CN103200934A - 治疗hcv感染的药物组合物 - Google Patents

Abstract

本发明涉及包含HCV蛋白酶抑制剂和至少一种泊洛沙姆的颗粒药物组合物。

Description

治疗HCV感染的药物组合物

本发明提供了用于治疗HCV感染的新制剂，其包含4-氟-1,3-二氢-异吲哚-2-甲酸(Z)-(1S,4R,6S,14S,18R)-14-叔丁氧基羰基氨基-4-环丙烷磺酰基氨基羰基-2,15-二氧代-3,16-二氮杂-三环[14.3.0.0^4,6]-十九-7-烯-18-基酯，下文称为化合物I及其可药用盐。化合物I具有作为抗病毒剂的活性。

化合物I是已知用于治疗HCV感染的肽类似物。该化合物可以单独应用或者与一定量的一种或多种其它抗病毒剂组合应用，以在患者中有效获得持久的病毒响应。化合物I抑制丙型肝炎病毒(HCV)蛋白酶NS3的酶活性。WO2005/037214中描述了该化合物。

化合物I是以晶体和无定型形式获得的，并且在生理范围内具有pH-依赖性理化性质，特别是溶解度和渗透性。由于溶解度和渗透性的限制，化合物I被认为是生物药剂分类系统4类化合物(溶解度和渗透性限制的口服吸收)。

具有pH-依赖性理化性质的弱酸给制剂科学家提出了特别的挑战。对于具有溶出速率限制的溶解度和生物利用度的药物，这成为一个重要的挑战。用于改善生物利用度的通用方法包括降低药物的粒度，应用共溶剂或络合剂，将药物分散在亲水基质中，应用基于脂质的药物递送系统例如自乳化药物递送系统、微乳、胶束系统、固体和分子分散，并且被广泛讨论，例如Choi等人,Drug Dev.Ind.Pharm.,vol29(10),1085-1094,2003；Yueksel等人,Eur.J.Pharm.and Biopharm.,vol56(3),453-459,2003和美国专利第6,632,455号。

化合物I存在的生物利用度挑战不简单是低溶解度的结果，而特别是由于在水性介质中其独特的倾向于粘合颗粒相互作用。当晶体盐形式的化合物I放入酸性介质中时，其快速分离形成无定形游离酸。由于疏水性，这些无定形颗粒聚集，以最小化与水性介质的面接触。这种疏松的聚集快速导致颗粒团聚并且形成更大的颗粒结构。这种现象导致化合物I在水性环境中表面积显著减少，从而降低溶出速率。

正是水性介质中这种颗粒相互作用主要限制了化合物I的生物利用度。因此需要能克服该问题的制剂方法，以改善化合物I的口服吸收和疗效。

令人惊讶地，本发明人发现含有化合物I药物颗粒和至少一种泊洛沙姆的颗粒药物组合物克服了本领域上述缺点并且提供了化合物I的改善的分散性，其最终导致增强的药物代谢动力学性质，即化合物I的更大且较小变化的口服吸收。因此，本发明提供了具有改善的药物代谢动力学性质的化合物I的固体药物组合物，即增强的生物利用度、降低的变化性和减少的食物效应。令人惊讶的是在水性介质中化合物I从包含泊洛沙姆的制剂中的溶出速率不依赖于药物粒度。这与本领域先前的理解相反，先前的理解是水溶解度差的药物从在泊洛沙姆或类似亲水基质中的结晶颗粒分散体的溶解速率和生物利用度强烈依赖于API粒度。

制备技术例如湿法制粒或干法制粒、流化床制粒、热熔挤出、喷雾干燥、喷雾冻凝、溶剂蒸发和高剪切制粒是获得本发明颗粒药物组合物的可用方法，通过直接混合。在本发明的一个实施方案中，颗粒药物组合物是通过热熔挤出制备的。令人惊讶地发现热熔挤出解决了很多制备和粉末流动的困难，所述的困难是聚集絮状和难压缩粉末(如化合物I药物)的制粒过程的代表。在本发明的颗粒药物组合物的可制备性、溶解度、生物利用度和患者便利性方面，热熔挤出获得了最佳的结果。

