CN103446234A - 多元多相丹参固体自微乳、其在制备药物中的应用及其制备方法 - Google Patents

Abstract

多元多相丹参固体自微乳、其在制备药物中的应用及其制备方法。固体自微乳组合物由丹参多组分提取物、乳化剂、助乳化剂、油相、固体吸附剂组成，各组分的重量比是：丹参多组分提取物：0.1~10g，乳化剂：10~30g，助乳化剂：5~20g，油相：10~30g，固体吸附剂：20~50g。本发明在一种制剂中同时载入了丹参内两种组分（丹参总酮，丹参酚酸类）并提高了丹参内多种成分的体内吸收；本发明可以增加自微乳制剂的稳定性并大大减少表面活性剂的用量，同时提高丹参多组分提取物的生物利用度。

Description

多元多相丹参固体自微乳、其在制备药物中的应用及其制备方法

技术领域

本发明属于医药技术领域，涉及一种抗心血管疾病的多元多相丹固体自微乳、其在制备药物中的应用及其制备方法。即通过制备多元多相固体自微乳来提高丹参多组分提取物的稳定性和生物利用度。

技术背景

丹参为唇形科植物Salvia miltiorrhiza Bge的干燥的根及根茎，具有祛淤止痛、活血调经、清心除烦之功效，在临床上被广泛用于心脑血管系统疾病。丹参具有活血化淤活性的有效部位主要为两大类，即脂溶性的二萜酮类化合物丹参酮I、丹参酮IIA，隐丹参酮等和水溶性的酚酸类成分丹酚酸A、丹酚酸B、丹参素、原儿茶醛等。两类活性成份均表现出抗血小板聚集作用、抗血栓作用、抗氧化损伤作用、抗动脉粥样硬化、缩小心肌梗死面积、降低心肌耗氧量以及防治心肌缺血再灌注损伤等作用。

然而丹参脂溶性成分有菲醒类的片状刚性结构，在水中几乎不溶，生物利用度很低，而水溶性成分由于其稳定性较差又易受P糖蛋白的外排影响，严重影响了药物的临床疗效。微乳化给药系统(MEDDS)作为一种新型的药剂学手段，可以通过将药物丹参的脂溶性成份和水溶性成份分散为10-100nm的小分子，使之容易通过肠道的水化膜，以及增加淋巴转运，抑制P糖蛋白的外排等方式提高其生物利用度。有一些学者将紫杉醇制备微乳，目前大多处于研究阶段，还有很多问题没有解决。例如普通的微乳剂稳定性差，不易于服用，表面活性剂用量过高。为了增加药物的稳定性，提高药物的口服适应性，提高丹参多组分提取物的生物利用度，我们对丹参多组分提取物的新剂型:多元多相丹参固体自微乳进行了全面研究。

将丹参多组分提取物制备成多元多相的固体自微乳后其溶解度，稳定性及生物利用度会明显增加。这是由于多元多相的微乳液由于不同HLB值的乳化剂和不同性状的油类的之间的互补特性，在电镜观察下与普通微乳溶液相比，具有较圆润的形态，使得体系更加均一，实测时具有较高的稳定性。还可使药物的表面活性剂含量减少，并降低毒副作用。此外，固体自微乳还有剂量准确、服用方便、制备简单、性质稳定、适合工业化大规模生产等特点，临床应用前景广阔。但是，由于普通微乳液稳定性差，服用不便以及需要大量的表面活性剂带来的毒副作用，在实际药物制备中面临一些问题，需要寻找新型无毒性的辅料优选合适的比例并使用合适的制备工艺来解决这些问题。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种抗心血管疾病的多元多相丹参固体自微乳、其在制备药物中的应用及其制备方法，本发明在一种制剂中同时载入了丹参内两种组分（丹参总酮，丹参酚酸类）并提高了丹参内多种成分的体内吸收；

