CN103204783B - 一种d-赖氨酸盐酸盐的制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种D-赖氨酸盐酸盐的制备方法，其以DL-赖氨酸为原料，经纯化处理后，于温度30～70℃下与L-酒石酸反应生成非对映体盐，再采用无机钙盐与非对映体盐反应，生成酒石酸钙沉淀物，而D-赖氨酸则保留在溶液中，D-赖氨酸溶液经盐酸调整pH、脱色处理、浓缩结晶等工艺过程，获得D-赖氨酸盐酸盐粗品结晶体，粗品结晶体再经纯化处理，制得D-赖氨酸盐酸盐。所得D-赖氨酸盐酸盐中 DL-赖氨酸含量在0.5%以下。本发明方法以简便的中和沉淀法取代较复杂的离子交换树脂法，有利于简化生产方法和稳定产品质量，同时还具有无需特殊设备，减少环境污染问题的优点，易于工业化推广应用。

Description

一种D-赖氨酸盐酸盐的制备方法

技术领域

本发明属于医药技术领域，具体涉及一种D-赖氨酸盐酸盐的制备方法。

背景技术

赖氨酸及其盐酸盐是国内外积极开发、不断扩展其用途的一个氨基酸，目前已查阅到的资料显示，该产品主要应用作药物中间体，如应用于合成促黄体生成激素(LH)类似物的前体(Proc Natl Acad Sci USA,1989,86(16);6313-6317)，合成促性腺激素释放激素(GnRH)的高活性类似物。还有研究发现，用作临床药物，D-赖氨酸可有效降低体内的非酶糖化作用(Clinical Chemistry ,1989,35(3); 384-387)。D-赖氨酸的多聚体，是一种药物的良好载体(J Controlled Release,1989,10:89-96)。还有报道在抗菌肽CM15的分子中引入2～5个D-赖氨酸取代2～9位的氨基酸，可大大提高其抗菌活性，增加对巨噬细胞的细胞膜通透能力(Polymers 2011, 3; 2088-2106)。

根据已检索到的文献资料，D-赖氨酸的制备方法主要有：生物方法和化学方法两种，生物方法是采用微生物把经化学外消旋DL-赖氨酸的L-赖氨酸分解，再分离提取D-赖氨酸的方法，化学方法是采用手性酸拆分剂，与DL-赖氨酸反应生成非对映体盐，再分离提取D-赖氨酸的方法。

己报道的生物方法有利用丛毛单胞菌属含睾丸激素的IAM 1048，分解DL-赖氨酸的L-赖氨酸，而从DL-赖氨酸的混合液中获得36～38%的D-赖氨酸（Biotechnology Letters, 1997,19(3);245–249、Applied Microbiology and Biotechnology  1997，47(4);347–351）。还有报道以蜂房哈夫尼菌(Hafnia alvei) AS 1·1009中的赖氨酸脱羧酶(LDC)对DL-赖氨酸进行立体选择性生物转化，可从30g的DL-赖氨酸中获得8.5gD-赖氨酸（现代化工，2007，27(5);32-34）。报道采用化学手性酸拆分方法是以D-酒石酸为拆分剂，与DL-赖氨酸反应生成D-酒石酸D-赖氨酸非对映体盐，再经离子交换树脂分离酒石酸与D-赖氨酸而获得D-赖氨酸，报道可从50 g的DL-赖氨酸中获得31.5g（含D-赖氨酸35%）的D-酒石酸D-赖氨酸非对映体盐（氨基酸和生物资源，1999,21(3):30-31）。

采用生物法制备是以微生物分解DL-赖氨酸溶液中的L-赖氨酸为目标，在溶液中积累D-赖氨酸，再从溶液中分离提取D-赖氨酸。技术关键在微生物对L-赖氨酸的分解率，已报道的研究显示分解30gDL-赖氨酸的L-赖氨酸需10g湿菌体（酶活3510U），D-赖氨酸的回收率为理论量的56.6%。看来获取更高酶活力的菌体，提高对L-赖氨酸的分解率才可减少生产过程D-赖氨酸分离纯化的难度，提高D-赖氨酸的生产收率。从工业化生产评估，报道的生物方法L-赖氨酸的分解率比化学方法高，但此方法工艺过程需采用发酵法生产菌体，技术控制点比较多，相对投资比较大。