本文所用的下列术语具有下面给出的含义。

术语“API”意指活性药物成分。

术语“赋形剂”意指用作活性药物成分的载体的无活性物质。赋形剂可以用于辅助活性药物成分的吸收，用于扩大制剂以辅助制备过程，或者有助于稳定活性药物成分。为了最大化片剂的物理特性，制剂可以进一步包含其它可药用赋形剂，例如抗粘剂、粘合剂、填充剂/稀释剂、分散剂、稳定剂、压制辅助剂、润滑剂、制粒辅助剂、流动辅助剂等。膜包衣可以进一步包含其它包衣赋形剂，例如遮光剂、色素、着色剂等。这些物质的选择和所用的量是本领域内所考虑的。

本文所用的术语“稀释剂”或“填充剂”意指为了调节容量而添加的惰性赋形剂，以制备实际压缩的尺寸。常用的稀释剂包括磷酸氢二钙、硫酸钙、乳糖、纤维素、高岭土、甘露醇、氯化钠、淀粉和糖粉。足量的稀释剂例如甘露醇、乳糖、山梨醇、蔗糖和肌醇有助于片剂的崩解，并且常用于咀嚼片。在湿法制粒和直接压制制剂中微晶纤维素

用作赋形剂。

术语“泊洛沙姆”表示非离子的三嵌段共聚物，由中间的聚环氧丙烷(PPO)疏水链和两侧的聚环氧乙烷(PEO)亲水链组成，每个PPO或PEO链可以是不同分子量。还已知泊洛沙姆商品名为Pluronics。具体的泊洛沙姆是泊洛沙姆188，其中PPO链的分子质量为1800g/mol和PEO含量为80%(w/w)的泊洛沙姆。可以获得宽范围分子量、熔点和亲水性的泊洛沙姆，并且通常作为润湿剂用于药物制剂，以改善生物利用度。

泊洛沙姆188(Lutrol F68.RTM.)是环氧乙烷和环氧丙烷的嵌段共聚物，并且在NF专著中以泊洛沙姆188列出。可以获得宽范围分子量、熔点和亲水性的泊洛沙姆，并且通常作为润湿剂用于药物制剂，以改善生物利用度。它们是由BASF(NJ,USA)提供的。本发明中所用的LutrolF68.RTM.分子量范围为8400道尔顿，熔点52℃-54℃，并且HLB(亲水亲脂平衡)为18-29，并且平均粒度范围从1微米至500微米。

本文所用的术语“粘合剂”意指为粉末提供粘合特性而添加的赋形剂，使得压制片保留其完整性。通常作为粘合剂应用的材料包括淀粉、明胶和糖，例如蔗糖、葡萄糖、右旋糖、糖蜜和乳糖。天然和合成的树胶包括阿拉伯胶、海藻酸钠、panwar胶、印度胶(ghatti gum)、羧甲基纤维素、甲基纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、乙基纤维素和羟丙基甲基纤维素在某些制剂中也用作粘合剂。

本文所用的术语“润滑剂”意指为防止片剂材料粘附在冲模表面而添加的赋形剂。通常应用的润滑剂包括滑石粉、硬脂酸镁、硬脂酸钙、硬脂酸、氢化植物油和PEG。水溶性润滑剂包括苯甲酸钠、苯甲酸钠和乙酸钠的混合物、氯化钠、亮氨酸和碳蜡4000。

本文所用的术语“助流剂”意指为改善片剂粉末的流动特性而添加的赋形剂。胶体二氧化硅

是常用的助流剂。滑石粉可以用作组合的润滑剂/助流剂。

本文所用的术语“崩解剂”意指为便于施用后分解或崩解而添加的赋形剂。干燥的且粉末状的玉米淀粉或马铃薯淀粉是常用的崩解剂。它们对水有很高的亲和力并且当润湿时膨胀，导致片剂破裂。已知作为超级崩解剂的一组材料包括交联羧甲基纤维素钠(交联纤维素)、交联聚维酮(交联聚合物)和淀粉羟乙酸钠(交联淀粉)。交联聚维酮