本发明可以增加自微乳制剂的稳定性并大大减少表面活性剂的用量，同时提高丹参多组分提取物的生物利用度。

本发明的技术方案如下

一种多元多相丹参固体自微乳，由丹参多组分提取物、乳化剂、助乳化剂、油相、固体吸附剂组成，各组分的重量比是，

丹参多组分提取物：0.1～10g，

乳化剂：10～30g，

助乳化剂：5～20g，

油相：10～30g，

固体吸附剂：20～50g。

本发明推荐以下优化的各组分的重量比：

丹参多组分提取物：1～5g，

乳化剂：15～25g，

助乳化剂：5～10g，

油相：10～20g，

固体吸附剂：40～60g。

其中所述丹参多组分提取物包括丹参素，丹酚酸B，二氢丹参酮I，丹参酮I，隐丹参酮，丹参酮IIA等有效成分。、

所述多元多相丹参固体自微乳，其中所述油相选自：肉豆蔻酸异丙酯，亚油酸甘油酯，油酸甘油酯或辛酸葵酸甘油三酯。乳化剂选自：聚氧乙烯氢化蓖麻油，聚乙二醇硬脂酸酯15，辛酸葵酸聚乙二醇甘油酯，聚乙二醇月桂酸甘油酯，油酸聚乙二醇甘油酯或聚山梨醇酯80。助乳化剂选自二乙二醇单乙基醚，聚乙二醇400或乙醇。所述的固体吸附剂选自：甘露醇、羟丙甲基纤维素或右旋糖苷80。

由于现有技术的普通微乳液稳定性差，服用不便以及需要大量的表面活性剂带来的毒副作用，本发明为提高药物口服适应性及稳定性采用了多元的乳化剂和油相配比以及通过冷冻干燥、喷雾干燥的手段制备成固体自微乳。

完成本申请第二个发明任务的方案是：上述抗心血管疾病的多元多相丹参固体自微乳、其在制备药物中的应用。

完成本申请第三个发明任务的方案是：上述抗心血管疾病的多元多相丹参固体自微乳的制备方法，其特征在于，步骤如下：

⑴.丹参多组分提取物微乳液制备；

⑵.加入相关辅料，混匀；

⑶.提取液经干燥，得固体自微乳；

⑷.灌装，灭菌，即得产品。

步骤⑴中多组分微乳液的制备可以是：⑴-a.直接将丹参饮片用微乳液提取所得；⑴-b.将丹参原料药加入制备好的空白自微乳中再分散入水液中；

步骤⑶所述的干燥，可以是喷雾干燥或冷冻干燥。

优化方案中，在步骤⑵之后，可以增加以下步骤之一：

⑵-a.加入固体吸附剂的成型辅料，磁力搅拌混合均匀（然后进行步骤⑶的干燥）；

⑵-b.加入固体吸附剂的成型辅料，机械搅拌、超声分散，或高压乳匀机分散（然后进行步骤⑶的干燥）。

本发明在一种制剂中同时载入了丹参内两种组分（丹参总酮，丹参酚酸类）并提高了丹参内多种成分的体内吸收；本发明可以增加微乳的稳定性并大大减少表面活性剂的用量，同时提高丹参多组分提取物的生物利用度。

本发明制备的多元多相丹参固体自微乳的优点是：多元多相的微乳液由于不同HLB值的乳化剂和不同性状的油类的之间的互补特性，在电镜观察下与普通微乳溶液相比，具有较圆润的形态，使得体系更加均一，故将丹参多组分提取物制备成多元多相的固体自微乳后其溶解度，稳定性及生物利用度会明显增加。还可使制剂所含表面活性剂含量减少，来降低毒副作用。此外，固体自微乳还有剂量准确、服用方便、制备简单、性质稳定、适合工业化大规模生产等特点，临床应用前景广阔。

所述制剂为水包油型。相对于普通微乳液有较高的化学物理稳定性，减少毒副作用，降低刺激性，提高用药顺应性，弥补了现有制剂的缺点。

附图说明

图1-1、图1-2为马尔文粒径仪的测定结果；

图2为透射电镜的测定结果：其中，

图2-1：只含一种油相，一种表面活性剂处方的电镜形态；

图2-2：只含一种油相，复合表面活性剂处方的电镜形态；

图2-3：多种油相，表面活性剂处方的电镜形态；

图3A～图3-D：固体自微乳制剂和混悬液对照口服后丹参素，丹酚酸B，隐丹参酮，丹参酮IIA在大鼠体内的药时曲线（n=6）。

具体实施方式

下面结合附图对本发明的实施例作详细说明:本实施例在以本发明技术方案为前提下进行实施，给出了详细的实施方式和具体的操作过程，但本发明的保护范围不限于下述的实施例。

实施例1：制备一种多元多相丹参固体自微乳制剂的方法，其组成成分如下：

包括以下步骤：将处方量的药物和辅料混合，加入十倍量的水，磁力搅拌，混合均匀至澄清透明，分装后零下40℃冷冻，放入冷冻干燥机进行冷冻干燥。干燥后所得粉末，灌装，灭菌，编号，即得产品。

实施例2:

包括以下步骤：将处方量的药物和辅料混合，加入十倍量的水，磁力搅拌，混合均匀至澄清透明，分装后零下40℃冷冻，放入冷冻干燥机进行冷冻干燥。干燥后所得粉末，灌装，灭菌，编号，即得产品。

