CN103193604B - 一种细辛脑化合物及其冻干粉针剂 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种全新活性的细辛脑化合物，该细辛脑化合物本身及其制剂在稳定性试验等均表现出显著优于现有细辛脑化合物的优势。由于细辛脑化合物能够显著改善制剂的稳定性，从而能够保障患者的用药安全。此外，本发明进一步公开了上述细辛脑化合物的制备方法及含有该细辛脑化合物的冻干粉针制剂。

Description

一种细辛脑化合物及其冻干粉针剂

技术领域

本发明属于药物制剂领域，具体涉及一种注射用细辛脑及其冻干粉针剂。

背景技术

细辛脑（2，4，5-三甲氧基-1-丙烯基苯），又名细辛醚（Alpha-Asaronum），主要存在于天南星科植物石菖蒲（Acorusgraninues Soland）等植物的挥发油中，1982年，我国柳州制药厂首次在国内人工合成成功。自60年代起，国内外对细辛脑进行了广泛的研究，已证实其有很强的药理活性，具有止咳、祛痰、平喘、镇静、解痉以及抗惊厥作用。对肺炎双球菌、金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的生长也有不同程度抑制作用，临床应用于肺炎、哮喘、癫痫大发作等收到良好效果。

细辛脑口服吸收迅速，15min即可达到血浓度高峰，血浆蛋白结合率61%，并迅速分布于肝、肾、胆汁及心、脑、肺、脾等脏器，其中肝、肾浓度接近于血浆浓度，其余依次递减。部分由胆汁排泄后，仍经肠肝再吸收，最后主要随小便排出，小部分被肝脏代谢。主要代谢物为2,4,5-三甲氧丙烯酸(肉桂酸)。

近十年来，有关细辛脑的研究报道，国内侧重临床应用较多,而国外则主要在毒理学方面多些，且取得了较大进展。

在慢性阻塞性肺部疾病(COPD)的治疗中，大量的临床研究证明细辛脑辅佐治疗喘息性支气管炎，无论是咳嗽、喘息的减退还是肺部哮鸣音的吸收方面均明显的好于常规治疗方法。另外在降低血脂方面的临床应用上也取得了很好的疗效。细辛脑使用的安全性好，我国将合成的细辛脑应用于临床多年，未见有关人体方面有较大的毒副反应报道，特别适合那些有肝肾功能障碍、血细胞计数低的患者使用。

目前，国内上市的细辛脑制剂有片剂、胶囊剂、注射液和冻干粉针剂，在临床上广泛应用于在肺炎、支气管哮喘、慢性阻塞性肺疾病伴肺部急性炎症等疾病的治疗。其中，冻干粉针是一种最为理想的剂型。由于细辛脑不溶于水，导致制剂和保存的过程中很容易出现安全隐患，为进一步推广细辛脑制剂，现有技术提出了多种改进的冻干粉针剂的技术方案，如：

中国申请201010221289.1公开了一种细辛脑注射制剂,具体讲,涉及一种注射用细辛脑组合物无菌冻干粉针制剂,该注射用细辛脑组合物冻干粉针包括细辛脑4～8g,体积比为95%～100%乙醇40～80ml,甘露醇24～80g,注射用水加至1000～2000ml后冻干后制成500～1000瓶,其中,所述的细辛脑为反溶剂结晶法制备的超细微粒。该注射用细辛脑组合物制剂中还含有聚山梨酯-80,所述聚山梨酯-80的量为0.01～10g,优选1～8g。由于本发明采用了反溶剂结晶法制备的细辛脑的超细微粒,大大的提高了细辛脑的溶解性能,从而在制备细辛脑制剂的时候,少量添加或者不添加助溶剂,同样可以得到稳定的、并且复溶性良好的冻干粉针剂。

中国申请200510073418.6公开了一种注射用细辛脑制剂及制备方法,其制剂处方为:细辛脑4.0-16g,吐温-8060.0g,亚硫酸氢钠1.5g,依地酸钙钠0.3g,甘露醇200.0g,注射用水至2500ml,冻干后共制成1000瓶。

但上述技术方法都无法真正满足冻干制剂本身及临床应用过程中对细辛脑原料提出的高要求，因此，依然有待于找到一种理想的细辛脑化合物，以进一步得到稳定性、疗效等显著优于现有技术的细辛脑冻干粉针剂。

