CN103285070A - 鹰嘴豆豆芽提取物分散片的制备方法和用途 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种用于降低血糖的鹰嘴豆豆芽提取物本发明涉及一种用于降低血糖的鹰嘴豆豆芽提取物分散片的制备方法和用途。该方法将鹰嘴豆经3-4天发芽，采摘豆芽，晾干后采用乙醇提取、大孔吸附树脂柱吸附、减压浓缩并干燥，得到鹰嘴豆豆芽提取物；再将鹰嘴豆豆芽提取物加入药学上可接受的填充剂、崩解剂、溶胀性辅料混合均匀，用乙醇液为润湿剂制软材，制粒，干燥，整粒，加入润滑剂混合均匀，压片，即可得到鹰嘴豆豆芽提取物分散片；通过本发明所述方法获得的鹰嘴豆豆芽提取物分散片具有崩解速度快，有效成分溶出度高，分散均匀性好的特点，用于治疗或预防糖尿病的药物或辅助降糖的保健食品。

Description

鹰嘴豆豆芽提取物分散片的制备方法和用途

技术领域

本发明涉及中药领域，具体的说涉及一种鹰嘴豆豆芽提取物分散片的制备方法和用于治疗或预防糖尿病的药物或辅助降糖的保健食品。

背景技术

糖尿病（diabetes mellitus，DM）是由遗传基因决定的全身代谢性疾病，在我国的发病率和患病率逐年提高，其主要特点是高血糖及糖尿，是继肿瘤和心血管疾病之后的第三大疾病。有关专家预测近十年是“糖尿病国际流行年”。据世界卫生组织（WHO）报告全球范围内糖尿病患者高达1.25亿，预计这一数字到2025年将突破3亿。我国流行病学调查显示，中国糖尿病患病率为3.21%，患病人数超过3000万，居世界前列。由糖尿病引起的各种并发症，是糖尿病患者致残和折寿的主要原因。由于体内胰岛素的相对或绝对不足而引起糖、脂肪和蛋白质代谢紊乱，是一种慢性、终生性疾病。

目前控制糖尿病所用的药物如：胰岛素、胰岛素促分泌剂磺脲类、双胍类；以及近年推出的胰岛素增敏剂-噻唑烷二酮类化合物、α-葡萄糖苷酶抑制剂等在降低血糖方面效果显著，但它们都存在不同程度的毒副作用，同时在防治并发症方面效果还不十分理想。另外，近年来国内外有关各种植物中天然降糖物质的研究和开发十分活跃。在长期的使用过程中发现，与具有降糖作用的化学合成药物相比，植物成分更适合于对糖尿病的长期控制。

鹰嘴豆为豆科豌豆族鹰嘴豆属植物鹰嘴豆Cicer arietinum L.的干燥种子。在新疆有2500年的生长历史,是维吾尔医常用药材，已被收载在中华人民共和国卫生部《药品标准》维吾尔药分册和《维吾尔药志》中，具有“清除异常体液，开通体液闭阻，调节机体等作用。用于身体瘦弱，性欲低下，食欲不振，皮肤瘙痒及糖尿病等疾病”。

本发明前期系统研究了鹰嘴豆不同发芽天数及不同部位（芽、豆瓣、豆芽）中异黄酮类化合物鹰嘴豆芽素A和芒柄花素的含量，结果在发芽3-4天的芽中鹰嘴豆芽素A和芒柄花素的含量最高。将采摘豆芽晾干，粉碎成粗粉，采用50%-80%乙醇回流提取，提取液滤过，减压回收乙醇至药液含醇浓度为5%-20%时，可直接上样经大孔吸附树脂柱吸附。中国专利ZL201010523065.6：一种鹰嘴豆豆芽有效成分的纯化方法、ZL201010614623.X：鹰嘴豆豆芽有效部位及其制备方法和应用，二者均采用聚酰胺吸附后再经大孔树脂纯化，操作工艺复杂，且乙醇提取液浓缩至无醇时，异黄酮类化合物易沉淀，给纯化工作带来不便，有效成分的损耗也较多。