实施例3:

包括以下步骤：将处方量的药物和辅料混合，加入十倍量的水，磁力搅拌，混合均匀至澄清透明，分装后零下40℃冷冻，放入冷冻干燥机进行冷冻干燥。干燥后所得粉末，灌装，灭菌，编号，即得产品。

实施例4

包括以下步骤：将处方量的药物和辅料混合，加入五倍量的水，磁力搅拌，混合均匀至澄清透明，吸入喷雾干燥机喷雾干燥。干燥后所得粉末，灌装，灭菌，编号，即得产品。

实施例5

包括以下步骤：按处方配成空白自微乳，按照药材：自微乳：水5：1：40的比例超声提取1小时提取两次。提取液过滤，旋转薄膜蒸发浓缩，加入固体吸附剂，混合均匀至澄清透明，分装后零下40℃冷冻，放入冷冻干燥机进行冷冻干燥。干燥后所得粉末，灌装，灭菌，编号，即得产品。

实施例6

包括以下步骤：按处方配成空白自微乳，按照药材：自微乳：水5:1:40的比例超声提取1小时提取两次。提取液过滤，旋转薄膜蒸发浓缩，加入固体吸附剂，吸入喷雾干燥机喷雾干燥，干燥后所得粉末，灌装灭菌，编号即得产品。

实施例7：多元多相丹参固体自微乳制剂的再分散性试验。

包括以下步骤：

取制备成的固体自微乳加入20倍量的水液，磁力搅拌至分散均匀，马尔文激光粒度仪测定其粒径和zeta电位，见图1，图2。

马尔文激光粒度仪的粒径分析结果：

由图1可以看出，复溶后测得的平均粒径为50.9nm，粒径分布较窄，分散系数较好，90%以上的液滴粒径在10-100纳米之间，符合自微乳给药系统的要求

实施例8：多元多相丹参固体自微乳制剂的透射电镜形态

包括以下步骤：

将不同配方制备成的微乳液滴在铜网上，用2%磷钨酸液染色，晾干后放入透射电镜观察形态。见图2。

由图2-1，2-2，2-3可以看出，多元多相的微乳液相比只使用一种油相或者一种表面活性剂的微乳液形态圆润，粒径分布均匀。所以多元多相的微乳液会具有更好的自乳化能力和稳定性。

实施例8：为了评价多元多相丹参固体自微乳制剂的成分在体内吸收效果，我们进行了以丹参多组分提取物混悬液为参比制剂的丹参多组分提取物固体自微乳制剂大鼠药代动力学研究。具体实施方案如下：将健康雄性SD大鼠平均分为两组，每组6只，实验前禁食(不禁水)12h，各组分别单剂量灌胃给予丹参固体自微乳制剂(相当于丹参素36mg·kg^-1丹酚酸B288mg·kg^-1丹参酮ⅡA15.42mg·kg^-1隐丹参酮9.6mg·kg^-1)。分别于给药后5、15、30、45、60、90、120、240、360、480、600、720、1440min眼眶后静脉丛取血0.5mL，置于预先准备好的肝素钠抗凝管中，5000r·min^-1离心5min，吸取上清分离血浆，放入-70℃冰箱冷冻保存待测。测前按照2.2项下所筛选的血浆样品处理方法处理，UPLC-MS测定其中丹参素，丹酚酸B，丹参酮IIA，隐丹参酮含量，拟合药时曲线图（见图3-A～图3-D）并计算其相对生物利用度

生物利用度（bioavailability，F）是指药物被机体吸收进入体循环的相对量和速率。分为绝对生物利用度和相对生物利用度，绝对生物利用度是以静脉注射剂为参比标准，而相对生物利用度是剂型之间或同种剂型不同制剂之间的比较研究，本实验中采用相对生物利用度指标来评价多元多相固体自微乳制剂对丹参指标性成分体内的吸收程度。

公式： $F=\frac{{\mathrm{AUC}}_t/{\mathrm{Dose}}_t}{{\mathrm{AUC}}_r/{\mathrm{Dose}}_r}\×100\%$

AUC_t:固体自微乳制剂组的药时曲线下的面积。

Dose_t:混悬液对照组的药物药时曲线下的面积。

AUC_r:固体自微乳制剂组的给药剂量。

Dose_r:混悬液对照组的给药剂量。

根据药动学统计参数计算丹参素，丹酚酸B，隐丹参酮，丹参酮IIA，固体自微乳制剂和混悬液对照组之间的相对生物利用度为：

F_丹参素=174.1%，

F_丹酚酸B=167.6%，

F_隐丹参酮=499.3%，

F_丹参酮IIA=938.2%。

由四种相对生物利用度的结果可知多元多相固体自微乳技术对于丹参药材内的活性成分的体内吸收有显著提高，分别为丹参素提高了74.1%，丹酚酸B提高了67.6%，隐丹参酮399%，丹参酮IIA838%。

