CN103243145A - 一种高纯度丝素肽的制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种高纯度丝素肽的制备方法，包括如下步骤：(1)以下脚茧或废蚕丝为原料，用Na2CO3溶液进行脱胶精炼；再经过水洗、干燥后，得到丝素；(2)将上述丝素用CaCl2-H2O-C2H5OH三元体系溶解；(3)稀释后，用中性蛋白酶进行酶解；(4)采用电渗析进行过滤；(5)采用透析进行过滤；(6)浓缩、喷雾干燥、灭菌，即可得到所述高纯度丝素肽。试验证明，本发明的脱盐率可达99.5%，最终得到的丝素肽产品中肽含量可达94%以上，满足了药品、化妆品、医用材料等的使用要求，从而解决了本领域的难题，具有创造性。

Description

一种高纯度丝素肽的制备方法
技术领域
本发明涉及一种高纯度丝素肽的制备方法。
背景技术
目前，丝素肽是先进的天然营养护肤、护发品的高级原料，在护肤用品中加入丝素肽，可以增加皮肤细胞活力，有防晒美白保湿的效果；在护发用品中加入丝素肽，可在头发表面形成保护膜，使头发增加弹性，滋养润泽，可修复烫发、染发等引起的损伤。此外，丝素肽在生物制药、外用医疗材料及功能性保健食品方面也有重要的利用价值，可制成保肝护肝类的药品、糖尿病类的药品、老年痴呆症类的药品等；可应用于制造隐形眼镜、人造皮肤及创伤膜、人工角膜、人造血管等医疗用品。同时，丝素肽与肌肤有天然的亲合效果，极易被皮肤吸收。因此，丝素肽可以防止皮肤干燥、为人体肌肤正常的新陈代谢提供必要的养分，并可阻断紫外线对人体的侵害、抑制皮肤黑色素的形成等等。其中，在应用于药品、化妆品、医用材料等领域中，要求丝素肽具有极高的纯度，一般需要达到90%以上才可。而现有的丝素肽的制备方法中，能满足上述高纯度要求的极少。例如，中国发明专利申请CN1392265A公开了一种生物活性肽-丝素肽的制备方法，其最终制得的丝素肽产品中肽含量为85.15%。而提高丝素肽产品中肽含量，一般有如下两种途径：一是对丝素肽产品进行二次提纯，二是改进制备工艺，得到高纯度的丝素肽。显然，对于第一种方法，需要额外增加处理工艺，费时费力，成本较高。而第二种方法，表面上看是较好的选择，但如何实现，成了本领域的难题之一。
总所周知，为了提高产品的纯度，就需要在制备过程中加强杂质的去除，然而，就中国发明专利申请CN1392265A而言，其采用了纳滤膜进行纳滤脱盐，其脱盐率达到了98.39%（参见说明书表3），但其纯度仍然较低。因此，如何进一步提高脱盐率，以获得高纯度的丝素肽，以满足药品、化妆品、医用材料等的使用要求，成了本领域亟待解决的难题之一。
发明内容
本发明目的是提供一种高纯度丝素肽的制备方法。
为达到上述目的，本发明采用的技术方案是：一种高纯度丝素肽的制备方法，包括如下步骤：
(1) 以下脚茧或废蚕丝为原料，用Na2CO3溶液进行脱胶精炼；再经过水洗、干燥后，得到丝素；
(2) 将上述丝素用CaCl2-H2O-C2H5OH三元体系溶解；
(3) 稀释后，用中性蛋白酶进行酶解，酶用量为20~200活力单位/g丝素，酶解温度为25~50℃，时间30~300 min；
(4) 采用电渗析进行过滤，电流密度为20~25毫安/cm2，直至脱盐率达到90%；
(5) 采用透析进行过滤：先以自来水为流动水进行透析，当透析膜的出水的电导率与自来水的电导率相同时；再以纯水为流动水进行透析，当透析膜的出水的电导率与纯水的电导率相同时，透析结束；
(6) 浓缩、喷雾干燥、灭菌，即可得到所述高纯度丝素肽。
上述技术方案中，所述步骤(1)中，Na2CO3溶液的体积浓度为0.3~0.5%。
上述技术方案中，所述步骤(2)中，以摩尔计，CaCl2：H2O：C2H5OH=1：8：2。
上述技术方案中，所述步骤(3)中，所稀释是采用蒸馏水稀释体积10倍以上。
本发明同时请求保护由上述制备方法得到的高纯度丝素肽。
由于上述技术方案运用，本发明与现有技术相比具有下列优点：
1．本发明开发了一种高纯度丝素肽的制备方法，试验证明，本方法的脱盐率可达99.5%，最终得到的丝素肽产品中肽含量可达94%以上，满足了药品、化妆品、医用材料等的使用要求，从而解决了本领域的难题，具有创造性。
2．本发明采用CaCl2-H2O-C2H5OH三元体系溶解丝素，在配合电渗析过滤和透析过滤，大大提高了脱盐率，取得了显著的效果。
3．本发明的制备方法简单、易于操作，工艺时间较短，具有良好的应用前景。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步描述：
实施例一
一种高纯度丝素肽的制备方法，包括如下步骤：
(1) 以下脚茧或废蚕丝为原料，用体积浓度为0.3%的Na2CO3溶液进行脱胶精炼；再经过水洗、干燥后，得到丝素；
(2) 将上述丝素用CaCl2-H2O-C2H5OH三元体系溶解；以摩尔计，CaCl2：H2O：C2H5OH=1：8：2；
(3) 采用蒸馏水稀释体积10倍之后，用中性蛋白酶进行酶解，酶用量为150活力单位/g丝素，酶解温度为45℃，时间120min；
(4) 采用电渗析进行过滤，电流密度为20~25毫安/cm2，直至脱盐率达到90%；
(5) 采用透析进行过滤：先以自来水为流动水进行透析，当透析膜的出水的电导率与自来水的电导率相同时；再以纯水为流动水进行透析，当透析膜的出水的电导率与纯水的电导率相同时，透析结束；
(6) 浓缩、喷雾干燥、灭菌，即可得到所述高纯度丝素肽。
 
