CN103478483A - 一种用于替代对虾饲料中鱿鱼膏或粉的水解鱼蛋白复合物 - Google Patents
一种用于替代对虾饲料中鱿鱼膏或粉的水解鱼蛋白复合物 Download PDFInfo
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Abstract
本发明涉及一种水解鱼蛋白复合物，用于替代对虾饲料中的鱿鱼膏或粉。以重量百分含量计，该复合物由以下原料组分制成：30%-60%水解鱼蛋白粉、30%-60%蛋黄粉及1%-10%牛磺酸。该复合物的制备方法包括：（1）制备水解鱼蛋白粉；（2）复合物的制备。经证实，本发明的水解鱼蛋白复合物，能完全替代鱿鱼膏（粉），利用本发明的水解鱼蛋白复合物制备的对虾饲料，与普通对虾饲料相比，饲养效果没有任何显著性差异，并且利用本发明的水解鱼蛋白复合物制备的对虾饲料，更加的安全环保，鱿鱼膏（粉）中含有的重金属镉不会通过对虾进入人体，不会危害人体健康，同时还能缓解鱿鱼资源紧张的问题。
Description
技术领域
本发明涉及一种饲料中的蛋白复合物，具体涉及一种水解鱼蛋白复合物，用于替代对虾饲料中的鱿鱼膏或鱿鱼粉。
背景技术
一直以来，鱿鱼膏或粉是对虾饲料中几乎必不可少的组成部分，主要原因在于：（1）鱿鱼膏或粉富含卵磷脂和胆固醇，饲料中若缺乏磷脂和胆固醇,对虾将不能完成蜕壳，从而导致高死亡率；（2）鱿鱼膏或粉富含诱食因子（游离氨基酸、牛磺酸等），在很大程度上能促进对虾的索饵和摄食行为，提高饲料的适口性和利用率。因此，鱿鱼膏或粉是保证对虾饲料品质的一个重要因素。
鱿鱼膏或粉主要是由鱿鱼片加工后所剩的内脏经蒸煮浓缩制得，内脏是鱿鱼在其生活史中富集海洋重金属的最主要部位，研究表明，鱿鱼膏或粉制品中的镉含量平均高达80-200mg/kg。众所周知，镉的危害性极大，蓄积性强，不仅会危及对虾健康和生态系统安全，更会由于其在对虾体内的残留而引起食品安全事故。按照目前对虾饲料生产平均添加重量百分比5%的鱿鱼膏或粉，我国平均年产对虾饲料约150万吨计算，估计每年因此而向对虾养殖生态系统输入重金属镉约10000公斤。镉不仅危害对虾的肝胰腺健康和内分泌调节功能，严重影响对虾的生态安全，而且镉也易在对虾体内蓄积，被人食用后对人体健康产生危害。广东省农贸市场对活虾抽检表明，目前对虾的平均镉含量达0.47mg/kg湿重（0.04mg～1.39mg/kg)（深圳疾控中心），或0.62mg/kg湿重（0.02mg～2.38mg/kg）（广州疾控中心）。这意味着，成人每天食用超过100克对虾，重金属镉的摄入量重就会超出CCFAC（国际食品添加剂和污染物法典委员会）推荐的安全限量标准（＜60μg/天/60Kg体重）。因此，鱿鱼膏（粉）是影响对虾养殖生态与食用安全的重要的潜在不利因素。
不仅如此，鱿鱼远洋资源枯竭已成为全球性的大趋势，2011年，我国鱿鱼远洋捕捞量仅为40万吨，产生内脏约为10万吨，估计可生产3万吨左右的鱿鱼膏或粉，如果添加至对虾饲料中的比例按平均5%重量百分比计算，可满足60万吨左右对虾饲料的生产，但是，2012年的对虾饲料总产量达到150万吨，缺口相当大，这一现实也使得鱿鱼膏或粉掺假之风盛行。因此，鱿鱼膏（粉）替代物的开发对于我国对虾的养殖生态安全与食用安全、对虾饲料行业的可持续发展等均具有重要的社会和经济意义。
