CN103170002A - 生物纤维敷料及其制备方法与用途 - Google Patents

Abstract

本发明揭示一种生物纤维敷料，其包含有一范围落在10-20％(w/w)内的水、一范围落在5-30％(w/w)内的微生物纤维素以及一范围落在50-85％(w/w)内的保水剂。本发明也揭示该生物纤维敷料的制备方法以及用途。

Description

生物纤维敷料及其制备方法与用途

【技术领域】

本发明是有关于一种生物纤维敷料(biocellulose dressing)，其包含有一范围落在10-20％(w/w)内的水、一范围落在5-30％(w/w)内的微生物纤维素(microbial cellulose)以及一范围落在50-85％(w/w)内的保水剂(waterretention agent)。该生物纤维敷料具有良好的吸水性，因而可被用来促进一皮肤伤口的愈合。本发明也有关于该生物纤维敷料的制备方法，其中涉及将一生物纤维材料(biocellulose material)浸泡于一含有一保水剂的水性溶液中，继而进行一干燥处理。

【背景技术】

当皮肤受到损伤(如，烫伤(scald)、创伤(trauma)、外科手术(surgery)以及挫伤(contusion)等)时会产生伤口(wound)，而伤口的种类与大小、病患的营养状况、年纪以及所使用的药物等都会影响伤口愈合(wound healing)的过程与时间。一般而言，伤口愈合可被区分为3个时期：(1)发炎期(inflammatory phase)：伤口处会产生发炎反应(inflammatory response)，进而促进细菌以及坏死组织(necrosis tissue)的清除；(2)增生期(proliferative phase)：伤口处会出现肉芽组织增生(granulation tissueproliferation)、血管生成(angiogenesis)、上皮形成(epithelialization)以及挛缩(contraction)的现象，进而促使伤口变小；以及(3)成熟期(maturation phase)：伤口处会出现胶原蛋白重塑(collagen remolding)以及微血管退化(capillary regression)的现象，进而促使伤口愈合。

为了加速伤口愈合以及减低伤口的感染，在伤口愈合的过程中有必要在伤口处施用以适当的敷料(dressing)。敷料可依照作用的特性而被区分为下面3大类型：

(1)被动型敷料(passive dressing)(也被称为传统敷料(traditionaldressing))：例如，纱布(gauze)以及薄纱敷料(tulle dressing)，它们通常被用来暂时性地覆盖于伤口上，但是容易与伤口粘附(adhering)，因而需要定期地更换；

(2)交互型敷料(interactive dressing)：例如，薄膜敷料(filmdressing)、发泡体敷料(foam dressing)、水胶体敷料(hydrocolloiddressing)以及生物纤维敷料(biocellulose dressing)等，它们通常是透明的(transparent)并且对于水汽(water vapor)以及氧气是可渗透的(permeable)，但是对于细菌则是不可渗透的；以及

(3)生物活性敷料(bioactive dressing)：例如，胶原蛋白敷料(collagendressing)、海藻酸盐敷料(alginate dressing)以及壳聚糖敷料(chitosandressing)等，它们可将所含有的活性物质递送至伤口上以促进伤口愈合。

生物纤维敷料主要是由微生物纤维素(microbial cellulose)所制成。微生物纤维素(也被称为Nata)是一种由纤维素-生成细菌(cellulose-producing bacteria)所生成的多醣聚合物(polysaccharidepolymer)，其主要是由D-葡萄吡喃糖单元(D-glucopyranose units)并通过β-1，4糖苷键(β-1，4-glycosidic bond)连接所构成，并且具有一范围落在2000至6000内的聚合度(degree of polymerization)以及一超细网状结构(ultrafine network structure)。常见的纤维素-生成细菌包括：八迭球菌属物种(Sarcina sp.)、假单孢菌属物种(Pseudomonas sp.)、根瘤菌属物种(Rhizobium sp.)、固氮菌属物种(Azotobacter sp.)、产气杆菌属物种(Aerobacter sp.)、产碱杆菌属物种(Alcaligenes sp.)、无色杆菌属物种(Achromobacter sp.)、土壤杆菌属物种(Agrobacterium sp.)以及葡萄糖酸醋酸菌属物种(Gluconacetobacter sp.)(也被称为醋酸菌属物种(Acetobacter sp.))(特别是木质葡萄糖酸醋酸菌(Gluconacetobacterxylinum)，也被称为木质醋酸菌(Acetobacter xylinum))。

已知微生物纤维素具有下列性质：(1)极佳的亲水性(hydrophilicity)：可吸收与其本身重量相比约为60至700倍的水；(2)良好的拉伸强度(tensilestrength)：可使其在拉伸(tension)下不易断裂；以及(3)良好的湿强度(wetstrength)：可使其在压缩(compression)下不易断裂。在生物医学应用(biomedical applications)上，由微生物纤维素所制成的生物纤维敷料可呈一薄膜(film)的形式并且具有良好的强度以及流体处理能力(fluid handlingability)(包括水分吸收(moisture absorption)以及水分供给(moisturedonation))，因而已被广泛地应用于各种不同类型的伤口(例如，烫伤伤口(scald wound)以及慢性伤口(chronic wound))。