测定上述实施例的脱盐率、肽含量、灰分含量和含水量，并与中国发明专利申请CN1392265A做比较，结果如下：
Figure 2013102089015100002DEST_PATH_IMAGE002
由上表可见，本发明的脱盐率可达99.5%，最终得到的丝素肽产品中肽含量可达94.08%，满足了药品、化妆品、医用材料等的使用要求，从而解决了本领域的难题，具有创造性。
接着，测定实施例一的丝素肽的理化指标和微生物指标，结果如下：
Figure 2013102089015100002DEST_PATH_IMAGE004
从上表可见，本实施例制备得到的丝素肽的各项指标均满足丝素行业标准，且其杂质含量极低，完全能满足药品、化妆品、医用材料等的使用要求。

Claims (5)

1.一种高纯度丝素肽的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1) 以下脚茧或废蚕丝为原料，用Na2CO3溶液进行脱胶精炼；再经过水洗、干燥后，得到丝素；
(2) 将上述丝素用CaCl2-H2O-C2H5OH三元体系溶解；
(3) 稀释后，用中性蛋白酶进行酶解，酶用量为20~200活力单位/g丝素，酶解温度为25~50℃，时间30~300 min；
(4) 采用电渗析进行过滤，电流密度为20~25毫安/cm2，直至脱盐率达到90%；
(5) 采用透析进行过滤：先以自来水为流动水进行透析，当透析膜的出水的电导率与自来水的电导率相同时；再以纯水为流动水进行透析，当透析膜的出水的电导率与纯水的电导率相同时，透析结束；
(6) 浓缩、喷雾干燥、灭菌，即可得到所述高纯度丝素肽。
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述步骤(1)中，Na2CO3溶液的体积浓度为0.3~0.5%。
3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述步骤(2)中，以摩尔计，CaCl2：H2O：C2H5OH=1：8：2。
4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述步骤(3)中，所稀释是采用蒸馏水稀释体积10倍以上。
5.根据权利要求1所述的制备方法得到的高纯度丝素肽。
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