CN103285399B - 一种皮上划痕用布氏菌活疫苗冻干保护剂 - Google Patents

一种皮上划痕用布氏菌活疫苗冻干保护剂 Download PDF

Info

Publication number
CN103285399B
CN103285399B CN201310219595.5A CN201310219595A CN103285399B CN 103285399 B CN103285399 B CN 103285399B CN 201310219595 A CN201310219595 A CN 201310219595A CN 103285399 B CN103285399 B CN 103285399B
Authority
CN
China
Prior art keywords
freeze drying
brucella
drying protectant
thiourea
sucrose
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN201310219595.5A
Other languages
English (en)
Other versions
CN103285399A (zh
Inventor
魏东
王国治
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
National Institutes for Food and Drug Control
Original Assignee
National Institutes for Food and Drug Control
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by National Institutes for Food and Drug Control filed Critical National Institutes for Food and Drug Control
Priority to CN201310219595.5A priority Critical patent/CN103285399B/zh
Publication of CN103285399A publication Critical patent/CN103285399A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN103285399B publication Critical patent/CN103285399B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Landscapes

  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

本发明公开了一种无动物源性明胶成分的疫苗冻干保护剂，其以灭菌注射用水为溶剂，每升冻干保护剂中含有蔗糖20-100g、谷氨酸钠5-20g和硫脲5-20g，用于皮上划痕用布氏菌活疫苗的冻干保护。