是合成的、不可溶的，但能快速膨胀的交联N-乙烯基-吡咯烷酮同聚物。

术语“可药用的”，例如可药用载体、赋形剂等，意指药理学可接受的并且对具体化合物施用的个体基本上无毒的。

术语“可药用盐”意指常规的酸加成盐或碱加成盐，其保留本发明化合物的生物学功效和性质，并且是由适合的无毒有机或无机酸或者有机或无机碱形成的。实例酸加成盐包括由无机酸衍生的那些，所述的无机酸例如盐酸、氢溴酸、氢碘酸、硫酸、氨基磺酸、磷酸和硝酸，以及由有机酸衍生的那些，所述的有机酸例如对甲苯磺酸、水杨酸、甲磺酸、草酸、琥珀酸、柠檬酸、苹果酸、乳酸、富马酸等。实例碱加成盐包括由铵、钾、钠和季铵氢氧化物(例如四甲基氢氧化铵)衍生的那些。将药用化合物(即药物)化学修饰成盐是药物化学家熟知的技术，以获得化合物改善的物理和化学稳定性、吸湿度和溶解度。参见，例如H.Ansel等人,PharmaceuticalDosage Forms and Drug Delivery Systems(第6版，1995)，第196页和第1456-1457页。

术语“颗粒外”意指添加至化合物I和粘合剂的热熔或湿润颗粒混合物(即第一颗粒组分)的片剂成分。然而，为了清楚，片剂或胶囊剂可以包含多于一种颗粒组分。

本文所用的术语“持续病毒响应”(SVR；也称为“持续响应”或“持久响应”)意指个体对用于HCV感染的治疗方案的响应，以血清HCV滴度方式。通常，“持续病毒响应”意指停止治疗后至少约一个月、至少约两个月、至少约三个月、至少约四个月、至少约五个月或至少约六个月在患者血清中发现没有可检测到的HCV RNA(例如，每毫升血清小于约500、小于约200或小于约100个基因组拷贝)。

术语“热熔挤出”或“HME”意指塑料工业所采用的制备药用目的的基质体系的热处理。治疗化合物通常以粉末或颗粒包含在制剂中并且在处理过程中分散在熔化的热塑性载体中，例如石蜡或聚合物。热处理包括升高温度和应用剪切力。在固化后，材料可以磨成粉，用于后处理或切成片状、小杆或圆柱体，用于后续滚圆。

图1系统描述了包含化合物I和至少一种泊洛沙姆的本发明颗粒药物组合物的制备过程，其中在用最终口服剂型所需的其它成分(赋形剂)包裹之前，将化合物I、至少一种泊洛沙姆和任选水溶性填充剂通过热熔挤出处理混合、研磨和筛分。

图2(A)涉及化合物I-泊洛沙姆188HME颗粒，并且图2(B)涉及化合物I-PEG8000HME颗粒，两者都在0.1N HCl中悬浮2小时。图2(A)和图2(B)表明泊洛沙姆188关于维持化合物I颗粒在酸性介质中细微悬浮方面的效果。维持化合物I在酸中的细微分散悬浮对于改善化合物I的口服吸收是至关重要的，因为它确保药物到达肠道时是快速溶出形式。

图3反映了比较的溶出性能：(1)根据实施例1制备的热熔挤出的片剂(以三角形显示)，(2)包含化合物I溶液的软明胶胶囊剂(以星形显示)，(3)包含通过喷雾干燥制备的无定形分散的化合物I的片剂(以圆圈显示)。