发明内容

本发明的第一目的在于提供一种细辛脑化合物，为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种细辛脑化合物，所述细辛脑化合物用粉末X射线衍射测定法测定，以2θ±0.2衍射角表示的X射线粉末衍射图谱在7.42°、8.63°、12.98°、14.69°、16.48°、18.74°、23.15°、25.26°、27.35°、29.73°、30.38°处显示出特征衍射峰。

本发明所述的细辛脑化合物采用如下方法制备而成：

（1）称取100份细辛脑粗品，将其中的95-98份溶于体积相当于细辛脑粗品重量5-8倍的有机溶剂中，所述有机溶剂为按体积比为3:1:0.5混合的乙腈/乙醚/乙醇中，搅拌均匀，得溶液A；

（2）在40℃-45℃下，以20-30rmp的搅拌速度将剩余2-5份细辛脑粗品充分溶解于0.025-0.075mol/L的乙醇水溶液中形成溶液B；

（3）在2-3小时内，将溶液B匀速滴加到溶液A中，同时控制溶液A的温度为20℃-25℃，流加过程中以5-10rmp的低速搅拌；

（4）流加完毕后，将溶液温度降至0～5℃，置于0.1-0.3KW功率的超声场下养晶6～10小时，过滤，滤饼用水洗涤，40℃以下低温干燥，得细辛脑化合物。

细辛脑不溶于水，在0.025-0.075mol/L的乙醇水溶液中具有很低的溶解度，发明人意外发现将其作为反溶剂后结合超声养晶能够促成重结晶得到一种全新化合物。本发明对乙醇水溶液的用量不作详细限定，具体以能够充分溶解剩余的细辛脑粗品为准。将该化合物的X射线粉末衍射图与现有公开的细辛脑粉末衍射图比较可知，本发明得到的是一种全新的细辛脑化合物。该细辛脑化合物本身及其制剂在稳定性试验等均表现出显著优于现有细辛脑化合物的优势。由于细辛脑化合物能够显著改善制剂的稳定性，这就能够保障患者的用药安全。

此外，为了获得一种成熟的，可重复实现并工业化推广应用的重结晶方法，发明人对此做了大量针对性试验，进一步优化了各操作步骤，使所述的制备方法能够稳定地实现，获得均一的高质量细辛脑化合物。

值得注意的是，本发明所述的细辛脑粗品即市售的细辛脑化合物，即背景技术中提到的中国申请201010221289.1及中国申请200510073418.6使用的细辛脑，具体的选择及获得为本领域技术人员所理解和掌握。

本发明优选所述的制备方法采用如下步骤：

所述的步骤1为：称取100份细辛脑粗品，将其中的96份溶于体积相当于细辛脑粗品重量6倍的有机溶剂中，所述有机溶剂为按体积比为3:1:0.5混合的乙腈/乙醚/乙醇中，搅拌均匀，搅拌速度为5-25rmp，得溶液A。

所述的步骤2为：在42℃下，以25rmp的搅拌速度将剩余4份细辛脑粗品充分溶解于0.05mol/L的乙醇水溶液中形成溶液B。（3）在3小时内，将溶液B匀速流加到溶液A中，同时控制溶液A的温度为22℃，流加过程中以8rmp的低速搅拌。

所述的步骤3为：在2.5小时内，将溶液B匀速滴加到溶液A中，同时控制溶液A的温度为22℃，流加过程中以8rmp的低速搅拌。

所述的步骤4为：流加完毕后，将溶液温度降至2℃，置于0.2KW功率的超声场下养晶8小时，过滤，滤饼用水洗涤，40℃以下低温干燥，得细辛脑化合物。

除特别说明外，本发明所述重量与体积比的单位为g/ml。

本发明的第三目的在于提供一种含有上述细辛脑化合物的冻干粉针制剂，更具体地，本发明是在中国申请200510073418.6公开的基础上，针对原料本身提出一种新的技术方案，得益于这种特殊的细辛脑化合物，本发明所述的冻干粉针制剂具有更理想的稳定性及复溶性。