采用化学手性酸拆分法是以手性酸为拆分剂，与DL-赖氨酸反应生成非对映体盐，根据二种非对映体盐的溶解度不同，分离D-赖氨酸非对映体盐与L-赖氨酸非对映体盐，再分解D-赖氨酸非对映体盐，纯化提取D-赖氨酸。从工业化生产评估，此方法相对生物法工艺过程简单，建设投资较少，易于工业化生产应用，但依据报道资料比较，D-赖氨酸的生产收率相对生物法低。

目前已报道的两种生产方法均采用离子交换树脂分离DL-赖氨酸与D-赖氨酸或分解D-赖氨酸非对映体盐，因此对保护环境都没有贡献。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是克服现有技术的不足，提供一种工艺过程简单、易于工业化生产应用，又对环境保护有贡献的D-赖氨酸盐酸盐制备方法。

为解决以上技术问题，本发明采取如下技术方案：

一种 D-赖氨酸盐酸盐的制备方法，其包括依次进行的下列步骤：

a、取DL-赖氨酸水溶液，加入反应容器中，搅拌下升温至30～70℃，然后加入L-酒石酸反应，生成非对映体盐L-酒石酸D-赖氨酸沉淀，过滤分离沉淀，洗涤，得非对映体盐L-酒石酸D-赖氨酸，备用；

b、将所得对映体盐L-酒石酸D-赖氨酸溶解在水中，然后在室温搅拌下加入化学计量的食品级以上纯度的无机钙盐，使反应生成L-酒石酸钙沉淀和D-赖氨酸，过滤分离沉淀，保留滤液，得D-赖氨酸的水溶液；

c、将D-赖氨酸的水溶液用盐酸调整至pH为5.5～6.0，升温至65～70℃，加入活性炭进行脱色，过滤，收集滤液，置于旋转蒸发器内减压浓缩，至有结晶出现，停止浓缩，将旋转蒸发器内的浓缩液冷却结晶，过滤分离结晶体，洗涤，得粗结晶体；

d、将粗结晶体加水升温溶解，趁热过滤去除不溶物，收集滤液，搅拌下室温冷却结晶，结晶完成后，过滤分离结晶体，洗涤，得精结晶体，在55℃~65℃下干燥，得D-赖氨酸盐酸盐成品。

根据本发明的一个优选方面，所述方法包括：

优选地，步骤a中，DL-赖氨酸水溶液中DL-赖氨酸的含量为0.5~1.0g/ml。

优选地，步骤a中，搅拌下升温至40℃~60℃。

优选地，步骤a中，洗涤时，先用质量为沉淀质量的0.5~1倍的水洗涤，滤干后，再用质量为沉淀质量2~3倍的甲醇或乙醇洗涤。洗涤用的甲醇的纯度可以为80%(v/v)~97%(v/v)，采用的乙醇的纯度可以为80%(v/v)~90%(v/v)。

