CN103446154A

CN103446154A - 香豆素衍生物在防治脑部重大疾病中的应用

Info

Publication number: CN103446154A
Application number: CN2012101729109A
Authority: CN
Inventors: 刘刚; 陈乃宏; 孙明娜; 胡金风; 宋修云
Original assignee: Institute of Materia Medica of CAMS
Current assignee: Institute of Materia Medica of CAMS
Priority date: 2012-05-29
Filing date: 2012-05-29
Publication date: 2013-12-18

Abstract

本发明公开一类香豆素化合物及其药学上可接受的盐在制备预防或治疗脑疾病的药物中的应用，尤其是预防或治疗神经元损伤、神经炎症相关疾病，特别是预防或治疗帕金森氏症、痴呆、脑缺血、抑郁、脑卒中。

Description

香豆素衍生物在防治脑部重大疾病中的应用

技术领域

本发明涉及香豆素类衍生物，以及该类化合物的一种新的医药用途，尤其在预防和治疗脑卒中、痴呆、帕金森氏症、抑郁等脑部神经、精神疾病中的应用；属于医药技术领域。

背景技术

随着现代社会的飞速发展，生活、工作节奏的加快，加之社会人口的日趋老龄化，脑部重大疾病包括神经系统疾病和精神障碍疾病（尤其是脑卒中、痴呆、帕金森、抑郁等）已经严重危害到人类的健康，不仅降低患者的生活质量，而且给患者家庭带来沉重的经济负担，亦将成为严重的社会问题。

现代医学认为神经元的异常损伤、丢失是脑卒中、痴呆、帕金森、抑郁等脑部重大疾病的共同病理特征，通过减少神经元的丢失数量或延缓神经功能衰减的速度，以及促进神经元的再生恢复神经功能是防治脑部疾病的重要策略。目前临床应用的神经保护剂有钙通道阻滞剂，如尼莫地平已广泛应用于缺血性脑血管病的治疗；NMDA受体拮抗剂，如美金刚批准应用于阿尔茨海默病的治疗；神经营养因子，如重组NGF、BDNF等；改善脑能量代谢药物如吡拉西坦、二氢麦角碱等；自由基清除剂如生育酚、依达拉奉等以及神经节苷脂类药物。此外，其它一些抗神经、精神系统疾病药物也可通过不同机制对神经元产生保护作用。虽然临床上使用的药物种类繁多，但由于存在或疗效不够好，或有较严重的副作用问题而限制了应用。因此开发有效治疗脑部重大疾病的药物具有良好的社会效应和经济效益。

目前越来越多的证据表明，神经炎症、小胶质细胞的激活与神经、精神系统疾病密切相关。尽管还不清楚神经炎症过程的实质及其影响疾病进程的机制，但现已发现许多急、慢性神经变性、精神障碍疾病均与神经炎症的参与密切相关。小胶质细胞是中枢神经系统中的主要吞噬细胞，是神经炎症的主要参与者。在健康的脑中，静息状态的小胶质细胞发挥正常吞噬功能；当小胶质细胞被中度激活时，它能清除过多的神经毒素、死亡细胞及细胞碎片，维持中枢神经系统的稳态；当小胶质细胞被持续激活时，它可与MCP-1等化学因子结合，继而与神经元结合，在炎症、创伤、缺血及中枢神经系统的变性疾病、精神障碍性疾病中发挥作用。随着人们对小胶质细胞在中枢神经系统中重要地位的认识，以小胶质细胞为靶标，通过调控小胶质细胞来减轻神经元的损伤已成为新药研发方向之一。

香豆素是广泛存在于自然界中的一种内酯类化合物，在芸香科和伞形科植物中存在最多，其次是豆科、兰科、木樨科、茄科和菊科植物，少数来自微生物。香豆素及其衍生物具有明显的生物活性，对人体具有抗氧化、降血糖、抗骨质疏松、抗高血压、抗凝血、抗菌、抗癌等多种药理作用；最近研究发现，香豆素及其衍生物还具有神经保护、抗高尿酸血症、保肝等生物活性。其中抗凝血作用的研究最为成熟，在治疗血拴方面，临床用药有苄丙酮香豆素(华法令)、醋硝香豆素、新抗凝(sintrom)和双香豆素。本发明人研究发现，一些哌嗪香豆素能够抑制趋化素样因子1（CKLF1）与其受体CCR4的相互作用。

发明内容

本发明涉及一些香豆素衍生物，该衍生物是采用多种神经细胞损伤模型，筛选出的具有神经保护作用的化合物。本发明还涉及使用该化合物防治重大脑疾病，特别是与神经元损伤、神经炎症相关疾病例如帕金森氏症、痴呆、脑缺血、抑郁等。具体而言：

香豆素衍生物选自如下组群的化合物及其药学上可接受的盐在制备预防或治疗脑疾病的药物中的应用

预防或治疗脑疾病优选是神经元损伤、神经炎症相关疾病。进一步优选是帕金森氏症、痴呆、脑缺血、抑郁、脑卒中。

药学可接受盐，是指分子中的氨基与无机酸或有机酸形成的酸加成盐。在此，无机酸包括硫酸、磷酸、盐酸、氢溴酸、硝酸、亚硫酸、戊酸、甲磺酸、乙磺酸、甲苯磺酸、水杨酸、苯甲酸等；有机酸包括甲酸、乙酸、丙二酸、乳酸、肉桂酸、琥珀酸、草酸、柠檬酸、马来酸、富马酸、苹果酸、扁桃酸、酒石酸、磺酸等。本发明中对于药学可接受盐不加限制。