由于异黄酮类化合物为难溶性成分，制成一般片剂，体外溶出慢，生物利用度低。为提高鹰嘴豆豆芽中功效成分的溶出度和生物利用度，将其制成分散片这一新型口服固体剂型。分散片(dispersibletablets)又称水分散片(water dispersible tablets),是指遇水可迅速崩解形成均匀黏性混悬液的片剂。它是近年来研究应用较多的一种速释固体制剂，兼有片剂和液体制剂的优点，并克服了两者的不足。与普通片相比，分散片具有分散状态佳、崩解时间短、药物溶出迅速、吸收快、生物利用度高、不良反应少、服用方便等优势，其中最显著特点是不需用水送服，在口腔内遇到唾液就能够迅速溶解，给一些吞服功能不好、婴幼儿及儿童、取水不便的患者提供了便利。分散片服用方式多样，可以吞服、咀嚼含吮、或在水分散后服用。分散片制备工艺简单，生产成本低，是一种具有开发前景的新型片剂，近几年已得到迅速发展。

发明内容

本发明的目的在于，提供一种鹰嘴豆豆芽提取物分散片的制备方法和用途，该方法将鹰嘴豆经3-4天发芽，采摘豆芽，晾干后采用乙醇提取、大孔吸附树脂柱吸附、减压浓缩并干燥，得到鹰嘴豆豆芽提取物；再将鹰嘴豆豆芽提取物，加入药学上可接受的填充剂、崩解剂、溶胀性辅料混合均匀，用乙醇液为润湿剂制软材，制粒，干燥，整粒，加入润滑剂混合均匀，压片，即可得到鹰嘴豆豆芽提取物分散片；通过本发明所述方法获得的鹰嘴豆豆芽提取物分散片具有崩解速度快，有效成分溶出度高，分散均匀性好的特点，用于治疗或预防糖尿病的药物或辅助降糖的保健食品。

本发明所述的一种鹰嘴豆豆芽提取物分散片的制备方法，按下列步骤进行：

a、将鹰嘴豆经3-4天发芽，采摘豆芽，晾干，粉碎成粗粉，加入重量15-30倍浓度为50-80%的乙醇水溶液，浸泡至透心，加热至温度60-90℃，回流提取1-4次，每次1-3小时，合并提取液，滤过，滤液减压回收乙醇至药液含醇浓度为5%-20%时，经大孔吸附树脂柱吸附3-12h，先用蒸馏水洗脱至流出液近无色，再用50-95%乙醇洗脱，收集至洗脱液无色为止，减压浓缩，浓缩温度40-80℃，压力-0.07Mpa至-0.1Mpa，干燥，干燥温度50-70℃，粉碎，过80-100目筛，得到鹰嘴豆豆芽提取物；

b、将步骤a的鹰嘴豆豆芽提取物加入辅料为药学上可接受的填充剂为乳糖、微晶纤维素中一种或两种，崩解剂为羧甲基淀粉钠、低取代羟丙纤维素、交联羧甲纤维素钠、交联聚乙烯吡咯烷酮中一种或两种，溶胀性辅料为预凝胶淀粉混合均匀，用浓度为75%-95%的乙醇液为润湿剂制软材，过24-40目筛制粒，温度50-70℃干燥，将干燥后的颗粒过24-40目筛整粒，加入润滑剂为硬脂酸镁、微粉硅胶中一种或两种混合均匀，压片，即可得到分散片；

或将步骤a的鹰嘴豆豆芽提取物加入辅料为药学上可接受的填充剂为乳糖、微晶纤维素中一种或两种，部分的崩解剂为羧甲基淀粉钠、低取代羟丙纤维素、交联羧甲纤维素钠、交联聚乙烯吡咯烷酮中一种或两种，溶胀性辅料为预凝胶淀粉混合均匀，用浓度为75%-95%的乙醇液为润湿剂制软材，过24-40目筛制粒，温度50-70℃干燥，将干燥后的颗粒过24-40目筛整粒，再加入剩余量的崩解剂，加入润滑剂为硬脂酸镁、微粉硅胶中一种或两种混合均匀，压片，即可得到分散片。

