriosclerosis，AS)是一种与脂质代谢障碍有关的，以大中动脉内膜脂质沉着、粥样斑块形成、纤维组织增生、管壁硬化为特征的全身性疾病。动脉粥样硬化的危害一方面可以造成血管淤积狭窄，供血不足，另一方面更大的危害在于斑块破裂，形成血栓，造成机体组织缺血、缺氧，严重者造成患者死亡。动脉粥样硬化患者多见于老年人，40～49岁的AS检出率分别为58.36％和88.31％，并随着年龄的增加而增加，它是一种严重危害人类健康的常见病，其中冠状动脉硬化引起的冠心病已经成为我国成人死亡率最高的疾病之一。

心肌梗死(myocardial infarction，MI)是指急性、持续性缺血、缺氧(冠状动脉功能不全)所引起的心肌坏死，可伴发心率失常、休克或心力衰竭等合并症，可危及生命，目前其在中国的发病率逐年升高。心肌梗死90％以上是由于冠状动脉粥样硬化病变引起的血栓而引起的，心肌梗死的病因基础为动脉粥样硬化，因此治疗心肌梗死首先要从根本上先治疗动脉粥样硬化。

目前，临床上用于治疗动脉粥样硬化的药物主要有(1)调血脂药：主要是通过降低TC和LDL来缓解病情，其代表药物为他汀类和胆汁酸结合树脂类；(2)抗氧化剂：主要是对抗血液中氧自由基及ox-LDL以达到治疗动脉皱样硬化的目的，代表药物有普罗布考(probucol)和维生素E；(3)多稀脂肪酸类(PUFA)：分为N-6型多稀脂肪酸和N-3型多稀脂肪酸，该类药物一方面是通过调节血脂，另一方面是通过抑制血小板聚集，扩张血管，改善微循环达到治疗的目的；(4)粘多糖和多糖类：该类药物能够保护血管内皮细胞，阻止血管平滑肌细胞转移和增殖，代表药物有低分子量肝素和硫酸乙酰肝素。

上述药物在治疗动脉粥样方面基本上都是通过降脂、抗氧化来减轻动脉粥样硬化的程度，无法从根本上阻止斑块的发展进程，也达不到稳定斑块防止斑块破裂的作用。新生血管有望成为动脉粥样硬化治疗的一个新靶点。Kapiotis等通过对来源于大豆提取的天然血管生成抑制剂genistein的研究，发现了血管生成抑制剂抗动脉粥样硬化的另一种机制：抑制低密度脂蛋白(LDL)的氧化，保护血管内皮免遭氧化低密度脂蛋白的损伤，长期应用可预防动脉粥样硬化的早期形成。目前研究证实LDL氧化后形成的ox-LDL能够与自身抗体形成氧化低密度脂蛋白免疫复合物(OX-LDL-IC)，后者在动脉粥样硬化的发生和发展中起重要作用。牛蒡苷元抑制血管新生的同时抑制LDL的氧化，能够有效治疗动脉粥样硬化。

“血管生成”则是指无发育完整中膜的新血管的形成，生理意义的血管形成在胚胎发育，创伤修复和侧支循环代偿缺血等方面发挥重要作用，而病理意义的血管形成，即血管生成异常则在动脉粥样硬化、肿瘤生长及转移、糖尿病性视网膜病变、风湿性关节炎等疾病的发生中发挥重要作用。越来越多的证据表明，血管生成在动脉粥样硬化(AS)发生机制及其发展中发挥重要作用，研究表明：随着动脉粥样硬化严重程度的加重，血管内膜新生血管发生率也随之提高，说明新生血管参与了动脉粥样硬化(AS)的发生、发展。