本发明具有上述通式的新化合物可以通过以下反应式合成：

反应式1:

反应式2：

反应式3：

反应式4：

反应式5：

反应式6：

本领域技术人员可对上述步骤进行变动以提高收率，他们可根据本领域的基本知识确定合成的路线，如选择反应物，溶剂和温度。这样的改动或变动均在本发明的范围内。还可以通过使用各种常规保护基以避免副反应的发生从而提高收率。这些常规的保护方法可参见例如T.Greene，Protecting Groups in Organic Synthesis（the Fourth Edition,John Wiley&Sons,Inc.）。改进的方法和路线都属于本专利保护范畴。

因此本发明提供含有治疗有效量的本发明化合物的药物，和一种或多种药学上可接受载体和/或赋形剂的药物组合物。载体包括如盐水，缓冲盐水，葡萄糖，水，甘油，乙醇和它们的结合，下文将更详细地论述。如果需要，该组合物还可以包含较小量的润湿剂或乳化剂，或pH缓冲剂。该组合物可以是液体溶液，悬浮液，乳剂，片剂，丸剂，胶囊，持续释放制剂或粉末。

本发明化合物可以以非肠道方式给药或以腹腔内方式给药，所述游离碱或其药学上可接受的盐的形式的溶液或悬浮液能够在水中进行配制，并且适当混合以表面活性剂，例如羟丙基纤维素。可以在甘油、液体聚乙二醇及其在油中的混合物中配制分散剂体，在通常的储存和使用条件下，所述制剂含有防腐剂以便抑制微生物的生长。本发明适合于注射使用的药物，其形式形式可包括无菌水溶液或分散液，以及用于即时配制注射溶液或分散液的无菌粉末。在所有情况下，所述形式必须是无菌的，并且必须是可流动的，达到了便于注射的程度，而且必须在生产和储存条件下是稳定的，并且针对微生物例如细菌和霉菌的污染作用必须是防腐的。载体可以是含有例如水、乙醇、多元醇(例如甘油、丙二醇或液体聚乙二醇)及其适当的混合物和植物油的溶剂或分散介质。

药理部分：

本发明所述化合物具有抗氧化及清除氧自由基的活性，因而可以用治疗与氧自由基有关疾病，例如脑缺血、脑卒中、阿尔海默此病及帕金森病等。

本发明涉及通式一化合物通过多种神经元损伤模型筛选出的具有神经保护作用的化合物。在优选的实施例中，本发明的化合物具有抑制多种因素诱导神经元损伤活性、抗小胶质细胞激活介导的炎症反应;以及使用该化合物治疗脑疾病，特别是与神经元损伤、神经炎症相关疾病例如帕金森氏症、痴呆、抑郁等的药物的应用;以及预防或治疗与抗氧化活性相关的疾病,如脑缺血、脑卒中、阿尔海默此病、帕金森病等的药物应用。

当给药用于治疗或抑制特定疾病或病症时，应该理解有效剂量可以根据使用的特定化合物、给药方式、疾病的状态和严重程度、治疗条件以及与被治疗个体有关的各种物理因素而变化。在治疗应用中，以足以治疗或至少部分改善疾病和其并发症的数量，将本发明化合物提供给已经患病的患者。该合适的数量被定义为“治疗有效量”。在特殊情况下治疗所使用的剂量必须客观地由治病的医生确定，涉及的变化包括患者的特殊状态、体重、年龄以及反应行为。将所需剂量水平提供给人类。所述剂量可以一次给药或分两次或多次给药。规定的日剂量可以随给药的方式变化。所述剂量能够以任何可用于将活性化合物导入接受者的血液中的方式给药，该方式包括口服、通过植入物、非肠道(包括静脉、腹膜内、关节内和皮下注射)、直肠、鼻内、表皮、眼内(眼滴剂)、阴道和经皮给药。

本发明化合物特别用于治疗与神经元损伤、神经炎症相关的脑部疾病。

本发明进一步提供治疗哺乳动物，包括人类的以下疾病的方法:帕金森氏症、痴呆、脑卒中、抑郁等。所述方法包括对感染的哺乳动物使用本发明的有效量的化合物。

具体实施方式

以下举出实施例对本发明作进一步的说明。但本发明并不限于这些实施例。

化学实施例部分

试剂与溶剂

反应所用试剂若无特别说明，均购自Acros Organics(Geel,Belgium)，未经过进一步纯化直接使用。10%钯-碳购自陕西开达化工有限公司。甲酸铵购自北京化学试剂公司。反应所用溶剂若无特别说明，均购自北京化工厂，级别是分析纯。干燥THF的处理：分析纯THF用

分子筛浸泡干燥过夜，加入金属钠和二苯基酮，加热回流，溶剂颜色变为蓝色时收集THF。干燥DCM的处理：分析纯DCM分别用5%Na₂CO₃、蒸馏水各洗涤两遍，用无水CaCl₂干燥过夜。过滤，加入P₂O₅加热回流重蒸制得。丙酮：分析纯丙酮用新炒无水K2CO3浸泡干燥。无水Na₂SO₄，无水K₂CO₃，