到目前为止，专门针对对虾饲料中的鱿鱼膏或粉的替代物的研究报道和应用还是空白。而在鱿鱼膏或粉诱食性方面，在对虾中仅有一篇报道DMPT（二甲基丙酸噻亭）的诱食性和鱿鱼膏或粉相当（赵红霞，2004），另有一篇报道是关于商品诱食剂（未公开具体成份）和鱿鱼膏在牙鲆上的诱食效果的比较（梁萌青，2004）。
发明内容
针对以上不足，本发明提供一种安全的水解鱼蛋白复合物，用于替代对虾饲料中的鱿鱼膏或鱿鱼粉，从而提供一种安全的对虾饲料，实现对虾健康养殖与食用安全。
本发明通过以下方案达到上述目的：
一种用于替代对虾饲料中鱿鱼膏或粉的水解鱼蛋白复合物，以重量百分含量计，由以下原料组分制成：30%-60%水解鱼蛋白粉、30%-60%蛋黄粉及1%-10%牛磺酸。
优选的一种水解鱼蛋白复合物，以重量百分含量计，由以下原料组分制成：40%水解鱼蛋白粉、55%蛋黄粉及5%牛磺酸。
优选的，上述水解鱼蛋白粉是由低值鱼类或鱼产品加工下脚料经水解后制得，所述水解鱼蛋白粉中的游离氨基酸占水解鱼蛋白粉中的总氨基酸的重量百分含量为≥15%。低值小鱼是指规格小（通常小于100克/尾）无食用价值同时没有任何经济价值的鱼类，不限品种。鱼产品加工下脚料是指在加工罐头、鱼片和熟食制品过程中产生的头、尾、皮、鳍、内脏和碎肉等，不限鱼的品种，例如金枪鱼罐头加工的下脚料。
进一步地，上述水解鱼蛋白粉的是通过以下方法制备而得：低值小鱼类或鱼产品加工下脚料磨碎过20～40目筛，调节固形物含量10～20%，用1M氢氧化钠调节PH至6～8，加入木瓜蛋白酶，按300～1500IU/克干物质底物剂量添加，55℃，2～8小时，用1M氢氧化钠调节PH至8～11，加入碱性蛋白酶，按300～1500IU/克干物质底物剂量添加，55℃，2～8小时，升温至90℃保持10分钟，喷雾干燥成粉。其中，在计算加入木瓜蛋白酶和碱性酶的量时，是按照原料（底物）的干物质的量来计算，干物质的质量百分含量的计算方法为100%-水份质量百分含量，而水份质量百分含量按国家标准方法测定GB/T6435饲料中的水分测定方法来测定。
在另一个优选的实施例中，上述牛磺酸的纯度≥99%，蛋黄粉中所含的胆固醇含量≥20克/Kg，以重量百分比计，所含的粗脂肪≥50%，所含的磷脂含量≥10%。
上述蛋黄粉与牛磺酸均可在市场买到。
一种制备上述水解鱼蛋白复合物的方法，包括以下步骤：
（1）制备水解鱼蛋白粉：低值鱼类或鱼产品加工下脚料磨碎过20～40目筛，调节固形物含量10～20%，用1M氢氧化钠调节PH至6～8，加入木瓜蛋白酶，按300～1500IU/克底物剂量添加，55℃，2～8小时，用1M氢氧化钠调节PH至8～11，加入碱性蛋白酶，按300～1500IU/克底物剂量添加，55℃，2～8小时，升温至90℃保持10分钟，喷雾干燥成粉；
（2）复合物的制备：将水解鱼蛋白粉、蛋黄粉及牛磺酸进行复配混合，制粒加工。
优选的一种制备方法，上述步骤（1）中的木瓜蛋白酶为20000IU/克，所述碱性蛋白酶为20000IU/克。
本发明提供的用于替代对虾饲料中鱿鱼膏或粉的水解鱼蛋白复合物，其主原理是围绕鱿鱼膏（粉）在对虾养殖中所起的关键功能来设计:1、鱿鱼膏（粉）富含诱食因子（游离氨基酸、牛磺酸等），在很大程度上能促进对虾的索饵和摄食行为，提高饲料的适口性和利用率；2、鱿鱼膏（粉）富含卵磷脂和胆固醇，饲料中若缺乏磷脂和胆固醇，对虾不能完成蜕壳，而导致高死亡率。