牛蒡苷元为白色粉末或无色块状结晶，在氯仿、甲醇、乙醇等有机溶剂中易溶，熔点为111-112℃。不易挥发，空气中不易被氧化，物理及化学性质均较为稳定。牛蒡苷元为木脂素类化合物，天然的牛蒡苷元是从菊科植物牛蒡的干燥果实牛蒡子中提取而来，但含量较少，但其前体物质牛蒡苷的含量在牛蒡子中含量很高，可通过转化获得大量的牛蒡苷元。已有文献报道牛蒡苷元具有如下药理活性：1)抗炎及免疫调节作用；2)抗病毒作用，包括HIV-1与流感病毒；3)诱导肿瘤细胞凋亡的作用；4)肾病及糖尿病、糖尿病并发症治疗作用；5)热休克反应抑制作用；6)神经保护作用；7)扩张血管作用；8)血小板活化因子拮抗作用；9)抗老年性痴呆的作用；10)抑制K+挛缩的作用等。比如，Cho J Y，et al.Immunomodulatoryeffect of arctigenin，a lignan compound on tumor necrosis factor-α and nitric oxide production，andlymphocyte proliferation[J].Pharm Pharmcol.1999；51(11)：1267-1273.公开了牛蒡苷元具有抗炎及免疫调节作用；Gao Y，et al.Activity of in vitro anti-influenza virus of arctigenin[J].ChineseTraditional and Herbal Drugs(中草药).2002；33(8)：724-726.公开了牛蒡苷元具有抗病毒的作用；Kim S H，et al.Hepatoprotective dibenzylbutyrolactone lignans of Torreya nucifera againstCCl4-induced toxicity in primary cultured rat hepatocytes[J].Biol Pharm Bull.2003；26(8)：1202-1205.公开了牛蒡苷元具有诱导肿瘤细胞凋亡的作用。

牛蒡苷元具有显著的抗菌、抗病毒、抗肿瘤、抗PAF受体的作用，但目前并无牛蒡苷元可以治疗动脉粥样硬化或心肌梗死的报道。发明人通过实验研究，发现牛蒡苷元对动脉粥样硬化和心肌梗死能够起到显著的治疗和预防效果，从而提出牛蒡苷元在制备治疗/预防动脉粥样硬化或心肌梗死的药物中的应用。

发明内容

鉴于目前临床上动脉粥样硬化和心肌梗死的药物治疗只能通过降低血脂、抑制血小板聚集、改善微循环等方式进行，而动脉粥样硬化的最大危害是斑块不稳定破裂后内容物进入血管形成血栓，堵塞微小血管，造成机体局部组织缺血、缺氧甚至坏死(如心肌梗死)。为了克服上述现有技术的不足，本发明公开一种牛蒡苷元的新的医药用途，即牛蒡苷元在用于制备治疗动脉粥样硬化和心肌梗死的药物中的用途。牛蒡苷元为天然的中药单体，体外实验显示其具有很好的血管抑制效果，因此成为治疗动脉粥样硬化和心肌梗死的治疗手段中的新视点，具有十分广泛的医药应用前景。

本发明公开牛蒡苷元在制备治疗动脉粥样硬化或心肌梗死的药物中的用途。

体外试验证明牛蒡苷元能够显著抑制新生血管的生成，而新生血管对动脉粥样硬化斑块的发展作用重大，一方面新生血管能够营养斑块组织，使斑块组织长大，另一方面由于斑块内的新生血管只是一层内皮组织环绕而成，没有结缔组织等基质支持，血管容易破裂，破裂后血液进入斑块内，进一步造成斑块肿大，因此牛蒡苷元对新生血管的抑制作用能够有效抑制动脉粥样斑块的发展。本发明实施例10中通过鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)模型确定牛蒡苷元在活体中对新生血管生成的影响，发现牛蒡苷元具有很强的新生血管生成的抑制作用，在很低的浓度即可显著抑制血管的生成情况，并且其血管生成抑制作用呈现剂量依赖性。因此本发明所述的牛蒡苷元的医药用途中，牛蒡苷元的治疗有效量可以为任意浓度。

本发明所述的医药用途中，牛蒡苷元可以制备成合适的制剂给药。口服制剂如片剂、口服微乳制剂、颗粒剂、口服液、胶囊剂、缓释片等，外用制剂如搽剂、凝胶剂、膏剂、软膏剂、霜剂等，注射制剂如注射微乳、注射液。上述含有牛蒡苷元的药物制剂中，每一制剂中含有牛蒡苷元的有效量为0.1mg-100mg。