优选地，步骤b中，将所得对映体盐L-酒石酸D-赖氨酸溶解在质量为其质量的1~3倍的水中。

优选地，步骤b中，采用的盐酸为化学纯盐酸（CP盐酸）。

优选地，步骤b中，所述的无机钙盐为选自氢氧化钙、碳酸钙以及氯化钙中的一种或多种的组合。

优选地，步骤c中，脱色用活性炭为味精级活性炭，添加质量为D-赖氨酸溶液体积的0.5%～1.5%，脱色液采用碳棒过滤器进行过滤。

优选地，步骤d中，升温至65℃~70℃

由于上述技术方案的采用，本发明与现有技术相比具有以下优点：

1、本发明方法采用L-酒石酸手性酸为拆分剂，分离效果较好，价格较低，有利于降低生产成本；

2、本发明采用无机钙盐为分解非对映体盐的试剂，取代了离子交换树脂分离非对映体盐的方法，既简化了操作工艺，又减少了离子交换树脂再生时对环境的污染；

3、本发明分解非对映体盐所生成的产物为酒石酸钙，反应时直接沉淀于反应液中，易于与D-赖氨酸溶液分离，也利于回收循环使用，降低生产成本；

4、本发明的工艺，能控制溶液体积，避免因浓缩时间过长导致D-赖氨酸盐酸盐变性，影响产品的纯度，因此按本发明工艺操作可获得高纯度D-赖氨酸盐酸盐产品；

5、本发明需浓缩的D-赖氨酸盐酸盐溶液体积比从离子交换树脂解吸液体积少，因此大大节省了浓缩能耗，符合低碳生产的要求；

6、本发明所得D-赖氨酸盐酸盐产品，检测产品含量与产品透过率均不低于99.0 %，以手性色谱柱检测产品纯度，DL-赖氨酸盐酸盐含量均在0.5%以下；

7、本发明可以在通用的化工生产线实现，无特殊设备，所以有投资少，见效快，效益高的优点；

8、本发明只需控制温度、搅拌速度二个技术参数，有利于生产工艺和产品质量的稳定，实用性强；

9、本发明操作简单，易被操作工人掌握，适合工业化推广应用。

附图说明

图1为实施例1手性色谱柱检测产品纯度的色谱图；

图2 为实施例2手性色谱柱检测产品纯度的色谱图；

图3为实施例1所得D-赖氨酸盐酸盐的红外图谱。

具体实施方式

本发明的目的在于建立一种工艺过程简单、易于工业化生产应用，又对环境保护有贡献的D-赖氨酸盐酸盐制备方法。为此，本发明采用手性酸拆分法，以L-酒石酸为手性拆分剂，与DL-赖氨酸进行反应生成非对映体盐，利用L-酒石酸D-赖氨酸非对映体盐与L-酒石酸L-赖氨酸非对映体盐的溶解度差异，沉淀获得L-酒石酸D-赖氨酸非对映体盐。该非对映体盐用无机钙盐沉淀酒石酸，获得D-赖氨酸溶液，此溶液再经分离纯化即可制备成D-赖氨酸盐酸盐。     

本发明与文献资料报道的方法是选择的手性酸不同，分解非对映体盐的方法不同。本发明研究过程发现，以D-酒石酸为手性拆分剂，反应生成沉淀物的非对映体盐比旋光是右旋型的，沉淀物滤液比旋光却是左旋型的，右旋型的非对映体盐分解后的赖氨酸溶液比旋光也是右旋型的，显然与D-赖氨酸的旋光型不同。分析此结果可能是D-酒石酸与DL-赖氨酸反应，生成了D-酒石酸L-赖氨酸非对映体盐。因此本发明改用L-酒石酸为手性拆分剂，使反应生成沉淀物的非对映体盐比旋光是左旋型，非对映体盐分解后的赖氨酸溶液比旋光也是左旋型的，从而制备成功D-赖氨酸盐酸盐产品。

本发明采用无机钙盐（氢氧化钙、碳酸钙、氯化钙等）取代离子交换树脂分解非对映体盐，不但易于回收L-酒石酸，降低生产成本，还避免了离子交换树脂处理所产生的环境污染问题，为更廉价，环保的制备D-赖氨酸盐酸盐找到了一种新的方法。本发明的这个方法迄今尚未见文献或专利报道。

下面结合具体的实施例对本发明做进一步详细的说明，但本发明不限于以下实施例。

以下实施例中，温度控制采用全自动控制电热水箱的热水控制。采用的甲醇的纯度为80%(v/v)~97%(v/v)，采用的乙醇的纯度为80%(v/v)~90%(v/v)。无机钙盐均采用食品级以上纯度的产品。脱色用活性炭为味精级碳，脱色液经碳棒过滤器过滤。手性色谱柱购自大赛璐药物手性技术（上海）有限公司。

实施例1

一种D-赖氨酸盐酸盐的制备方法，其包括依次进行的下列步骤：

（1）取相当于含DL-赖氨酸100g的DL-赖氨酸溶液140mL，加入500mL三口瓶中，搅拌下升温至50℃~60℃，然后加入75gL-酒石酸反应，生成非对映体盐L-酒石酸D-赖氨酸沉淀；

（2）过滤分离非对映体盐L-酒石酸D-赖氨酸沉淀和溶液，收集非对映体盐L-酒石酸D-赖氨酸53.75g，备用；

（3）加入25~55g水洗涤非对映体盐L-酒石酸D-赖氨酸，滤干，然后再加入120g甲醇，再洗涤非对映体L-酒石酸D-赖氨酸盐，再滤干，得非对映体L-酒石酸D-赖氨酸盐45g，备用；

