CN103412062A

CN103412062A - 一种测定莫达非尼含量的高效液相色谱法

Info

Publication number: CN103412062A
Application number: CN2013102989714A
Authority: CN
Inventors: 张梅; 彭学东; 赵金召; 祁法娟
Original assignee: ZHANGJIAGANG WEISHENG BIOLOGICAL PHARMACEUTICAL CO Ltd
Current assignee: ZHANGJIAGANG WEISHENG BIOLOGICAL PHARMACEUTICAL CO Ltd
Priority date: 2013-07-17
Filing date: 2013-07-17
Publication date: 2013-11-27

Abstract

本发明涉及一种药物的含量检测领域，具体涉及一种检测莫达非尼含量的高效液相色谱法，并采用外标法测定莫达非尼的含量。本发明色谱条件为：C18(4.6×250mm 5μm)，流动相为甲醇和水混合组成的体积比为6∶4，使用紫外检测器，检测波长为225nm。本发明测定方法中样品浓度与峰面积线性关系好、溶剂没有危害、准确性高和分析简便。测定莫达非尼线性范围为0.1μg/ml～100μg/ml，线性相关系r＝0.988，精密度的RDS＝0.23％，稳定性的RDS＝0.32％。

Description

一种测定莫达非尼含量的高效液相色谱法

技术领域

本发明涉及一种药物含量测定方法，具体涉及一种测定莫达非尼含量的高效液相色谱方法。

背景技术

莫达非尼中(结构式见附图1)文别名：2-[(二苯甲基)亚砜基]乙酰胺，是一种新型的种属兴奋α1受体激动剂。莫达非尼的分子式是C₁₅H₁₅NO₂S，白色或类白色的结晶性粉末，无臭、几乎无味。在甲醇中略溶，在乙醇或乙酸乙酯中微溶，在水中几乎不溶。该药原先只被限定用于治疗严重的嗜睡症，1998年被美国食品及药物管理局批准上市。由于其可以使人脑保持清醒，并且没有任何像咖啡因或安非他明所产生的神经过敏、紧张、精神崩溃等副反应，上市以来已经获得了近乎神话般的声誉。据统计，目前在服用莫达非尼的人群中，80％并非嗜睡症患者，他们中绝大多数人是夜班工人、卡车司机、飞行员和士兵。莫达非尼可用于治疗可卡因依赖引起的嗜睡，亦可治疗儿童注意力缺失多动症。因此测定莫达非尼的含量十分重要。目前公开报道：董卫星(HPLC法测定莫达非尼分散片的含量，董卫星，王霆，邓桂兴，今日药学，2012年04期)报道，利用HPLC法，色谱柱为Platisil ODS(5μm 250mm×4.6mm)，流动相为乙腈-水(4∶6)测定莫达非尼分散片的含量，该法虽操作简单，但是线性关系太差。徐小平(高效液相色谱法测定莫达非尼及其胶囊剂含量，徐小平，陈聪，贺英菊，药物分析杂质，2002年03期)报道也采用高效液相色谱法，其流动相为甲醇-50mmoL·L～(-1)甲酸(50∶50，pH＝2.5)，该检测方法的流动相成分腐蚀性太强，操作危险。本发明提供的测定方法，样品浓度与峰面积线性关系好，溶剂没有危害，测定准确性高，分析简便等特点，对于准确测定莫达非尼制剂及原料药的含量具有重要的应用价值。

发明内容

针对现有的检测方法，本发明的目的在于提供一种操作方法方便，分离效果好，线性关系好，溶剂没有危害，测定准确度高，分析简便的莫达非尼含量测定方法。为了达到上述目的，本发明采用如下方案：

本发明的一个具体的实施例中，本发明采用高效液相色谱法测定莫达非尼的含量，即采用外标法测定莫达非尼的含量。

本发明另一个具体的实施例中，本发明典型但不限制的选用液相色谱仪为：美国Agilent-1260进行检测，紫外检测器。

本发明又一个具体的实施例中，本发明典型但不限制的所选色谱柱：C18(4.6x250mm5μm)，检测波长为225nm。

本发明再一个具体的实施例中，甲醇和水混合组成的体积比为7-5∶3-5，体积比优选6∶4。

本发明进一个具体的实施例中，所述的进样量为1-20μl，优选5μl。

本发明还一个具体的实施例中，所述流动相的流速为0.5-1.2mg/ml，优选1.0mg/ml。

附图说明

图1为莫达非尼结构式。

图2为莫达非尼标准品液相色谱图。

图3为莫达非尼线性关系。

图4为莫达非尼标准品工作曲线。

具体实施方式

色谱条件：

采用Agilent-1260高效液相色谱仪，用C18色谱柱C18(4.6x250mm 5μm)；

柱温：25℃。

检测器：紫外检测器，检测波长225nm。

流动相溶液：甲醇和水混合组成的体积比为6∶4。

根据含量计算公式：

莫达非尼含量(％)＝(A1XC2)/(A2XC1)