牛蒡苷元制备成用于治疗动脉粥样硬化或心肌梗死药物时，可以采用合适的给药途径给药，如口服给药、注射给药或者制备成外用制剂局部用药。口服给药时优选将牛蒡苷元制备成片剂、胶囊剂、颗粒剂、口服液或口服微乳制剂，每日的用量为0.001～100mg/kg。注射给药时，优选将牛蒡苷元制备成注射微乳、注射液等，每日的用量为0.001～25mg/kg。对于裸露在体表外部的血管生成性疾病，如皮肤瘤、黑色素瘤等，牛蒡苷元还可以制备成局部外用制剂给药，优选的制剂为搽剂、凝胶剂、膏剂、软膏剂、霜剂等，每日用量为0.01～200mg/kg。上述制剂均采用各种制剂常规的药用辅料按照常规的制备工艺制备。

牛蒡苷元用于制备治疗动脉粥样硬化或心肌梗死的药物时，以口服微乳制剂不良反应最小，效果最佳。本发明将牛蒡苷元制备成的微乳制剂，包括牛蒡苷元和微乳载体，平均粒径为15-90nm，牛蒡苷元与微乳载体组成牛蒡苷元的微乳浓缩物。其中牛蒡苷元的微乳浓缩物以辛葵酸甘油脂为油相、以壬烷基酚聚氧乙烯醚作为乳化剂、以1，2-丙二醇作为助乳化剂的微乳载体制成。

牛蒡苷元制成微乳后能够有效提高药物的溶解度，提高生物利用度，经口服给药后可经淋巴管吸收，克服首过效应及通过胃肠道上皮细胞膜的障碍，起效迅速，此外该剂型还适合不能吞服固体制剂的患者服用。本发明制备的微乳制剂由于其粒径小，吸收快，亦可以通过注射方式给药。

本发明所公开的的牛蒡苷元治疗动脉粥样硬化或心肌梗死疾病的用途，与现有技术相比具有以下治疗优势：

1、本发明中药效实施例10证明了牛蒡苷元在很低的药物浓度下即可显著抑制血管生成情况，且呈现剂量依赖性。故牛蒡苷元用于治疗动脉粥样硬化或心肌梗死时，用量小，作用明显。

2、本发明实施例11中证明了在兔动脉粥样硬化模型中，牛蒡苷元具有良好的降脂作用，在减轻动脉粥样硬化炎症反应、抑制斑块发展方面也有良好的效果，能够有效的治疗动脉粥样硬化。本发明的实施例12中证明在大鼠心肌梗死模型中，牛蒡苷元对动脉粥样硬化造成的心肌梗死有良好的治疗效果，能够有效减轻心肌损伤程度。

3、由于牛蒡苷元为天然提取产物，牛蒡苷元用于动脉粥样硬化或心肌梗死相关疾病治疗时，副作用和不良反应率低，不但可以降低患者的用药费用，而且可以提高患者的用药依从性。

4、牛蒡苷元用于动脉粥样硬化或心肌梗死相关疾病治疗时，其直接作用于血管生成，血管生成为许多疾病的发病病因和诱发因素，故其治愈后复发几率低，可以大大提高患者的生存率。

5、牛蒡苷元用于动脉粥样硬化或心肌梗死相关疾病治疗时，可以制备成多种用药剂型以适应不同适应症的治疗需要。故其可制备的制剂种类多，用药适应症广，可降低并发症的发生，具有重要的医学应用前景。