Description

一种皮上划痕用布氏菌活疫苗冻干保护剂
技术领域
本发明涉及一种不含明胶的疫苗冻干保护剂，用于皮上划痕用布氏菌活疫苗的冻干保护，属于疫苗生产技术领域。
背景技术
目前国内皮上划痕用布氏菌活疫苗均为冻干产品，为了确保活疫苗在冻干过程以及在运输和储存过程中布氏菌的活菌率，现有技术在制备活疫苗的过程中会使用冻干保护剂。已知的用于制备皮上划痕用布氏菌活疫苗的冻干保护剂中含有明胶、蔗糖、谷氨酸钠和硫脲。由于冻干保护剂中含有动物源性的明胶成分，部分皮上划痕用布氏菌活疫苗的接种者会因体内产生抗明胶的IgE抗体而表现出过敏反应。另外，现有的皮上划痕用布氏菌活疫苗冻干保护剂，虽然能够在一定程度上提高布氏菌活疫苗在冻干过程以及在运输和储存过程中的活菌率，但是活菌率仍然较低，一般来说，在冻干后活菌率很难超过45%，并且随着运输和储存时间的延长，活菌率还会进一步降低，这导致疫苗的稳定性较差，进一步导致疫苗的效力较低。
发明内容
本发明提供了一种不含明胶的皮上划痕用布氏菌活疫苗冻干保护剂，解决了动物源性明胶成分可能导致的疫苗过敏问题。不仅如此，本发明的冻干保护剂还出人意料地提高了皮上划痕用布氏菌活疫苗在冻干过程以及在运输和储存过程中的活菌率，改善了疫苗的稳定性，从而提高了疫苗的效力。
本发明的皮上划痕用布氏菌活疫苗冻干保护剂中不含明胶，其以灭菌注射用水为溶剂，在每升冻干保护剂中含有：蔗糖20-100g、谷氨酸钠5-20g和硫脲5-20g；优选进一步含有氯化钠5-20g，以及更进一步含有乳糖20-100g和/或聚山梨酯800.001-0.05g。在每升冻干保护剂中，蔗糖的优选含量为约50g、谷氨酸钠的优选含量为约10g、硫脲的优选含量为约9g、氯化钠的优选含量为约9g、乳糖的优选含量为约25g、聚山梨酯80的优选含量为约0.005g。
在优选的实施方案中，本发明的皮上划痕用布氏菌活疫苗冻干保护剂由灭菌注射用水、蔗糖、谷氨酸钠和硫脲组成；在更优选的实施方案中，冻干保护剂由灭菌注射用水、蔗糖、谷氨酸钠、硫脲和氯化钠组成，或者由灭菌注射用水、蔗糖、谷氨酸钠、硫脲、氯化钠和乳糖组成，或者由灭菌注射用水、蔗糖、谷氨酸钠、硫脲、氯化钠和聚山梨酯80组成，或者由灭菌注射用水、蔗糖、谷氨酸钠、硫脲、氯化钠、乳糖和聚山梨酯80组成。在每升冻干保护剂中，各组分的含量为：蔗糖20-100g、谷氨酸钠5-20g、硫脲5-20g、氯化钠5-20g、乳糖20-100g、聚山梨酯800.001-0.05g，优选含量为：蔗糖约50g、谷氨酸钠约10g、硫脲约9g、氯化钠约9g、乳糖约25g、聚山梨酯80约0.005g。
本发明的冻干保护剂pH值在7.2-7.6范围内，可以用氢氧化钠溶液调节冻干保护剂的pH值使之在7.2-7.6范围内。
本发明的冻干保护剂可以通过包括如下步骤的方法制备得到：称取各组分并溶解于适量灭菌注射用水中，定容并调节pH值在7.2-7.6范围内，高压灭菌或过滤除菌，即得。本发明的冻干保护剂的保存条件为2-8℃。
本发明的冻干保护剂用于制备皮上划痕用布氏菌活疫苗，包括如下步骤：收获时用冻干保护剂洗下菌苔或刮取菌苔于冻干保护剂内，得原液；用冻干保护剂将原液稀释至所需浓度，例如，每1ml含菌1.9×1011，得半成品；分装，例如，每安瓿含0.5ml（10次人用剂量），冻干，得成品。
本发明还涉及皮上划痕用布氏菌活疫苗，其通过对由布氏菌和本发明的冻干保护剂组成的组合物冻干得到。本发明的皮上划痕用布氏菌活疫苗优选是人用的。
本发明的冻干保护剂中由于不含有动物源性的明胶成分，减少了接种者对皮上划痕用布氏菌活疫苗的过敏反应的发生，不仅如此，本发明的冻干保护剂还提高了皮上划痕用布氏菌活疫苗在冻干过程以及在运输和储存过程中的活菌率。在冻干过程中，使用含有明胶的现有冻干保护剂制备的皮上划痕用布氏菌活疫苗活菌减少率为57.1%，活菌率为41.1%，而使用本发明的冻干保护剂制备的皮上划痕用布氏菌活疫苗活菌减少率不超过25%，在优选的实施方案中活菌减少率低至13.3%。并且，在2-8℃放置1、2和3个月以及在37℃放置3天的情况下，使用本发明的冻干保护剂制备的皮上划痕用布氏菌活疫苗的活菌数均明显高于使用含有明胶的现有冻干保护剂制备的布氏菌活疫苗，由此可见，本发明取得了意想不到的积极效果。因此，本发明的冻干保护剂不仅赋予了皮上划痕用布氏菌活疫苗更好的安全性，还改善了疫苗的稳定性，从而提高了疫苗的效力，而且，制备本发明的冻干保护剂的各原料价格低廉，使得工业化生产的成本低。
具体实施方式
实施例1
称取以下物质：蔗糖20g、谷氨酸钠20g、硫脲20g；将上述物质溶解于适量灭菌注射用水，定容至1L并用氢氧化钠溶液调节pH值至7.2；高压灭菌，即得。
实施例2
称取以下物质：蔗糖50g、谷氨酸钠10g、硫脲9g；将上述物质溶解于适量灭菌注射用水，定容至1L并用氢氧化钠溶液调节pH值至7.4；高压灭菌，即得。
实施例3
称取以下物质：蔗糖100g、谷氨酸钠5g、硫脲5g；将上述物质溶解于适量灭菌注射用水，定容至1L并用氢氧化钠溶液调节pH值至7.3；过滤除菌，即得。
实施例4
称取以下物质：蔗糖20g、谷氨酸钠5g、硫脲5g、氯化钠20g；将上述物质溶解于适量灭菌注射用水，定容至1L并用氢氧化钠溶液调节pH值至7.5；高压灭菌，即得。
实施例5
称取以下物质：蔗糖50g、谷氨酸钠10g、硫脲9g、氯化钠9g；将上述物质溶解于适量灭菌注射用水，定容至1L并用氢氧化钠溶液调节pH值至7.4；高压灭菌，即得。
实施例6
称取以下物质：蔗糖100g、谷氨酸钠20g、硫脲20g、氯化钠5g；将上述物质溶解于适量灭菌注射用水，定容至1L并用氢氧化钠溶液调节pH值至7.6；过滤除菌，即得。