本发明所述冻干粉针剂按重量份计，由包括如下组分的原料制备而成：细辛脑8份、吐温-8054-64份、亚硫酸氢钠1-2份、依地酸钙钠0.1-0.5份、甘露醇180-220份。其中优选由包括如下组分的原料制备而成：细辛脑8份、吐温-8060份、亚硫酸氢钠1.5份、依地酸钙钠0.3份、甘露醇200份。

此外，本发明进一步提供了上述冻干粉针剂的制备方法，所述制备方法具体包括如下步骤：

（1）称取处方量细辛脑、吐温-80于烧杯中，水浴加热至50±2℃，搅拌至细辛脑全部溶解后加入处方量甘露醇、亚硫酸氢钠和依地酸钙钠，再加注射用水搅拌至得澄明溶液；

（2）加入0.15-0.25%（w/v）活性炭，室温下搅拌15-25分钟后脱炭过滤；所得粗滤液再用0.22μm微孔滤膜过滤，补加注射用水至全量；

（3）对所得澄明滤液进行含量测定，折算每支的灌装量后灌装于棕色西林瓶中；

（4）真空冷冻干燥：

（4.1）预冻：把分装好的药品放入冻干箱内隔板上进行预冻，4-6小时内匀速将制品温度下降至－45℃；

（4.2）升华：控制干燥箱内的真空度达到13.33Pa以下，通过隔板下的加热系统缓缓加热，温度控制在最低共熔点以下5℃，升华干燥时间为10-15小时；

（4.3）再干燥：在10-15小时内将温度升至28-32℃，密封、压盖，成品检验合格后进行保存，即得。

优选包括如下步骤：

（1）称取处方量细辛脑、吐温-80于烧杯中，水浴加热至50±2℃，搅拌至细辛脑全部溶解后加入处方量甘露醇、亚硫酸氢钠和依地酸钙钠，再加注射用水搅拌至得澄明溶液；

（2）加入0.15-0.25%（w/v）活性炭，室温下搅拌15-25分钟后脱炭过滤；所得粗滤液再用0.22μm微孔滤膜过滤，补加注射用水至全量；

（3）对所得澄明滤液进行含量测定，折算每支的灌装量后灌装于棕色西林瓶中；

（4）真空冷冻干燥：

（4.1）预冻：把分装好的药品放入冻干箱内隔板上进行预冻，4-6小时内匀速将制品温度下降至－45℃；

（4.2）升华：控制干燥箱内的真空度达到13.33Pa以下，通过隔板下的加热系统缓缓加热，温度控制在最低共熔点以下5℃，升华干燥时间为10-15小时；

（4.3）再干燥：在10-15小时内将温度升至28-32℃，密封、压盖，成品检验合格后进行保存，即得。

采用上述技术方案，本发明所得细辛脑冻干粉针剂具有理想的稳定性和疗效，从而保证了患者的用药安全。此外，本发明所述的冻干粉针剂处方科学合理，制备过程简易可行，适宜推广应用。

附图说明

图1为本发明所述细辛脑化合物的X射线粉末衍射图。

具体实施方式

以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。

实施例1细辛脑化合物的制备

（1）称取100g细辛脑粗品，将其中的96g溶于体积相当于细辛脑粗品重量6倍的有机溶剂中，所述有机溶剂为按体积比为3:1:0.5混合的乙腈/乙醚/乙醇中，搅拌均匀，搅拌速度为15rmp，得溶液A；

（2）在42℃下，以25rmp的搅拌速度将剩余4g细辛脑粗品充分溶解于0.05mol/L的乙醇水溶液中形成溶液B；

（3）在2.5小时内，将溶液B匀速滴加到溶液A中，同时控制溶液A的温度为22℃，流加过程中以8rmp的低速搅拌；

（4）流加完毕后，将溶液温度降至2℃，置于0.2KW功率的超声场下养晶8小时，过滤，滤饼用水洗涤，40℃以下低温干燥，得细辛脑化合物，总收率为96.76%。。

所得细辛脑化合物的X射线粉末衍射图见图1（在7.42°、8.63°、12.98°、14.69°、16.48°、18.74°、23.15°、25.26°、27.35°、29.73°、30.38°处显示出特征衍射峰）。

