CN103344767A - Pct/crp联合检测用上转发光材料(ucp)试纸条 - Google Patents

Abstract

本发明属于临床医学检验领域，具体涉及一种PCT/CRP检测用上转发光材料(UCP)试纸条，包括试纸条底衬。以及试纸条底衬上顺次相互搭接粘贴的样品垫、涂覆有UCP生物标记物抗体的聚酯膜、包被膜及吸水纸，包被膜上设有一条包被兔抗鼠IgG抗体的控制线，包被膜上还设有与所述控制线平行的两条检测线，分别包被能与待检抗原PCT特异性结合的抗体以及与待检抗原CRP特异结合的抗体；所述UCP生物标记物抗体有两种，分别为上转发光材料(UCP)标记的能与待检抗原PCT特异性结合的抗体以及与待检抗原CRP特异结合的抗体。本发明能同时检测PCT/CRP，提高了炎症反应诊断准确率，操作简便。

Description

PCT/CRP联合检测用上转发光材料(UCP)试纸条

技术领域

本发明属于临床医学检验领域，具体涉及PCT/CRP联合检测用上转发光材料(UCP)试纸条。

背景技术

降钙素原(procalcitonin，PCT)是无激素活性的降钙素前体物质，是由116个氨基酸组成，分子量为13KD的糖蛋白。PCT由神经内细胞分泌(包括甲状腺、肺和胰腺组织细胞)表达，经酶切分解为降钙素(CT)，羧基端肽及氨基端肽。PCT在人体内的半衰期为25-30h，稳定性好，在正常人血清中含量极低。

在导致全身炎症反应综合征(SIRS)的许多情况下，诸如细菌性感染、胰腺炎、烧死、多发伤，血中PCT异常升高，而CT无明显变化。血中PCT水平与感染及损伤的严重程度呈正相关，且已成为用于脓毒症、严重脓毒症、脓毒休克的诊断和疗效监测的有效指标。

C反应蛋白(C-reactive protein，简称CRP)是一种能和肺炎链球菌的荚膜C多糖结合，机体受到微生物入侵或组织损伤等刺激时肝细胞合成的Y球蛋白，分子量约为105KD，痕量存在于健康人血清中(约580ng/ml)。当发生炎症疾病或组织损伤6-8小时内，血清或血浆CRP量迅速升高，并在48-72小时达高峰，但随着病情改善或组织结构功能恢复其含量也恢复正常。因此血清或血浆中C反应蛋白的水平，可以作为判断有无感染、疾病是否处于活动期的指标。

研究表明在诊断炎症有关疾病，单独使用一种指标CRP或PCT不能有效和准确诊断。如在自身免疫疾病的炎症性疾病(如红斑狼疮、反应性关节炎和炎症性肠病)活动期间，仅测定PCT含量，会发现其与正常人的含量没有显著差异。但是如果测定CRP时，CRP含量明显高于正常人。因此，结合这两种指标的结果，才能最终确定病人是否有炎症反应。Hammer等对78例心脏或肺脏移植患者研究显示，急性排异期C反应蛋白和白细胞记数升高，而PCT无变化。因此一种指标不能确定是否炎症感染。合并全身细菌或真菌感染时PCT＞lng/ml，PCT用来鉴别急性排异反应与感染。

自然界中存在的一些有机或无机物质可以受电磁辐射激发，发射荧光或磷光，在其发光的过程中都遵守Stokes规则，即发射光的波长长于激发光的波长。20世纪70年代，科学家发现了一类可以反Stokes规则产生磷光的特殊材料，这种材料在红外光区(波长＞780nm)被激发，却可以发射波长远短于激发光的可见光(波长475nm-670nm)，即能量上转，这种现象被称为上上转发光。

