CN103235144A - 一种同时检测两种环境雌激素的传感器的制备方法及应用 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种同时检测两种环境雌激素的传感器的制备方法及应用,属于纳米功能材料、环境检测、生物免疫技术和电化学分析领域。将Pt杂化的SBA-15纳米复合材料标记二抗,通过测定材料对底液中过氧化氢的催化性能,制备一种双通道印刷电极电化学免疫传感器,实现对两种环境雌激素己烯雌酚和雌二醇的同时检测。本发明制备简单、加工方便、便于携带;该检测方法简单、快速、灵敏度高、特异性好。
Description
技术领域
本发明属于纳米功能材料、环境检测、生物免疫技术和电化学分析领域,公开了一种同时检测两种环境雌激素的传感器的制备方法及应用。
背景技术
雌激素是一种重要的生理激素,雌激素生物体的生理调节与不孕症、肥胖、绝经期的乳腺癌、前列腺癌、老年痴呆和骨质疏松症等多种人体疾病有关。人造雌激素如己烯雌酚、双烯雌酚、己烷雌酚是医学上常用于控制生理作用的药物;也被广泛用于促进牲畜生长,雌激素药物一部分通过排泄物排出到环境水中,而其余仍保存在生物体中。
己烯雌酚是人工合成的非甾体雌激素物质,能产生与天然雌二醇相同的所有药理与治疗作用。主要用于雌激素低下症及激素平衡失调引起的功能性出血、闭经,还可用于死胎引产前,以提高子宫肌层对催产素的敏感性。
许多证据证明这些天然的以及人工合成的药物在低浓度(ng·mL-1)也可能成为人体健康的潜在危机,如癌症和其他病症等。在许多国家雌激素已经被禁止添加到动物的饲料中。因此,雌激素的禁止使用已经成为亟待解决的问题,而建立水中雌激素的高灵敏、特异性快速检测方法迫在眉睫。
目前对复合样品中低浓度目标雌激素的检测方法存在许多不足。电化学免疫传感器具有样品预处理简单、成本低、灵敏度高、特异性强的优点,成为研究的重要手段。
本实验将Pt纳米粒子杂化至孔径较大的SBA-15的孔道及介孔壁上,制备了Pt杂化的SBA-15纳米复合材料(Pt@SBA-15)。该材料具有SBA-15和Pt纳米粒子的双重效应,是一种高催化活性的纳米复合材料。采用Pt@SBA-15标记二抗,检测其对底液中过氧化氢的催化性能,制备双通道的丝网印刷电极生物传感器,实现了环境样品中两种环境雌激素己烯雌酚和雌二醇的同时检测。
发明内容
本发明的目的之一是提供一种同时检测两种环境雌激素的传感器的制备方法。
本发明的目的之二是将所制备的电化学传感器,用于同时检测两种环境雌激素己烯雌酚和雌二醇。
本发明的技术方案,包括以下步骤。
1. 一种同时检测两种环境雌激素的传感器的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)氨基化SBA-15的合成
将1 g 三嵌段共聚物EO20PO70EO20(P123)溶解在30 mL、1.5~2 mol·L-1的 HCl溶液中,加入2.215 g正硅酸乙酯(TEOS),混合物在34℃下搅拌4~5 h,转移到高压釜在100℃条件下加热20~22 h,冷却后过滤,将获得的白色粉末在空气中干燥,然后在560℃条件下煅烧3~4 h除去模板,合成制得SBA-15;将所合成的SBA-15,加10~15 mL无水乙醇,置于100 mL三口烧瓶中,油浴,加热到70℃后,迅速加入50 µL 3-氨丙基三乙氧基硅烷,70℃恒温回流3h,离心,用无水乙醇洗涤沉淀3次,室温下真空干燥9~11 h,得到氨基功能化的SBA-15。
(2)Pt杂化的SBA-15的合成
将氨基功能化的SBA-15与HPtCl4以质量比1 : 0.5~ 1混合并用水稀释成溶液,将混合物在室温下搅拌18~24
h,离心后用水重新稀释,用稀HCl调节溶液的pH <2,搅拌20~25 min,得到混合液;将40~50 mmol·L-1的NaBH4溶液逐滴加入到所述的混合液中,直到所有的HPtCl4全部还原成金属Pt,将混合液离心、真空干燥,制得Pt杂化的SBA-15(Pt@SBA-15)。