图4显示根据实施例2制备的含有微粉化和本身形式的化合物I的片剂在图4(A)pH5.0和图4(B)pH7.5乙酸缓冲液中比较化合物I释放的溶出试验结果。

图5显示包含不同大小的热熔挤出的颗粒的化合物I片剂的溶出度试验结果。

在第一个实施方案中，本发明涉及包含式(I)化合物(也称为化合物I)或其可药用盐和至少一种泊洛沙姆的颗粒药物组合物。化合物I可以以结晶或无定形状态存在。

在可选择的实施方案中，至少一种泊洛沙姆是泊洛沙姆188。本发明的颗粒药物组合物优选包含20至50%wt/wt的化合物I和20至40%wt/wt的泊洛沙姆188。

在进一步可选择的实施方案中，本发明的颗粒药物组合物进一步包含颗粒内填充剂，例如磷酸氢二钙、硫酸钙、乳糖、纤维素、高岭土、甘露醇、氯化钠、淀粉和糖粉。优选地，甘露醇是以至多80%wt/wt的量并且甚至更优选以至多40%wt/wt的量作为颗粒内填充剂添加的。本发明的优选实施方案涉及包含40%wt/wt的化合物I、23%wt/wt的泊洛沙姆188和37%wt/wt的甘露醇的颗粒药物组合物。

在另一个可选择的实施方案中，本发明的颗粒药物组合物是由20至80%wt/wt的式(I)化合物和20至80%wt/wt的泊洛沙姆组成的二元组合物。优选地，所述的二元组合物是由40至60%wt/wt的式(I)化合物和40至60%wt/wt的泊洛沙姆组成的。

本发明的颗粒药物组合物可以通过热熔挤出处理获得。因此，本发明还提供了通过HME制备包含化合物I和至少一种泊洛沙姆的颗粒药物组合物的方法。热熔挤出通常应用不同尺寸并且配有一个或数个温度区的单或双螺杆挤出机。来自应用于不同温度区的外部热或来自旋转螺杆的机械能的挤出系统的能量输入应当足以熔化聚合物。然而，挤出系统提供的能量不应太大，以免引起聚合物或其它制剂组分的降解。挤出物的直径和形状主要由冲模孔口的直径和几何形状控制的，但也可以受聚合物熔化的粘弹性影响。直径在500至4000微米的环状冲模是适合的。挤出物可以在热状态或冷却至室温后切成圆柱状小粒，并且可以进一步滚圆。已经开发了数种技术以连续或半连续方式用于后续粒化和滚圆，这些技术是本领域熟知的。

通过体外试验显示由于药物颗粒与至少一种泊洛沙姆之间的独特相互作用，本发明的颗粒药物组合物增强了化合物I在水性环境中的分散性。发现该组合物中化合物I的分散性和溶出度不依赖于药物颗粒大小。最后，发现在基于溶液的制剂概念方面，本发明组合物增强了化合物I在人体中的口服吸收。

在本发明的颗粒药物组合物中，防止了在水性介质中的颗粒团聚，这导致增强的生物利用度。而且，食物对产品的药物代谢动力学性质的影响也降到了最低。至少一种泊洛沙姆、优选泊洛沙姆188的优选的物理形式是细颗粒材料，以能够直接混合。除了泊洛沙姆188，其它适合的泊洛沙姆包括但不限于泊洛沙姆407和泊洛沙姆338。此外，还可以添加其它非离子型表面活性剂，例如维生素E TPGS(Eastman Kodak),Gelucire44/14,Gelucire50/13(Gattefosse,NJ),Solutol HS15,Lutrol F77,CremophorRH40(BASF,NJ)，蔗糖二棕榈酸酯和蔗糖二硬脂酸酯(Croda,NJ)。

在另一个实施方案中，本发明还涉及含有上述的颗粒药物组合物的口服剂型。口服剂型优选是片剂或胶囊剂，并且可以包含其它赋形剂，例如填充剂、粘合剂、崩解剂、润滑剂、抗粘剂、助流剂、着色剂、聚合物包衣和增塑剂。口服剂型可以进一步包含速释薄膜包衣。

通过常用片剂压制和包衣技术制备的常规片剂除了活性剂之外还需要应用若干百分数的赋形剂，以优化成分的物理性质，其便于制备片剂和制备最终产品，所述的产品易于施用于患者。这些赋形剂可以包括填充剂、粘合剂、崩解剂、润滑剂、抗粘剂、助流剂、着色剂、聚合物包衣和增塑剂。填充剂或稀释剂是惰性填充剂，以提供足够的材料用于将粉末压制成片剂。