由某些稀土金属元素掺杂于晶体的晶格中构成的材料具有上上转发光现象，在这种材料中有三种主要的成分：主基质(host matrix)、吸收子(absorber)和发射子(emitter)。作为主基质的晶体材料有：氧硫化物(如Y₂O₂S，GdO₂S，La₂O₂S等)、氟化物(如YF₃，GdF₃，LaF₃等)、稼酸盐(如YGaO₃，Y₃Ga₅O₁₂等)以及硅酸盐(如YSi₂O₅，YSi₃O₇等)等；

常用作吸收子的稀土金属离子有：镱离子(Yb³⁺)，铒离子(Er⁺)，钐离子(Sm³⁺)等；常用作发射子的稀土金属离子有：铒离子(Er⁺)、钬离子(Ho³⁺)，铥离子(Tm³⁺)，铽离子(Tb³⁺)等。吸收子和发射子这一离子对在主基质晶格内适宜的空间取向和距离，是产生上上转发光的基础。上上转发光的产生是一个涉及多个光子(至少两个)的光学过程。在这个过程中，上上转发光材料内的吸收子(如Yb³⁺)至少要吸收两个低能量光子(红外光区，如970nm)，而后经过一系列内部能量转换，以非辐射的形式(Al→A2，A2→A3)将这两个光子的能量连续传递给发射子(如Era+)，以使其处于激发态(A3)。后者接着发生一个返回基态能级的跃迁，释放一个高能光子(可见光区，如525nm或540nm)完成能量上转。

两个光子激发UCP产生上上转发光的过程(见图1)。

不同的吸收子、发射子、主基质结合可使上转发光颗粒(up-converting particle，UCP)具有不同的光学性质。(1)主基质相同的情况下，一系列UCP采用相同的吸收子，不同的发射子，则它可由相同波长的红外光激发，产生不同波长的发射光(如：980nm红外光激发吸收子-Yb³⁺-发射子-Er³⁺、吸收子-Yb³⁺-发射子-Tm³⁺，分别发射550nm绿色可见光、475nm蓝色可见光)；采用不同的吸收子，相同的发射子，则虽经由不同的激发光，却可产生相同的发射光。(2)主基质不同的情况下，UCP光谱特征也将改变(如：吸收子-Yb³⁺-发射子-Er³⁺，在主基质YF₃，GdF₃中，分别发射红色和绿色的可见光)。组成的多样性决定了UCP光谱(激发光谱、发射光谱)的多样性，这成为其使用中灵活性的基础。

但是，目前还没有一种能利用上转发光免疫分析技术同时检测PCT和CRP的方法或者手段。

发明内容

本发明的目的在于针对现有技术不足，提供一种PCT/CRP联合检测用上转发光材料(UCP)试纸条，可以解决现有技术存在的不能在一个试纸条中同时检测PCT/CRP的问题。

本发明的另一个目的是利用上上转发光材料，弥补在PCT/CRP联合检测行业的行白。

本发明的目的可通过采用以下技术方案予以实现：

PCT检测用上转发光材料(UCP)试纸条，包括试纸条底衬、以及试纸条底衬上顺次相互搭接粘贴的样品垫、涂覆UCP作为生物标记物抗体的聚酯膜、包被膜及吸水纸，包被膜上设有包被兔抗鼠IgG抗体的控制线，包被膜还设有与所述的控制线平行的两条检测线，分别包被能与待检抗原PCT特异性结合的抗体以及与待检抗原CRP特异结合的抗体；所述UCP作为生物标记物抗体有两种，分别为上转发光材料(UCP)标记的能与待检抗原PCT特异性结合的抗体以及与待检抗原CRP特异结合的抗体。