(3)石墨烯(GS)溶液制备
将2mg GS溶解于1mL高纯水中,超声0.5~2 h,制成浓度为2mg·mL-1 GS溶液。
(4)Pt@SBA-15/二抗溶液的制备
取1~2 mg Pt@SBA-15分散在1 mL的pH 7.4的PBS缓冲溶液中,加入0.5~1.5 mL 、质量分数2.5%的戊二醛溶液,搅拌2~4 h;加入1~2 mL两种环境雌激素二抗(Ab2)中的一种,将上述混合物在室温下搅拌10~12
h,离心,制得两种Pt@SBA-15/Ab2溶液,置于4℃下储存,备用;所述两种环境雌激素二抗的浓度为400~500µg/mL。
(5)双通道免疫传感器的构建
1)取一片双通道丝网印刷电极,超纯水冲洗;分别取4~6 µL、2mg·mL-1 GS溶液,滴涂到双通道丝网印刷电极的2个工作电极表面上,室温晾干。
2)在1)中得到的2个工作电极的表面上分别滴加6~8µL的1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺和N-羟基琥珀酰亚胺(EDC/NHS)混合溶液,保持湿润、孵化1~2 h,超纯水清洗,晾干;所述EDC和NHS的浓度分别为1~4 mg/mL和1mg/mL;
3)分别取4~8 µL两种环境雌激素一抗(Ab1),分别滴涂于2)得到的对应的两个工作电极表面上,4℃条件下晾干;所述的环境雌激素选自己烯雌酚和雌二醇,两种环境雌激素一抗的浓度为5~10µg/mL。
4)分别取4~6 µL、质量分数为0.5~1 %的BSA溶液,滴涂于3)得到两个工作电极表面上,保持电极湿润3~4 h, 4℃下晾干,超纯水清洗、晾干,制得一种同时检测两种环境雌激素的传感器。
以上所述的环境雌激素选自己烯雌酚和雌二醇
2.如上所述的制备的一种同时检测两种环境雌激素的传感器,用于己烯雌酚和雌二醇的同时检测,步骤如下:
(1)将制得的免疫传感器温育在一系列浓度的两种环境雌激素对应的抗原溶液中,放置1 h,4 ℃下晾干,清洗电极。
(2)滴涂6 µL、 Pt@SBA-15/Ab2溶液到(1)得到的电极表面上,晾干、清洗,制得组装的工作电极,置于4 ◦C冰箱中备用。
(3)将参比电极、对电极和组装的工作电极连接在电化学工作站上,在电解槽中加入40~60
µL、5~10 mmol/L H2O2的pH=7.0~7.8的PBS缓冲溶液,用循环伏安和方波伏安法检测传感器的电流响应,根据所得电流响应与己烯雌酚和雌二醇的标准溶液浓度之间的关系,绘制工作曲线。
(4)将待测样品代替己烯雌酚和雌二醇的标准溶液,按照所述己烯雌酚和雌二醇工作曲线的绘制方法进行检测。
所述一种同时检测两种环境雌激素的传感器,所用原材料均可在化学试剂公司或生物制药公司购买。
本发明具备以下优势:
(1)本发明快速、准确,可用于两种环境雌激素的同时检测。
(2)本发明采用的Pt@SBA-15和石墨烯均可增强电化学信号,从而提高了传感器的灵敏度。
(3)本发明使用印刷电极,其制备简单、成本低、便于携带、样品消耗少,易于微型化和集成化,应用范围广。
(4)本发明与其它的丝网印刷电极传感器相比,可以一次性同时检测两种环境雌激素,显著提高了检测效率,同时具有良好的准确性和精密度。该免疫传感器的研制对环境分析和食品安全分析具有重要的科学意义和应用价值。
具体实施方式
下面结合实施例进一步说明本发明。
实施例中所述的环境雌激素选自己烯雌酚和雌二醇。
实施例
1
纳米功能材料制备
(1)氨基化SBA-15的合成
将1 g 三嵌段共聚物EO20PO70EO20(P123)溶解在30 mL、1.5 mol·L-1的 HCl溶液中,加入2.215 g正硅酸乙酯(TEOS),混合物在34℃下搅拌4h,转移到高压釜在100℃条件下加热20 h,冷却后过滤,将获得的白色粉末在空气中干燥,然后在560℃条件下煅烧3 h除去模板,合成制得SBA-15;将所合成的SBA-15,加10mL无水乙醇,置于三口烧瓶中,油浴,加热到70℃后,迅速加入50 µL 3-氨丙基三乙氧基硅烷,70℃恒温回流3h,离心,用无水乙醇洗涤沉淀3次,室温下真空干燥9 h,得到氨基功能化的SBA-15。