膜包衣可以进一步包含其它包衣赋形剂，例如遮光剂、色素、着色剂等。这些材料的选择和所用的量是本领域内所考虑的。为了使膜包衣的硬化和破裂最小化，通常需要与聚合包衣材料组合应用增塑剂。根据本发明可以应用的增塑剂的实例包括：三醋汀、丙二醇、分子量为约200至约1,000的聚乙二醇、邻苯二甲酸二丁酯、癸二酸二丁酯、柠檬酸三乙酯、植物油和矿物油、脂肪酸、C₆-C₁₈脂肪酸的脂肪酸甘油酯等。

下列实施例举例说明本发明的颗粒药物组合物和固体剂型(例如片剂和胶囊剂)的制备。提供下文的实施例和制备以使得本领域技术人员更清楚地理解和实践本发明。熟练的药物科学家将意识到赋形剂、稀释剂和载体可以互换应用，并且这些变更没有脱离本发明的精神。

实施例1

评价含有化合物I和泊洛沙姆188和PEG8000作为粘合剂的颗粒的 分散性

应用泊洛沙姆188或PEG8000作为粘合剂的化合物I的颗粒可以通过热熔挤出制备。表1中提供了两种颗粒制剂的组成。这些制剂的组分可以应用常用的粉末混合机混合。然后，将粉末混合物在常用的配有200RPM转速的双螺杆挤出系统(HAAKE MiniLab)中在70℃下热熔挤出处理。然后可以应用常用的配有2.0mm显示屏磨砂玻璃插片的锤磨机(L1ALab Scale FitzMill)将挤出物磨碎。

表1

	泊洛沙姆颗粒	PEG颗粒
			成分	%w/w	%w/w
化合物I钠盐	40	40
			D-甘露醇粉	37	37
泊洛沙姆188	23	--
			PEG8000	--	23

这些颗粒的相对分散性是根据下列方法评价的：

将两克化合物I-泊洛沙姆188和化合物I-PEG8000HME颗粒加入到含有250mL0.1N HCl的单独烧杯中，并且通过磁力搅拌混合两分钟。无搅拌放置两小时后，定性评价悬浮液并且照相。图2显示了这些分析的结果。

(A)涉及在0.1N HCl中悬浮两小时的化合物I-泊洛沙姆188HME颗粒，并且(B)涉及在0.1N HCl中悬浮两小时的化合物I-PEG8000HME颗粒。图(A)和(B)说明了泊洛沙姆188在维持化合物I颗粒在酸性介质中细微悬浮方面的功效。维持化合物I在酸中细微分散悬浮对于改善化合物I的口服吸收是至关重要，因为它保证了当药物到达肠道时是快速溶出形式。化合物I和泊洛沙姆188在水性介质中的独特相互作用是这些HME颗粒优异分散性的根本原因。对于PEG颗粒所观察到的导致沉降的团聚是常规方法制备的或没有包含至少一种泊洛沙姆的制剂的代表。

实施例2

通过热熔挤出获得的化合物I的片剂制剂

化合物I的制粒可以通过热熔挤出处理实现。这是最优选的方法，因为它提供了化合物I与至少一种泊洛沙姆(优选泊洛沙姆188)直接混合，导致更均一和结实的颗粒药物组合物，并且最后产生最终口服剂型。由于热熔挤出处理是连续的，它还提供了在规模化的最终口服剂型中的其它优点。表2提供了含有本发明的颗粒药物组合物的代表性最终口服剂型。图1进一步系统显示了相应的制备过程。

表2

成分	量(mg/片)	%wt/wt
			化合物I(钠盐)	103.00	17.48
D-甘露醇粉	95.28	16.17
			泊洛沙姆188	59.23	10.05
总的颗粒内重量	257.51	43.70
			甘露醇(Parteck M200)	240.34	40.78
交联羧甲基纤维素钠	22.89	3.88
			滑石粉	22.89	3.88
硬脂酰基富马酸钠	22.89	3.88
			胶体二氧化硅	5.72	0.97
总的片芯重量	572.24	97.09
			欧巴代II棕色	17.17	2.91
总的片剂重量	589.41	100.00

