CN103461128A - 一种香橼的快速繁殖方法 - Google Patents

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杨存
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Abstract

本发明公开了一种香橼的快速繁殖方法。包括无菌苗的获得,增殖培养,生根培养,炼苗移栽等步骤。采用本发明所建立的香橼快速繁殖的组培体系,解决了香橼生长周期长,繁殖率低等技术难题,达到了增殖系数高,成活率高的要求,最终实现香橼的产业化生产。

Description

一种香橼的快速繁殖方法
技术领域
本发明涉及植物技术领域,具体涉及一种香橼的组培快速繁殖方法。
背景技术
香橼为芸香科常绿小乔木或灌木植物,生于海拔350米到1750米的高温多湿环境。秋季果实成熟时采收。趁鲜切片,除去种子及瓤,晒干或低温干燥。具有治疗胸腹满闷;胁肋胀痛;咳嗽痰多之功效。所含挥发油对胃肠道有温和刺激作用,能促进肠胃里蠕动和消化液分泌,排除肠内积气,并有祛痰作用。此外,可用作砧木,但只可嫁接佛手,对其他种类严格不亲和。香橼作为中药材,目前普遍采用种子进行繁殖,但产量低,生长周期长,现在药用资源正在锐减。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种香橼的组培快速繁殖方法,由该方法所制备得到的香橼组培幼苗生长周期短,增殖系数高,生根率高,成活率高,可以规模化的进行大田生产。
本发明所要解决的技术问题是通过以下方案来实现的:10月选取成熟果实,切开去瓢,取出种子,洗净,晾干,超净工作台上酒精消毒30s,氯化汞消毒20min,无菌水冲洗4-5次,无菌解剖刀去除外种皮,取湿砂质土,121℃高压灭菌20min,冷却,将超净工作台上去除种皮的香橼种子接入灭菌过的砂质土,光照培养一周,获得无菌的香橼幼苗,将无菌香橼幼苗,切去根,接于WPM+2,4-D0.2mg/L+IAA0.3mg/L+柠檬酸2mg/L上进行丛生芽增殖培养,培养2-3代,将生长健壮的丛生芽接入3/4MS+NAA0.3mg/L+活性炭5mg/L培养基中进行生根诱导,生根诱导后取长势大小5cm的香橼幼苗从培养基中取出,洗去根上培养基,转移到装有蛭石培养瓶中,将其放入 27℃培养箱炼苗20 天,移出室外定植。
采用本发明调控出来的试管苗长势好,香橼成活率达92%,周期短,操作可控,香橼的遗传稳定性好,可进行农业扩大化生产。
下面将结合具体实施方式对本发明作进一步阐述,但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。
具体实施方式
实施例1
10月选取成熟果实,切开去瓢,取出种子,洗净,晾干,超净工作台上酒精消毒30s,氯化汞消毒20min,无菌水冲洗4-5次,无菌解剖刀去除外种皮,取湿砂质土,121℃高压灭菌20min,冷却,将超净工作台上去除种皮的香橼种子接入灭菌过的砂质土,光照培养一周,获得无菌的香橼幼苗,将无菌香橼幼苗,切去根,接于WPM+2,4-D0.1mg/L+IAA0.2mg/L+柠檬酸2mg/L上进行丛生芽增殖培养,培养2-3代,将生长健壮的丛生芽接入1/4MS+NAA0.1mg/L+活性炭5mg/L培养基中进行生根诱导,生根诱导后取长势大小5cm的香橼幼苗从培养基中取出,洗去根上培养基,转移到装有蛭石培养瓶中,将其放入 27℃培养箱炼苗20 天,移出室外定植,香橼成活率达84%。
实施例2
10月选取成熟果实,切开去瓢,取出种子,洗净,晾干,超净工作台上酒精消毒30s,氯化汞消毒20min,无菌水冲洗4-5次,无菌解剖刀去除外种皮,取湿砂质土,121℃高压灭菌20min,冷却,将超净工作台上去除种皮的香橼种子接入灭菌过的砂质土,光照培养一周,获得无菌的香橼幼苗,将无菌香橼幼苗,切去根,接于WPM+2,4-D0.3mg/L+IAA0.4mg/L+柠檬酸2mg/L上进行丛生芽增殖培养,培养2-3代,将生长健壮的丛生芽接入3/4MS+NAA0.5mg/L+活性炭5mg/L培养基中进行生根诱导,生根诱导后取长势大小5cm的香橼幼苗从培养基中取出,洗去根上培养基,转移到装有蛭石培养瓶中,将其放入 27℃培养箱炼苗20 天,移出室外定植,香橼成活率达87%。
实施例3
10月选取成熟果实,切开去瓢,取出种子,洗净,晾干,超净工作台上酒精消毒30s,氯化汞消毒20min,无菌水冲洗4-5次,无菌解剖刀去除外种皮,取湿砂质土,121℃高压灭菌20min,冷却,将超净工作台上去除种皮的香橼种子接入灭菌过的砂质土,光照培养一周,获得无菌的香橼幼苗,将无菌香橼幼苗,切去根,接于WPM+2,4-D0.2mg/L+IAA0.4mg/L+柠檬酸2mg/L上进行丛生芽增殖培养,培养2-3代,将生长健壮的丛生芽接入1/2MS+NAA0.3mg/L+活性炭5mg/L培养基中进行生根诱导,生根诱导后取长势大小5cm的香橼幼苗从培养基中取出,洗去根上培养基,转移到装有蛭石培养瓶中,将其放入27℃培养箱炼苗20 天,移出室外定植,香橼成活率达85%。
实施例4
10月选取成熟果实,切开去瓢,取出种子,洗净,晾干,超净工作台上酒精消毒30s,氯化汞消毒20min,无菌水冲洗4-5次,无菌解剖刀去除外种皮,取湿砂质土,121℃高压灭菌20min,冷却,将超净工作台上去除种皮的香橼种子接入灭菌过的砂质土,光照培养一周,获得无菌的香橼幼苗,将无菌香橼幼苗,切去根,接于WPM+2,4-D0.3mg/L+IAA0.4mg/L+柠檬酸2mg/L上进行丛生芽增殖培养,培养2-3代,将生长健壮的丛生芽接入1/4MS+NAA0.1mg/L+活性炭5mg/L培养基中进行生根诱导,生根诱导后取长势大小5cm的香橼幼苗从培养基中取出,洗去根上培养基,转移到装有蛭石培养瓶中,将其放入 27℃培养箱炼苗20 天,移出室外定植,香橼成活率达90%。