步骤a中所述的大孔树脂为HPD-100或HPD-300、HPD-450、HPD-600型。

通过本发明所述方法获得的鹰嘴豆豆芽提取物分散片以200片为基数，其中鹰嘴豆豆芽提取物为15-35g，填充剂为30-55g，崩解剂为10-30g，溶胀性辅料为1-4g，润滑剂为0.5-2g。

所述的方法获得的鹰嘴豆豆芽提取物分散片的用途，该分散片用于在制备治疗或预防糖尿病的药物或辅助降糖的保健食品。

附图说明

图1为鹰嘴豆不同发芽天数不同部位芒柄花素和鹰嘴豆芽素A的含量变化图，其中

为芒柄花素，

为鹰嘴豆芽素A。

具体实施方式

实施例1：（以制成200片为基数）

将鹰嘴豆经3天发芽，采摘豆芽，晾干，粉碎成粗粉，加入重量15倍浓度为50%的乙醇水溶液，浸泡至透心，加热至温度60℃，回流提取2次，每次1小时，合并提取液，滤过，滤液减压回收乙醇至药液含醇浓度为5%时，经HPD300大孔吸附树脂柱吸附6h，先用蒸馏水洗脱至流出液近无色，再用50%乙醇和95%乙醇依次洗脱，收集至洗脱液无色为止，减压浓缩，浓缩温度40℃，压力-0.07Mpa至-0.1Mpa，干燥，粉碎，过100目筛，得到鹰嘴豆豆芽提取物；

称取鹰嘴豆豆芽提取物35g，填充剂微晶纤维素50g，崩解剂交联聚乙烯吡咯烷酮12g，溶胀性辅料预凝胶淀粉2g，过100目筛混合均匀，用浓度为75%乙醇液为润湿剂制软材，过40目筛制粒，湿颗粒于温度50℃干燥1h，取干燥后的颗粒过40目筛整粒，再加入润滑剂微粉硅胶1g，混合均匀，压片，即可得到鹰嘴豆豆芽提取物分散片。

实施例2：（以制成200片为基数）

将鹰嘴豆经4天发芽，采摘豆芽，晾干，粉碎成粗粉，加入重量20倍浓度为60%乙醇水溶液，浸泡至透心，加热至温度70℃，回流提取3次，每次1.5小时，合并提取液，滤过，滤液减压回收乙醇至药液含醇浓度为10%时，经HPD600大孔吸附树脂柱吸附10h，先用蒸馏水洗脱至流出液近无色，再用浓度为60%乙醇洗脱，收集至洗脱液无色为止，减压浓缩，浓缩温度50℃，压力-0.07Mpa至-0.1Mpa，干燥，粉碎，过100目筛，得到鹰嘴豆豆芽提取物；

称取鹰嘴豆豆芽提取物30g，填充剂为微晶纤维素40g，崩解剂为交联羧甲纤维素钠18g和交联聚乙烯吡咯烷酮9g，溶胀性辅料为预凝胶淀粉2.5g，过100目筛混合均匀，用浓度为85%乙醇液为润湿剂制软材，过24目筛制粒，湿颗粒于温度60℃干燥1h，取干燥后的颗粒过30目筛整粒，再加入润滑剂为硬脂酸镁0.5g，混合均匀，压片，即可得到鹰嘴豆豆芽提取物分散片。

实施例3：（以制成200片为基数）

将鹰嘴豆经3天发芽，采摘豆芽，晾干，粉碎成粗粉，加入重量30倍浓度为70%乙醇水溶液，浸泡至透心，加热至温度80℃，回流提取4次，每次1.0小时，合并提取液，滤过，滤液减压回收乙醇至药液含醇浓度为15%时，经HPD100大孔吸附树脂柱吸附12h，先用蒸馏水洗脱至流出液近无色，再用浓度为80%乙醇洗脱，收集至洗脱液无色为止，减压浓缩，浓缩温度65℃，压力-0.07Mpa至-0.1Mpa，干燥，粉碎，过80目筛，得到鹰嘴豆豆芽提取物；