(2)Pt杂化的SBA-15的合成
将氨基功能化的SBA-15与HPtCl4以质量比1 : 0.5混合并用水稀释成溶液,将混合物在室温下搅拌18 h,离心后用水重新稀释,用稀HCl调节溶液的pH <2,搅拌20 min,得到混合液;将40 mmol·L-1的NaBH4溶液逐滴加入到所述的混合液中,直到所有的HPtCl4全部还原成金属Pt,将混合液离心、真空干燥,制得Pt杂化的SBA-15(Pt@SBA-15)。
(3)石墨烯(GS)溶液制备
将2.0 mg GS溶解于1mL高纯水中,超声0.5 h,制成浓度为2mg·mL-1 GS溶液。
实施例
2
纳米功能材料制备
(1)氨基化SBA-15的合成
将1 g 三嵌段共聚物EO20PO70EO20(P123)溶解在30 mL、1.8 mol·L-1的 HCl溶液中,加入2.215 g正硅酸乙酯(TEOS),混合物在34℃下搅拌4.5h,转移到高压釜在100℃条件下加热21 h,冷却后过滤,将获得的白色粉末在空气中干燥,然后在560℃条件下煅烧3.5 h除去模板,合成制得SBA-15;将所合成的SBA-15, 加入12 mL无水乙醇,置于100 mL三口烧瓶中,油浴,加热到70℃后,迅速加入50 µL 3-氨丙基三乙氧基硅烷,70℃恒温回流3h,离心,用无水乙醇洗涤沉淀3次,室温下真空干燥10 h,得到氨基功能化的SBA-15。
(2)Pt杂化的SBA-15的合成
将氨基功能化的SBA-15与HPtCl4以质量比1 : 0.7混合并用水稀释成溶液,将混合物在室温下搅拌21h,离心后用水重新稀释,用稀HCl调节溶液的pH <2,搅拌22 min,得到混合液;将45 mmol·L-1的NaBH4溶液逐滴加入到所述的混合液中,直到所有的HPtCl4全部还原成金属Pt,将混合液离心、真空干燥,制得Pt杂化的SBA-15(Pt@SBA-15)。
(3)石墨烯(GS)溶液制备
将2mg GS溶解于1mL高纯水中,超声1 h,制成浓度为2 mg·mL-1 GS溶液。
实施例
3
纳米功能材料制备
(1)氨基化SBA-15的合成
将1 g 三嵌段共聚物EO20PO70EO20(P123)溶解在30 mL、2 mol·L-1的 HCl溶液中,加入2.215 g正硅酸乙酯(TEOS),混合物在34℃下搅拌5 h,转移到高压釜在100℃条件下加热22 h,冷却后过滤,将获得的白色粉末在空气中干燥,然后在560℃条件下煅烧4 h除去模板,合成制得SBA-15;将所合成的SBA-15,加入15 mL无水乙醇,置于100 mL三口烧瓶中,油浴,加热到70℃后,迅速加入50 µL 3-氨丙基三乙氧基硅烷,70℃恒温回流3h,离心,用无水乙醇洗涤沉淀3次,室温下真空干燥11 h,得到氨基功能化的SBA-15。
(2)Pt杂化的SBA-15的合成
将氨基功能化的SBA-15与HPtCl4以质量比1 : 1混合并用水稀释成溶液,将混合物在室温下搅拌24 h,离心后用水重新稀释,用稀HCl调节溶液的pH <2,搅拌25 min,得到混合液;将50 mmol·L-1的NaBH4溶液逐滴加入到所述的混合液中,直到所有的HPtCl4全部还原成金属Pt,将混合液离心、真空干燥,制得Pt杂化的SBA-15(Pt@SBA-15)。
(3)石墨烯(GS)溶液制备
将2 mg GS溶解于1mL高纯水中,超声2 h,制成浓度为2mg·mL-1 GS溶液。
实施例
4
Pt@SBA-15/二抗溶液的制备