Claims (6)

1.一种香橼的快速繁殖方法,其步骤如下:
(1)外植体的处理:取香橼种子,放在光照培养箱中,恒温培养数天,培养无菌苗;
(2)增殖培养:步骤(1)中培养的无菌香橼幼苗,切去根,接于WPM+2,4-D0.1-0.3mg/L+IAA0.2-0.4mg/L+柠檬酸2mg/L上进行丛生芽增殖培养;
(3)生根诱导:将增殖的丛生芽接入1/4-3/4MS+NAA0.1-0.5mg/L+活性炭5mg/L培养基中进行生根诱导;
(4)炼苗移栽到大田进行大规模培养。
2.根据权利要求1所述的一种香橼的快速繁殖方法,其特征在于:无菌苗的获得方法为:10月选取成熟果实,切开去瓢,取出种子,洗净,晾干,超净工作台上酒精消毒30s,氯化汞消毒20min,无菌水冲洗4-5次,无菌解剖刀去除外种皮,取湿砂质土,121℃高压灭菌20min,冷却,将超净工作台上去除种皮的香橼种子接入灭菌过的砂质土,光照培养一周,可获得无菌的香橼幼苗。
3.根据权利要求1所述的一种香橼的快速繁殖方法,其特征在于:在香橼幼苗增殖培养中除加入2,4-D和IAA激素之外,还添加了柠檬酸,防止在增殖过程中褐化现象严重。
4.根据权利要求1所述的一种香橼的快速繁殖方法,其特征在于:香橼幼苗生根培养过程中,加入适当浓度的活性炭既能促进幼苗的生长,又能防止生根过程中的褐化现象。
5.根据权利要求1所述的一种香橼的快速繁殖方法,其特征在于:香橼幼苗生根培养过程中,培养基中营养元素减量,蔗糖含量20g/L,对其进行饥饿处理,有助于根的生长。
6.根据权利要求1所述的一种香橼的快速繁殖方法,其特征在于:香橼幼苗炼苗培养过程中,将香橼幼苗从培养基中取出,洗去根上培养基,转移到装有蛭石培养瓶中,将其放入27℃培养箱炼苗20 天,移出室外定植。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103749297A (zh) * 2013-04-28 2014-04-30 安徽农业大学 一种蝴蝶兰防褐化组培方法及防褐化培养基

Cited By (2)

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