例如，US 7,390,499B2揭示一种供用于治疗慢性伤口(诸如褥疮(pressure sore)、静脉溃疡(venous ulcer)以及糖尿病溃疡(diabeticulcer))的微生物纤维素伤口敷料(microbial cellulose wound dressing)，它是通过一包括下列步骤的方法而制成：将一微生物纤维素片(microbialcellulose pellicle)去热原(depyrogenating)以提供一无热原(nonpyrogenic)的伤口敷料；以及调整该伤口敷料的水含量(water content)，而使得该伤口敷料实质上是由水以及一范围落在1.5至4.3wt％内的微生物纤维素所构成，其中该伤口敷料没有被完全地干燥。该伤口敷料可从一渗出性慢性伤口(exuding chronic wound)中吸收其重量的大约20％至200％的流体渗出物(fluid exudate)，并且可将大于其重量的75％的水分提供给一个慢性伤口的一干燥或坏死的部分。

TW 200803924揭示一种用于减轻皮肤损伤(alleviating skin damage)以及缓解皮肤问题(relieving skin problem)的薄片装置(sheet device)，其包含有生物纤维，其中该生物纤维包含1-50wt％的微生物纤维素、1-10wt％的活性药物以及40-98wt％的水分。此外，该薄片装置可进一步包含有一范围落在15.0-20.0wt％内(以该薄片装置的总重量计)的保水剂(water retentionagent)，而该保水剂可选自于下列所构成的群组：甘油(glycerol)、丙二醇(propanediol)、丁二醇(butanediol)、聚乙二醇(polyethylene glycol)、山梨糖醇(sorbitol)、麦芽糖醇(maltitol)、多元醇(polyalcohol)、玻尿酸(hyaluronans)、氨基酸(amino acid)、纳豆萃取液(natto gum)以及乳酸钠(sodium lactate)。虽然该台湾专利案有提到保水剂可被应用于生物纤维敷料中，但是它并未清楚揭露如何使用一保水剂来制备出一具有较佳吸水性的生物纤维敷料。

在研发生物纤维敷料的过程中，申请人意外地发现：将一含有水以及微生物纤维素的生物纤维材料浸泡于保水剂中，进而给予干燥处理，所得到的生物纤维敷料具有一高度的吸水性，因而被预期可用于吸收大量的伤口渗出物(wound exudate)并且维持伤口的湿度(moisture)，进而促进伤口愈合。

【发明内容】

于是，在第一个方面，本发明提供一种生物纤维敷料，其包含有一范围落在10-20％(w/w)内的水、一范围落在5-30％(w/w)内的微生物纤维素以及一范围落在50-85％(w/w)内的保水剂。

在第二个方面，本发明提供一种用以制备如上所述的生物纤维敷料的方法，其包括：

提供一含有水以及微生物纤维素的生物纤维材料；

将该生物纤维材料浸泡于一含有一保水剂的水性溶液中；以及

将该经浸泡的生物纤维材料进行一干燥处理，由此得到该生物纤维敷料。

在第三个方面，本发明提供一种用于促进皮肤伤口的愈合的方法，其包括对该皮肤伤口施用如上所述的生物纤维敷料。

【附图说明】

下面结合附图及实施例对本发明进行详细说明，所以本发明在上述以及其他目的与特征，可通过参照下文的描述、权利要求书和图式而变得更为明显，附图中：

图1是一依据本发明的生物纤维敷料的平面图；

图2显示依据本发明的生物纤维敷料的水汽渗透值随着时间的变化；

图3显示各组S.D.大鼠的伤口愈合率随着时间的变化；

图4显示在施用敷料之后的第7天时，从各组S.D.大鼠的皮肤伤口中所取得的组织经苏木精-伊红染色并在100X的放大倍率下观察到的结果；以及

图5的A区与B区分别显示在施用敷料之后的第14天时，从各组S.D.大鼠的皮肤伤口中所取得的组织经苏木精-伊红染色并在100X以及200X的放大倍率下观察到的结果。

【具体实施方式】

微生物纤维素具有极佳的亲水性、良好的拉伸强度以及湿强度，因而已被广泛地应用于制备各种生物纤维敷料。在研发生物纤维敷料的过程中，申请人将一生物纤维薄膜(biocellulose film)浸泡于一保水溶液(waterretention solution)中，进而予以干燥处理，所得到的生物纤维敷料进行物理性质分析以及动物实验。而实验结果证实：由此所形成的生物纤维敷料具有良好的弹性、延展性以及透气性，因而在使用上可提供较佳的舒适感。此外，该生物纤维敷料也具有高度的吸水性，因而可吸收大量的伤口渗出物(wound exudate)并且保持伤口的湿度(moisture)，进而促进伤口愈合(woundhealing)。

