CN103191044B - 菲律宾蛤仔多糖在制备化妆品中的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开一种菲律宾蛤仔多糖在制备化妆品中的应用，所述菲律宾蛤仔多糖的相对分子量为1000~10000Da，含有质量百分比至少为80~85%的多糖成分，所述多糖成分是由氨基己糖、已糖醛酸、岩藻糖及半乳糖构成，氨基己糖、已糖醛酸、岩藻糖及半乳糖的质量比为15~60:7~10:1~4:5~9。将菲律宾蛤仔多糖作为生物活性成分添加到护肤化妆品中，可以有效预防紫外线损伤，避免因紫外线照射而引起的皮肤老化等。因菲律宾蛤仔多糖是以菲律宾蛤仔为原料分离提取、纯化而成，原料来源广泛，制备工艺简单、成本低，产品安全可靠，便于广泛应用。
Description
发明领域
本发明涉及一种菲律宾蛤仔多糖的新用途，尤其是一种菲律宾蛤仔多糖在制备化妆品中的应用。
背景技术
目前，化妆品的种类较多，有护肤霜、眼霜、隔离霜、护手霜和按摩霜等。如中国发明专利号为ZL02817885.8，名称为“二氧化硅被覆混晶氧化物颗粒、其制备方法以及用其制备的化妆品材料”的发明专利就公开了一种具有防晒（预防紫外线造成皮肤损伤）功能的化妆品，是在化妆品基本原料中添加具有遮挡紫外线能力的二氧化硅被覆混晶氧化物颗粒而制成，即通过物理方法预防紫外线损伤。还有一种防晒化妆品是在化妆品基料中添加纤维细胞生长因子，通过促表皮细胞修复增殖预防紫外线损伤，此方法比物理方法更加有效。但因现有纤维细胞生长因子生产工艺复杂、价格昂贵，为此限制了它的广泛应用。中国发明专利申请号为201110344431.6，名称为“贻贝凝集素在制备化妆品中的应用”的发明专利，公开了将贻贝凝集素应用于防晒化妆品中的技术方案，虽然贻贝凝集素制备工艺相对简单，但产量较小，依旧不能广泛应用。
范秀萍等报道了菲律宾蛤仔氨基多糖的分离纯化及化学性质（ 现代食品科技，2005，21（2）：97-99）。所分离纯化得到的菲律宾蛤仔多糖相对分子量为1000~10000Da，含有多糖成分为80~85% 以上，是氨基己糖、已糖醛酸、岩藻糖、半乳糖等单糖组成的多糖，氨基己糖、已糖醛酸、岩藻糖、半乳糖的质量比为15~60:7~10:1~4:5~9，菲律宾蛤仔多糖产量较大。但是，迄今为止还没有关于菲律宾蛤仔多糖在化妆品方面应用的相关报道。
发明内容
本发明是发现了菲律宾蛤仔多糖具有显著的促进成纤维细胞生长的作用，从而发明了菲律宾蛤仔多糖在制备化妆品中的应用。
一种菲律宾蛤仔多糖在制备化妆品中的应用，所述菲律宾蛤仔多糖的相对分子量为1000~10000Da，含有质量百分比至少为80~85%的多糖成分，所述多糖成分是由氨基己糖、已糖醛酸、岩藻糖及半乳糖构成，氨基己糖、已糖醛酸、岩藻糖及半乳糖的质量比为15~60:7~10:1~4:5~9。
所述菲律宾蛤仔多糖在制备化妆品中的应用，是在防晒化妆品中的应用。
本发明发现了菲律宾蛤仔多糖具有显著的促进成纤维细胞生长及对成纤维细胞紫外辐射损伤具有保护作用，从而将菲律宾蛤仔多糖作为生物活性成分添加到护肤化妆品中，可以有效预防紫外线损伤，避免因紫外线照射而引起的皮肤老化等。因菲律宾蛤仔多糖是以菲律宾蛤仔为原料分离提取、纯化而成，原料来源广泛，制备工艺简单、成本低，产品安全可靠，便于广泛应用。