分子筛：马弗炉500℃烘烤12h以上。GF254薄层层析硅胶，柱层析硅胶（60-100目，160-200目），硅胶H均购自青岛海洋化工厂。

仪器

自动HPLC-MS分析仪：

HPLC分析仪为Agilent 1100 HPLC系统。Agilent G1312A泵，Agilent G1314A紫外检测器，Agilent G1313A自动进样器，Agilent G1316A柱温箱和分流阀。洗脱条件同上述GilsonHPLC系统。

质谱仪为ThermoFinnigan LCQ-Advantage质谱仪。洗脱液中的5%分流进入质谱仪。质谱检测采用正离子或者负离子扫描方式。离子源：电喷雾离子源(ESI)。

色谱柱：Kromasil C18分析柱(4.6μm，4.6mm×50mm)，购自DIKMA公司。

洗脱条件：流动相为含有0.05%HCOOH的乙腈和水。线性梯度洗脱5∶95(v∶v)acetonitrile-H2O到95∶5(v∶v)acetonitrile-H2O，时间5minutes，流速是1mL/min。UV检测波长是254nm

高分辨质谱仪：

Agilent LC/MSD TOF系统。色谱柱：Agilent ZORBAX SB-C18(Rapid resolution,3.5μm,2.130mm)。流动相：MeOH∶H2O=75∶25(v∶v)，含有5mmol/L甲酸，等梯度洗脱。时间：5mins，流速：0.40mL/min。质谱检测采用正离子或者负离子扫描方式。离子源：ESI。

核磁共振仪：Varian Mercury，300MHz，400MHz，或500HMz。溶剂为DMSO-d6。

熔点仪：Yanaco微量熔点仪。所测熔点均未校正。熔点用日本Yanaco显微熔点仪测定，温度未经校正。

质谱用Finnigan LCQ-Advantage型质谱仪测定。

实施例1

5,7-二羟基-4-甲基-3-(4-(苯磺酰基)哌嗪-1-基)-2H-苯并吡喃-2-酮

m.p.231-234℃;¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆，80℃):10.400(s,1H),10.201(s,1H),7.710(m,5H),6.226(d,1H,J＝2.4Hz),6.105(d,1H,J＝2.4Hz),3.855(br,1H),3.187(br,3H),2.997(br,4H),2.487(s,3H);HRMS Calcd.For C₂₀H₂₀N₂NaO₆S(M+Na⁺)439.0940;found.439.0932.

实施例2

3-(4-(2-乙基丁基)哌嗪-1-基)-5,7-二羟基-4甲基-2H-苯并吡喃-2-酮

m.p.296-299℃;¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆):δ5.927(s,1H),5.710(s,1H),2.650-3.685(br,8H),2.650(s,3H),2.120(d,2H,J＝4.6Hz),1.428(m,1H),1.281(m,4H),0.853(t,6H,J＝7.2Hz).HRMS Calcd.For C₂₀H₂₉N₂O₄(M+H⁺)361.2127;found361.2124.

实施例3

4-(5,7-二羟基-4-甲基-2-氧-2H-苯并吡喃-3-基)-N-(4-异丙基苯基)哌嗪-1-酰胺

m.p.262-265℃;¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆):δ10.421(s,1H),10.186(s,1H),8.441(s,1H),7.348(dd,2H,J＝8.7Hz,J＝1.5Hz),7.082(dd,2H,J＝8.7Hz,J＝1.5Hz),6.258(d,1H,J＝2.4Hz),6.124(d,1H,J＝2.4Hz),3.459(s,1H),2.779-4.400(br,8H),2.668(s,3H),1.174(s,3H),1.151(s,3H);HRMS Calcd.For C₂₄H₂₈N₃O₅(M+H⁺)438.2029;found 438.2007.

实施例4

4-(5,7-二羟基-4-甲基-2-氧-2H-苯并吡喃-3-基)-N-庚基哌嗪-1-酰胺

m.p.282-284℃;¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ10.400(s,1H),10.170(s,1H),6.450(t,1H,J＝5.1Hz),6.249(d,1H,J＝2.1Hz),6.110(d,1H,J＝2.1Hz),3.000(m,2H,J＝6.0Hz)2.638-4.000(br,8H),2.638(s,3H),1.162-1.412(m,10H,J＝6.0Hz),0.845(t,3H,J＝6.0Hz);HRMS Calcd.For C₂₂H₃₂N₃O₅(M+H⁺)418.2342;found 418.2342.

实施例5

4-(5,7-二羟基-4-甲基-2-氧-2H-苯并吡喃-3-基)-N-(2-苯氧苯基)哌嗪-1-酰胺

m.p.198～200℃;¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆):δ10.424(s,1H),10.194(s,1H),7.975(s,1H),7.665(d,1H,J＝7.5Hz),7.34(t,2H,J＝7.5Hz),7.079(m,3H),6.930(m,3H),6.251(s,1H),6.117(s,1H),2.000-4.000(br,8H),2.623(s,3H);HRMS Calcd.For C₂₇H₂₆N₃O₆(M+H⁺)488.1822;found 488.1810.

实施例6

4-(5,7-二羟基-4-甲基-2-氧-2H-苯并吡喃-3-基)-N-(4-(三氟甲氧基)苯基)哌嗪-1-酰胺

m.p.254～256℃;¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆，80℃):δ10.202(s,1H),9.952(s,1H),8.741(s,1H),7.570(d,2H,J＝4.5Hz),7.200(d,2H,J＝4.5Hz)),6.272(d,1H,J＝1.2Hz),6.132(d,1H,J＝1.2Hz),3.524(br,4H),2.961(br,4H),2.685(s,3H);¹³C NMR(125MHz,DMSO-d₆):δ160.082,157.855,154.677,154.452,149.791,142.460,139.836,128.153,120.012,120.467,102.204,99.204,94.041,48.994,44.455,16.858;HRMSCalcd.For C22H21F3N3O6(M+H⁺)480.1382;found 480.1387.