（4）将非对映体盐L-酒石酸D-赖氨酸加1~2倍质量的水溶解，然后在室温搅拌下加入13.5g的氢氧化钙，使其与非对映体盐的L-酒石酸反应，生成L-酒石酸钙沉淀和D-赖氨酸；

（5）过滤分离L-酒石酸钙沉淀与D-赖氨酸溶液，收集L-酒石酸钙，待回收处理，集中D-赖氨酸溶液，备用；

（6）D-赖氨酸溶液用CP盐酸调整pH约5.5～6.0，升温至65～70℃，加入质量为溶液体积的1.0%的活性炭脱色，然后过滤去除活性炭，收集滤液，旋转蒸发器内减压浓缩至有结晶出现，停止浓缩，把旋转蒸发器内的浓液倒入烧杯中，冷却结晶；

（7）过滤分离D-赖氨酸盐酸盐结晶体，未结晶的滤液另处理，结晶体用少量乙醇洗涤，再滤干，得D-赖氨酸盐酸盐粗结晶体；

（8）将D-赖氨酸盐酸盐粗结晶体加约1倍质量的水，升温至65～70℃溶解，趁热过滤去除不溶物，收集滤液于烧杯中，搅拌下缓慢冷却结晶；

（9）结晶完成后，过滤分离结晶体与溶液，未结晶的滤液另处理，结晶体用少量乙醇洗涤，再滤干，得D-赖氨酸盐酸盐精结晶体；

（10）将滤干的结晶体置于干燥箱内，控制温度60℃，常压下干燥约6h，获得D-赖氨酸盐酸盐6.5g；

以上步骤（7）的滤液与下批相同滤液合并处理，步骤（9）的滤液与下批相同滤液合并处理。

干燥后的D-赖氨酸盐酸盐送捡，检测产品含量99.0%，产品比旋光-21.13°，手性色谱柱检测，其色谱图参见图1，计算DL-赖氨酸盐酸盐含量在0.5%以下。

对-赖氨酸盐酸盐还进行了红外测试，结果参见图3。

实施例2

一种D-赖氨酸盐酸盐的制备方法，其包括依次进行的下列步骤：

（1）取相当于含DL-赖氨酸500g的DL-赖氨酸溶液590mL，加入1000mL三口瓶中，搅拌下升温至40℃～50℃，然后加入360gL-酒石酸反应，生成非对映体盐L-酒石酸D-赖氨酸沉淀；

（2）过滤分离非对映体盐L-酒石酸D-赖氨酸沉淀和溶液，收集非对映体盐L-酒石酸D-赖氨酸269.5g，备用；

（3）加入比例量水洗涤非对映体盐L-酒石酸D-赖氨酸，滤干，然后再加入比例量甲醇，再洗涤非对映体L-酒石酸D-赖氨酸盐，再滤干，得非对映体L-酒石酸D-赖氨酸盐226.4g，备用；

（4）将非对映体盐L-酒石酸D-赖氨酸226.4g加2~3倍质量的水溶解，然后在室温搅拌下加入78g的碳酸钙，使其与非对映体盐的L-酒石酸反应，生成L-酒石酸钙沉淀和D-赖氨酸；

（5）过滤分离L-酒石酸钙沉淀与D-赖氨酸溶液，收集L-酒石酸钙，待回收处理，集中D-赖氨酸溶液，备用；

（6）D-赖氨酸溶液用CP盐酸调整pH约5.5～6.0，升温至65～70℃，加入质量为溶液体积的0.8%的活性炭脱色，然后过滤去除活性炭，收集滤液，旋转蒸发器内减压浓缩至有结晶出现，停止浓缩，把旋转蒸发器内的浓液倒入烧杯中，冷却结晶；