附图说明

附图1为阴性对照组(未用牛蒡苷元)的CAM血管生成形态观察。

附图2为牛蒡苷元低剂量组的CAM血管生成形态观察。

附图3为牛蒡苷元中剂量组的CAM血管生成形态观察。

附图4为牛蒡苷元高剂量组的CAM血管生成形态观察。

附图5为动脉粥样硬化模型硬化形态学观察。

附图6为牛蒡苷元高剂量组动脉粥样硬化形态学观察。

附图7为心肌梗死模型组形态学观察。

附图8为牛蒡苷元低剂量心肌梗死形态学观察。

附图9为牛蒡苷元中剂量心肌梗死形态学观察。

附图10为牛蒡苷元高剂量心肌梗死形态学观察。

具体实施方式

下面以具体实验进一步说明本发明，但应该理解，本发明实施例并不以任何方式限制本发明。

实施例1片剂的制备

制备工艺：将牛蒡苷元和辅料微晶纤维素、羧甲基淀粉钠混合均匀，加入适量的淀粉浆制软材，然后过16目筛制粒。湿颗粒在60℃干燥，干颗粒过20目筛整粒，筛出干粒中的细粉，与硬脂酸镁混匀，然后再与干颗粒混匀，压片，每片约200mg，即得。

实施例2注射液的制备

牛蒡苷元                    10g

吐温80                      1g

石蜡注射用水                1000mL

制备工艺：将10g牛蒡苷元和1g吐温混合均匀，加注射用水至1000mL，分装即得。

实施例3胶囊的制备

牛蒡苷元                    100g

乳糖                        120g

玉米淀粉                    130g

硬脂酸镁                    5g

制备工艺：将牛蒡苷元100g，乳糖120g和玉米淀粉130g在混合机中混合10-15分钟，加入硬脂酸镁5g混合1～3分钟，装入1000粒胶囊壳即可。

实施例4凝胶剂的制备

制备工艺：将卡波姆缓慢加入到处方量50％左右的水，边加边搅拌直至形成透明的凝胶基质，将牛蒡苷元加入处方量丙二醇中，搅拌均匀，再加入基质中，搅拌均匀，加入甘油、纯化水至全量，三乙醇胺调节PH值至中性，即得。

实施例5微乳浓缩物

制备工艺：称取处方量中链脂肪酸甘油酯、聚氧乙烯蓖麻油EL-40、1，2-丙二醇、无水乙醇，混合后搅拌均匀，然后加入牛蒡苷元溶解，也可以超声波处理以加速溶解，得澄清浓缩液，即为牛蒡苷元微乳浓缩物。

实施例6微乳浓缩物

组分	重量/g
		牛蒡苷元	10
PEG-2-硬脂酸酯	85
		聚氧乙烯蓖麻油EL-40	60
1，2-丙二醇	60

制备工艺同实施例5。

实施例7微乳浓缩物

组分	重量/g
		牛蒡苷元	1
月桂酰基聚乙二醇-32-甘油酯	20
		聚氧乙烯蓖麻油EL-40	35
1，2-丙二醇	15

制备工艺同实施例5。

实施例8微乳浓缩物

组分	重量/g
		牛蒡苷元	1
氢化椰油甘油酯	5
		月桂酰基聚乙二醇-32-甘油酯	20
1，2-丙二醇	5
		聚乙二醇3350	20

制备工艺：称取处方量氢化椰油甘油脂、月桂酰基聚乙二醇-32-甘油酯、1，2-丙二醇、聚乙二醇3350，混合后搅拌均匀，然后加入牛蒡苷元溶解，也可以超声波处理以加速溶解，得澄清浓缩液，即为牛蒡苷元微乳浓缩物。

实施例9微乳浓缩物

组分

重量/g

牛蒡苷元	5
		PEG-2-硬脂酸酯	30
吐温-20	50
		1-己醇	20
PEG3350	25

称取处方量PEG-2-硬脂酸酯、吐温-20、1-己醇、PEG3350混合后搅拌均匀，然后加入牛蒡苷元溶解，也可以超声波处理以加速溶解，得澄清浓缩液，即为牛蒡苷元微乳浓缩物。实施例10牛蒡苷元对鸡胚绒毛尿囊膜血管生成的抑制作用