实施例7

N-苄基-4-(5,7-二羟基-4-甲基-2-氧-2H-苯并吡喃-3-基)哌嗪-1-酰胺

m.p.277～280℃;¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆):δ10.409(s,1H),10.177(s,1H),7.168-7.355(m,5H),7.096(t,1H,J＝6.0Hz),6.250(d,1H,J＝2.4Hz),6.120(d,1H,J＝2.4Hz),4.250(d,2H,J＝6.0Hz),3.322-4.100(m,4H),2.925(br,4H),2.878(s,3H);¹³C NMR(125MHz,DMSO-d₆):δ160.098,157.900,157.450,154.502,149.780,141.007,128.339,128.046,126.940,126.345,102.299,99.351,94.094,59.708,49.001,44.264,16.889;HRMS Calcd.For C₂₂H₂₄N₃O₅(M+H⁺)410.1716;found 410.1711.

实施例8

3-(4-肉桂酰哌嗪-1-基)-5,7-二羟基-4-甲基-2H-苯并吡喃-2-酮

m.p.232～234℃;¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆):δ10.433(s,1H),10.196(s,1H)7.722(d,2H,J1＝7.5Hz,J2＝1.5Hz),7.515(d,1H,J＝15.6Hz),7.356-7.430(m,3H),7.300(d,1H,J＝15.6Hz),6.260(d,1H,J＝2.4Hz),6.120(d,1H,J＝2.4Hz),3.315-4.448(br,4H),2.710-3.165(br,4H),2.681(s,3H);¹³C NMR(125MHz,DMSO-d₆):δ164.406,160.202,157.978,157.888,154.525,150.054,141.505,135.158,129.474,128.715,128.015,118.268,102.219,99.318,94.102,49.817,49.087,45.895,42.451,17.004.HRMS Calcd.For C₂₃H₂₃N₂O₅(M+H⁺)407.1607;found 407.1594.

实施例9

3-(4-丙烯酰哌嗪-1-基)-5,7-二羟基-4-甲基-2H-苯并吡喃-2-酮

m.p.225～228℃;¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆):δ10.422(s,1H),10.186(s,1H),6.825(dd,1H,J1＝12.6Hz,J2＝7.8Hz),6.256(d,1H,J＝1.2Hz),6.121(dd,1H,J1＝12.6Hz,J2＝1.5Hz),6.118(d,1H,J＝1.2Hz),5.680(d,1H,J1＝7.8Hz,J2＝1.2Hz),2.720-4.501(br,8H),2.660(s,3H);HRMS Calcd.For C₁₇H₁₉N₂O₅(M+H⁺)331.1294;found331.1280.

实施例10

3-(4-(2-氯乙酰基)哌嗪-1-基)-5,7-二羟基-4-甲基-2H-苯并吡喃-2-酮

m.p.262～264℃;¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆):δ10.428(s,1H),10.193(s,1H)6.260(d,1H,J＝2.4Hz),6.120(d,1H,J＝2.4Hz),4.401(s,2H),2.654-4.401(br,8H),2.654(s,3H).HRMS Calcd.For C₁₆H₁₈ClN₂O₅(M+H⁺)353.0904;found 353.0900.

实施例11

3-(4-苯甲酰基哌嗪1-基)-5,7-二羟基-4-甲基-2H-苯并吡喃-2-酮

m.p.260～262℃;¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆):δ10.421(s,1H),10.187(s,1H),7.396-7.458(m,5H),6.254(d,1H,J＝1.8Hz),6.125(d,1H,J＝1.8Hz),2.658-4.500(br,8H),2.658(s,3H);HRMS Calcd.For C₂₁H₂₁N₂O₅(M+H⁺)381.1450;found 381.1449.

实施例12

N-(4-(4-(5,7-二羟基-4-甲基-2-氧-2H-苯并吡喃-3-基)哌嗪-1-基磺酰)苯基)酰胺

m.p.258-260℃;¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆):10.399(s,1H),10.194(s,1H),7.941(s,1H),7.817(m,2H),7.489(m,2H),6.230(d,1H,J＝2.4Hz),6.108(d,1H,J＝2.4Hz),2.522-3.551(br,8H),2.878(s,3H),2.720(s,3H);HRMS Calcd.For C22H24N3O7S(M+H⁺)474.1335;found.474.1308.

实施例13

3-(4-苄基哌嗪-1-基)-5,7-二羟基-4-甲基-2H-苯并吡喃-2-酮

m.p.212-214℃;¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆):δ10.377(s,1H),10.151(s,1H),7.312-7.326(m,4H),7.236-7.250(m,1H),6.241(d,1H,J＝2.4Hz),6.106(d,1H,J＝2,4Hz),3.497(s,2H),2.608-3.322(m,4H),2.608(s,3H),2.000-2.478(m,4H);¹³C NMR(125MHz,DMSO-d₆):δ159.994,157.818,154.457,149.453,138.297,128.805,128.517,128.129,126.852,102.267,99.236,94.033,62.330,53.328,49.015,16.856;HRMS Calcd.For C₂₁H₂₂N₂O₄(M+H⁺)367.1658;found 367.1658.