实施例7
称取以下物质：蔗糖20g、谷氨酸钠5g、硫脲5g、氯化钠5g、乳糖100g；将上述物质溶解于适量灭菌注射用水，定容至1L并用氢氧化钠溶液调节pH值至7.3；高压灭菌，即得。
实施例8
称取以下物质：蔗糖50g、谷氨酸钠10g、硫脲9g、氯化钠9g、乳糖25g；将上述物质溶解于适量灭菌注射用水，定容至1L并用氢氧化钠溶液调节pH值至7.4；高压灭菌，即得。
实施例9
称取以下物质：蔗糖100g、谷氨酸钠20g、硫脲20g、氯化钠20g、乳糖20g；将上述物质溶解于适量灭菌注射用水，定容至1L并用氢氧化钠溶液调节pH值至7.2；过滤除菌，即得。
实施例10
称取以下物质：蔗糖20g、谷氨酸钠5g、硫脲5g、氯化钠5g、聚山梨酯800.05g；将上述物质溶解于适量灭菌注射用水，定容至1L并用氢氧化钠溶液调节pH值至7.4；高压灭菌，即得。
实施例11
称取以下物质：蔗糖50g、谷氨酸钠10g、硫脲9g、氯化钠9g、聚山梨酯800.005g，将上述物质溶解于适量灭菌注射用水，定容至1L并用氢氧化钠溶液调节pH值至7.4；高压灭菌，即得。
实施例12
称取以下物质：蔗糖100g、谷氨酸钠20g、硫脲20g、氯化钠20g、聚山梨酯800.001g，将上述物质溶解于适量灭菌注射用水，定容至1L并用氢氧化钠溶液调节pH值至7.6；过滤除菌，即得。
实施例13
称取以下物质：蔗糖75g、谷氨酸钠5g、硫脲20g、氯化钠13g、乳糖50g、聚山梨酯800.005g，将上述物质溶解于适量灭菌注射用水，定容至1L并用氢氧化钠溶液调节pH值至7.2；高压灭菌，即得。
实施例14
称取以下物质：蔗糖50g、谷氨酸钠10g、硫脲9g、氯化钠9g、乳糖25g、聚山梨酯800.005g，将上述物质溶解于适量灭菌注射用水，定容至1L并用氢氧化钠溶液调节pH值至7.4；高压灭菌，即得。
实施例15
称取以下物质：蔗糖25g、谷氨酸钠20g、硫脲5g、氯化钠17g、乳糖75g、聚山梨酯800.005g，将上述物质溶解于适量灭菌注射用水，定容至1L并用氢氧化钠溶液调节pH值至7.5；过滤除菌，即得。
实施例16（对照实施例）
称取以下物质：明胶10g、蔗糖50g、谷氨酸钠10g、硫脲9g，将上述物质溶解于适量灭菌注射用水，定容至1L并用氢氧化钠溶液调节pH值至7.4；高压灭菌，即得。
实施例17
以肝琼脂为培养基，生产布氏菌，分别刮取菌苔于实施例1-16制备的冻干保护剂内，得原液1-16；使用实施例1-16制备的冻干保护剂分别将原液1-16稀释至每1ml含菌1.9×1011，得半成品1-16；分装，每安瓿含0.5ml（10次人用剂量），冻干，得成品。
分别对上述疫苗进行冻干前的活菌数测定，冻干后的水分、活菌数、2-8℃稳定性和37℃稳定性测定。结果如下：
（1）、疫苗冻干后的水分测定
按照2010年版《中华人民共和国药典》三部ⅦD提供的方法，分别对上述冻干后的疫苗的部分样品进行水分测定，结果见下表：
上述结果表明，利用本发明的冻干保护剂（实施例1-15）制备的皮上划痕用布氏菌活疫苗在冻干后水分均小于3.0%，符合《中华人民共和国药典》关于冻干疫苗水分应不高于3.0%的要求。
（2）、疫苗冻干前及冻干后的活菌数测定
分别对上述疫苗冻干前及冻干后的部分样品进行活菌数测定，结果见下表：
注：活菌减少率=（冻干前活菌数-冻干后活菌数）/冻干前活菌数
上述结果表明，利用本发明的冻干保护剂（实施例1-15）制备的皮上划痕用布氏菌活疫苗在冻干过程中活菌减少率要明显低于使用对照实施例（实施例16）制备的疫苗。
（3）、疫苗冻干后在2-8℃的稳定性测定
将上述冻干后的疫苗的部分样品放置在2-8℃，并分别于放置后的1、2、3个月进行活菌数测定，结果见下表：
上述结果表明，利用本发明的冻干保护剂（实施例1-15）制备的皮上划痕用布氏菌活疫苗冻干后在2-8℃条件下分别放置1、2和3个月，活菌数均明显高于使用对照实施例（实施例16）制备的疫苗。
（4）、疫苗冻干后在37℃的稳定性测定
将上述冻干后的疫苗的部分样品放置在37℃，并于3天后进行活菌数测定，结果见下表：
制备疫苗使用的 疫苗批号 3天活菌数
冻干保护剂 （×1011/ml）
实施例1 20130101 0.65
实施例2 20130102 0.63
实施例3 20130103 0.60
实施例4 20130104 1.26
实施例5 20130105 1.32
实施例6 20130106 1.28
实施例7 20130107 1.33
实施例8 20130108 1.37
实施例9 20130109 1.32
实施例10 20130110 1.29
实施例11 20130111 1.34
实施例12 20130112 1.28
实施例13 20130113 1.29
实施例14 20130114 1.35
实施例15 20130115 1.31
实施例16 20130116 0.36
上述结果表明，利用本发明的冻干保护剂（实施例1-15）制备的皮上划痕用布氏菌活疫苗冻干后在37℃条件下放置3天，活菌数要明显高于使用对照实施例（实施例16）制备的疫苗。
综合上述数据可以看出，本发明的不含明胶的皮上划痕用布氏菌活疫苗冻干保护剂与目前使用的含有明胶的冻干保护剂相比，无论是在皮上划痕用布氏菌活疫苗的冻干过程中，还是在2-8℃条件下或者在37℃条件下，由前者制备的疫苗的活菌数都明显高于后者，这表明，本发明的冻干保护剂与现有技术相比，明显改善了皮上划痕用布氏菌活疫苗的稳定性，从而提高了疫苗的效力。同时，由于本发明的冻干保护剂中不含明胶，还进一步提高了疫苗的安全性。