1.实验材料

海兰褐种鸡蛋共50个，蛋重(65±10g)，临沂大成种禽有限公司提供，种蛋洗净，75％乙醇擦拭干净、晾干，置生化培养箱在(38±0.5)℃、相对湿度65％-70％环境中孵育，每日早晚各翻转一次。从第3天起于检卵灯下观察种蛋生长情况，无血管出现者退出实验(未受精、弱精、散黄及死蛋)；牛蒡苷元微乳剂(自制)。

2.实验方法

2.1实验分组：鸡胚发育至第8天，随机分为4组。

2.2 CAM模型建立：

2.2.1假气室的制备：

孵育第8天，酒精消毒气室(大头端)表面2cm×3cm区域，用牙科砂轮在蛋壳表面划出凹痕，用眼科弯镊小心揭去蛋壳，形成1.5cm×1.5cm的小窗。然后用一次性注射器(1mL在CAM上滴一滴生理盐水，用注射器针头透过盐水滴在气室膜上轻轻点刺一下，然后用针头小心推开气室膜并及时用眼科弯镊夹住，在注射针头协助下，轻轻揭去气室膜，使CAM完全暴露，开窗成功的鸡胚随机分组。

2.2.2药物载体的制备：

用移液枪吸取各浓度组的牛蒡苷元溶液各10μL，加于载体上，用生理盐水作为阴性对照。将各组载体放入培养皿中，再置于生物安全柜中风干。

2.2.3药物载体的植入：

将载体置于CAM中央血管稀少区，用无菌透明胶带密封窗后继续孵育，观察鸡胚的存活情况。

2.2.4结果的观察：

鸡胚发育48h后，由观察窗加入甲醇/丙酮等体积混合固定液预固定15min，待CAM的血管完全凝固后，以载体为中心完整剪下CAM，置于生理盐水的培养皿中，拍照。

2.2.5检测指标及方法：

按表1就药物对CAM血管生成的影响进行等级评估，记录载体边缘5mm内的血管数，并根据下列公式计算血管抑制率(inhibition rate，IR)。

IR％＝[阴性对照组血管平均数-实验组血管平均数/阴性对照组血管平均数]×100％，凡属趋向性生长的血管，即为载体从中心发出，与滤膜半径的夹角小于45°者均予以计数，而穿行、绕行的血管则不算在内。

2.3统计学处理：

对等级评定结果进行等级分组资料的秩和检验，比较各组对CAM血管生成的影响。采用SPSS13.0统计软件，CAM载体边缘的微血管数以均数±标准差(χ±s)表示，采用One-WayANOVY单因素方差分析，比较组间差异，P＜0.05为有显著差异。

3.实验结果

3.1牛蒡苷元对CAM血管生成影响的形态学观察

从本发明的附图可以看出，阴性对照组(附图1所示)血管明显生长，可见尿囊膜血管排列成车辐状，类似树叶的叶脉状分布，大血管和小血管都明显发育。与对照组相比较，牛蒡苷元低剂量组(附图2所示)仅载体覆盖区内部分血管生成被抑制，牛蒡苷元中剂量组(附图3所示)载体覆盖区内以及周围血管部分血管生成均被抑制，牛蒡苷元高剂量组(附图4所示)的血管生成明显受抑制，载体覆盖区及周围血管网模糊，颜色变浅，血管分支处多出断裂，密度减少，新生血管被破坏，出现溶血现象，甚至未见血管，出现空斑。可见，牛蒡苷元能够表现出很强的血管生成抑制活性，并呈现剂量依赖性，即随着血浆中牛蒡苷元浓度增大，其血管抑制活性越强。

3.2牛蒡苷元对CAM血管生成影响的等级评定

表1 药物对CAM生成影响的判断标准

表2 牛蒡苷元对CAM血管生成的影响统计(个)

由表2可见，各组鸡胚的血管生长状态等级不同，中剂量组与高剂量组为3+和4+阴性对照组和低剂量组都明显增加，经检验发现，中、高剂量组与阴性对照组比较有显著差异(P＜0.05)，说明牛蒡苷元对CAM血管新生有一定的抑制作用，并跟剂量正相关。

3.3牛蒡苷元对CAM血管密度的影响

表3 牛蒡苷元各剂量组作用CAM后膜上血管数统计(χ±s)