（7）过滤分离D-赖氨酸盐酸盐结晶体，未结晶的滤液另处理，结晶体用少量乙醇洗涤，再滤干，得D-赖氨酸盐酸盐粗结晶体；

（8）将D-赖氨酸盐酸盐粗结晶体加0.5～1.5倍质量的水，升温至65～70℃溶解，趁热过滤去除不溶物，收集滤液于烧杯中，搅拌下缓慢冷却结晶；

（9）结晶完成后，过滤分离结晶体与溶液，未结晶的滤液另处理，结晶体用少量乙醇洗涤，再滤干，得D-赖氨酸盐酸盐精结晶体；

（10）将滤干的结晶体置于干燥箱内，控制温度60℃，常压下干燥约6h，获得D-赖氨酸盐酸盐38g；

以上步骤（7）的滤液与下批相同滤液合并处理，步骤（9）的滤液与下批相同滤液合并处理。

干燥后的D-赖氨酸盐酸盐送捡，检测产品含量99.2 %，产品比旋光-21.17°。手性色谱柱检测，其色谱图参见图2，DL-赖氨酸盐酸盐含量为0.0%。

实施例3

一种D-赖氨酸盐酸盐的制备方法，其包括依次进行的下列步骤：

（1）取相当于含DL-赖氨酸1000g的DL-赖氨酸溶液1500mL，加入3000mL三口瓶中，搅拌下升温至30～70℃，然后加入750gL-酒石酸反应，生成非对映体盐L-酒石酸D-赖氨酸沉淀；

（2）过滤分离非对映体盐L-酒石酸D-赖氨酸沉淀和溶液，收集非对映体盐L-酒石酸D-赖氨酸540g，备用；

（3）加入280g水洗涤非对映体盐L-酒石酸D-赖氨酸，滤干，然后再加入1200g甲醇，再洗涤非对映体L-酒石酸D-赖氨酸盐，再滤干，得非对映体L-酒石酸D-赖氨酸盐440.7g，备用；

（4）将非对映体盐L-酒石酸D-赖氨酸440.7g加1~3倍质量的水溶解，然后在室温搅拌下加入85g的氢氧化钙和70g的碳酸钙，使其与非对映体盐的L-酒石酸反应，生成L-酒石酸钙沉淀和D-赖氨酸；

（5）过滤分离L-酒石酸钙沉淀与D-赖氨酸溶液，收集L-酒石酸钙，待回收处理，集中D-赖氨酸溶液，备用；

（6）D-赖氨酸溶液用CP盐酸调整pH约5.5～6.0，升温至65～70℃，加入质量为溶液体积的1.2%的活性炭脱色，然后过滤去除活性炭，收集滤液，旋转蒸发器内减压浓缩至有结晶出现，停止浓缩，把旋转蒸发器内的浓液倒入烧杯中，冷却结晶；

（7）过滤分离D-赖氨酸盐酸盐结晶体，未结晶的滤液另处理，结晶体用少量乙醇洗涤，再滤干，得D-赖氨酸盐酸盐粗结晶体；

（8）将D-赖氨酸盐酸盐粗结晶体加0.5～1.5倍质量的水，升温至65～70℃溶解，趁热过滤去除不溶物，收集滤液于烧杯中，搅拌下缓慢冷却结晶；

（9）结晶完成后，过滤分离结晶体与溶液，未结晶的滤液另处理，结晶体用少量乙醇洗涤，再滤干，得D-赖氨酸盐酸盐精结晶体；

（10）将滤干的结晶体置于干燥箱内，控制温度60℃，常压下干燥约6h，获得D-赖氨酸盐酸盐170.5g；

以上步骤（7）的滤液与下批相同滤液合并处理，步骤（9）的滤液与下批相同滤液合并处理。

干燥后的D-赖氨酸盐酸盐送捡，检测产品含量99.5 %，产品比旋光-21.3°。手性色谱柱检测，DL-赖氨酸盐酸盐含量为0.0%。

实施例4

一种D-赖氨酸盐酸盐的制备方法，其包括依次进行的下列步骤：

（1）取相当于含DL-赖氨酸1000g的DL-赖氨酸溶液1500mL，加入3000mL三口瓶中，搅拌下升温至30～70℃，然后加入750gL-酒石酸反应，生成非对映体盐L-酒石酸D-赖氨酸沉淀；

（2）过滤分离非对映体盐L-酒石酸D-赖氨酸沉淀和溶液，收集非对映体盐L-酒石酸D-赖氨酸552.4g，备用；

（3）加入300g水洗涤非对映体盐L-酒石酸D-赖氨酸，滤干，然后再加入1500g甲醇，再洗涤非对映体L-酒石酸D-赖氨酸盐，再滤干，得非对映体L-酒石酸D-赖氨酸盐447.5g，备用；