鱿鱼膏（粉）经替代后，本发明采用低值鱼类经恰当水解后得到水解鱼蛋白作为对虾诱食剂，主要基于水解鱼蛋白富含游离核苷酸及氨基酸，但至今尚无水解鱼蛋白应用于对虾饲料改善诱食性效果尚无报道，更没有在对虾饲料中利用水解鱼蛋白替代鱿鱼膏（粉）的技术研究。蛋黄粉富含胆固醇和卵磷脂，因此非常适宜作为鱿鱼膏（粉）促进对虾蜕壳的功能的替代物，发明人发现，到目前为止，蛋黄粉还从没有作为对虾饲料在饲料生产中应用过，更末见蛋黄粉用作替代对虾饲料中鱿鱼膏（粉）的技术在本领域公开。
经试验证实，本发明提供的水解鱼蛋白复合物，能完全替代鱿鱼膏（粉），利用本发明的水解鱼蛋白复合物制备的对虾饲料，与普通对虾饲料相比，饲养效果没有任何显著性差异，并且利用本发明的水解鱼蛋白复合物制备的对虾饲料，更加的安全环保，避免目前对虾饲料所用的鱿鱼膏（粉）中的重金属镉通过对虾进入人体，从而不会危害人体健康，同时还能缓解鱿鱼资源紧张的问题。本发明对对虾产生具有非常重要和积极的作用，能极大推动对虾产业的发展。
具体实施方式
以下结合具体实施例对本发明进行进一步说明。
实施例1：一种用于替代对虾饲料中鱿鱼膏或粉的水解鱼蛋白复合物及制备方法
制备方法：
制备水解鱼蛋白粉：低值小鱼200公斤（实测干物质含量25%）磨碎过40目筛，加水调节固形物含量15%，用1M氢氧化钠调节PH至6.5，加入木瓜蛋白酶（200，000IU/克）150克（按所需酶量为600IU/克（底物）干物质添加），55℃，水解4小时，用1M氢氧化钠调节PH至10.0，加入碱性蛋白酶（200,000IU/克）150克（按所需酶量为600IU/克（底物）干物质添加），55℃，水解4小时，升温至90℃保持10分钟，喷雾干燥成粉得到40公斤的水解鱼蛋白粉（水份4.2%），经分析，该水解鱼蛋白粉的氨基酸组成如表1所示。
其中，干物质的质量百分含量的计算方法为100%-水份质量百分含量，而水份质量百分含量按国家标准方法测定GB/T6435饲料中的水分测定方法来测定。
表1：制备得到的水解鱼蛋白的氨基酸组成
| 名称 | 游离氨基酸（%） | 总氨基酸（%） |
| Asp | 2.00 | 5.92 |
| Thr | 1.16 | 2.72 |
| Ser | 1.00 | 2.48 |
| Glu | 2.56 | 9.32 |
| Gly | 0.72 | 4.44 |
| Ala | 1.72 | 4.28 |
| Val | 1.48 | 3.12 |
| Met | 0.8 | 1.84 |
| Ile | 1.36 | 2.68 |
| Leu | 2.32 | 4.64 |
| Tyr | 1.24 | 2.12 |
| Phe | 1.48 | 2.48 |
| Lys | 1.72 | 5.04 |
| His | 0.68 | 1.48 |
| Arg | 1.36 | 3.96 |
| 总量 | 21.6 | 56.48 |
（2）复合物的制备：取上述水解鱼蛋白粉40份，市售蛋黄粉（实测值粗脂肪55%，总磷脂含量14%，胆固醇1.6%）55份，牛磺酸（纯度99.8%）5份，混合均匀，制粒加工，即得到100公斤水解鱼蛋白复合物。
实施例2：一种用于替代对虾饲料中鱿鱼膏或粉的水解鱼蛋白复合物及制备方法