将颗粒内组分化合物I和泊洛沙姆188在常用混合机(二或双壳瓣)中一起混合。然后，将产生的粉末填充入常用挤出机(American Leistritz modelMicro-18实验室双螺杆挤出机)中，应用普通损失重量加料器，以75g/分钟的速度操作，同时螺杆旋转速度维持在290RPM。双螺杆挤出机配有合适的几何形状的螺杆，用于沿着桶转运和混合颗粒内组分。桶由数个温度控制块和冲模组成，维持在以下温度：35、45、60、60、60、45、40、40℃。挤出物是由模具通过配有空气冷却系统的输送带运输的。然后用2.0mm筛子的锤磨机以中等速度将收集的挤出物磨碎。将颗粒与外部赋形剂在适合的混合机中混合。应用压片机将最终混合物压制成片剂。然后可以将片芯用普通薄膜包衣在开口式(vented)包衣锅中包衣。

实施例3

不同化合物I制剂概念的溶出度试验

图3引用的样品的溶出度试验是在配置桨(USP app.2,rot paddle)、用于自动进样的蠕动泵和介质装入HPLC小瓶的采样工作站的SOTAX AT7智能型离线溶出系统(SOTAX,Allschwil,瑞士)中进行的。溶出度是在37℃下分别在900mL10mM乙酸盐缓冲液pH5.0，10mM磷酸盐缓冲液pH7.5中进行的，每次运行试验3或6个单元，应用桨速为50RPM。5、10、15、20、30、45和60分钟后在溶出介质的表面和旋转桨的顶端之间但离管壁不小于1cm的中间区取样(1.5mL)。在采样前，用25mL样品溶液以闭路循环冲洗相关的管路和过滤器。所有样品在装瓶用于随后的HPLC分析前经Cannula预滤器(35μm)或相当物和1μm Glassfiber过滤器(例如Pall Acrodisc)过滤。

HPLC分析是在Agilent1100Series HPLC系统或相当系统上以等度洗脱方式运行的，在215nm处应用UV检测。泵流速、柱温和注射体积设为1.5mL/分钟、15℃和5μL。色谱分离是在尺寸50×4.6mm的C18反相柱上完成的。流动相由体积比53:47的20mM磷酸铵缓冲液pH7.0和乙腈的混合物组成。结果是以%回收报告的，参照在研的各试验项目的具体标定要求，考虑吸出的样品体积(体积校准)。

图3显示比较下列的溶出度性质：(1)根据实施例1制备的热熔挤出的片剂(以三角形显示)，(2)包含化合物I溶液的软明胶胶囊剂(以星形显示)，(3)包含通过喷雾干燥制备的无定形分散的化合物I的片剂(以圆圈显示)。

溶出度结果清楚地说明从模拟胃液换成pH 5.5乙酸盐缓冲液后热熔挤出的片剂中化合物I具有令人惊讶的快速的溶出速率。这些溶解度结果的一个特别令人惊讶的方面是含有基本上结晶形式的药物的HME片剂表现出与软明胶胶囊剂和喷雾干燥片剂类似的溶出度特性，所述的胶囊剂和片剂都含有主要是分子和/或无定形形式的药物。

考虑到化合物I是BCS 4分子，该结果是特别令人惊讶的，因为将这些类型的药物转变成无定形或分子形式通常导致溶出速率显著增加，并且超过结晶形式。提高的溶出度特性涉及在哺乳动物中改善的药物代谢动力学性质，其最终改善了分子在其治疗适应证方面的功效。

实施例4

不同化合物I制剂概念的人体药物代谢动力学评价

表3

	液体填充的软胶囊剂(参考)	HME制剂
			Cmax(ng/mL)	35.7(73%)	42.7(30%)
AUC0-∞(ng*h/mL)	40.0(44%)	48.1(25%)
			Tmax(hr)	1.00(0.50-3.00)	1.00(0.50-1.50)
t1/2(hr)	1.70(28%)	1.75(29%)

除了Tmax(中间值和范围)，人血浆水平平均值(CV%)