实施例2细辛脑化合物的制备

（1）称取100g细辛脑粗品，将其中的95g溶于体积相当于细辛脑粗品重量5倍的有机溶剂中，所述有机溶剂为按体积比为3:1:0.5混合的乙腈/乙醚/乙醇中，搅拌均匀，搅拌速度为5rmp，得溶液A；

（2）在40℃下，以30rmp的搅拌速度将剩余5g细辛脑粗品充分溶解于0.075mol/L的乙醇水溶液中形成溶液B；

（3）在2小时内，将溶液B匀速滴加到溶液A中，同时控制溶液A的温度为20℃，流加过程中以5rmp的低速搅拌；

（4）流加完毕后，将溶液温度降至0℃，置于0.1KW功率的超声场下养晶10小时，过滤，滤饼用水洗涤，40℃以下低温干燥，得细辛脑化合物，总收率为94.52%。。

所得细辛脑化合物的X射线粉末衍射图见图1。

实施例3细辛脑化合物的制备

（1）称取100g细辛脑粗品，将其中的98g溶于体积相当于细辛脑粗品重量8倍的有机溶剂中，所述有机溶剂为按体积比为3:1:0.5混合的乙腈/乙醚/乙醇中，搅拌均匀，搅拌速度为25rmp，得溶液A；

（2）在45℃下，以20rmp的搅拌速度将剩余2g细辛脑粗品充分溶解于0.025mol/L的乙醇水溶液中形成溶液B；

（3）在2-3小时内，将溶液B匀速滴加到溶液A中，同时控制溶液A的温度为25℃，流加过程中以10rmp的低速搅拌；

（4）流加完毕后，将溶液温度降至5℃，置于0.3KW功率的超声场下养晶6小时，过滤，滤饼用水洗涤，40℃以下低温干燥，得细辛脑化合物，总收率为95.12%。。

所得细辛脑化合物的X射线粉末衍射图见图1。

实施例4细辛脑化合物的制备

（1）称取100g细辛脑粗品，将其中的97g溶于体积相当于细辛脑粗品重量7倍的有机溶剂中，所述有机溶剂为按体积比为3:1:0.5混合的乙腈/乙醚/乙醇中，搅拌均匀，搅拌速度为10rmp，得溶液A；

（2）在42℃下，以24rmp的搅拌速度将剩余3g细辛脑粗品充分溶解于0.045mol/L的乙醇水溶液中形成溶液B；

（3）在2小时内，将溶液B匀速滴加到溶液A中，同时控制溶液A的温度为25℃，流加过程中以6rmp的低速搅拌；

（4）流加完毕后，将溶液温度降至4℃，置于0.15KW功率的超声场下养晶7小时，过滤，滤饼用水洗涤，40℃以下低温干燥，得细辛脑化合物，总收率为94.36%。。

所得细辛脑化合物的X射线粉末衍射图见图1。

实施例5细辛脑化合物的制备

（1）称取100g细辛脑粗品，将其中的98g溶于体积相当于细辛脑粗品重量8倍的有机溶剂中，所述有机溶剂为按体积比为3:1:0.5混合的乙腈/乙醚/乙醇中，搅拌均匀，搅拌速度为18rmp，得溶液A；