（4）将非对映体盐L-酒石酸D-赖氨酸447.5g加2倍质量的水溶解，然后在室温搅拌下加入120g的碳酸钙和40g的氯化钙，使其与非对映体盐的L-酒石酸反应，生成L-酒石酸钙沉淀和D-赖氨酸；

（5）过滤分离L-酒石酸钙沉淀与D-赖氨酸溶液，收集L-酒石酸钙，待回收处理，集中D-赖氨酸溶液，备用；

（6）D-赖氨酸溶液用CP盐酸调整pH约5.5～6.0，升温至65～70℃，加入质量为溶液体积的1.0%的活性炭脱色，然后过滤去除活性炭，收集滤液，旋转蒸发器内减压浓缩至有结晶出现，停止浓缩，把旋转蒸发器内的浓液倒入烧杯中，冷却结晶；

（7）过滤分离D-赖氨酸盐酸盐结晶体，未结晶的滤液另处理，结晶体用少量乙醇洗涤，再滤干，得D-赖氨酸盐酸盐粗结晶体；

（8）将D-赖氨酸盐酸盐粗结晶体加0.5～1.5倍质量的水，升温至65～70℃溶解，趁热过滤去除不溶物，收集滤液于烧杯中，搅拌下缓慢冷却结晶；

（9）结晶完成后，过滤分离结晶体与溶液，未结晶的滤液另处理，结晶体用少量乙醇洗涤，再滤干，得D-赖氨酸盐酸盐精结晶体；

（10）将滤干的结晶体置于干燥箱内，控制温度60℃，常压下干燥约6h，获得D-赖氨酸盐酸盐174g；

以上步骤（7）的滤液与下批相同滤液合并处理，步骤（9）的滤液与下批相同滤液合并处理。

干燥后的D-赖氨酸盐酸盐送捡，检测产品含量99.3 %，产品比旋光-21.37°。手性色谱柱检测，DL-赖氨酸盐酸盐含量为0.0%。

上述实施例只为说明本发明的技术构思及特点，其目的在于让熟悉此项技术的人士能够了解本发明的内容并据以实施，并不能以此限制本发明的保护范围，凡根据本发明精神实质所作的等效变化或修饰，都应涵盖在本发明的保护范围之内。

Claims (3)

1.一种D-赖氨酸盐酸盐的制备方法，其特征在于：包括依次进行的下列步骤：

a、取DL-赖氨酸水溶液，加入反应容器中，搅拌下升温至40～60℃，然后加入L-酒石酸反应，生成非对映体盐L-酒石酸D-赖氨酸沉淀，过滤分离沉淀，洗涤，得非对映体盐L-酒石酸D-赖氨酸，备用，其中，DL-赖氨酸水溶液中DL-赖氨酸的含量为0.5～1.0g/ml，洗涤时，先用质量为沉淀质量的0.5～1倍的水洗涤，滤干后，再用质量为沉淀质量2～3倍的甲醇或乙醇洗涤；

b、将所得对映体盐L-酒石酸D-赖氨酸溶解在水中，然后在室温搅拌下加入化学计量的食品级以上纯度的无机钙盐，使反应生成L-酒石酸钙沉淀和D-赖氨酸，过滤分离沉淀，保留滤液，得D-赖氨酸的水溶液，所述的无机钙盐为碳酸钙和氯化钙的组合；

c、将D-赖氨酸的水溶液用盐酸调整至pH为5.5～6.0，升温至65～70℃，加入活性炭进行脱色，过滤，收集滤液，置于旋转蒸发器内减压浓缩，至有结晶出现，停止浓缩，将旋转蒸发器内的浓缩液冷却结晶，过滤分离结晶体，洗涤，得粗结晶体；

d、将粗结晶体加水升温溶解，趁热过滤去除不溶物，收集滤液，搅拌下室温冷却结晶，结晶完成后，过滤分离结晶体，洗涤，得精结晶体，在55℃～65℃下干燥，得D-赖氨酸盐酸盐成品。

2.根据权利要求1所述的D-赖氨酸盐酸盐的制备方法，其特征在于：步骤b中，将所得对映体盐L-酒石酸D-赖氨酸溶解在质量为其质量的1～3倍的水中。

3.根据权利要求1所述的D-赖氨酸盐酸盐的制备方法，其特征在于：步骤c中，采用的盐酸为化学纯盐酸。