表3显示了本发明的颗粒药物组合物并且更特别是实施例3获得的颗粒药物组合物可以获得提高的生物利用度。该HME制剂包含未溶解的结晶形式的化合物I。令人惊讶地，相比其中化合物I已经溶解的液体填充的软胶囊剂，HME制剂显示出更高的AUC值和降低的变化性。由于API直接包埋在作为亲水聚合物的泊洛沙姆188中，这表明很大的益处。HME制剂降低的变化性导致与降低的潜在副作用相关的恒定的血中水平。

实施例5

狗血浆水平

表4

狗血浆水平平均值(CV)

表4显示化合物I的狗血浆水平的比较。包含化合物I并且含有和不含甘露醇的片剂之间的比较表明亲水填充剂甘露醇导致更高的血浆值(AUC)。这些结果表明除了泊洛沙姆188，亲水填充剂甘露醇组合泊洛沙姆188进一步增加了化合物I的生物利用度。

实施例6

用不同粒度级的化合物I钠盐制备的HME片剂的溶出度试验

图4中样品参考的溶出度试验是在配置桨(USP app.2,rot paddle)、用于自动进样的蠕动泵和用于将介质装入HPLC小瓶的采样工作站的SOTAX AT7智能型离线溶出系统(SOTAX,Allschwil,瑞士)中进行的。溶出度是在37℃下分别在900mL10mM乙酸盐缓冲液pH5.0，10mM磷酸盐缓冲液pH7.5中进行的，每次运行试验3或6个单元，应用桨速为50RPM。5、10、15、20、30、45和60分钟后在溶出介质的表面和旋转桨的顶端之间但离管壁不小于1cm的中间区取样(1.5mL)。在采样前用25mL样品溶液以闭路循环冲洗相关的管路和过滤器。所有样品在装瓶用于随后的HPLC分析前经Cannula预滤器(35μm)或相当物和1μm Glassfiber过滤器(例如Pall Acrodisc)过滤。

HPLC分析是在Agilent1100Series HPLC系统或相当系统上以等度洗脱方式运行的，应用在215nm处UV检测。泵流速、柱温和注射体积设为1.5mL/分钟、15℃和5μL。色谱分离是在尺寸50×4.6mm的C18反相柱上完成的。流动相由体积比53:47的20mM磷酸铵缓冲液pH7.0和乙腈的混合物组成。结果是以%回收报告的，参照在研的各试验项目的具体标定要求，考虑吸出的样品体积(体积校准)。

图4显示根据实施例2制备的含有微粉化和本身形式的化合物I的片剂在图4(A)pH5.0和图4(B)pH7.5乙酸缓冲液中比较化合物I释放的溶出度试验结果。

更具体地，图4说明了根据实施例2制备的片剂中化合物I的溶出速率不依赖于API粒度。按照结晶处理(本身)，没有进一步机械处理获得的化合物I的粒度分布是：对于d(0.1)，1.5μm；对于d(0.5)，5.0μm；对于d(0.9)，34.7μm。通过微粉化本身API获得的化合物I的粒度分布是：对于d(0.1)，0.8μm；对于d(0.5)，1.3μm；对于d(0.9)，2.2μm。因此，微粉化产生了化合物I的粒度显著减小。关于改善水溶性差药物的溶出度性质的常识阐明溶出速率随着粒度减小而增加。这是基于Noyes-Whitney方程，该方程说明了在每次给定时间间隔的溶剂中溶质物质进入溶液相的量与溶质的表面积直接成比例。通过微粉化减小粒度，显著增加了化合物I的表面积。然而，相比本身API，没有观察到实施例2制备的片剂溶出速率相应的增加。

实施例7

用不同粒度的HME颗粒制备的化合物I片剂的溶出度试验

图5显示了含有不同大小的热熔挤出的颗粒的化合物I片剂的溶出度试验结果。本研究中所用的颗粒是通过实施例2描述的热熔挤出和研磨法获得的。研磨的颗粒是通过筛分根据粒度分类。然后由不同粒度颗粒制成片剂。片剂还可以以实施例2的类似方法制备。