具体实施方式
实施例1：
含有菲律宾蛤仔多糖的护肤霜对成纤维细胞生长促进活性测定：
1．样品制备
菲律宾蛤仔多糖按照范秀萍等报道的“菲律宾蛤仔氨基多糖的分离纯化及化学性质”（现代食品科技，2005，21（2）：97-99）中记述的方法制备。
护肤霜为表1所示配方：
表1
| 成分 | 质量百分比 | 成分 | 质量百分比 |
| 单硬脂酸甘油酯 | 8 | 尼泊金丙酯 | 0.5 |
| 硬脂酸 | 8 | 丙三醇 | 10 |
| 十六烷醇 | 1 | 三乙醇胺 | 1 |
| 对羟苯甲酸丙酯 | 0.1 | 蒸馏水 | 69.9 |
| 二甲基硅油 | 1 | 香精 | 0.5 |
（1）实验组含菲律宾蛤仔多糖的护肤霜样品（实验组1）制备：即按表1将油相原料和油溶性乳化剂，在不断搅拌下混合加热至80℃，维持20 min灭菌，将水相原料和水溶性乳化剂加入至蒸馏水中，搅拌下加热至80℃，维持20min灭菌，然后冷却，将与护肤霜按质量比为十万分之一的菲律宾蛤仔多糖缓慢加到水相中搅拌乳化，再将水相加入到油相中，当温度降至45℃时加入香精，继续搅拌冷却，即得含菲律宾蛤仔多糖的护肤霜。取0.5g含菲律宾蛤仔多糖的护肤霜溶于2.5ml蒸馏水中，10000 rpm离心20 min取上清，经过0.2 μm滤膜过滤，4℃保存。
（2）菲律宾蛤仔多糖样品（实验组2）的制备：配制0.5g/2.5ml的菲律宾蛤仔多糖水溶液，10000 rpm离心20 min取上清，经过0.2 μm滤膜过滤，4℃保存。
（3）护肤霜样品（实验组3）制备：取0.5g表1所示配方护肤霜溶于2.5ml蒸馏水中，10000 rpm离心20 min取上清，经过0.2 μm滤膜过滤，4℃保存。
2．样品对成纤维细胞生长促进作用的测定：
成纤维细胞为第10代体外培养的人成纤维细胞。
将数量为4.5×104 个/ml处于对数生长期的人成纤维细胞100 μl分别置于培养孔中，其中三组分别加入不同的样品（实验组1、2、3）溶液各2.5ml，剩余一组为对照组。加含10%胎牛血清的RPMI-1640培养基液至每孔200 μl，在5%CO2的37oC培养箱中培养24h后，加入20 μl MTT（５g/L），再培养4h后，弃去培养基，加入180 μl DMSO，在恒温振荡器上振荡60s后，用酶标仪在570 nm/630 nm波长处检测吸光度。
每个样品溶液设3个平行样。
根据测得的吸光度值计算生长促进率：生长促进率=［（实验组吸光度值–对照组吸光度值）/ 对照组吸光度值］×100%。
结果如表2。
表2
| 样品 | 对照组 | 含菲律宾蛤仔多糖的护肤霜 | 菲律宾蛤仔多糖 |
| 成纤维细胞生长促进率（%） | 0 | 54.3 | 64.6 |
结果表明：含有菲律宾蛤仔多糖的护肤霜及菲律宾蛤仔多糖对人体成纤维细胞具有促生长作用。
实施例2：
含菲律宾蛤仔多糖的护肤霜对成纤维细胞紫外损伤的保护活性测定：
1．样品制备：
菲律宾蛤仔多糖和护肤霜的制备方法同实施例1。
实验组1（含菲律宾蛤仔多糖的护肤霜样品）、实验组1（菲律宾蛤仔多糖样品）及实验组3（护肤霜样品）的制备均同实施例1.