称取鹰嘴豆豆芽提取物25g，填充剂为加入乳糖20g和微晶纤维素20g，部分的崩解剂为羧甲基淀粉钠25g，溶胀性辅料为预凝胶淀粉4g，过100目筛混合均匀，用浓度为90%乙醇液为润湿剂制软材，过24目筛制粒，湿颗粒于温度60℃干燥1h，取干燥后的颗粒过24目筛整粒，再加入剩余量的崩解剂为羧甲基淀粉钠5g，加入润滑剂为微粉硅胶1g，混合均匀，压片，即可得到鹰嘴豆豆芽提取物分散片。

实施例4：（以制成200片为基数）

将鹰嘴豆经4天发芽，采摘豆芽，晾干，粉碎成粗粉，加入重量25倍浓度为80%乙醇水溶液，浸泡至透心，加热至温度90℃，回流提取1次，每次3.0小时，合并提取液，滤过，滤液减压回收乙醇至药液含醇浓度为20%时，经HPD450大孔吸附树脂柱吸附3h，先用蒸馏水洗脱至流出液近无色，再用浓度为70%乙醇洗脱，收集至洗脱液无色为止，减压浓缩，浓缩温度80℃，压力-0.07Mpa至-0.1Mpa，干燥，粉碎，过100目筛，得到鹰嘴豆豆芽提取物；

称取鹰嘴豆豆芽提取物15g，加入填充剂为微晶纤维素55g、崩解剂为低取代羟丙纤维素14g，溶胀性辅料为预凝胶淀粉4g，过100目筛混合均匀，用浓度为95%乙醇液为润湿剂制软材，过40目筛制粒，湿颗粒于温度60℃干燥1h，取干燥后的颗粒过40目筛整粒，再加入崩解剂为羧甲基淀粉钠10g，润滑剂为微粉硅胶1g和硬脂酸镁1g，混合均匀，压片，即可得到鹰嘴豆豆芽提取物分散片。

实施例5：（以制成200片为基数）

将鹰嘴豆经3天发芽，采摘豆芽，晾干，粉碎成粗粉，加入重量18倍浓度为55%的乙醇水溶液，浸泡至透心，加热至温度75℃，回流提取3次，每次2小时，合并提取液，滤过，滤液减压回收乙醇至药液含醇浓度为8%时，经HPD100大孔吸附树脂柱吸附8h，先用蒸馏水洗脱至流出液近无色，再用浓度为65%乙醇洗脱，收集至洗脱液无色为止，减压浓缩，浓缩温度50℃，压力-0.07Mpa至-0.1Mpa，干燥，粉碎，过80目筛，得到鹰嘴豆豆芽提取物；

称取鹰嘴豆豆芽提取物30g，填充剂为乳糖45g，崩解剂为低取代羟丙纤维素20g，溶胀性辅料为预凝胶淀粉3.5g，过100目筛混合均匀，用浓度为75%乙醇液为润湿剂制软材，过40目筛制粒，湿颗粒于温度70℃干燥1h，取干燥后的颗粒过40目筛整粒，再加入润滑剂为微粉硅胶1.5g混合均匀，压片，即可得到鹰嘴豆豆芽提取物分散片。

实施例6：（以制成200片为基数）

将鹰嘴豆经4天发芽，采摘豆芽，晾干，粉碎成粗粉，加入重量24倍浓度为65%乙醇水溶液，浸泡至透心，加热至温度65℃，回流提取4次，每次1.5小时，合并提取液，滤过，滤液减压回收乙醇至药液含醇浓度为12%时，经HPD300大孔吸附树脂柱吸附12h，先用蒸馏水洗脱至流出液近无色，再用浓度为85%乙醇洗脱，收集至洗脱液无色为止，减压浓缩，浓缩温度65℃，压力-0.07Mpa至-0.1Mpa，干燥，粉碎，过100目筛，得到鹰嘴豆豆芽提取物；