通过比较(表3)，与阴性对照组相比较，低剂量组显著性差异(P＜0.05)，而中、高剂量组的血管数有极显著性差异(P＜0.01)。与低剂量组相比，中剂量组的血管数差异显著(P＜0.05)，高剂量组的微血管数差异极显著(P＜0.01)，低、中和高剂量组的抑制率分别达到19.04％、52.17％和72.95％。血管统计的差异性比较和等级评定一致，提示牛蒡苷元具有抑制血管生成的作用并跟剂量正相关。

实施例11牛蒡苷元微乳对兔颈动脉粥样硬化抑制作用

1.实验目的

验证牛蒡苷元微乳对兔颈动脉粥样硬化抑制作用。

2.受试药物

牛蒡苷元微乳：由山东新时代药业有限公司提供，根据实施例6配制而成，浓度为50mg/ml，使用前用纯化水稀释为2.5mg/ml、7.5mg/ml和22.5mg/ml。

3.组别设置与给药

3.1剂量设置(见表4)

表4 剂量设置

4.实验方法

取40只健康新西兰大白兔，体重为2.5～3.0kg，随机分为正常对照组、模型对照组、牛蒡苷元微乳低、中、高剂量组共4组，每组8只，全部雄性，所有动物用记号笔在左耳描记阿拉伯数字以区分个体。动物先行灌胃高脂乳1个月，耳缘动脉取血检测动物TG、TC升高后，戊巴比妥钠30mg/kg耳缘静脉注射麻醉，剔除颈部被毛，消毒、手术暴露动物左侧颈总动脉2.5cm左右，用动脉夹先后夹闭血管近心端与远心端，两端之间保留血管长度为2cm左右，用胰岛素注射针吸取1％浓度月桂酸钠0.1ml注入血管，5min后松开远心端血管夹，棉球压迫止血后再松开近心端，缝合伤口，消毒处理后放回饲养笼。术后连续3天肌肉注射80万单位青霉素消毒后，开始灌胃给药，给药期限为2个月，每天给药1次，同时每天继续灌胃高脂乳。

5.实验结果

给药两个月后耳缘动脉取血4ml，离心取血清，利用全自动生化分析仪检测血清TG(血脂)、TC(胆固醇)、HDL(高密度脂)、LDL(低密度脂蛋白)，利用酶联免疫法检测MM-9(基质金属蛋白酶-9)、VCAM-1(血管内皮细胞黏附因子)；动物放血处死，取左侧颈总动脉做病理组织学检查，检测颈总动脉动脉粥样硬化程度。

血清生化学结果表明，与空白对照组相比，模型组HDL显著降低，其它指标显著升高，均有统计学差异，表明造模成功；与模型组相比，牛蒡苷元微乳组HDL显著升高，其它各项指标显著降低；与模型组比较，牛蒡苷元微乳各剂量组MM-9和VCAM-1均显著降低，有统计学差异(P＜0.05)，表明牛蒡苷元微乳组有良好的抗炎效果(见表5)。

病理组织学结果显示模型组动物局部血管内皮出现破坏，内皮下见泡沫细胞聚集灶，泡沫细胞体积大，圆形，胞浆内有大量空泡(见图5)。牛蒡苷元微乳各剂量组未见血管新生及平滑肌增生，仅见内皮下有散在的泡沫细胞(见图6)，表明牛蒡苷元微乳对动脉粥样硬化发展有抑制作用。

综上所述，牛蒡苷元微乳能够减轻动脉粥样硬化炎症反应、抑制斑块发展，能够有效的治疗动脉粥样硬化。

表5 牛蒡苷元微乳对兔颈总动脉粥样硬化的抑制作用

注：数据均以

表示

^#与正常对照组相比，p＜0.05；^*与模型对照组相比，p＜0.05；

实施例12牛蒡苷元微乳对大鼠心肌梗死模型心肌的保护作用

1.实验目的

牛蒡苷元微乳对大鼠心肌梗死模型心肌的保护作用。

2.受试药物

牛蒡苷元微乳，由山东新时代药业有限公司提供，根据实施例6配制而成，浓度为50mg/ml，使用前用纯化水稀释为1.25mg/ml、2mg/ml和5mg/ml。

3.组别设置与给药

3.1剂量设置(见表6)