所述样品垫为两层样品垫。

所述的与待检抗原PCT是人PCT，所述待检抗原CRP是人CRP。

所述的与待检抗原特异结合的抗体为能够与待检抗原特异结合的单克隆抗体。

所述的两条检测线中一条包被PCT单克隆抗体，另一条包被CRP单克隆抗体。

所述的UCP作为生物标记物抗体为上上转发光材料(UCP)标记的PCT单克隆抗体和上转发光材料(UCP)标记的CRP单克隆抗体。

本发明所述的PCT/CRP联合检测上上转发光材料(UCP)试纸条在同时检测人PCT和人CRP中的应用。

本试纸条可以用来检测PCT和CRP液体样品，操作时，将全血或血浆，血清按一定的量滴加在本试纸条的样品垫上，当出现的结果是在试纸条的PCT检测线、CRP检测线和控制线位置上各出现一条紫红色带时，表现为两者都是阳性。PCT检测线和控制线各出现一条红色带，说明PCT为阳性；CRP检测线和控制线各出现一条红色带，说明CRP为阳性；仅试纸条的控制线9位置出现一条紫红色带时，为阴性结果；在试纸条的控制线9位置上未出现紫红色条带时，为无效结果。

有益效果：本发明采用了现代PCT检测中最流行的上转发光材料(UCP)技术，通过试纸条上同时设置包被有PCT单克隆抗体或PCT多克隆抗体检测线、包被有CRP单克隆抗体或CRP多克隆抗体的检测线和兔抗鼠IgG抗体的控制线，能够同步检测两个指标，并且两种抗原不会相互干扰，结果准确，快速，操作简便，可以广泛用于炎症反应等疾病的检测。

附图说明

图1为两个光子激发UCP产生上转发光的过程。

图2本发明的上转发光材料(UCP)试纸条的横断面结构示意图；其中：1、底衬；2、第一层样品垫；3、第二层样品垫；4、聚酯膜；5、包被膜；6、吸水纸；7、包被PCT抗体的检测线；8、包被CRP抗体的检测线；9、包被兔抗鼠IgG抗体的控制线。

具体实施方式

下面结合附图和具体实施方式对本发明作进一步详细的说明。

实施例1

如图2所示，PCT/CRP联合检测用上转发光材料(UCP)试纸条，包括试纸条底衬1，以及试纸条底衬上顺次相互搭接粘贴的第一层样品垫2和第二层样品垫3、涂覆UCP作为生物标记物抗体的聚酯膜4、包被膜5和吸水纸6，包被膜5中部有一条包被鼠抗PCT的单克隆抗体的测线7、一条包被鼠抗CRP单克隆抗体的检测线8和一条包被兔抗鼠IgG抗体的控制线9。

涂覆UCP作为生物标记物抗体的聚酯膜中有由上转发光材料(UCP)颗粒标记的PCT单克隆抗体和由上转发光材料(UCP)颗粒标记的CRP单克隆抗体。

Claims (4)

1.PCT/CRP联合检测用上转发光材料(UCP)试纸条，包括试纸条底衬，以及试纸条底衬上顺次相互搭接粘贴的样品垫、涂覆有UCP作为生物标记物抗体的聚酯膜、包被膜及吸水纸，包被膜上设有一条包被兔抗鼠IgG抗体的控制线，其特征在于包被膜上还设有与所述控制线平行的两条检测线，分别包被能与待检抗原PCT特异性结合的抗体以及与待检抗原CRP特异结合的抗体；所述UCP作为生物标记物抗体有两种，分别为上转发光材料(UCP)标记的能与待检抗原PCT特异性结合的抗体以及与待检抗原CRP特异结合的抗体。

2.根据权利要求1所述的PCT/CRP联合检测上转发光材料(UCP)试纸条，其特征在于所述的样品垫为两层样品垫。

3.根据权利要求1所述的PCT/CRP联合检测上转发光材料(UCP)试纸条，其特征在于所述的与待检抗原PCT是人PCT，所述待检抗原CRP是人CRP。

4.根据权利要求1所述的PCT/CRP联合检测上转发光材料(UCP)试纸条，其特征在于所述的与待检抗原特异结合抗体是与待检抗原特异结合的单克隆抗体。

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