实施例14

3-(4-((6-氯苯并[d][1,3]亚甲二氧基-5-基)甲基)哌嗪-1-基)-5,7-二羟基-4-甲基-2H-苯并吡喃-2-酮

m.p.275-278℃;¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆):δ10.647(s,1H),10.365(s,1H),7.041(s,2H),6,428(d,1H,J＝2.1Hz),6.138(d,1H,J＝2.1Hz),6.055(s,2H),3.612(br,2H),2.716-3.254(m,4H),2.610(s,3H),2.260-2.502(m,4H);HRMS Calcd.ForC₂₂H₂₂ClN₂O₆(M+H⁺)445.1166;found 445.1168.

实施例15

4-苯基-5,7-二羟基-2H-苯并呋喃-2-酮

m.p.226-228℃;¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆):δ10.371(s,1H),10.085(s,1H),7.334(m,5H),6.253(d,1H,J＝2.1Hz),6.147(d,1H,J＝2.1Hz),5.729(s,1H);

ESI-MS

(m/z):255.2;[M+H]⁺(MW=255.24).

实施例16

4-甲基-5,7-二羟基-2H-苯并呋喃-2-酮

m.p.282-284℃;¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆):δ10.497(s,1H),10.275(s,1H),6.241(d,1H,J＝2.4Hz),6.147(d,1H,J＝2.4Hz),5.822(s,1H),2.468(s,3H);ESI-MS(m/z):193.1;[M+H]⁺(MW=193.17).

实施例17

3-氯-4-甲基-5,7-二羟基-2H-苯并呋喃-2-酮

m.p.>300℃;¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ10.762(s,1H),10.433(s,1H),6.312(d,1H,J＝2.8Hz),6.195(d,1H,J＝2.8Hz,),2.682(s,3H);ESI-MS(m/z):227.1;[M+H]⁺(MW=227.62).

实施例18

3,4-二甲基-5,7-二羟基-2H-苯并呋喃-2-酮

m.p.235-237℃;¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ10.377(s,1H),10.105(s,1H),6.249(d,1H,J＝2.4Hz),6.127(d,1H,J＝2.4Hz),2.503(s,3H),1.982(s,3H);ESI-MS(m/z):207.1;[M+H]⁺(MW=206.20).

实施例19

5,7-二羟基-4-甲基-3-(哌啶-1-基)-2H-苯并吡喃-2-酮

m.p.224-226℃;¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆):δ6.375(d,1H,J＝2.1Hz),6.116(d,1H,J＝2.1Hz),3.354(br s,4H),2.610(s,3H),1.546(br s,6H);HRMS Calcd.For C₁₅H₁₈NO₄(M+H⁺)276.1236;found 276.1239.

实施例20

5,7-二羟基-4-甲基-3-吗啉基-2H-苯并吡喃-2-酮

m.p.285-287℃;¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆):δ10.404(s,1H),10.175(s,1H),6.249(d,1H,J＝2.1Hz),6.117(d,1H,J＝2.1Hz),3.641(brs,4H),2.858(brs,4H),2.644(s,3H).HRMS Calcd.For C₁₄H₁₆NO₅(M+H⁺)278.1028;found 278.1028.

实施例21

5-羟基-4,7-二甲基-3-(4-甲基哌嗪-1-基)-2H-苯并吡喃-2-酮盐酸盐

m.p.213-215℃;¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆):δ10.490(s,1H),9.382(s,1H),6.599(s,1H),6.584(s,1H),3.492-3.531(m,2H),3.402-3.445(m,2H),3.105-3.207(m,2H),2.905(br,2H),2.838(d,3H,J=4.2Hz),2.674(s,3H),2.262(s,3H);¹³C NMR(125MHz,DMSO-d₆):δ17.118,20.936,45.427,48.452,54.971,106.968,107.296,111.968,130.876,141.373,148.475,152.816,156.382,157.645;HRMS Calcd.For C₁₆H₂₁N₂O₃(M+H⁺)289.1552;found 289.1553.

实施例22

7-乙氧基-4-甲基-3-(4-甲基哌嗪-1-基)-2H-苯并吡喃-2-酮

m.p.195-197℃;¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆):δ7.627(d,1H,J=9.0Hz),6.906-6.031(m,2H),4.098(q,2H,J＝6.9Hz),2.983(br,4H),2.490(br,4H),2.426(s,3H),2.275(s,3H),1.333(t,3H,J＝6.9Hz).HRMS Calcd.For C₁₇H₂₃N₂O₃(M+H⁺)303.1709;found 303.1723.

实施例23

8-甲基-7-(4-甲基哌嗪-1-基)-6H-[1,3]二氧杂亚甲基[4,5-g]苯并吡喃-6-酮盐酸盐

m.p.254-256℃;¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆):δ9.369(s,1H),7.294(s,2H),7.077(s,2H),6.154(s,2H),3.447(br,4H),3.173(br,2H),2.944(br,2H),2.843(s,3H),2.445(s,3H);¹³C NMR(125MHz,DMSO-d₆):δ13.746,42.536,46.572,53.369,97.474,102.478,103.584,113.788,129.713,144.764,148.056,148.666,150.047,158.171;HRMS Calcd.For C₁₆H₁₉N₂O₄(M+H+)303.1345;found 303.1351.