取1 mg Pt@SBA-15分散在1 mL的pH 7.4的PBS缓冲溶液中,加入0.5 mL 、2.5%的戊二醛溶液,搅拌2 h;加入1 mL两种环境雌激素二抗(Ab2)中的一种,将上述混合物在室温下搅拌10h,离心,制得两种Pt@SBA-15/Ab2溶液,置于4◦C下储存,备用;所述两种环境雌激素二抗的浓度为400µg/mL。
实施例
5
Pt@SBA-15/二抗溶液的制备
取1.5mg Pt@SBA-15分散在1 mL的pH 7.4的PBS缓冲溶液中,加入1.0 mL 、2.5%的戊二醛溶液,搅拌3 h;加入1.5mL两种环境雌激素二抗(Ab2)中的一种,将上述混合物在室温下搅拌11h,离心,制得两种Pt@SBA-15/Ab2溶液,置于4◦C下储存,备用;所述两种环境雌激素二抗的浓度为450µg/mL。
实施例
6
Pt@SBA-15/二抗溶液的制备
取2 mg Pt@SBA-15分散在1 mL的pH 7.4的PBS缓冲溶液中,加入1.5 mL 、2.5%的戊二醛溶液,搅拌4 h;加入2.0 mL两种环境雌激素二抗(Ab2)中的一种,将上述混合物在室温下搅拌12 h,离心,制得两种Pt@SBA-15/Ab2溶液,置于4◦C下储存,备用;所述两种环境雌激素二抗的浓度为500µg/mL。
实施例
7
双通道免疫传感器的构建
(1)取一片双通道丝网印刷电极,超纯水冲洗;分别取4µL、2 mg·mL-1 GS溶液,滴涂到双通道丝网印刷电极的2个工作电极表面上,室温晾干。
(2)在(1)中得到的2个工作电极的表面上分别滴加6µL的1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺和N-羟基琥珀酰亚胺(EDC/NHS)混合溶液,保持湿润、孵化1 h,超纯水清洗,晾干;所述EDC和NHS的浓度分别为1 mg/mL和1mg/mL;
(3)分别取4 µL两种环境雌激素一抗(Ab1),分别滴涂于(2)得到的对应的两个工作电极表面上,4 ℃条件下晾干。
(4)分别取4 µL,质量分数为0.8 %的BSA溶液,滴涂于(3)得到两个工作电极表面上,保持电极湿润3.5 h, 4℃下晾干,超纯水清洗、晾干,制得一种同时检测两种环境雌激素的传感器。
实施例
8
双通道免疫传感器的构建
(1)取一片双通道丝网印刷电极,超纯水冲洗;分别取5µL、2 mg·mL-1 GS溶液,滴涂到双通道丝网印刷电极的2个工作电极表面上,室温晾干。
(2)在(1)中得到的2个工作电极的表面上分别滴加7µL的1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺和N-羟基琥珀酰亚胺(EDC/NHS)混合溶液,保持湿润、孵化1.5 h,超纯水清洗,晾干;所述EDC和NHS的浓度分别为2 mg/mL和1mg/mL。
(3)分别取6μL两种环境雌激素一抗(Ab1),分别滴涂于(2)得到的对应的两个工作电极表面上,4℃条件下晾干。
(4)分别取5 µL,质量分数为0.5%的BSA溶液,滴涂于(3)得到两个工作电极表面上,保持电极湿润3.5 h, 4℃下晾干,超纯水清洗、晾干,制得一种同时检测两种环境雌激素的传感器。
实施例
9
双通道免疫传感器的构建
(1)取一片双通道丝网印刷电极,超纯水冲洗;分别取6 µL、2mg·mL-1 GS溶液,滴涂到双通道丝网印刷电极的2个工作电极表面上,室温晾干。
(2)在(1)中得到的2个工作电极的表面上分别滴加8µL的1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺和N-羟基琥珀酰亚胺(EDC/NHS)混合溶液,保持湿润、孵化2 h,超纯水清洗,晾干;所述EDC和NHS的浓度分别为4 mg/mL和1mg/mL。
(3)分别取8 µL两种环境雌激素一抗(Ab1),分别滴涂于(2)得到的对应的两个工作电极表面上,4℃条件下晾干。
(4)分别取6 µL,质量分数为1 %的BSA溶液,滴涂于(3)得到两个工作电极表面上,保持电极湿润4 h, 4℃下晾干,超纯水清洗、晾干,制得一种同时检测两种环境雌激素的传感器。