（2）在44℃下，以22rmp的搅拌速度将剩余2g细辛脑粗品充分溶解于0.035mol/L的乙醇水溶液中形成溶液B；

（3）在3小时内，将溶液B匀速滴加到溶液A中，同时控制溶液A的温度为25℃，流加过程中以7rmp的低速搅拌；

（4）流加完毕后，将溶液温度降至3℃，置于0.15KW功率的超声场下养晶7小时，过滤，滤饼用水洗涤，40℃以下低温干燥，得细辛脑化合物，总收率为93.94%。。

所得细辛脑化合物的X射线粉末衍射图见图1。

实施例6细辛脑冻干粉针剂

处方：

细辛脑8g（实施例1得到）、吐温-8060g、亚硫酸氢钠1.5g、依地酸钙钠0.3g、甘露醇200g，注射用水2500ml，制成1000瓶。

制备方法：

（1）称取处方量细辛脑、吐温-80于烧杯中，水浴加热至50℃，搅拌至细辛脑全部溶解后加入处方量甘露醇、亚硫酸氢钠和依地酸钙钠，再加注射用水搅拌至得澄明溶液；

（2）加入0.2%（w/v）活性炭，室温下搅拌20分钟后脱炭过滤；所得粗滤液再用0.22μm微孔滤膜过滤，补加注射用水至全量；

（3）对所得澄明滤液进行含量测定，折算每支的灌装量后灌装于棕色西林瓶中；

（4）真空冷冻干燥：

（4.1）预冻：把分装好的药品放入冻干箱内隔板上进行预冻，5小时内匀速将制品温度下降至－45℃；

（4.2）升华：控制干燥箱内的真空度达到13.33Pa以下，通过隔板下的加热系统缓缓加热，温度控制在最低共熔点以下5℃，升华干燥时间为12小时；

（4.3）再干燥：在12小时内将温度升至30℃，密封、压盖，成品检验合格后进行保存，即得。

实施例7细辛脑冻干粉针剂

处方：

细辛脑8g（实施例2得到）、吐温-8054g、亚硫酸氢钠1g、依地酸钙钠0.1g、甘露醇180g，注射用水2500ml，制成1000瓶。

制备方法：

（1）称取处方量细辛脑、吐温-80于烧杯中，水浴加热至48℃，搅拌至细辛脑全部溶解后加入处方量甘露醇、亚硫酸氢钠和依地酸钙钠，再加注射用水搅拌至得澄明溶液；

（2）加入0.15%（w/v）活性炭，室温下搅拌15分钟后脱炭过滤；所得粗滤液再用0.22μm微孔滤膜过滤，补加注射用水至全量；

（3）对所得澄明滤液进行含量测定，折算每支的灌装量后灌装于棕色西林瓶中；

（4）真空冷冻干燥：

（4.1）预冻：把分装好的药品放入冻干箱内隔板上进行预冻，4小时内匀速将制品温度下降至－45℃；

（4.2）升华：控制干燥箱内的真空度达到13.33Pa以下，通过隔板下的加热系统缓缓加热，温度控制在最低共熔点以下5℃，升华干燥时间为10小时；

（4.3）再干燥：在10小时内将温度升至28℃，密封、压盖，成品检验合格后进行保存，即得。

实施例8细辛脑冻干粉针剂

处方：

细辛脑8g（实施例3得到）、吐温-8064g、亚硫酸氢钠2g、依地酸钙钠0.5g、甘露醇220g，注射用水2500ml，制成1000瓶。

制备方法：

（1）称取处方量细辛脑、吐温-80于烧杯中，水浴加热至48℃，搅拌至细辛脑全部溶解后加入处方量甘露醇、亚硫酸氢钠和依地酸钙钠，再加注射用水搅拌至得澄明溶液；

（2）加入0.25%（w/v）活性炭，室温下搅拌25分钟后脱炭过滤；所得粗滤液再用0.22μm微孔滤膜过滤，补加注射用水至全量；

（3）对所得澄明滤液进行含量测定，折算每支的灌装量后灌装于棕色西林瓶中；

（4）真空冷冻干燥：

（4.1）预冻：把分装好的药品放入冻干箱内隔板上进行预冻，6小时内匀速将制品温度下降至－45℃；

（4.2）升华：控制干燥箱内的真空度达到13.33Pa以下，通过隔板下的加热系统缓缓加热，温度控制在最低共熔点以下5℃，升华干燥时间为15小时；

（4.3）再干燥：在15小时内将温度升至32℃，密封、压盖，成品检验合格后进行保存，即得。

实施例9细辛脑冻干粉针剂

处方：

细辛脑8g（实施例4得到）、吐温-8058g、亚硫酸氢钠1g、依地酸钙钠0.4g、甘露醇210g，注射用水2500ml，制成1000瓶。

制备方法：

（1）称取处方量细辛脑、吐温-80于烧杯中，水浴加热至50℃，搅拌至细辛脑全部溶解后加入处方量甘露醇、亚硫酸氢钠和依地酸钙钠，再加注射用水搅拌至得澄明溶液；