图5中样品参考的溶出度试验是在配置桨(USP app.2,rot paddle)、用于自动进样的蠕动泵和用于介质装入HPLC小瓶的采样工作站的SOTAXAT7智能型离线溶出系统(SOTAX,Allschwil,瑞士)中进行的。溶出度是在37℃下在900mL10mM乙酸盐缓冲液pH5.0中进行的，每次运行试验3或6个单元，应用桨速为50RPM。5、10、15、20、30、45和60分钟后在溶出介质的表面和旋转桨的顶端之间但离管壁不小于1cm的中间区取样(1.5mL)。在采样前用25mL样品溶液以闭路循环冲洗相关的管路和过滤器。所有样品在装瓶用于随后的HPLC分析前经Cannula预滤器(35μm)或相当物和1μm Glassfiber过滤器(例如Pall Acrodisc)过滤。

HPLC分析是在Agilent1100Series HPLC系统或相当系统上以等度洗脱方式运行的，应用在215nm处UV检测。泵流速、柱温和注射体积设为1.5mL/分钟、15℃和5μL。色谱分离是在尺寸50×4.6mm的C18反相柱上完成的。流动相由体积比53:47的20mM磷酸铵缓冲液pH7.0和乙腈的混合物组成。结果是以%回收报告的，参照在研的各试验项目的具体标定要求，考虑吸出的样品体积(体积校准)。

用不同粒度的热熔挤出的颗粒制备的片剂的溶出度性质是可叠加的。这说明本文描述的片剂的化合物I的溶出度不依赖于粒度。在对于难溶化合物的常规制粒操作中，溶出度强烈依赖于颗粒的粒度分布。

上面描述或下面权利要求中公开的特征(以它们具体形式或以实现所公开的功能的方法表示)，或获得所公开的结果的方法或处理适当地可以单独或以这些特征的任何组合用于实现不同形式的本发明。

上述发明已经通过说明和实施例的方式详细描述，用于明确和理解目的。对于本领域技术人员显而易见的是变化和修饰可以在附属权利要求的范围内实施。因此，应当理解的是上面描述旨在说明而非限制。因此，本发明范围应当不是参考上面描述来确定的，而应当参考下面附属的权利要求连同这些权利要求赋予的相当物的全部范围来确定。

Claims (15)

1.包含式(I)化合物或其可药用盐和至少一种泊洛沙姆的颗粒药物组合物

2.权利要求1的组合物，其中至少一种泊洛沙姆是泊洛沙姆188。

3.权利要求1或2的组合物，其进一步包含颗粒内填充剂，优选选自磷酸氢二钙、硫酸钙、乳糖、纤维素、高岭土、甘露醇、氯化钠、淀粉和糖粉。

4.权利要求3的组合物，其中颗粒内填充剂是优选至多80%wt/wt量并且更优选至多40%wt/wt量的甘露醇。

5.权利要求1至4中任意一项的组合物，其包含20至50%wt/wt的式(I)化合物和20至40%wt/wt的泊洛沙姆188。

6.权利要求5的组合物，其包含40%wt/wt的式(I)化合物和23%wt/wt的泊洛沙姆188。

7.权利要求6的组合物，其包含40%wt/wt的式(I)化合物，23%wt/wt的泊洛沙姆188和37%wt/wt的甘露醇。

8.权利要求1或2的组合物，其是由20至80%wt/wt的式(I)化合物和20至80%wt/wt的泊洛沙姆，优选40至60%wt/wt的式(I)化合物和40至60%wt/wt的泊洛沙姆组成的二元组合物。

9.权利要求1至8中任意一项的组合物，其是通过热熔挤出获得的。

10.权利要求1至9中任意一项的组合物，其中式(I)化合物以结晶形式存在。

11.口服剂型，其包含权利要求1至9中任意一项的组合物。

12.权利要求10的口服剂型，其进一步包含至少一种赋形剂，选自填充剂、粘合剂、崩解剂、润滑剂、抗粘剂、助流剂、着色剂、聚合物包衣和增塑剂。

13.权利要求10或11的口服剂型，其是片剂或胶囊剂，优选包含速释薄膜包衣。

14.权利要求1至10中任意一项的组合物在治疗HCV感染中的用途。

15.权利要求11至13中任意一项的口服剂型在治疗HCV感染中的用途。

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