Claims (20)

1.一种不含明胶的皮上划痕用布氏菌活疫苗冻干保护剂，其以灭菌注射用水为溶剂，由灭菌注射用水、蔗糖、谷氨酸钠和硫脲组成，每升冻干保护剂中各组分的含量为：蔗糖20-100g、谷氨酸钠5-20g和硫脲5-20g。
2.如权利要求1所述的冻干保护剂，其特征在于，每升冻干保护剂中各组分的含量为：蔗糖50g、谷氨酸钠10g和硫脲9g。
3.如权利要求1或2所述的冻干保护剂，其特征在于，pH值在7.2-7.6范围内。
4.如权利要求1-3任一项所述的冻干保护剂的制备方法，包括如下步骤：称取各组分并溶解于适量灭菌注射用水中，定容并调节pH值在7.2-7.6范围内，高压灭菌或过滤除菌，即得。
5.如权利要求1-3任一项所述的冻干保护剂在制备皮上划痕用布氏菌活疫苗中的用途。
6.一种皮上划痕用布氏菌活疫苗，其通过对由布氏菌和如权利要求1-3任一项所述的冻干保护剂组成的组合物冻干得到。
7.一种不含明胶的皮上划痕用布氏菌活疫苗冻干保护剂，其以灭菌注射用水为溶剂，由灭菌注射用水、蔗糖、谷氨酸钠、硫脲和氯化钠组成，每升冻干保护剂中各组分的含量为：蔗糖20-100g、谷氨酸钠5-20g、硫脲5-20g和氯化钠5-20g。
8.如权利要求7所述的冻干保护剂，其特征在于，每升冻干保护剂中各组分的含量为：蔗糖50g、谷氨酸钠10g、硫脲9g和氯化钠9g。
9.如权利要求7或8所述的冻干保护剂，其特征在于，pH值在7.2-7.6范围内。
10.如权利要求7-9任一项所述的冻干保护剂的制备方法，包括如下步骤：称取各组分并溶解于适量灭菌注射用水中，定容并调节pH值在7.2-7.6范围内，高压灭菌或过滤除菌，即得。
11.如权利要求7-9任一项所述的冻干保护剂在制备皮上划痕用布氏菌活疫苗中的用途。
12.一种皮上划痕用布氏菌活疫苗，其通过对由布氏菌和如权利要求7-9任一项所述的冻干保护剂组成的组合物冻干得到。
13.一种不含明胶的皮上划痕用布氏菌活疫苗冻干保护剂，其以灭菌注射用水为溶剂，由灭菌注射用水、蔗糖、谷氨酸钠、硫脲、氯化钠以及乳糖和/或聚山梨酯80组成，每升冻干保护剂中各组分的含量为：蔗糖20-100g、谷氨酸钠5-20g、硫脲5-20g、氯化钠5-20g以及乳糖20-100g和/或聚山梨酯800.001-0.05g。
14.如权利要求13所述的冻干保护剂，其特征在于，每升冻干保护剂中各组分的含量为：蔗糖50g、谷氨酸钠10g、硫脲9g、氯化钠9g和乳糖25g。
15.如权利要求13所述的冻干保护剂，其特征在于，每升冻干保护剂中各组分的含量为：蔗糖50g、谷氨酸钠10g、硫脲9g、氯化钠9g和聚山梨酯800.005g。
16.如权利要求13所述的冻干保护剂，其特征在于，每升冻干保护剂中各组分的含量为：蔗糖50g、谷氨酸钠10g、硫脲9g、氯化钠9g、乳糖25g和聚山梨酯800.005g。
17.如权利要求13-16任一项所述的冻干保护剂，其特征在于，pH值在7.2-7.6范围内。
18.如权利要求13-17任一项所述的冻干保护剂的制备方法，包括如下步骤：称取各组分并溶解于适量灭菌注射用水中，定容并调节pH值在7.2-7.6范围内，高压灭菌或过滤除菌，即得。
19.如权利要求13-17任一项所述的冻干保护剂在制备皮上划痕用布氏菌活疫苗中的用途。
20.一种皮上划痕用布氏菌活疫苗，其通过对由布氏菌和如权利要求13-17任一项所述的冻干保护剂组成的组合物冻干得到。
CN201310219595.5A 2013-06-04 2013-06-04 一种皮上划痕用布氏菌活疫苗冻干保护剂 Active CN103285399B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201310219595.5A CN103285399B (zh) 2013-06-04 2013-06-04 一种皮上划痕用布氏菌活疫苗冻干保护剂