称取鹰嘴豆豆芽提取物35g，填充剂为微晶纤维素30g，崩解剂为交联羧甲纤维素钠30g，溶胀性辅料为预凝胶淀粉4g，过100目筛混合均匀，用浓度为65%乙醇液为润湿剂制软材，过30目筛制粒，湿颗粒于温度60℃干燥1h，取干燥后的颗粒过40目筛整粒，再加入润滑剂为硬脂酸镁1g混合均匀，压片，即可得到鹰嘴豆豆芽提取物分散片。

实施例7：（以制成200片为基数）

将鹰嘴豆经3天发芽，采摘豆芽，晾干，粉碎成粗粉，加入重量28倍浓度为75%乙醇水溶液，浸泡至透心，加热至温度75℃，回流提取2次，每次3小时，合并提取液，滤过，滤液减压回收乙醇至药液含醇浓度为16%时，经HPD450大孔吸附树脂柱吸附9h，先用蒸馏水洗脱至流出液近无色，再用浓度为95%乙醇洗脱，收集至洗脱液无色为止，减压浓缩，浓缩温度50℃，压力-0.07Mpa至-0.1Mpa，干燥，粉碎，过80目筛，得到鹰嘴豆豆芽提取物；

称取鹰嘴豆豆芽提取物26g，加入填充剂为乳糖15g和微晶纤维素25g，崩解剂为交联聚乙烯吡咯烷酮25g，溶胀性辅料为预凝胶淀粉3.2g，过100目筛混合均匀，用浓度为90%乙醇液为润湿剂制软材，过24目筛制粒，湿颗粒于温度50℃干燥1h，取干燥后的颗粒过40目筛整粒，再加入崩解剂为低取代羟丙纤维素5g，润滑剂为微粉硅胶0.8g混合均匀，压片，即可得到鹰嘴豆豆芽提取物分散片。

实施例8：（以制成200片为基数）

将鹰嘴豆经4天发芽，采摘豆芽，晾干，粉碎成粗粉，加入重量30倍浓度为50%乙醇水溶液，浸泡至透心，加热至温度80℃，回流提取3次，每次3.0小时，合并提取液，滤过，滤液减压回收乙醇至药液含醇浓度为18%时，经HPD600大孔吸附树脂柱吸附12h，先用蒸馏水洗脱至流出液近无色，再用浓度为75%乙醇洗脱，收集至洗脱液无色为止，减压浓缩，浓缩温度60℃，压力-0.07Mpa至-0.1Mpa，干燥，粉碎，过100目筛，得到鹰嘴豆豆芽提取物；

称取鹰嘴豆豆芽提取物35g，加入填充剂为乳糖40g，崩解剂为交联聚乙烯吡咯烷酮14g和羧甲基淀粉钠8g，溶胀性辅料为预凝胶淀粉2g，过100目筛混合均匀，用浓度为80%乙醇液为润湿剂制软材，过30目筛制粒，湿颗粒于温度65℃干燥1h，取干燥后的颗粒过40目筛整粒，加入润滑剂为硬脂酸镁1g，混合均匀，压片，即可得到鹰嘴豆豆芽提取物分散片。

实施例9：（以制成200片为基数）

将鹰嘴豆经3天发芽，采摘豆芽，晾干，粉碎成粗粉，加入重量25倍浓度为70%乙醇水溶液，浸泡至透心，加热至温度60℃，回流提取4次，每次2.5小时，合并提取液，滤过，滤液减压回收乙醇至药液含醇浓度为6%时，经HPD300大孔吸附树脂柱吸附3h，先用蒸馏水洗脱至流出液近无色，再用浓度为85%乙醇洗脱，收集至洗脱液无色为止，减压浓缩，浓缩温度70℃，压力-0.07Mpa至-0.1Mpa，干燥，粉碎，过100目筛，得到鹰嘴豆豆芽提取物；

称取鹰嘴豆豆芽提取物30g，加入填充剂为乳糖44g，崩解剂为羧甲基淀粉钠15g，溶胀性辅料为预凝胶淀粉4g，过100目筛混合均匀，用浓度为85%乙醇液为润湿剂制软材，过40目筛制粒，湿颗粒于温度65℃干燥1h，取干燥后的颗粒过40目筛整粒，再加入崩解剂为低取代羟丙纤维素5g，润滑剂为硬脂酸镁2g混合均匀，压片，即可得到鹰嘴豆豆芽提取物分散片。