其中A1为待测样品峰面积

A2为标准品峰面积

C1待测样品浓度(mg/ml)

C2标准品浓度(mg/ml)

带入数据即可得到莫达非尼含量。

实施例1：

精密称取10.3mg莫达非尼标准品，置于10ml容量瓶中，加乙腈超声使样品溶解并定容至刻度线，冷却至室温。用注射器吸取1ml经0.2μm微孔滤头过滤后，贴上标签放入液相色谱仪中，按本发明确定的方法，如下所述的色谱条件下进行测定。

精密称取10.3mg待测样品，置于10ml容量瓶中，加乙腈超声使样品溶解并定容至刻度线，冷却至室温。用注射器吸取1ml经0.2μm微孔滤头过滤后，贴上标签放入液相色谱仪中，按本发明确定的方法，如下所述的色谱条件下进行测定，其色谱峰见附图2。

将标准溶液与待测样品分别量取5μl进色谱柱，所得峰面积取平均值带入上述公式计算，计算结果如表1。

表1 莫达非尼样品测定结果如下表

其中，色谱柱：C18(4.6×250mm 5μm)；流动相为甲醇和水混合组成的体积比为6∶4；色谱温度：25℃；进样量：5μl；流速：1.0ml/min；检测器为紫外检测器；检测波长：225nm。

实施例2：

精密称取10.5mg待测样品，置于10ml容量瓶中，加乙腈超声使样品溶解并定容至刻度线，冷却至室温。用注射器吸取1ml经0.2μm微孔滤头过滤后，贴上标签放入液相色谱仪中，按本发明确定的方法，如下所述的色谱条件下进行测定。

表2 莫达非尼样品测定结果如下表

本发明的方法学考察

(1)线性关系考察

按照上述所述的方法配制莫达非尼标准溶液，经0.2μm微孔滤膜过滤后注入液相色谱仪，根据本发明所述方法测定，在如下所述条件下分别进样1μl、2μl、4μl、6μl、8μl，数据回归分析，对进样量和峰面积回归方程得r＝0.988。可见本方法的线性关系很好，见附图3。

(2)线性范围考察

精密称取10.3mg莫达非尼标准品，置于10ml容量瓶中，加乙腈超声溶解制成浓度为1.03mg/ml的储备液。加流动相分别稀释成0.1μg/ml、0.5μg/ml、2μg/ml、5μg/ml、10μg/ml、50μg/ml、100μg/ml的标准溶液，按照本发明分析方法，对样品浓度(X)和峰面积(Y)进行数据回归分析，得回归方程为：Y＝7.2276X-0.0258，详见附图4。结果表明，莫达非尼在0.1μg/ml～100μg/ml浓度范围内，峰面积和其浓度呈良好的线性关系。

(3)精密度考察

按上述制备的莫达非尼标准溶液的方法，对莫达非尼标准品重复进样5次，按本发明分析方法，如下所述色谱条件进样，结果经过5次重复试验，所得峰面积值见下表，峰面积RSD＝0.23％。结果表明：本发明测定莫达非尼含量精密度高，重现性好，相对标准偏差小。

表3 莫达非尼重复实验的结果

(4)溶液的稳定性考察

按上述制备的莫达非尼标准溶液，放置，分别于不同时间进样。按本发明分析方法，如下所述色谱条件进样，并记录不同时间的峰面积。结果表明：本发明测定溶液在8小时内莫达非尼的峰面积未见明显变化。

表4莫达非尼稳定性结果

Claims

1.本发明旨在采用高效液相色谱法(HPLC)测定莫达非尼的含量，选用高效液相色谱仪为美国Agilent-1260，所述的液相色谱柱为C18，流动相为甲醇和水混合组成的体积比为7-5∶3-5，紫外检测器。

2.如权利要求1所述的方法，本发明特征在于，高效液相色谱法采用外标法进行莫达非尼的含量测定。

3.如权利要求1所述的方法，本发明特征在于，所述色谱柱为：C18(4.6×250mm 5μm)，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂。

4.如权利要求1所述的方法，本发明特征在于，所述流动相甲醇和水混合组成的体积比为7-5∶3-5，体积比进一步优选6∶4。

5.如权利要求1所述的方法，本发明特征在于，检测波长为225nm，柱温为25℃，流速为1.0ml/min，进样体积为5μl。

6.如权利要求1所述的方法，本发明特征在于，乙腈超生溶解配制的样品溶液，样品浓度为1.03mg/ml。