（2）加入0.15%（w/v）活性炭，室温下搅拌18分钟后脱炭过滤；所得粗滤液再用0.22μm微孔滤膜过滤，补加注射用水至全量；

（3）对所得澄明滤液进行含量测定，折算每支的灌装量后灌装于棕色西林瓶中；

（4）真空冷冻干燥：

（4.1）预冻：把分装好的药品放入冻干箱内隔板上进行预冻，5小时内匀速将制品温度下降至－45℃；

（4.2）升华：控制干燥箱内的真空度达到13.33Pa以下，通过隔板下的加热系统缓缓加热，温度控制在最低共熔点以下5℃，升华干燥时间为14小时；

（4.3）再干燥：在13小时内将温度升至30℃，密封、压盖，成品检验合格后进行保存，即得。

实施例10细辛脑冻干粉针剂

处方：

细辛脑8g（实施例5得到）、吐温-8060g、亚硫酸氢钠1g、依地酸钙钠0.4g、甘露醇200g，注射用水2500ml，制成1000瓶。

制备方法：

（1）称取处方量细辛脑、吐温-80于烧杯中，水浴加热至50℃，搅拌至细辛脑全部溶解后加入处方量甘露醇、亚硫酸氢钠和依地酸钙钠，再加注射用水搅拌至得澄明溶液；

（2）加入0.15%（w/v）活性炭，室温下搅拌20分钟后脱炭过滤；所得粗滤液再用0.22μm微孔滤膜过滤，补加注射用水至全量；

（3）对所得澄明滤液进行含量测定，折算每支的灌装量后灌装于棕色西林瓶中；

（4）真空冷冻干燥：

（4.1）预冻：把分装好的药品放入冻干箱内隔板上进行预冻，5小时内匀速将制品温度下降至－45℃；

（4.2）升华：控制干燥箱内的真空度达到13.33Pa以下，通过隔板下的加热系统缓缓加热，温度控制在最低共熔点以下5℃，升华干燥时间为11小时；

（4.3）再干燥：在12小时内将温度升至30℃，密封、压盖，成品检验合格后进行保存，即得。

本发明还进一步提供如下试验例，以进一步对本发明的技术方案进行说明。

试验例1细辛脑化合物稳定性试验

本试验例检测了本发明所提供的细辛脑化合物的稳定性。

本试验按照中国药典2005版第二部附录XIX C药物稳定性试验指导原则进行，结果如下：

表1、加速试验结果

表2、长期试验结果

其中样品1为实施例1产品，样品2为实施例2产品；

样品3为市售细辛脑原料，HPLC纯99.40％；

本实验说明，本发明提供的细辛脑结晶稳定性好，加速、长期试验纯度含量变化小，其中以实施例1的稳定性最佳。

本发明其他实施例产品也进行了相同的实验，并得到相同趋势的实验结果，但篇幅所限，本发明不再一一列举。

试验例2细辛脑冻干粉针制剂稳定性试验

本试验例检测了本发明所提供的细辛脑冻干粉针剂的稳定性。

试验条件

加速试验：温度40±2℃，时间为6个月。

长期试验：在温度25±2℃的条件下。

考察项目

根据中国药典2000版二部附录XIX C药物稳定性试验指导原则确定考察项目为性状、溶液澄清度与颜色、pH值、有关物质及含量。并于长期试验12个月增加无菌和热原检查两项。

考察方法及结果

【鉴别】（1）取各试验品约50mg，置试管中，加乙醇2ml溶解后，滴加溴试液，溴的颜色立即退去。

（2）取各试验品适量，用95%乙醇溶解制成每1ml中含40μg的溶液，照分光光度法（中国药典2000年版附录ⅣA）测定，在258nm、313nm波长处有最大吸收。

（3）取各试验品适量，精密称定，分别用95%乙醇制成每1ml中含80μg的溶液，作为对照品溶液和供试品溶液。照有关物质测定项下的色谱条件进行试验，供试品主峰的保留时间应与细辛脑对照品峰的保留时间一致。

【检查】蓝色荧光物质 取各试验品适量，精密称定，加醋酸乙酯制成每1ml中含200mg的溶液，照薄层色谱法（中国药典2000版二部附录ⅤB）试验，吸取50ul点于硅胶G薄层板上，以石油醚（60～90℃）-醋酸乙酯（6：4）为展开剂，展开后，取出晾干，刮取在紫外光灯（365nm）下呈蓝色荧光斑点（Rf值约0.3～0.5）的硅胶置10ml量瓶中，另在空白处刮取于此斑点相同大小的硅胶置另一10ml量瓶中作为空白对照，加乙醇适量，充分振瑶，洗脱后，加乙醇稀释至刻度，摇匀，离心取上清夜，照分光光度法（中国药典2000年版二部附录ⅣA），在278nm的波长处测定吸收度，不得大于0.20。