实施例10

本发明所述的鹰嘴豆豆芽提取物分散片在制备治疗糖尿病降血糖的药物中的用途；

1、鹰嘴豆不同发芽天数不同部位中异黄酮类活性成分的变化：

取不同发芽天数的芽、豆瓣、豆芽，分别粉碎过100筛，各取约1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇20ml，密塞，称定重量，超声处理（功率300W，频率35KHz）30分钟，放冷至室温，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，静置，取上清液用微孔滤膜（0.45μm）滤过，弃去初滤液，取续滤液，即得；用HPLC测其芒柄花素和鹰嘴豆芽素A的含量，结果如表1：

表1不同发芽天数不同部位芒柄花素和鹰嘴豆芽素A的含量

结果：从表中数据可以看出，不同发芽天数的芽、豆瓣、豆芽中第三天芽中芒柄花素和鹰嘴豆芽素A的含量最高。

2、鹰嘴豆豆芽提取物的体外、体内降糖活性研究：

2.1体外降糖（蛋白络氨酸磷酸酶1B）活性研究：

表2不同发芽天数不同部位PTP1B抑制活性研究

样品号	降糖作用PTP-1B IC50（ug/ml）
		1a	12.588
1b	>50ug/ml
		1c	>50ug/ml
2a	25.628
		2b	37.26
2c	>50ug/ml
		3a	8.632
3b	22.116
		3c	20.519
4a	10.131
		4b	17.12
4c	26.197

注：1）a,b,c分别为完整豆芽、芽、豆瓣；2）1,2,3,4分别表示第一、二、三、四天。

2.2鹰嘴豆豆芽提取物对血糖的调节作用，通过体内药效学实验对本发明作进一步的说明：

盐酸二甲双胍片（四川制药制剂有限公司生产，批号100201）；四氧嘧啶(Alloxan，Sigma公司，批号22136)，保存条件：4℃，密封保存。用生理盐水溶解，按等容积不同浓度配制成相应浓度，临用时现配，注射时分次少量配制，溶液置于冰袋上低温注射；葡萄糖检测试纸（德国罗氏诊断有限公司，批号23433332，23430631）；葡萄糖（江西航天泰力士药业有限公司，批号080720）。

ACCU-CHEK血糖测定仪（德国罗氏诊断有限公司）；Sartorius-BS323S电子天平(北京赛多利斯天平有限公司)。

昆明种小鼠，清洁级，体重l8-22g，雌雄各半，新疆实验动物研究中心提供，许可证号：新医动字SCXK（新）2003-002；

数据处理方法采用均数±标准差描述；数据比较：计量资料两组间比较采用t检验；多组比较采用方差分析；组间两两比较采用q检验；非正态资料采用非参数检验（检验水准α=0.05）；所有数据均用SPSS16.0统计软件包处理；

（1）、对正常小鼠血糖值的影响：

昆明种小鼠（18-22g）30只，SPF级，雌雄各半，禁食12h，检测血糖值，先根据血糖值大小进行随机分为3组，分别为空白对照组、鹰嘴豆豆芽提取物低剂量组（0.2g/kg）、鹰嘴豆豆芽提取物高剂量组（0.6g/kg），每组雌雄各半共10只。给药一周后，禁食12h，血糖试纸检测血糖值表3；

表3鹰嘴豆豆芽提取物对正常小鼠血糖值影响

由表3的试验结果可见：鹰嘴豆豆芽提取物高、低剂量组与空白对照组比较，给药后的血糖没有统计学差异（P>0.05）；表明鹰嘴豆豆芽提取物低剂量（0.2g/kg）、高剂量（0.6g/kg）对正常小鼠的血糖值无影响；