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201310219595.5A CN103285399B (zh) 2013-06-04 2013-06-04 一种皮上划痕用布氏菌活疫苗冻干保护剂

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN103285399A CN103285399A (zh) 2013-09-11
CN103285399B true CN103285399B (zh) 2015-01-28

Family

ID=49087283

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201310219595.5A Active CN103285399B (zh) 2013-06-04 2013-06-04 一种皮上划痕用布氏菌活疫苗冻干保护剂

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN103285399B (zh)

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104862242B (zh) * 2015-03-20 2018-03-16 中国食品药品检定研究院 一种布氏菌疫苗

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1168503C (zh) * 2001-12-21 2004-09-29 卫广森 鸡新城疫弱毒冻干疫苗耐热冻干保护剂及制备工艺
CN102657870B (zh) * 2012-06-04 2013-03-27 长春祈健生物制品有限公司 一种无明胶及人血蛋白成分的疫苗冻干保护剂

Also Published As

Publication number Publication date
CN103285399A (zh) 2013-09-11

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP5117193B2 (ja) アルスロスピラをベースとする組成物及びその利用
CN101891904A (zh) 一种海带寡糖及其制备方法和它的应用
CN102232609B (zh) 一种果胶酶解物天然食品防腐剂及其制备方法
CN104830713A (zh) 一株联产多种抗菌脂肽和γ-聚谷氨酸的芽孢杆菌菌株
CN104311645B (zh) 具有抑菌活性的螺旋藻多肽p1及其应用
CN103980665A (zh) 一种水溶性抗菌复合材料及其制备方法
CN103461715A (zh) 一种利用纳米载体材料做为辅料的水产饲料及其制备方法
CN103285399B (zh) 一种皮上划痕用布氏菌活疫苗冻干保护剂
CN105340893A (zh) 一种农用抗逆组合物及其制备方法和应用
CN103301450B (zh) 一种皮上划痕用鼠疫活疫苗冻干保护剂
CN103301451B (zh) 一种皮内注射用布氏菌活疫苗冻干保护剂
CN102703357A (zh) 聚天冬氨酸作为农用芽孢杆菌喷雾干燥保护剂的应用
CN105155341B (zh) 一种高强度高柔软性高抗菌性生活用纸及其制备方法
CN106751281A (zh) 一种含麦饭石除臭的膨润土/pva杀菌保鲜膜及其制备方法
KR101281920B1 (ko) 항균 효능을 나타내는 밀배아 추출물의 제조방법
JP2008295462A (ja) 家畜飼育法
JP2007332110A (ja) 根こぶ病害防除剤及び根こぶ病害防除方法
US20200283464A1 (en) Glycosaminoglycan ester and application thereof
CN112755179A (zh) 一种预防及治疗口腔中的幽门螺杆菌的组合物及其应用
CN105362211A (zh) 纳米金属氧化物-米诺环素纳米缓释凝胶及其制备方法和应用
CN102150924B (zh) 一种含有蒜氨酸的保鲜剂及其生产方法
CN110373351A (zh) 一种冻干保护剂及其在制备乳酸菌冻干粉中应用
CN106751278A (zh) 一种防水、含大蒜油的膨润土/pva杀菌保鲜膜及其制备方法
CN106751280A (zh) 一种疏水保湿、含大蒜油的膨润土/pva杀菌保鲜膜及其制备方法
JP3834460B2 (ja) 動物の乳頭除菌剤

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant