CN103242432A

CN103242432A - 通过氢亚磷酸二酯中间体合成磷氨米酮的方法

Info

Publication number: CN103242432A
Application number: CN2013102047332A
Authority: CN
Inventors: 孙麒; 龚珊珊; 杨庆昆; 蒲守智; 刘国栋; 多树旺; 肖强
Original assignee: Jiangxi Science and Technology Normal University
Current assignee: Jiangxi Science and Technology Normal University
Priority date: 2013-02-07
Filing date: 2013-05-29
Publication date: 2013-08-14
Anticipated expiration: 2033-05-29
Also published as: CN103242432B

Abstract

一种通过氢亚磷酸二酯中间体合成磷氨米酮的方法，包括以下步骤：利用α-L-三乙酰鼠李糖，苄氧基二异丙基氨基亚磷酰氯在碱性条件下生成亚磷酰胺中间体；经弱酸催化水解得到α-L-鼠李糖基-1-氢亚磷酸二酯中间体；利用氧化偶联方法将与亮色二肽苄酯氮端反应得到磷酰胺前体；最后“一锅法”氢化和去乙酰化脱除磷酰胺前体的全部保护基，经葡聚糖凝胶层析纯化得到高纯度磷氨米酮。本发明通过对L-鼠李糖、亚磷酰化试剂和亮色二肽三个合成片段的保护基进行设计与优化，最大程度地简化产物前体脱除保护的步骤，并利用新型氢亚磷酸二酯中间体和氧化偶联的方法极大提高目标产物的产率，为磷氨米酮的化学合成建立了一种新的方法。

Description

通过氢亚磷酸二酯中间体合成磷氨米酮的方法

技术领域

本发明属于天然产物类生化试剂的化学制备技术领域，涉及一种通过氢亚磷酸二酯中间体合成磷氨米酮的方法。

背景技术

磷氨米酮--Phosphoramidon（又名磷酰二肽）是1972年首先由日本科学家Umezawa等从链霉菌（Streptomyces tanashiensis）的培养液中分离得到的一种含磷的天然糖肽类化合物。磷氨米酮能够在嗜热菌蛋白酶（Thermolysin）的活性位点形成非常强的键合，对嗜热菌蛋白酶有非常强的抑制作用。嗜热菌蛋白酶及其家族金属蛋白酶（Thermolysin-like proteinases，TLPs）具有良好的热稳定性和蛋白质切割活性，广泛的应用于生物化学、分子生物学、遗传学、免疫学、肿瘤学、细胞工程等众多生物和医学前沿领域。例如，嗜热菌蛋白酶被用来进行蛋白质序列分析、蛋白质纯化、细胞外组织解离、肽键逆向合成、生物催化转化等等。因此，作为与嗜热菌蛋白酶配合使用的强力抑制剂，磷氨米酮在这些领域亦有着广泛的应用。目前，磷氨米酮作为常规的生物试剂，每年有大量的市场需求。但是该化合物依赖生物提取，需要大量从美国和日本进口，价格相当昂贵。由此可见，利用化学方法大量、高效的合成高纯度的该天然产物在实际应用方面都有着重要的意义。

从磷氨米酮发现至今的近三十年时间里，有关该化合物化学合成方法的报道非常有限，而且产率非常低。目前，文献报道的磷氨米酮或其糖磷酰胺结构片段的合成有以下四种方法。

1、1975年，Umezawa等以α-L-鼠李糖-1-磷酸单酯为原料，以羰基二咪唑（N,N’-Carbonyl diimidazole, CDI）为缩合试剂，在干燥的DMF中与L-亮氨酸-L-组氨酸二肽反应。粗产物经纤维素和硅胶柱层析，离子交换色谱纯化，最后结晶得到磷氨米酮类似物，总产率6%。 2、1995年，法国化学家De Nanteuil等以2,3,4-三乙酰基鼠李糖、二氯磷酸苯酯和亮色二肽乙酯为原料在碱性条件下在氯仿中反应的到全保护的磷氨米酮前体。氢氧化钠脱除全部保护基后，磷氨米酮经反相HPLC纯化，总产率约6%。 3、2003年，清华大学的孙麒等以及2006年，美国Vanderbilt大学的Johnston等，分别报道了使用糖基1-氢亚磷酸单酯前体通过碘氧化偶联反应合成磷氨米酮分子结构中糖磷酰胺片段及类似物的方法，产率为35%-64%。但是，这一类磷氨米酮类似物及前体极性很大，纯化难度大。 4、2008年，荷兰Leiden大学的Filippov等报道了以亚磷酰胺二酯原料通过活化磷酰4,5-二氰基咪唑中间体利用一锅法合成磷氨米酮分子结构中糖磷酰胺片段的方法，产率仅为19%。

发明内容

本发明的目的就是提供一种实用、生产成本低、产率高的通过氢亚磷酸二酯中间体合成磷氨米酮的方法。

本发明的通过氢亚磷酸二酯中间体合成磷氨米酮的方法，包括以下四个步骤：

1、利用α-L-三乙酰鼠李糖，苄氧基二异丙基氨基亚磷酰氯在碱性条件下生成亚磷酰胺中间体；2、经弱酸催化水解得到α-L-鼠李糖基-1-氢亚磷酸二酯中间体；3、利用氧化偶联方法将与亮色二肽苄酯氮端反应得到磷酰胺前体；4、最后采用一锅法，氢化和去乙酰化脱除磷酰胺前体的全部保护基，经葡聚糖凝胶层析纯化得到磷氨米酮，其合成路线如下：

在本方法步骤1中，α-L-三乙酰鼠李糖2与苄氧基二异丙基氨基亚磷酰氯3的摩尔比例为1：1-3；缚酸用的有机碱为：三甲胺、三乙胺、三正丙胺、三异丙胺、三正丁胺、三异丁胺、三戊胺、三己胺、三辛胺、N-甲基吗啉、N-甲基环己胺、1,4-二甲基哌嗪、二异丙基乙基胺、1,8-二氮杂二环[5.4.0]十一碳-7-烯中的任意一种，鼠李糖2与有机碱的摩尔比例为1：1-5；反应溶剂为无水二氯甲烷、1,2-二氯乙烷、氯仿、乙醚、乙腈、四氢呋喃、1,4-二氧六环中的任意一种；反应温度在-80oC至+80oC；反应时间在30分钟至3小时。

在步骤2中，亚磷酰胺中间体4水解反应中使用的酸性催化剂为：1H -四氮唑、 4,5-二氰基咪唑、 1,2,4-三氮唑、4-硝基苯酚、N-羟基琥珀酰亚胺、1-羟基苯并三唑、咪唑盐酸盐、 N-甲基咪唑盐酸盐、吡啶盐酸盐、吡啶对甲苯磺酸盐、三乙胺盐酸盐中的任意一种；反应溶剂为乙腈、四氢呋喃、 1,4-二氧六环中的任意一种；反应温度在-50 oC至+80 oC；反应时间在10分钟至2小时。

在步骤3中，氧化偶联反应中使用的氧化剂为：四氯化碳、六氯乙烷、四溴化碳、N-溴代琥珀酰亚胺、碘中的任意一种，氢亚磷酸二酯5与氧化剂的摩尔比为1：5-30；有机碱为：三甲胺、三乙胺、三正丙胺、三异丙胺、三正丁胺、三异丁胺、三戊胺、三己胺、三辛胺、N-甲基吗啉、N-甲基环己胺、 1,4-二甲基哌嗪、二异丙基乙基胺、 1,8-二氮杂二环[5.4.0]十一碳-7-烯、吡啶、2,6-二甲基吡啶中的任意一种，中间体氢亚磷酸二酯5与有机碱的摩尔比例为1：2-20；反应溶剂为二氯甲烷、1,2-二氯乙烷、氯仿、乙醚、乙腈、四氢呋喃、1,4-二氧六环中的任意一种；反应温度在-50 oC至+80 oC；反应时间在15分钟至3小时。

在步骤4中，“一锅法”氢化及脱乙酰化反应中使用的溶剂为：无水甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇、正丁醇、异丁醇、叔丁醇、乙腈、四氢呋喃、1,4-二氧六环中的任意一种；氢气反应的压力在1-5大气压，催化剂可使用磷酰胺前体5%-10%重量比例的5%-10%的钯碳或钯碳酸钙或钯氧化铝或雷尼镍，反应时间在1-5 小时，温度在0 oC至50 oC之间；脱乙酰化反应中使用的有机碱为甲醇钠、碳酸钾、氨/甲醇溶液中的一种，磷酰胺前体7与有机碱的摩尔比例为1：5-50，反应时间在3-10小时，温度在0-50 ℃。

本发明通过对L-鼠李糖、亚磷酰化试剂和亮色二肽三个合成片段的保护基进行设计与优化，最大程度地简化产物前体脱除保护的步骤，并利用新型氢亚磷酸二酯中间体和氧化偶联的方法极大提高目标产物的产率，为磷氨米酮的化学合成建立了一种新的方法。

具体实施方式

实施例1：一种通过氢亚磷酸二酯中间体合成磷氨米酮的方法，包括以下步骤：

步骤1： O-苄基-O-(α-L-2,3,4-三乙酰基)- L-鼠李糖-1-亚磷酰二异丙胺4的合成：将580 mg（2.0 mmol, 1.0当量）2,3,4-三乙酰-α-L-鼠李糖2和0.51 ml（3.4 mmol，1.7当量）干燥DBU溶于10 ml干燥的乙醚中，在冰浴条件下逐滴加入溶有820 mg（3.0 mmol，1.5当量）苄氧基二异丙基氨基亚磷酰氯3的乙醚溶液5 ml。体系逐渐有白色沉淀析出，滴加完毕后继续反应30分钟。减压浓缩反应液，残余物用乙腈（5 ml）减压共沸两次。残余物溶于乙酸乙酯（5 ml），滤除不溶物。滤液浓缩得淡黄色油状亚磷酰胺中间体4粗品，不需进一步纯化，直接用于下一步反应。

步骤2： O-苄基-O-(α-2,3,4-三乙酰基)- L-鼠李糖-1-氢亚磷酸二酯5的合成：向亚磷酰胺中间体4粗品的乙腈溶液（10 ml）中加入1H-四氮唑280 mg （4.0 mmol，2.0当量）和水72 μL（4 mmol，2.0当量）。室温搅拌30分钟后，减压浓缩反应液。残余物溶于50 ml二氯甲烷，依次用2%的稀盐酸和水各30 ml洗涤。有机相经无水硫酸钠干燥，减压浓缩至干得到淡黄色油状氢亚磷酸二酯中间体5粗品625 mg，不需进一步纯化，直接用于下一步反应。

步骤3： N-(O-苄基-O-(α-2,3,4-三乙酰基- L-鼠李糖-1-)磷酰)-L-亮-L-色二肽苄酯7的合成：向溶有326 mg（0.8 mmol，0.8当量）L-亮-L-色二肽苄酯6的5 ml乙腈溶液中加入0.21 ml（158 mg，1.5 mmol，1.5当量）三乙胺，0.48 ml（769 mg，5.0 mmol，5.0当量）四氯化碳。将444 mg（1.0 mmol，1.0当量）的氢亚磷酸二酯中间体5粗品溶于5 ml的乙腈中，在冰浴的条件下，逐滴加入反应瓶中。滴加完毕，继续反应30分钟。减压浓缩反应液。残余物溶于乙酸乙酯（5 ml），滤除不溶物。滤液浓缩得淡黄色油状磷氨米酮前体7粗品。硅胶柱层析分离（石油醚：乙酸乙酯：2：1至 1：1），得无色油状的磷氨米酮前体7纯品517 mg，产率：76%。

步骤4：N-(O-α-L-鼠李糖-1-)磷酰)-L-亮-L-色二肽二钠盐（磷氨米酮）1的合成：向溶有85 mg （0.1 mmol，1当量）前体7 的20 ml无水甲醇中加入（10%底物质量）9 mg 5%钯碳后，向体系通入氢气在常压下进行氢化。室温搅拌1小时后，向反应中逐滴加入（2.0当量，0.1 M）的甲醇钠甲醇溶液，中和至pH=7。中和完毕后，再缓慢逐滴加入（3.0当量，0.1 M）甲醇钠甲醇溶液。室温搅拌2小时后，用（3.0当量，0.1 M）的盐酸甲醇溶液中和至pH=7。过滤除去钯碳，减压浓缩反应液，残留物真空干燥，得到58 mg白色粉末状粗品。经葡聚糖凝胶LH-20层析纯化（洗脱剂：甲醇），得55 mg的白色粉末状磷氨米酮1纯品，产率：94%，熔点：176-179 ℃。

实施例2：一种通过氢亚磷酸二酯中间体合成磷氨米酮的方法，包括以下步骤：

步骤1： O-苄基-O-(α-2,3,4-三乙酰基)- L-鼠李糖-1-亚磷酰二异丙胺4的合成：将580 mg（2.0 mmol, 1.0当量）2,3,4-三乙酰-α-L-鼠李糖2和0.51 ml（3.4 mmol，1.7当量）干燥的DBU溶于10 ml干燥的四氢呋喃中，在-20 ℃条件下逐滴加入溶有820 mg（4.0 mmol，2.0当量）苄氧基二异丙基氨基亚磷酰氯3的四氢呋喃溶液5 ml。滴加完毕后继续反应30分钟。减压浓缩反应液，残余物用乙腈（5 ml）减压共沸两次。残余物溶于乙酸乙酯（5 ml），滤除不溶物。滤液浓缩得淡黄色油状亚磷酰胺中间体4粗品，不需进一步纯化，直接用于下一步反应。

步骤2： O-苄基-O-(α-2,3,4-三乙酰基)- L-鼠李糖-1-氢亚磷酸二酯5的合成：向亚磷酰胺中间体4粗品的乙腈溶液（10 ml）中加入1H-四氮唑420 mg （6.0 mmol，3.0当量）和水108μL（6 mmol，3.0当量）。室温搅拌15分钟后，减压浓缩反应液。残余物溶于50 ml二氯甲烷，依次用2%的稀盐酸和水各30 ml洗涤。有机相经无水硫酸钠干燥，减压浓缩至干得到淡黄色油状氢亚磷酸二酯中间体5粗品635 mg，不需进一步纯化，直接用于下一步反应。

步骤3： N-(O-苄基-O-(α-2,3,4-三乙酰基- L-鼠李糖-1-)磷酰)-L-亮-L-色二肽苄酯7的合成：向溶有326 mg（0.8 mmol，0.8当量）L-亮-L-色二肽苄酯6的5 ml乙腈溶液中加入0.21 ml（158 mg，1.5 mmol，1.5当量）氮甲基吗啉，0.48 ml（769 mg，5.0 mmol，5.0当量）四氯化碳。将444 mg（1.0 mmol，1.0当量）的氢亚磷酸二酯中间体5粗品溶于5 ml的乙腈中，在冰浴的条件下，逐滴加入反应瓶中。滴加完毕，继续反应30分钟。减压浓缩反应液。残余物溶于乙酸乙酯（5 ml），滤除不溶物。滤液浓缩得淡黄色油状磷氨米酮前体7粗品。硅胶柱层析分离（石油醚：乙酸乙酯：2：1至 1：1），得无色油状的磷氨米酮前体7纯品530 mg，产率：78%。

步4： N-(O-α-L-鼠李糖-1-)磷酰)-L-亮-L-色二肽二钠盐（磷氨米酮）1的合成：向溶有170 mg （0.2 mmol，1当量）前体7的20 ml无水甲醇中加入（10%底物质量）18 mg 10%钯碳后，向体系通入氢气在常压下进行氢化。室温搅拌1小时后，向反应中逐滴加入（1.0当量，0.1 M）的碳酸钾甲醇/水（50：1）溶液，中和至中性。中和完毕后，再缓慢逐滴加入（5.0当量，0.1 M）碳酸钾的甲醇/水（50：1）混合溶液。室温搅拌2小时后，用（1.0当量，0.1 M）的盐酸甲醇溶液中和至pH=7.0。过滤除去钯碳，减压浓缩反应液，残留物真空干燥，得到100 mg白色粉末状粗品。经葡聚糖凝胶LH-20层析纯化（洗脱剂：甲醇），得94 mg的白色粉末状磷氨米酮1纯品，产率：80%，熔点：176-179 ℃。

实施例3：一种通过氢亚磷酸二酯中间体合成磷氨米酮的方法，包括以下步骤：

步骤1： O-苄基-O-(α-2,3,4-三乙酰基)- L-鼠李糖-1-亚磷酰二异丙胺4的合成：将1.16 g（4.0 mmol, 1.0当量）2,3,4-三乙酰-α- L-鼠李糖2和1.2 ml（4.0 mmol，2.0当量）干燥的DBU溶于20 ml干燥的乙醚中，在-20 ℃条件下逐滴加入溶有1.64 g（8.0 mmol，2.0当量）苄氧基二异丙基氨基亚磷酰氯3的乙醚溶液10 ml。滴加完毕后继续反应1小时。减压浓缩反应液，残余物用乙腈（5 ml）减压共沸两次。残余物溶于乙酸乙酯（5 ml），滤除不溶物。滤液浓缩得淡黄色油状亚磷酰胺中间体4粗品，不需进一步纯化，直接用于下一步反应。

步骤2： O-苄基-O-(α-2,3,4-三乙酰基)- L-鼠李糖-1-氢亚磷酸二酯5的合成：向亚磷酰胺中间体4粗品的乙腈溶液（20 ml）中加入4,5-二氰基咪唑0.94 g（8.0 mmol，2.0当量）和水0.22 ml（12 mmol，3.0当量）。室温搅拌10分钟后，减压浓缩反应液。残余物溶于80 ml二氯甲烷，依次用2%的稀盐酸和水各40 ml洗涤。有机相经无水硫酸钠干燥，减压浓缩至干得到淡黄色油状氢亚磷酸二酯中间体5粗品1.3 g，不需进一步纯化，直接用于下一步反应。

步骤3： N-(O-苄基-O-(α-2,3,4-三乙酰基- L-鼠李糖-1-)磷酰)-L-亮-L-色二肽苄酯7的合成：向溶有652 mg（1.6 mmol，0.8当量）L-亮-L-色二肽苄酯6的10 ml乙腈溶液中加入0.52 ml（387 mg，3.0 mmol，3.0当量）二异丙基乙基胺，0.48 ml（769 mg，5.0 mmol，5.0当量）六氯乙烷。将444 mg（1.0 mmol，1.0当量）的氢亚磷酸二酯中间体5粗品溶于5 ml的乙腈中，在冰浴的条件下，逐滴加入反应瓶中。滴加完毕，继续反应30分钟。减压浓缩反应液。残余物溶于乙酸乙酯（5 ml），滤除不溶物。滤液浓缩得淡黄色油状磷氨米酮前体7粗品。硅胶柱层析分离（石油醚：乙酸乙酯：2：1至 1：1），得无色油状的磷氨米酮前体7纯品530 mg，产率：78%。

步骤4： N-(O-α-L-鼠李糖-1-)磷酰)-L-亮-L-色二肽二钠盐（磷氨米酮）1的合成：向溶有170 mg （0.2 mmol，1当量）前体7 的20 ml无水甲醇中加入（10%底物质量）18 mg 10%钯碳后，向体系通入氢气在常压下进行氢化。室温搅拌1小时后，向反应中逐滴加入（1.0当量，0.1 M）的碳酸钾甲醇/水（50：1）溶液，中和至中性。中和完毕后，再缓慢逐滴加入（5.0当量，0.1 M）碳酸钾的甲醇/水（50：1）混合溶液。室温搅拌2小时后，用（1.0当量，0.1 M）的盐酸甲醇溶液中和至pH=7.0。过滤除去钯碳，减压浓缩反应液，残留物真空干燥，得到100 mg白色粉末状粗品。经葡聚糖凝胶LH-20层析纯化（洗脱剂：甲醇），得94 mg的白色粉末状磷氨米酮1纯品，产率：80%，熔点：176-179 ℃。

实施例4：一种通过氢亚磷酸二酯中间体合成磷氨米酮的方法，包括以下步骤：

步骤1： O-苄基-O-(α-2,3,4-三乙酰基)- L-鼠李糖-1-亚磷酰二异丙胺4的合成：将5.8 g（20 mmol, 1.0当量）2,3,4-三乙酰-α- L-鼠李糖2和6 ml（40 mmol，2.0当量）干燥DBU溶于100 ml干燥的四氢呋喃中，在-20 ℃条件下逐滴加入溶有11 g（40 mmol，2.0当量）苄氧基二异丙基氨基亚磷酰氯3的四氢呋喃溶液50 ml。滴加完毕后，缓慢升至室温，继续反应30分钟。减压浓缩反应液，残余物用乙腈（30 ml）减压共沸两次。残余物溶于乙酸乙酯（50 ml），滤除不溶物。滤液浓缩得淡黄色油状亚磷酰胺中间体4粗品，不需进一步纯化，直接用于下一步反应。

步骤2： O-苄基-O-(α-2,3,4-三乙酰基)- L-鼠李糖-1-氢亚磷酸二酯5的合成：向亚磷酰胺中间体4粗品的乙腈溶液（100 ml）中加入吡啶盐酸盐 4.62 g（40 mmol，2.0当量）和水0.72 ml（40 mmol，2.0当量）。室温搅拌45分钟后，减压浓缩反应液。残余物溶于150 ml二氯甲烷，依次用2%的稀盐酸和水各150 ml洗涤。有机相经无水硫酸钠干燥，减压浓缩至干得到淡黄色油状氢亚磷酸二酯中间体5粗品6.1 g，不需进一步纯化，直接用于下一步反应。

步骤3： N-(O-苄基-O-(α-2,3,4-三乙酰基- L-鼠李糖-1-)磷酰)-L-亮-L-色二肽苄酯7的合成：向溶有3.3 g（0.8 mmol，0.8当量）L-亮-L-色二肽苄酯6的50 ml四氢呋喃溶液中加入三丁胺3.56 ml（2.78 g, 15 mmol，1.5当量），四氯化碳4.8 ml（7.7 g，50 mmol，5.0当量）。将4.5 g（10 mmol，1.0当量）的氢亚磷酸二酯中间体5粗品溶于25 ml的四氢呋喃中，在冰浴的条件下，逐滴加入反应瓶中。滴加完毕，继续反应1小时。减压浓缩反应液。残余物溶于乙酸乙酯（50 ml），滤除不溶物。滤液浓缩得淡黄色油状磷氨米酮前体7粗品。硅胶柱层析分离（石油醚：乙酸乙酯：2：1至 1：1），得无色油状的磷氨米酮前体7纯品4.7 g，产率：69%。

步骤4： N-(O-α-L-鼠李糖-1-)磷酰)-L-亮-L-色二肽二钠盐（磷氨米酮）1的合成：向溶有1.7 g （2 mmol，1当量）前体7 的200 ml无水甲醇中加入（10%底物质量）100 mg 10%钯碳后，向体系通入氢气在常压下进行氢化。室温搅拌2小时后，向反应中逐滴加入（2.0当量，0.1 M）的甲醇钠甲醇溶液，中和至pH=7。中和完毕后，再缓慢逐滴加入（5.0当量，0.1 M）甲醇钠甲醇溶液。室温搅拌3小时后，用（5.0当量，0.1 M）的盐酸甲醇溶液中和至pH=7。过滤除去钯碳，减压浓缩反应液，残留物真空干燥，得到1.12 g白色粉末状粗品。经葡聚糖凝胶LH-20层析纯化（洗脱剂：甲醇），得1.10 g的白色粉末状磷氨米酮1纯品，产率：93%，熔点：176-179 ℃。

Claims

1.一种通过氢亚磷酸二酯中间体合成磷氨米酮的方法，其特征在于：它包括以下四个步骤：

（1）、利用α-L-三乙酰鼠李糖，苄氧基二异丙基氨基亚磷酰氯在碱性条件下生成亚磷酰胺中间体；（2）、经酸催化水解得到α-L-鼠李糖基-1-氢亚磷酸二酯中间体；（3）、利用氧化偶联方法将与亮色二肽苄酯氮端反应得到磷酰胺前体；（4）、最后采用一锅法，氢化和去乙酰化脱除磷酰胺前体的全部保护基，经葡聚糖凝胶层析纯化得到磷氨米酮。

2.根据权利要求1所述的通过氢亚磷酸二酯中间体合成磷氨米酮的方法，其特征在于：步骤（1）中，α-L-三乙酰鼠李糖与苄氧基二异丙基氨基亚磷酰氯的摩尔比例为1：1-3，缚酸用的有机碱为：三甲胺、三乙胺、三正丙胺、三异丙胺、三正丁胺、三异丁胺、三戊胺、三己胺、三辛胺、N-甲基吗啉、N-甲基环己胺、1,4-二甲基哌嗪、二异丙基乙基胺、1,8-二氮杂二环[5.4.0]十一碳-7-烯中的任意一种，鼠李糖与有机碱的摩尔比例为1：1-5，反应溶剂为无水二氯甲烷、1,2-二氯乙烷、氯仿、乙醚、乙腈、四氢呋喃、1,4-二氧六环中的任意一种，反应温度在-80oC至+80oC，反应时间在30分钟至3小时。

3.根据权利要求1所述的通过氢亚磷酸二酯中间体合成磷氨米酮的方法，其特征在于：步骤（2）中，亚磷酰胺中间体水解反应中使用的酸性催化剂为：1H -四氮唑、 4,5-二氰基咪唑、 1,2,4-三氮唑、 4-硝基苯酚、 N-羟基琥珀酰亚胺、1-羟基苯并三唑、咪唑盐酸盐、N-甲基咪唑盐酸盐、吡啶盐酸盐、吡啶对甲苯磺酸盐、三乙胺盐酸盐中的任意一种，反应溶剂为乙腈、四氢呋喃、 1,4-二氧六环中的任意一种，反应温度在-50 oC至+80 oC，反应时间在10分钟至2小时。

4.根据权利要求1所述的通过氢亚磷酸二酯中间体合成磷氨米酮的方法，其特征在于：步骤（3）中，氧化偶联反应中使用的氧化剂为：四氯化碳、六氯乙烷、四溴化碳、N-溴代琥珀酰亚胺、碘中的任意一种，氢亚磷酸二酯与氧化剂的摩尔比为1：5-30，有机碱为三甲胺、三乙胺、三正丙胺、三异丙胺、三正丁胺、三异丁胺、三戊胺、三己胺、三辛胺、N-甲基吗啉、N-甲基环己胺、 1,4-二甲基哌嗪、二异丙基乙基胺、 1,8-二氮杂二环[5.4.0]十一碳-7-烯、吡啶、2,6-二甲基吡啶中的任意一种，中间体氢亚磷酸二酯与有机碱的摩尔比例为1：2-20；反应溶剂为二氯甲烷、1,2-二氯乙烷、氯仿、乙醚、乙腈、四氢呋喃、1,4-二氧六环中的任意一种，反应温度在-50 oC至+80 oC，反应时间在15分钟至3小时。

5.根据权利要求1所述的通过氢亚磷酸二酯中间体合成磷氨米酮的方法，其特征在于：步骤（4）中，反应中使用的溶剂为：无水甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇、正丁醇、异丁醇、叔丁醇、乙腈、四氢呋喃、1,4-二氧六环中的任意一种，氢气反应的压力在1-5大气压，催化剂可使用磷酰胺前体5%-10%重量比例的5%-10%的钯碳或钯碳酸钙或钯氧化铝或雷尼镍，反应时间在1-5 小时，温度在0 oC至50 oC之间，脱乙酰化反应中使用的有机碱为甲醇钠、碳酸钾、氨/甲醇溶液中的一种，磷酰胺前体与有机碱的摩尔比例为1：5-50，反应时间在3-10小时，温度在0-50 ℃。