实施例9：与实施例1基本相同，但有以下改变：各组分的重量比是，丹参多组分提取物：1g；乳化剂：15g；助乳化剂：5g；油相：10g；固体吸附剂：40g。

实施例10：与实施例1基本相同，但有以下改变：各组分的重量比是，丹参多组分提取物：5g；乳化剂：25g；助乳化剂：10g；油相：20g；固体吸附剂：60g。

实施例11：与实施例1基本相同，但有以下改变：各组分的重量比是，丹参多组分提取物：1g；乳化剂：25g；助乳化剂：5g；油相：20g；固体吸附剂：40g。

实施例12：与实施例1基本相同，但有以下改变：各组分的重量比是，丹参多组分提取物：5g；乳化剂：15g；助乳化剂：10g；油相：10g；固体吸附剂：60g。

以上列举的仅是本发明的若干个具体实施例，从本发明公开的内容推导出的所有变形，均应属于本发明的保护范围。

Claims (10)

1. 一种多元多相丹参固体自微乳，其特征在于，本组合物由丹参多组分提取物、乳化剂、助乳化剂、油相、固体吸附剂组成，各组分的重量比是：

丹参多组分提取物：0.1~10g，

乳化剂：10~30g ，

助乳化剂：5~20g ，

油相：10~30g，

固体吸附剂：20~50g。

2. 根据权利要求1所述的多元多相丹参固体自微乳，其特征在于，各组分的重量比是：

丹参多组分提取物：1~5g

乳化剂：15~25 g

助乳化剂：5~ 10g

油相：10~20g

固体吸附剂：40~60g。

3. 根据权利要求1所述的多元多相丹参固体自微乳，其特征在于，所述丹参多组分提取物包括有丹参素，丹酚酸B，2氢丹参酮I，丹参酮I，隐丹参酮，丹参酮IIA。

4. 根据权利要求1所述的多元多相丹参多组分提取物固体自微乳，其特征在于，

所述油相选自：肉豆蔻酸异丙酯，亚油酸甘油酯，油酸甘油酯或辛酸葵酸甘油三酯；

所述乳化剂选自：聚氧乙烯氢化蓖麻油，聚乙二醇硬脂酸酯15，辛酸葵酸聚乙二醇甘油酯，聚乙二醇月桂酸甘油酯，油酸聚乙二醇甘油酯或聚山梨醇酯80；

所述助乳化剂选自二乙二醇单乙基醚，聚乙二醇400或乙醇；

所述的固体吸附剂选自：甘露醇、羟丙甲基纤维素或右旋糖苷80。

5. 根据权利要求1所述的多元多相丹参固体自微乳，其特征在于，所述多元多相丹参固体自微乳是采用以下方法制备得到的固体自微乳：

⑴. 将丹参药材通过所述配方配制好的微乳液提取；

⑵. 加入相关辅料，混匀；

⑶. 提取液经干燥，得固体自微乳；

⑷. 灌装，灭菌，即得产品。

6. 权利要求1所述的抗心血管疾病的多元多相丹参固体自微乳在制备药物中的应用。

7. 权利要求1所述的抗心血管疾病的多元多相丹参固体自微乳的制备方法，其特征在于，步骤如下：

⑴. 丹参多组分提取物微乳液制备；

⑵. 加入相关辅料，混匀；

⑶. 提取液经干燥，得固体自微乳；

⑷. 灌装，灭菌，即得产品。

8. 根据利要求7所述的抗心血管疾病的多元多相丹参固体自微乳的制备方法，其特征在于，步骤⑴中多组分微乳液的制备操作是：⑴-a.直接将丹参饮片用微乳液提取所得；⑴-b.将丹参多组分提取物原料药加入制备好的空白自微乳中再分散入水液中。

9. 根据利要求7所述的抗心血管疾病的多元多相丹参固体自微乳的制备方法，其特征在于，步骤⑶所述的干燥，是喷雾干燥或冷冻干燥。

10. 根据利要求7或8或9所述的抗心血管疾病的多元多相丹参固体自微乳的制备方法，其特征在于，在步骤⑵之后，增加有以下步骤之一：

⑵-a. 加入固体吸附剂的成型辅料，磁力搅拌混合均匀；

⑵-b. 加入固体吸附剂的成型辅料，机械搅拌、超声分散，或高压乳匀机分散。

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