实施例24

5,7-二甲氧基-4-甲基-3-(4-甲基哌嗪-1-基)-2H-苯并吡喃-2-酮盐酸盐

m.p.230-232℃;¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆):δ9.380(s,1H),6.549(d,1H,J＝2.4Hz),6.510(d,1H,J＝2.4Hz),3.859(s,3H),3.830(s,3H),3.397-3.485(m,4H),3.178(br,2H),2.892(br,2H),2.839(s,3H),2.620(s,3H).¹³C NMR(125MHz,DMSO-d₆):δ17.214,42.582,46.538,53.379,55.847,56.276,93.228,95.873,104.148,128.642,154.295,157.690,159.161,162.160.HRMS Calcd.For C₁₇H₂₃N₂O₄(M+H⁺)319.1658;found 319.1657.

实施例25

5-羟基-7-甲氧基-4-甲基-3-(4-甲基哌嗪-1-基)-2H-苯并吡喃-2-酮盐酸盐

m.p.173-175℃;¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆):δ10.510(s,1H),9.362(s,1H),6.370(d,1H,J＝2.1Hz),6.280(d,1H,J＝2.1Hz),3.821(s,3H),3.436-3.483(br,4H),3.132-3.197(br,2H),2.830(s,3H),2.606(s,3H);HRMS Calcd.For C₁₆H₂₁N₂O₄(M+H⁺)305.1501;found 305.1508.

实施例26

7-(4-乙基环己基氧基)-4-甲基-3-(4-甲基哌嗪-1-基)-2H-苯并吡喃-2-酮

m.p.136-138℃;¹H NMR(300MHz,MeOD):δ7.558(d,1H,J＝9.0Hz),6.837(dd,1H,J1＝9.0Hz,J2＝2.4Hz),6.749(d,1H,J＝2.4Hz),4.250(m,1H),3.069(br,4H),2.562(br,4H),2.448(s,3H),2.296(s,3H),2.092(m,2H).1.811(m,2H),0.983-1.425(m,8H),0.863(t,3H,J＝7.2Hz);HRMS Calcd.For C₂₃H₃₃N₂O₃(M+H⁺)385.2491;found 385.2498.

实施例27

7-(4-甲氧基苄氧基)-4-甲基-3-(4-甲基哌嗪-1-基)-2H-苯并吡喃-2-酮

m.p.182-184℃;¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆):δ7.630(d,1H,J＝9.0Hz),7.385(d,2H,J＝9.0Hz),6.972-7.003(m,2H),6.937(d,2H,J＝9.0Hz),5.108(s,2H),3.743(s,3H),2.963(br,4H),2.490(br,4H),2.423(s,3H),2.230(s,3H);¹³CNMR(125MHz,DMSO-d₆):δ12.885,42.817,55.099,59.008,101.687,112.042,112.981,114.180,118.799,127.074,128.159,134.255,148.568,152.867,158.084,160.311,160.589;HRMS Calcd.For C₂₃H₂₇N₂O₄(M+H⁺)395.1971;found 395.1975.

实施例28

4-甲基-3-(4-甲基哌嗪-1-基)-7-(2-噻吩-2-基)乙氧基)-2H-苯并吡喃-2-酮

m.p.268-270℃;¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆):δ7.681(d,1H,J＝9.0Hz),7.460(d,1H,J＝4.5Hz),6.962-6.977(m,4H),4.289(t,2H,J＝6.0Hz),3.271(t,2H,J＝6.0Hz),3.084(br,8H),2.682(s,3H),2.457(s,3H);¹³C NMR(125MHz,DMSO-d₆):δ13.181,21.653,42.910,101.949,112.212,113.181,125.181,126.459,127.290,127.466,128.332,137.826,149.086,153.049,158.339,160.517;HRMSCalcd.For C₂₁H₂₅N₂O₃S(M+H⁺)385.1586;found 385.1581.

实施例29

4-甲基-3-(4-甲基哌嗪-1-基)-7-(2-吗啉基乙氧基)-2H-苯并吡喃-2-酮

m.p.96-98℃;¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆):δ7.635(d,1H,J＝9.0Hz),6.930-6.958(m,2H),3.729(t,2H,J＝6.9Hz),4.168(t,2H,J＝6.0Hz),3.533-3.577(m,4H),3.008(br,4H),2.692(t,2H,J＝6.0Hz),2.584(br,4H),2.433-2.494(m,7H),2.337(s,3H);HRMS Calcd.For C₂₁H₃₀N₃O₄(M+H⁺)388.2236;found 388.2229.

实施例30

4-甲基-3-(4-甲基哌嗪-1-基)-7-(2-(哌啶-1-基)乙氧基)-2H-苯并吡喃-2-酮

m.p.231-233℃;¹H NMR(300MHz,DMSO-d6):δ7.632(d,1H,J＝9.0Hz),6.953(br,2H),4.164(br,2H),2.991(br,2H),2.718(br,2H),2.492(br,8H),2.431(s,3H),2.289(s,3H),1.502(br,4H),1.384(m,2H);HRMS Calcd.For C22H32N303(M+H⁺)386.2444；found 386.2443.

实施例31

5,7-二羟基-4-甲基-3-苯基-2H-苯并吡喃-2-酮

m.p.263-265℃;¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆):δ10.405(br s,2H),7.310-7.430(m,3H),7.204-7.227(m,2H),6.295(d,1H,J＝2.1Hz),6.192(d,1H,J＝2.1Hz),2.318(s,3H);¹³C NMR(125MHz,DMSO-d₆):δ160.693,160.025,158.225,155.337,150.081,135.564,130.453,128.069,127.271,120.783,102.356,99.243,94.255,20.939;HRMS Calcd.For C₁₆H₁₃O₄(M+H⁺)269.0841;found 269.0782.