（1）制备水解鱼蛋白粉：低值小鱼600公斤（实测干物质含量25%）磨碎过40目筛，加水调节固形物含量20%，用1M氢氧化钠调节PH至6.2，加入木瓜蛋白酶（200,000IU/克）225克（按所需酶量为300IU/克（底物）干物质添加），55℃，水解4小时，用1M氢氧化钠调节PH至10.0，加入碱性蛋白酶（200,000IU/克）225克（按所需酶量为300IU/克（底物）干物质添加），55℃，水解4小时，升温至90℃保持10分钟，喷雾干燥成粉得到110公斤的水解鱼蛋白粉（水份4.6%），经分析，该水解鱼蛋白粉的氨基酸组成如表2所示。
其中，干物质的质量百分含量的计算方法为100%-水份质量百分含量，而水份质量百分含量按国家标准方法测定GB/T6435饲料中的水分测定方法来测定。
表2：制备得到的水解鱼蛋白的氨基酸组成
| 名称 | 游离氨基酸（%） | 总氨基酸（%） |
| Asp | 2.00 | 5.62 |
| Thr | 1.16 | 2.82 |
| Ser | 1.00 | 2.58 |
| Glu | 2.56 | 9.32 |
| Gly | 0.61 | 4.54 |
| Ala | 1.61 | 4.18 |
| Val | 1.48 | 3.02 |
| Met | 0.70 | 1.94 |
| Ile | 1.26 | 2.68 |
| Leu | 2.32 | 4.74 |
| Tyr | 1.22 | 2.22 |
| Phe | 1.42 | 2.38 |
| Lys | 1.71 | 5.04 |
| His | 0.61 | 1.38 |
| Arg | 1.30 | 3.86 |
| 总量 | 19.04 | 56.28 |
（2）复合物的制备：取上述水解鱼蛋白粉50份，市售蛋黄粉（实测值粗脂肪55%，总磷脂含量12%，胆固醇1.7%）47份，牛磺酸（纯度99.8%）3份，混合均匀，制粒加工，即得到220公斤水解鱼蛋白复合物。
实施例3：对比实验
利用普通的鱿鱼膏制备A组对虾饲料，并利用实施例1的水解鱼蛋白复合物替代A组中的鱿鱼膏来制备B组对虾饲料。A组和B组对虾饲料的配方如表3所示。
表3：A组和B组对虾饲料的配方表（单位：%）
在对虾饲料生产线的混合机中，按照表3的组分以及各组分含量分别生产A组对虾饲料（含鱿鱼膏）以及B组对虾饲料（无鱿鱼膏）各4吨，通过以下方法对两组饲料的饲料系数以及成活率进行检测，检测结果如表4所示。
检测方法：选用360尾健康均匀的虾苗随机分组于12个容积为300L的循环流水过滤水族箱中进行养殖试验，试验设为2个处理，每个处理6个重复，每个重复30尾，试验期间每日投喂2次，投喂时间为9：00和16：00，根据虾生长情况，调节投喂量，实行饱食投喂，一般为虾总重的6～10%。实验水源为经沙滤、消毒后的天然海水，盐度4～5‰，养殖过程中，增氧机持续增氧，溶氧>7.0mg/L，氨氮<0.02mg/L。试验结束前24h停止投喂。试验结束时称重，计数，分别计算增重率、摄食率、存活率。
试验结果采用SPSS13.0统计软件进行统计分析，经单因子方差分析后处理后若有显著差异，再进行邓肯氏多重比较，显著性水平P采用0.05。
表4：A组和B组对虾饲料的对比结果表
（差异不显著，P>0.05）
从上表可以看出，4%的水解鱼蛋白复合物可完全替代5%的鱿鱼膏，对摄食和增重均无显著影响，同时不影响对虾的存活率和饲料系数。
实施例4：对比实验
利用普通的鱿鱼膏制备C组对虾饲料，并利用实施例2的水解鱼蛋白复合物替代C组中的鱿鱼膏来制备D组对虾饲料。C组和D组对虾饲料的配方如表5所示。