（2）、鹰嘴豆豆芽提取物对四氧嘧啶造模糖尿病小鼠血糖值的影响：

昆明种小鼠（l8-22g）50只，SPF级，雌雄各半，随机分成2大组，其中对照组10只，另一组为糖尿病造模组。糖尿病造模组小鼠于禁食12h后按60mg／kg剂量一次尾静脉注射四氧嘧啶致糖尿病，对照组注射等体积生理盐水，72h后称体重，断尾采血测空腹血糖值。以血糖值大于11.1mmol／L作为造模成功标准，并按血糖值将造模成功小鼠随机分成糖尿病模型组、糖尿病模型＋阳性对照组（盐酸二甲双胍0.2g/kg）、糖尿病模型＋鹰嘴豆豆芽提取物低剂量组（0.2g/kg）、糖尿病模型＋鹰嘴豆豆芽提取物高剂量组（0.6g/kg）；

分组后次日开始每天灌胃相应药物；空白对照组与模型组注射等体积生理盐水，连续给药7d后，禁食不禁水12h，血糖试纸检测血糖值表4，表5；

表4鹰嘴豆豆芽提取物对四氧嘧啶造模糖尿病小鼠体重的影响

注：与空白组比较，**P<0.01，*P<0.05；与模型组比较，##P<0.01，#P<0.05；

表5鹰嘴豆豆芽提取物对四氧嘧啶造模糖尿病小鼠血糖值的影响

注：与空白组比较，**P<0.01，*P<0.05；与模型组比较，##P<0.01，#P<0.05；

由表5的试验结果可见：鹰嘴豆豆芽提取物高剂量给药可以降低四氧嘧啶造模引起的血糖升高，结果差异具有统计学意义（P<0.01），鹰嘴豆豆芽提取物低剂量给药可以降低四氧嘧啶造模引起的血糖升高，结果差异具有统计学意义（P<0.05），阳性对照组给药后血糖较给药前有明显降低，与模型组比较有明显降低，结果具有统计意义（P<0.01）。结果表明：鹰嘴豆豆芽提取物高、低剂量具有不同程度降低糖尿病模型小鼠血糖升高的作用；

（3）、鹰嘴豆豆芽提取物对四氧嘧啶造模糖尿病小鼠的糖耐量影响：

将购回的小鼠适应性喂养1d后，随机分成2大组，其中对照组10只，另一组为糖尿病造模组。糖尿病造模组小鼠于禁食12h后按60mg／kg剂量一次尾静脉注射四氧嘧啶致糖尿病，对照组注射等体积生理盐水，72h后称体重、断尾采血，血糖试纸测空腹血糖值，以血糖值大于11.1mmol／L作为造模成功标准，并按血糖值均衡原则将造模成功小鼠分成糖尿病模型组、糖尿病模型＋阳性对照组（盐酸二甲双胍0.2g/kg）、糖尿病模型＋鹰嘴豆豆芽提取物低剂量组（0.2g/kg）、糖尿病模型＋鹰嘴豆豆芽提取物高剂量组（0.6g/kg）。

分组后次日开始每天灌胃相应药物，空白对照组与模型组注射等体积生理盐水，连续给药7d，末次给药后30min，将每组实验动物按2g／kg剂量灌胃给予10%葡萄糖，分别于给葡萄糖后的0h、0.5h、1h、2h断尾取血，血糖试纸测定血糖值表6：

表6鹰嘴豆豆芽提取物对四氧嘧啶造模糖尿病小鼠的糖耐量的影响

注：与模型组比较##P<0.01，#P<0.05

由表6的试验结果可见：鹰嘴豆豆芽提取物高、低剂量组与模型对照组比较能降低给药后0-2h以内的血糖值，结果具有统计学意义（P<0.05)；

以上实验结果表明：鹰嘴豆豆芽提取物高、低剂量在糖尿病模型小鼠服糖后2小时内可以降低其血糖值，提示鹰嘴豆豆芽提取物具有改善糖尿病小鼠餐后血糖升高的作用。

3、通过本发明所述方法获得的鹰嘴豆豆芽提取物分散片，具有崩解速度快，有效成分溶出度高，分散均匀性好的特点，可用于治疗或预防糖尿病的药物或辅助降糖的保健食品。

为表明本发明的进步性，以普通片与本发明的分散片进行崩解时间和溶出度的比较试验：

（1）鹰嘴豆豆芽分散片与普通片的崩解情况比较：

崩解时间及分散均匀性测定：取1片鹰嘴豆豆芽分散片与普通片，分别置于100ml水中振摇，在温度20℃±1℃的温度下，时间3分钟内应全部崩解且达到均匀分散状态，通过2号筛，结果见表7：