实施例32

7-(二甲基氨基)-4-甲基-3-(4-甲基哌嗪-1-基)-2H-苯并吡喃-2-酮

m.p.163-165℃；¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆):δ7.493(d,1H,J＝9.0Hz),6.722(d,1H,J1＝9.0Hz,J2＝2.1Hz),6.503(d,1H,J＝2.1Hz),2.600-3.332(m,6H),2.982(s,6H),2.440(br,2H),2.388(s,3H),2.223(s,3H);HRMS Calcd.For C₁₇H₂₄N₃O₂(M+H⁺)302.1869;found 302.1872.

实施例33

7-甲氧基-4-甲基-3-(4-甲基哌嗪-1-基)-2H-苯并吡喃-2-酮

m.p.190-192℃;¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆):δ7.642(d,1H,J＝9.0Hz),6.933-6.940(m,2H),3.827(s,3H),2.975(br,4H),2.490(br,4H),2.431(s,3H),2.246(s,3H);HRMS Calcd.For C₁₆H₂₁N₂O₃(M+H⁺)289.1552;found 289.1566.

实施例34

4-甲基-3-(4-甲基哌嗪-1-基)-7-(2-(四氢吡咯-1-基)乙氧基)-2H-苯并吡喃-2-酮

m.p.146－148℃;¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆):δ7.526(d,1H,J＝9.0Hz),6.820(m,1H),6.610(s,1H),3.603(br,6H),3.335(br,6H),2.779（m,4H),2.523(s,3H),2.392(s,3H);HRMS Calcd.For C₂₁H₃₀N₃O₃(M+H⁺)372.2287;found 372.2289.

实施例35

4-甲基-3-(4-甲基哌嗪-1-基)-2-氧-2H-苯并吡喃-5,7-二羟基二乙酸酯

m.p.225-228℃；¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆):δ7.170(d,1H,J＝2.4Hz),7.030(d,1H,J＝2.4Hz),2.967(m,4H),2.502(s,3H),2.363(m,4H),2.346(s,3H),2.280(s,3H),2.198(s,3H).

实施例36

7-羟基-4-甲基-3-(4-甲基哌嗪-1-基)-2H-苯并吡喃-2-酮

m.p.272-275℃;¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆):δ7.500(d,1H,J＝9.0Hz),6.730(d,1H,J1＝9.0Hz,J2＝2.1Hz),6.598(d,1H,J＝2.4Hz),2.931(br,4H),2.191-2.393(m,7H),2.193(s,3H)；¹³C NMR(100MHz,DMSO-d₆):δ13.172,42.500,42.574,46.641,49.753,53.445,101.842,112.249,113.148,127.472,128.753,148.834,153.046,158.366,160.451；HRMS Calcd.For C₁₅H₁₉N₂O₃(M+H⁺)275.1396;found275.1398.

实施例37

3-(4-(4-氟苯基)哌嗪-1-基)-5,7-二羟基-4-甲基-2H-苯并吡喃-2-酮

m.p.189-193℃;¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆):δ10.416(s,1H),10.202(s,1H),7.012(m,4H),6.256(d,1H,J＝1.5Hz),6.130(d,1H,J＝1.5Hz),2.870-3.438(br,8H),2.653(s,3H).HRMS Calcd.For C₂₀H₂₀FN₂O₄(M+H⁺)371.1407;found 371.1405.

实施例38

3-(4-(2,3-二甲基苯基)哌嗪-1-基)-5,7-二羟基-4-甲基-2H-苯并吡喃-2-酮

m.p.236-239℃;¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆):δ10.409(s,1H),10.178(s,1H),7.033(t,1H,J1＝7.5Hz,J2＝8.1Hz),6.931(t,1H,J＝8.1Hz),6.872(t,1H,J＝7.5Hz),6.264(d,1H,J＝2.4Hz),6.139(d,1H,J＝2.4Hz),3.373(br,4H),2.851(br,4H),2.671(s,3H),2.199(s,3H),2.178(s,3H);HRMS Calcd.For C₂₂H₂₅N₂O₄(M+H⁺)381.1814;found 381.1812.

实施例39

5,7-二羟基-4-甲基-3-(4-(3-(三氟甲基)苯基)哌嗪-1-基)-2H-苯并吡喃-2-酮

m.p.235-238℃;¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆):δ10.426(s,1H),10.190(s,1H),7.418(t,1H,J＝7.8Hz),7.245(d,1H,J＝7.8Hz),7.188(s,1H),7.065(d,1H,J＝7.8Hz),6.260(d,1H,J＝2.4Hz),6.128(d,1H,J＝2.4Hz),2.879-4.231(br,8H),2.666(s,3H);HRMS Calcd.For C₂₁H₂₀F₃N₂O₄(M+H⁺)421.1375;found 421.1378.

实施例40

5,7-二羟基-3-(4-(2-甲氧基苯基)哌嗪-1-基)-4-甲基-2H-苯并吡喃-2-酮

m.p.218-221℃;¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆):δ10.409(s,1H),10.176(s,1H),7.102(t,1H,J＝8.1Hz),6.538(d,1H,J＝8.1Hz),6.468(m,1H),6.358(d,1H,J1＝8.1Hz,J2＝2.1Hz),6.261(d,1H,J＝2.4Hz),6.130(d,1H,J＝2.1Hz),3.708(s,3H),2.768～3.465(br,8H),2.660(s,3H);HRMS Calcd.For C₂₁H₂₃N₂O₅(M+H⁺)383.1607;found 383.1600.