实施例
10
上述制备的一种同时检测两种环境雌激素的传感器,用于己烯雌酚和雌二醇的同时检测,步骤如下:
(1)将制得的免疫传感器温育在一系列浓度的两种环境雌激素对应的抗原溶液中,放置1 h,4℃下晾干,清洗电极。
(2)滴涂6 µL、 Pt@SBA-15/Ab2溶液到(1)得到的电极表面上,晾干、清洗,制得组装的工作电极,置于4 ◦C冰箱中备用。
(3)将参比电极、对电极和组装的工作电极连接在电化学工作站上,在电解槽中加入40µL、5 mmol/L H2O2的pH=7.0的PBS缓冲溶液,用循环伏安和方波伏安法检测传感器的电流响应,根据所得电流响应与己烯雌酚和雌二醇的标准溶液浓度之间的关系,绘制工作曲线。
(4)将待测样品代替己烯雌酚和雌二醇的标准溶液,按照所述己烯雌酚和雌二醇工作曲线的绘制方法进行检测。
实施例
11
上述制备的一种同时检测两种环境雌激素的传感器,用于己烯雌酚和雌二醇的同时检测,步骤如下:
(1)将制得的免疫传感器温育在一系列浓度的两种环境雌激素对应的抗原溶液中,放置1 h,4 ℃下晾干,清洗电极。
(2)滴涂6 µL、 Pt@SBA-15/Ab2溶液到(1)得到的电极表面上,晾干、清洗,制得组装的工作电极,置于4℃冰箱中备用。
(3)将参比电极、对电极和组装的工作电极连接在电化学工作站上,在电解槽中加入50 µL、7 mmol/L H2O2的pH=7.4的PBS缓冲溶液,用循环伏安和方波伏安法检测传感器的电流响应,根据所得电流响应与己烯雌酚和雌二醇的标准溶液浓度之间的关系,绘制工作曲线。
(4)将待测样品代替己烯雌酚和雌二醇的标准溶液,按照所述己烯雌酚和雌二醇工作曲线的绘制方法进行检测。
实施例
12
上述制备的一种同时检测两种环境雌激素的传感器,用于己烯雌酚和雌二醇的同时检测,步骤如下:
(1)将制得的免疫传感器温育在一系列浓度的两种环境雌激素对应的抗原溶液中,放置1 h,4 ℃下晾干,清洗电极。
(2)滴涂6µL、 Pt@SBA-15/Ab2溶液到(1)得到的电极表面上,晾干、清洗,制得组装的工作电极,置于4 ◦C冰箱中备用。
(3)将参比电极、对电极和组装的工作电极连接在电化学工作站上,在电解槽中加入60 µL、10 mmol/L H2O2的pH=7.8的PBS缓冲溶液,用循环伏安和方波伏安法检测传感器的电流响应,根据所得电流响应与己烯雌酚和雌二醇的标准溶液浓度之间的关系,绘制工作曲线。
(4)将待测样品代替己烯雌酚和雌二醇的标准溶液,按照所述己烯雌酚和雌二醇工作曲线的绘制方法进行检测。
实施例10~12用于两种环境刺激素己烯雌酚和雌二醇的检测,己烯雌酚的线性范围0.001~10.0
ng·mL-1,检测限为0.28 pg·mL-1;雌二醇的线性范围为0.005 ~ 8.0 ng·mL-1,检测限为1.2 pg·mL-1。
Claims (5)
1.一种同时检测两种环境雌激素的传感器的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)氨基化SBA-15的合成
将1 g 三嵌段共聚物EO20PO70EO20(P123)溶解在30 mL、1.5~2 mol·L-1的 HCl溶液中,加入2.215 g正硅酸乙酯(TEOS),混合物在34℃下搅拌4~5 h,转移到高压釜在100℃条件下加热20~22 h,冷却后过滤,将获得的白色粉末在空气中干燥,然后在560℃条件下煅烧3~4 h除去模板,合成制得SBA-15;将所合成的SBA-15,加10~15mL无水乙醇,置于100 mL三口烧瓶中,油浴,加热到70℃后,迅速加入50 μL 3-氨丙基三乙氧基硅烷,70℃恒温回流3h,离心,用无水乙醇洗涤沉淀3次,室温下真空干燥9~11 h,得到氨基功能化的SBA-15;
(2)Pt杂化的SBA-15的合成