有关物质 取各试验品适量，精密称定，用95%乙醇制成每1ml中含0.16mg的溶液，作为供试品溶液；精密量取供试品溶液1ml，置100ml量瓶中，加95%乙醇稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液（色谱条件见含量测定项下）。精密量取对照溶液20μl，注入液相色谱仪，调节检测器灵敏度，使主成分色谱峰峰高为记录仪满量程的15%，再精密量取供试品溶液20μl注入液相色谱仪，记录色谱图至供试品主峰保留时间的2.5倍。供试品溶液的色谱图中，量取各杂质峰面积之和，不得大于对照溶液的主峰面积（即1.0%）。

氯化物 取各试验品0.25g，加95%碳酸钠0.3g混合后，加水少量混匀,于表面覆盖一薄层95%碳酸钠,用小火加热,使碳化，于7000C炽灼使完全碳化，放冷。加水溶解后，滤过，坩埚及滤器用水洗净，滤液与洗液合并，加水使成25ml，滴加硝酸使遇石蕊试纸呈中性，依法（照中国药典2000年版二部附录ⅧA）检查，如发生混浊与标准氯化钠溶液5.0ml用同一方法制成的对照液比较，不得更浓（0.02%）。

炽灼残渣 取各试验品2.0g，依法检查(中国药典2000版二部附录ⅧN)，遗留残渣不得过0.2%。

重金属 取炽灼残渣项下遗留的残渣，依法检查(中国药典2000版二部附录ⅧH第二法)，含重金属不得过百万分之五。

干燥失重取各试验品约1.0g,置五氧化二磷干燥器内，在室温减压（小于5mmHg）干燥至恒重,减失重量不得过0.5%（中国药典2000年版二部附录ⅧL）。

【含量测定】照高效液相色谱法（中国药典2000年版二部附录ⅤD）测定。

色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈：水（55:45）为流动相；检测波长为258nm。理论塔板数按细辛脑计算应不得低于2000。

测定法取各试验品适量，精密称定，加95%乙醇溶解并稀释制成每1ml中含80μg的溶液，作为供试品溶液；另取细辛脑对照品适量，加95%乙醇溶解并稀释制成每1ml中含80μg的溶液，作为对照品溶液。精密量取供试品溶液和对照品溶液各20μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算。

加速试验

方法：取各实验组样品，于恒温40±2℃,相对湿度75±5％干燥箱内放置六个月。在试验期间于第1、2、3和6个月各取样一次，按上述考察项目进行检测，并与0月结果比较。试验结果表明，本发明所得冻干粉针剂的性状、pH值、溶液澄清度与颜色、含量及有关物质基本无变化。具体测定结果见表3。

其中样品1为本发明实施例6得到的冻干粉针制剂（其中采用的细辛脑为实施例1所制备得到）；

样品2为中国申请200510073418.6公开的实施例3（处方与本发明实施例1一致，区别点仅在于细辛脑化合物不同）；

样品3为中国申请201010221289.1中处方17按实施例5的步骤（4）（5）（6）制成的冻干粉。

表3注射用细辛脑加速试验结果

长期试验

方法：取各实验组样品，于25±2℃,相对湿度60±10％的条件下放置，在试验期间于第3、6、9、12个月各取样一次，按上述考察项目进行检测，并与0月比较。

长期试验至12个月的结果表明，三批样品的性状、pH值、溶液澄清度与颜色、含量及有关物质基本无变化。测定结果见表4和5。

表4注射用细辛脑长期试验考察结果

表5长期试验热原、无菌检查结果

结论：

试验品为采用棕色西林瓶包装的无菌冻干品，经6个月加速试验和12个月长期试验，与0月相比，各项考察指标均无明显变化，试验品稳定性良好，显著优于现有技术公开的其他细辛脑冻干粉针。