表7鹰嘴豆豆芽分散片与普通片崩解时间比较

由表7结果可以看出，分散片的崩解时间比普通片提高了10～15倍。

（2）、鹰嘴豆豆芽分散片与普通片溶出情况比较：

本发明的鹰嘴豆豆芽分散片的溶出度测定，按照中国药典2010版二部附录XC第二法，用高效液相色谱仪测定样品中鹰嘴豆芽素A、芒柄花素的累积溶出百分率（%），试验结果见表8：

表8鹰嘴豆豆芽分散片与普通片溶出度比较

由表8结果可以看出，5分钟内分散片的溶出度是普通片的约25倍左右；

以上结果表明：本发明所述的鹰嘴豆豆芽分散片能在2分钟内崩解完全且达到均匀分散状态，其有效成分鹰嘴豆芽素A、芒柄花素在5分钟时累积溶出率分别为83.1%、85.2%，明显优于普通片。

Claims (4)

1.一种鹰嘴豆豆芽提取物分散片的制备方法，其特征在于按下列步骤进行：

a、将鹰嘴豆经3-4天发芽，采摘豆芽，晾干，粉碎成粗粉，加入重量15-30倍浓度为50-80%的乙醇水溶液，浸泡至透心，加热至温度60-90℃，回流提取1-4次，每次1-3小时，合并提取液，滤过，滤液减压回收乙醇至药液含醇浓度为5%-20%时，经大孔吸附树脂柱吸附3-12h，先用蒸馏水洗脱至流出液近无色，再用50-95%乙醇洗脱，收集至洗脱液无色为止，减压浓缩，浓缩温度40-80℃，压力-0.07Mpa至-0.1Mpa，干燥，干燥温度50-70℃，粉碎，过80-100目筛，得到鹰嘴豆豆芽提取物；

b、将步骤a的鹰嘴豆豆芽提取物加入辅料为药学上可接受的填充剂为乳糖、微晶纤维素中一种或两种，崩解剂为羧甲基淀粉钠、低取代羟丙纤维素、交联羧甲纤维素钠、交联聚乙烯吡咯烷酮中一种或两种，溶胀性辅料为预凝胶淀粉混合均匀，用浓度为75%-95%的乙醇液为润湿剂制软材，过24-40目筛制粒，温度50-70℃干燥，将干燥后的颗粒过24-40目筛整粒，加入润滑剂为硬脂酸镁或微粉硅胶中一种或两种混合均匀，压片，即可得到分散片；

或将步骤a的鹰嘴豆豆芽提取物加入辅料为药学上可接受的填充剂为乳糖、微晶纤维素中一种或两种，部分的崩解剂为羧甲基淀粉钠、低取代羟丙纤维素、交联羧甲纤维素钠、交联聚乙烯吡咯烷酮中一种或两种，溶胀性辅料为预凝胶淀粉混合均匀，用浓度为75%-95%的乙醇液为润湿剂制软材，过24-40目筛制粒，温度50-70℃干燥，将干燥后的颗粒过24-40目筛整粒，再加入剩余量的崩解剂，加入润滑剂为硬脂酸镁、微粉硅胶中一种或两种混合均匀，压片，即可得到分散片。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于步骤a中所述的大孔树脂为HPD-100或HPD-300、HPD-450、HPD-600型。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于通过本发明所述方法获得的鹰嘴豆豆芽提取物分散片以200片为基数，其中鹰嘴豆豆芽提取物15-35g，填充剂30-55g，崩解剂10-30g，溶胀性辅料1-4g，润滑剂0.5-2g。

4.一种如权利要求1所述的方法获得的鹰嘴豆豆芽提取物分散片的用途，其特征在于该分散片用于在制备治疗或预防糖尿病的药物或辅助降糖的保健食品。

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