将氨基功能化的SBA-15与HPtCl4以质量比1 : 0.5~ 1混合并用水稀释成溶液,将混合物在室温下搅拌18~24 h,离心后用水重新稀释,用稀HCl调节溶液的pH <2,搅拌20~25 min,得到混合液;将40~50 mmol·L-1的NaBH4溶液逐滴加入到所述的混合液中,直到所有的HPtCl4全部还原成金属Pt,将混合液离心、真空干燥,制得Pt杂化的SBA-15(Pt@SBA-15);
(3)石墨烯(GS)溶液制备
将2.0 mg GS溶解于1mL高纯水中,超声0.5~2 h,制成浓度为2mg·mL-1 GS溶液;
(4)Pt@SBA-15/二抗溶液的制备
取1~2 mg
Pt@SBA-15分散在1 mL的pH 7.4的PBS缓冲溶液中,加入0.5~1.5 mL
、质量分数为2.5%的戊二醛溶液,搅拌2~4 h;加入1~2 mL两种环境雌激素二抗(Ab2)中的一种,将上述混合物在室温下搅拌10~12 h,离心,制得两种Pt@SBA-15/Ab2溶液,置于4◦C下储存,备用;
(5)双通道免疫传感器的构建
1)取一片双通道丝网印刷电极,超纯水冲洗;分别取4~6 µL、2mg·mL-1 GS溶液,滴涂到双通道丝网印刷电极的2个工作电极表面上,室温晾干;
2)在1)中得到的2个工作电极的表面上分别滴加6~8µL的1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺和N-羟基琥珀酰亚胺(EDC/NHS)混合溶液,保持湿润、孵化1~2 h,超纯水清洗,晾干;所述EDC和NHS的浓度分别为1~4 mg/mL和1mg/mL;
3)分别取4~8 µL两种环境雌激素一抗(Ab1),分别滴涂于2)得到的对应的两个工作电极表面上,4 oC条件下晾干;
4)分别取4~6 µL、质量分数为0.5~1 %的BSA溶液,滴涂于3)得到两个工作电极表面上,保持电极湿润3~4 h, 4 oC下晾干,超纯水清洗、晾干,制得一种同时检测两种环境雌激素的传感器。
2.如权利要求1所述的一种同时检测两种环境雌激素的传感器的制备方法,所述的环境雌激素选自己烯雌酚和雌二醇。
3.如权利要求1所述的一种同时检测两种环境雌激素的传感器的制备方法,(4)中所述两种环境雌激素二抗的浓度为400~500µg/mL。
4.如权利要求1所述的一种同时检测两种环境雌激素的传感器的制备方法,(5)中所述两种环境雌激素一抗的浓度为5~10µg/mL。
5.如权利要求1所述的制备的一种同时检测两种环境雌激素的传感器,用于两种环境雌激素己烯雌酚和雌二醇的同时检测,步骤如下:
(1)将制得的免疫传感器温育在一系列浓度不同的己烯雌酚和雌二醇对应的抗原溶液中,放置1 h,4 oC下晾干,清洗电极;
(2)滴涂6 µL、 Pt@SBA-15/Ab2溶液到(1)得到的电极表面上,晾干、清洗,制得组装的工作电极,置于4 ◦C冰箱中备用;
(3)将参比电极、对电极和组装的工作电极连接在电化学工作站上,在电解槽中加入40~60
µL、5~10 mmol/L H2O2的pH=7.0~7.8的PBS缓冲溶液,用循环伏安和方波伏安法检测传感器的电流响应,根据所得电流响应与两种环境雌激素己烯雌酚和雌二醇的标准溶液浓度之间的关系,绘制工作曲线;
(4)将待测样品代替两种环境雌激素己烯雌酚和雌二醇的标准溶液,按照所述己烯雌酚和雌二醇工作曲线的绘制方法进行检测。
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CN2013101368660A Pending CN103235144A (zh) | 2013-04-19 | 2013-04-19 | 一种同时检测两种环境雌激素的传感器的制备方法及应用 |
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2013
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