对成纤维细胞紫外损伤的保护活性测定：
成纤维细胞为第10代体外培养的人成纤维细胞。
将数量为4.5×104 个/ml处于对数生长期的人成纤维细胞100 μl分别置于培养孔中，加含10%胎牛血清的RPMI-1640培养基液至每孔200 μl，在5%CO2的37oC培养箱中培养24h后，其中三组分别加入不同的样品（实验组1、2、3）溶液各2.5ml，剩余一组为对照组。在相同条件下培养30 min，用UVA辐射5s，辐射强度1.87×10-3J/cm2，另外相同一组用UVB辐射5s，辐射强度1.11×10-3J/cm2。辐射结束后，再培养30 min，然后加入20 μL MTT（５g/L），再培养4h后，弃去培养基，加入180 μl DMSO，在恒温振荡器上振荡60s后，用酶标仪在570 nm/630 nm波长处检测吸光度。
每个样品溶液设3个平行样。
根据测得的吸光度值计算生长促进率：生长促进率=［（实验组吸光度值–对照组吸光度值）/ 对照组吸光度值］×100%。
结果如表3。
表3
| 样品 | 对照样品 | 含菲律宾蛤仔多糖的护肤霜 | 菲律宾蛤仔多糖 |
| UVA处理后成纤维细胞生长促进率（%） | 10.9 | 50.9 | 66.9 |
| UVB处理后成纤维细胞生长促进率（%） | -1.97 | 45.9 | 48.8 |
结果表明：UVA短时间辐射，对成纤维细胞有促进生长作用；UVB对成纤维细胞具有损伤作用，而含有菲律宾蛤仔多糖的护肤霜及菲律宾蛤仔多糖对成纤维细胞具有紫外损伤保护和生长促进作用。
实施例3：
菲律宾蛤仔多糖保湿效果测定：
将甘油及菲律宾蛤仔多糖分别制成质量浓度为10%的水溶液，以水为空白对照组，将三种不同的液体置于同样尺寸的蒸发皿中，分别在6h、12h、18h、24h测定失水率，结果如表4.
表4
从表4可以看出，菲律宾蛤仔多糖具有很好的保湿作用。
含菲律宾蛤仔多糖的护肤品涂抹时有明显的润滑感，手感良好；涂于皮肤后，可在皮肤表面形成一层薄膜，使皮肤产生良好的光滑感和湿润感，对皮肤起到保护作用。
实施例4：
实施例1、2、3分别表明菲律宾蛤仔多糖对成纤维细胞生长具有显著促进作用，对成纤维细胞具有紫外损伤保护作用及具有很好的保湿作用。为此可将菲律宾蛤仔多糖以与化妆品基本原料质量比为千分之一至十万分之一的量添加至现有化妆品基本原料中，制成护肤霜、眼霜、隔离霜、护手霜和按摩霜等，可涂敷于皮肤用于预防紫外线造成皮肤损伤。
按表5所示组方配比制备护手霜：
表5
按表5将油相原料和油溶性乳化剂，在不断搅拌下混合加热至80℃，维持20 min灭菌，将水相原料和水溶性乳化剂加入至蒸馏水中，搅拌下加热至80℃，维持20min灭菌，然后冷却，将菲律宾蛤仔多糖缓慢加到水相中搅拌乳化，再将水相加入到油相中，当温度降至45℃时加入香精，继续搅拌冷却，即得防晒护手霜。
Claims (1)
1.一种菲律宾蛤仔多糖在制备化妆品中的应用，所述菲律宾蛤仔多糖的相对分子量为1000~10000Da，含有质量百分比至少为80~85%的多糖成分，所述多糖成分是由氨基己糖、已糖醛酸、岩藻糖及半乳糖构成，氨基己糖、已糖醛酸、岩藻糖及半乳糖的质量比为15~60:7~10:1~4:5~9，其特征是所述菲律宾蛤仔多糖作为对成纤维细胞具有紫外损伤保护和生长促进作用的活性成分在制备防晒化妆品中的应用。
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| "4种海洋贝类多糖提取和保湿性研究";邓一清等;《广东海洋大学学报》;20120630;第32卷(第3期);86-89 * |
| "菲律宾蛤仔多糖提取物抑制蚕豆根尖细胞微核形成的研究";常林瑞等;《食品科学》;20090630;第30卷(第3期);235-238 * |
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