实施例41

3-(4-乙基哌嗪-1-基)-5,7-二羟基-4-甲基-2氢-苯并吡喃-2-酮

m.p.210-212℃;¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆):δ10.535(s,1H),10.288(s,1H),9.542(s,1H),6.317(d,1H,J＝2.4Hz),6.135(d,1H,J＝2.4Hz),3.428-3.539(br,4H),3.058-3.149(br,4H),2.850(br,2H),2.637(s,3H),1.229(t,3H,J＝7.5Hz);HRMS Calcd.For C₁₆H₂₁N₂O₄(M+H⁺)305.1501;found 305.1505.

实施例42

3-(4-(双(4-氟苯基)甲基)哌嗪-1-基)-5,7-二羟基-4-甲基-2H-苯并吡喃-2-酮

m.p.283-286℃;¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆):δ10.365(s,1H),10.147(s,1H),7.468(d,2H,J＝5.7Hz),7.438(d,2H,J＝5.7Hz),7.122(m,4H),6.230(d,1H,J＝2.4Hz),6.103(d,1H,J＝2.4Hz),4.395(s,1H),2.579(s,3H),2.409-3.315(br,8H);HRMS Calcd.For C₂₇H₂₅F₂N₂O₄(M+H⁺)479.1782;found 479.1787.

实施例43

5,7-二羟基-4-甲基-3-(哌嗪-1-基)-2H-苯并吡喃-2-酮

m.p.110-112℃。¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆):δ6.233(d,1H,J＝2.1Hz),6.092(d,1H,J＝2.1Hz),3.156(br,4H),2.799(br,5H),2.624(s,3H);HRMS Calcd.ForC₁₄H₁₇N₂O₄(M+H⁺)277.1188;found 277.1183.

药理实验

实验例1

IMMLG系列化合物对体外神经细胞损伤的影响

取铺满单层的PC12细胞（模拟神经元细胞），弃去原培养液，加入5%FBS、5%马血清的DMEM完全培养液，用吸管轻轻吹打使细胞分散完全，以5×10⁴个/ml密度，每孔100μl接种于预先用多聚赖氨酸（0.1mg/ml)）处理过的96培养板中，培养24h即可用于实验。实验分为空白组、模型组和加药组。空白组给予完全培养基，鱼藤酮造模组是加入终浓度为4μM鱼藤酮的完全培养基作用细胞48h（模拟PD模型），氧糖剥夺（OGD）组是采用低糖完全培养基及加入终浓度为5mM的连二亚硫酸钠作用细胞24h（模拟脑缺血模型），Aβ_25-35造模组是加入终浓度为20μM Aβ_25-35的完全培养基作用细胞24h（模拟AD模型），去血清组为加入无血清DMEM培养基作用细胞24h。加药组则在造模的同时加入10μM受试化合物。细胞增殖实验是除空白组外，加药组加入终浓度为10μM受试化合物的完全培养基作用24h。然后加入10μl 5mg/ml MTT,4h后去上清，加入150μl DMSO，以570nm吸光度值表示存活细胞数。

结果见Table 1，鱼藤酮、氧糖剥夺、Aβ_25-35可明显减少PC12细胞存活率，而化合物实施例1、实施例2、实施例3、实施例4、、实施例5、实施例6、实施例7、实施例16、实施例17、实施例18、实施例19、实施例20、实施例25、对其中2种或3种损伤模型显示明显保护作用。

因此，将上述化合物进行复筛，实验结果见Table 2。结果表明在筛选的13个化合物中，有3个对其中3种或4种损伤模型显示明显保护作用，其中实施例5、实施例17、实施例25、对鱼藤酮、去血清、氧糖剥夺、Aβ25-35四种损伤PC12细胞模型均显示明显保护作用。

Table 1 IMMLG系列化合物对PC12细胞损伤的影响（means±SD,n=3）。

^###P＜0.001vs.空白组，^*P＜0.05，^**P＜0.01，^***P＜0.001vs.模型组。

Table 2 IMMLG系列化合物对PC12细胞损伤的影响（means±SD,n=3）

Claims

1.选自如下组群的化合物及其药学上可接受的盐在制备预防或治疗脑疾病的药物中的应用

2.根据权利要求1的应用，其特征在于，所述的脑疾病选自神经元损伤、神经炎症相关疾病。

3.根据权利要求2的应用，其特征在于，所述的神经元损伤、神经炎症相关疾病选自帕金森氏症、痴呆、脑缺血、抑郁、脑卒中。

4.根据权利要求1-3中任一项的应用，其特征在于，所述的其药学上可接受的盐选自化合物和无机酸、有机酸成的盐。

5.根据权利要求4的应用，其特征在于，所述的无机酸选自硫酸、磷酸、盐酸、氢溴酸、硝酸、亚硫酸、戊酸、甲磺酸、乙磺酸、甲苯磺酸、水杨酸、苯甲酸；所述的有机酸选自甲酸、乙酸、丙二酸、乳酸、肉桂酸、琥珀酸、草酸、柠檬酸、马来酸、富马酸、苹果酸、扁桃酸、酒石酸、磺酸。