表5：C组和D组对虾饲料的配方表（单位：%）
在对虾饲料生产线的混合机中，按照表5的组分以及各组分含量分别生产C组对虾饲料（含鱿鱼膏）以及D组对虾饲料（无鱿鱼膏）各4吨，利用实施例3的方法对两组饲料的饲料系数以及成活率进行检测，检测结果如表6所示。
表6：C组和D组对虾饲料的对比结果表
（差异不显著，P>0.05）
从上表可以看出，5%的水解鱼蛋白复合物可完全替代6%的鱿鱼膏，对摄食和增重均无显著影响，同时不影响对虾的存活率和饲料系数。
以上所述，仅为本发明的较佳的具体实施例，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本发明的保护范围内。
Claims (7)
1.一种用于替代对虾饲料中鱿鱼膏或粉的水解鱼蛋白复合物，其特征在于，以重量百分含量计，由以下原料组分制成：30%-60%水解鱼蛋白粉、30%-60%蛋黄粉及1%-10%牛磺酸。
2.如权利要求1所述的一种用于替代对虾饲料中鱿鱼膏或粉的水解鱼蛋白复合物，其特征在于，以重量百分含量计，由以下原料组分制成：40%水解鱼蛋白粉、55%蛋黄粉及5%牛磺酸。
3.如权利要求1-2中任一权利要求所述的一种用于替代对虾饲料中鱿鱼膏或粉的水解鱼蛋白复合物，其特征在于，所述水解鱼蛋白粉是由低值鱼类或鱼产品加工下脚料经水解后制得，所述水解鱼蛋白粉中的游离氨基酸占水解鱼蛋白粉中的总氨基酸的重量百分含量为≥15%。
4.如权利要求3所述的一种用于替代对虾饲料中鱿鱼膏或粉的水解鱼蛋白复合物，其特征在于，所述水解鱼蛋白粉是通过以下方法制备而得：低值鱼类或鱼产品加工下脚料磨碎过20～40目筛，调节固形物含量10～20%，用1M氢氧化钠调节PH至6～8，加入木瓜蛋白酶，按300～1500IU/克底物剂量添加，55℃，2～8小时，用1M氢氧化钠调节PH至8～11，加入碱性蛋白酶，按300～1500IU/克底物剂量添加，55℃，2～8小时，升温至90℃保持10分钟，喷雾干燥成粉。
5.如权利要求4所述的一种用于替代对虾饲料中鱿鱼膏或粉的水解鱼蛋白复合物，其特征在于，所述牛磺酸的纯度≥99%，蛋黄粉中所含的胆固醇含量≥20克/Kg，以重量百分比计，所含的粗脂肪≥50%，所含的磷脂含量≥10%。
6.一种制备如权利要求1-5中任一权利要求所述的用于替代对虾饲料中鱿鱼膏或粉的水解鱼蛋白复合物的方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）制备水解鱼蛋白粉：低值鱼类或鱼产品加工下脚料磨碎过20～40目筛，调节固形物含量10～20%，用1M氢氧化钠调节PH至6～8，加入木瓜蛋白酶，按300～1500IU/克干物质底物剂量添加，55℃，2～8小时，用1M氢氧化钠调节PH至8～11，加入碱性蛋白酶，按300～1500IU/克干物质底物剂量添加，55℃，2～8小时，升温至90℃保持10分钟，喷雾干燥成粉；
（2）复合物的制备：将水解鱼蛋白粉、蛋黄粉及牛磺酸进行复配混合，制粒加工。
7.一种如权利要求6所述的的水解鱼蛋白复合物的制备方法，其特征在于，所述步骤（1）中的木瓜蛋白酶为20000IU/克，所述碱性蛋白酶为20000IU/克。
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