表6 牛蒡苷元微乳对大鼠心肌梗死模型心肌的保护作用试验剂量设置

4.实验方法

清洁级健康大鼠70只，雌雄各35只，体重在230～280g之间，分为假手术组、模型对照组、牛蒡苷元微乳低、中、高剂量组，每组14只，雌雄各7只。3％戊巴比妥钠50mg/kg腹腔注射麻醉，直视下行气管插管，调节动物呼吸机待大鼠呼吸频率与呼吸机一致且稳定后，剔除术区(左胸第3肋间)被毛，消毒、手术暴露心脏，在左心耳边缘进针，肺动脉圆锥处下1mm出阵，结扎左冠状动脉前降支，心脏表面点利多卡因注射剂1～2滴，防止室颤发生，逐层关胸，切口处消毒放回饲养笼。除假手术组只穿线不结扎外，其它动物全部按照上述方法进行手术，术后每只动物肌注青霉素10万单位/天，连续3天。动物术后第2天开始给药，连续给药2周，每天1次。

5实验结果

5.1大鼠存活情况：假手术组动物全部存活，模型对照组、牛蒡苷元微乳低、中、高剂量组分别存活11、12、10、11只动物。

5.2血清生化学检查：所有动物麻醉后腹主静脉取血，3000rpm离心后取血清进行血清生化学检查，结果见表7，结果显示与假手术组相比，模型对照组AST、CKMB、LDH升高有统计学差异(P＜0.05)，表明造模成功；与模型组比较牛蒡苷元微乳组上述指标均有降低并有统计学差异(P＜0.05)，表明两者对心肌梗死均有治疗效果。

表7 血清生化学检查结果

注：数据均以

表示

^#与假手术组相比，p＜0.05；^*与模型对照组相比，p＜0.05；

5.3病理学检查：所有存活动物麻醉放血处死后，取心脏进行病理组织学检查。结果显示假手术组心肌纤维排列规则，无炎性浸润，无纤维组织增生。模型组在心肌组织出现大面积凝固性坏死，细胞核碎裂或消失，胞浆裂解，呈均质红染或不规则颗粒状，间质水肿伴炎细胞浸润(图7)，表明模型成功。牛蒡苷元微乳各剂量组心肌坏死面积减小，坏死区可见纤维组织增生及胶原化，瘢痕组织形成，有剂量关系(见图8、9、10)，表明牛蒡苷元微乳对心肌梗死均有治疗效果。

5.4综上所述，我们认为牛蒡苷元微乳对动脉粥样硬化造成的心肌梗死有良好的治疗效果，能够有效减轻心肌损伤程度。

Claims (8)

1.牛蒡苷元在制备治疗动脉粥样硬化或心肌梗死药物中的用途。

2.如权利要求1所述的用途，其特征在于牛蒡苷元具有抑制动脉粥样硬化斑块内新生血管生成的作用。

3.如权利要求2所述的用途，其特征在于牛蒡苷元每天的给药量为0.001mg/kg～200mg/kg。

4.如权利要求1-3所述的用途，其特征在于牛蒡苷元为口服制剂、注射制剂或外用制剂。

5.如权利要求4所述的用途，其特征在于所述制剂中牛蒡苷元的含量为0.1mg～100mg。

6.如权利要求4所述的用途，其特征在于所述口服制剂选自片剂、口服微乳制剂、胶囊剂或缓释片；所述注射制剂选自注射微乳制剂或注射液；所述外用制剂选自搽剂、凝胶剂、膏剂、软膏剂或霜剂。

7.如权利要求6所述的用途，其特征在于所述口服制剂为口服微乳制剂。

8.如权利要求1所述的用途，其特征在于所述心肌梗死为动脉粥样硬化引发的心肌梗死。

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