本发明其他实施例产品也进行了相同的实验，并得到相同趋势的实验结果，但篇幅所限，本发明不再一一列举。

虽然，上文中已经用一般性说明、具体实施方式及试验，对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。

Claims (9)

1.一种细辛脑化合物，其特征在于，所述细辛脑化合物用粉末X射线衍射测定法测定，以2θ±0.2衍射角表示的X射线粉末衍射图谱在7.42°、8.63°、12.98°、14.69°、16.48°、18.74°、23.15°、25.26°、27.35°、29.73°、30.38°处显示出特征衍射峰。

2.权利要求1所述的细辛脑化合物的制备方法，其特征在于：所述制备方法包括如下步骤：

(1)称取100份细辛脑粗品，将其中的95-98份溶于体积相当于细辛脑粗品重量5-8倍的有机溶剂中，所述有机溶剂为按体积比为3:1:0.5混合的乙腈/乙醚/乙醇中，搅拌均匀，得溶液A；

(2)在40℃-45℃下，以20-30rmp的搅拌速度将剩余2-5份细辛脑粗品充分溶解于0.025-0.075mol/L的乙醇水溶液中形成溶液B；

(3)在2-3小时内，将溶液B匀速滴加到溶液A中，同时控制溶液A的温度为20℃-25℃，滴加过程中以5-10rmp的低速搅拌；

(4)滴加完毕后，将溶液温度降至0～5℃，置于0.1-0.3KW功率的超声场下养晶6～10小时，过滤，滤饼用水洗涤，40℃以下低温干燥，得细辛脑化合物。

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于：所述的步骤1为：称取100份细辛脑粗品，将其中的96份溶于体积相当于细辛脑粗品重量6倍的有机溶剂中，所述有机溶剂为按体积比为3:1:0.5混合的乙腈/乙醚/乙醇中，搅拌均匀，搅拌速度为5-25rmp，得溶液A。

4.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于：所述的步骤2为：在42℃下，以25rmp的搅拌速度将剩余4份细辛脑粗品充分溶解于0.05mol/L的乙醇水溶液中形成溶液B。

5.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于：所述的步骤3为：在2.5小时内，将溶液B匀速滴加到溶液A中，同时控制溶液A的温度为22℃，滴加过程中以8rmp的低速搅拌。

6.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于：所述的步骤4为：滴加完毕后，将溶液温度降至2℃，置于0.2KW功率的超声场下养晶8小时，过滤，滤饼用水洗涤，40℃以下低温干燥，得细辛脑化合物。

7.含有权利要求1所述细辛脑化合物的细辛脑冻干粉针剂，其特征在于：所述冻干粉针剂按重量份计，由包括如下组分的原料制备而成：细辛脑 8份、吐温-80 54-64份、亚硫酸氢钠 1-2份、依地酸钙钠 0.1-0.5份、甘露醇 180-220份。

8.根据权利要求7所述的细辛脑冻干粉针剂，其特征在于：所述冻干粉针剂按重量份计，由包括如下组分的原料制备而成：细辛脑8份、吐温-80 60份、亚硫酸氢钠 1.5份、依地酸钙钠 0.3份、甘露醇 200份。

9.权利要求7所述细辛脑冻干粉针剂的制备方法，包括如下步骤：(1)称取处方量细辛脑、吐温-80于烧杯中，水浴加热至50±2℃，搅拌至细辛脑全部溶解后加入处方量甘露醇、亚硫酸氢钠和依地酸钙钠，再加注射用水搅拌至得澄明溶液；

(2)加入0.15-0.25％w/v活性炭，室温下搅拌15-25分钟后脱炭过滤；所得粗滤液再用0.22μm微孔滤膜过滤，补加注射用水至全量；

(3)对所得澄明滤液进行含量测定，折算每支的灌装量后灌装于棕色西林瓶中；

(4)真空冷冻干燥：

(4.1)预冻：把分装好的药品放入冻干箱内隔板上进行预冻，4-6小时内匀速将制品温度下降至－45℃；

(4.2)升华：控制干燥箱内的真空度达到13.33Pa以下，通过隔板下的加热系统缓缓加热，温度控制在最低共熔点以下5℃，升华干燥时间为10-15小时；

(4.3)再干燥：在10-15小时内将温度升至28-32℃，密封、压盖，成品检验合格后进行保存，即得。