于是，本发明提供一种生物纤维敷料，其包含有一范围落在10-20％(w/w)内的水、一范围落在5-30％(w/w)内的微生物纤维素以及一范围落在50-85％(w/w)内的保水剂。

较佳地，该生物纤维敷料包含有一范围落在13-17％(w/w)内的水、一范围落在8-15％(w/w)内的微生物纤维素以及一范围落在68-79％(w/w)内的保水剂。在本发明的一个较佳实例中，该生物纤维敷料具有14.92％(w/w)的水、12.08％(w/w)的微生物纤维素以及73％(w/w)的保水剂。

依据本发明，该保水剂是选自于下列所构成的群组：甘油(glycerol)、乳糖(lactose)、羧甲基纤维素钠(sodium carboxymethylcellulose)、蔗糖(sucrose)、葡萄糖(glucose)、甲基纤维素钠(sodium methylcellulose)、糖醇(glycitol)、淀粉(starch)、糊精(dextrin)、凡士林(vaseline)，以及它们的组合。在本发明的一个较佳实例中，该保水剂是由甘油、乳糖以及羧甲基纤维素钠所构成。

依据本发明，该生物纤维敷料具有一范围落在0.1-0.3mm内的厚度。

本发明也提供一种制备如上所述的生物纤维敷料的方法，其包括：

提供一含有水以及微生物纤维素的生物纤维材料；

将该生物纤维材料浸泡于一含有一保水剂的水性溶液中；以及

将该经浸泡的生物纤维材料进行一干燥处理，由此得到该生物纤维敷料。

适用于本发明的方法的保水剂如上面所描述。在本发明的一个较佳实例中，该保水剂是由甘油、乳糖以及羧甲基纤维素钠所构成。

依据本发明，本领域技术人员可依据实际的制程与需求来调整该生物纤维材料的水含量、该水性溶液所含有的保水剂浓度、该水性溶液与该生物纤维材料之间的相对比例以及其他浸泡的操作条件等等，而使得该经浸泡的生物纤维材料具有一所需浓度的保水剂。

在本发明的一个较佳实例中，该经浸泡的生物纤维材料具有5％(w/w)的甘油、1％(w/w)的乳糖以及0.05％(w/w)的羧甲基纤维素钠。

有关该生物纤维材料的制备可以采用本领域技术人员所详知且惯用的技术来进行。依据本发明，该生物纤维材料是由纤维素-生成细菌(cellulose-producing bacteria)生成。该纤维素-生成细菌包括那些本领域技术人员易于获得的纤维素-生成细菌菌株(例如，可购自于国内或国外寄存机构)，或者利用本领域所惯用的微生物分离方法从天然来源中所分离纯化出的新纤维素-生成细菌菌株。

较佳地，该纤维素-生成细菌是选自于下列所构成的群组：葡萄糖酸醋酸菌属物种(Gluconacetobacter sp.)(也被称为醋酸菌属物种(Acetobactersp.))、八迭球菌属物种(Sarcina sp.)、假单孢菌属物种(Pseudomonas sp.)、根瘤菌属物种(Rhizobium sp.)、固氮菌属物种(Azotobacter sp.)、产气杆菌属物种(Aerobacter sp.)、产碱杆菌属物种(Alcaligenes sp.)、无色杆菌属物种(Achromobacter sp.)、土壤杆菌属物种(Agrobacterium sp.)，以及它们的组合。

依据本发明，该生物纤维材料可以是商业上可购得的产品，包括，但不限于：椰果(越南佳美公司，货号为CP4-BB142-HKP-30)、高纤维椰果(海南椰国食品股份有限公司)、生物纤维面膜材质(海南亿德食品股份有限公司，货号为N200789173034)以及生物纤维膜基材(栗马生技股份有限公司)。在本发明的一个较佳实例中，该生物纤维材料是购自于越南佳美公司的椰果，并且它是一种由木质葡萄糖酸醋酸菌(Gluconacetobacter xylinum)(也被称为木质醋酸菌(Acetobacter xylinum))所生成的微生物纤维素片(microbialcellulose pellicle)。

依据本发明，该生物纤维材料在被浸泡于该水性溶液之前，先经过一干燥处理，而使得该生物纤维材料具有一范围落在85-95％(w/w)内的水以及一范围落在5-15％(w/w)内的微生物纤维素。

依据本发明，有关该生物纤维材料在被浸泡于该水性溶液之前或之后的干燥处理可以采用本领域技术人员所详知且惯用的技术来进行。适用于本发明的干燥处理包括，但不限于：机械压制(mechanical pressing)、离心排水(centrifugal draining)、风干(air drying)、阴干(shade drying)、真空干燥(vacuum drying)以及冷冻干燥(freeze drying)。

依据本发明，该生物纤维敷料可进一步进行灭菌处理。该灭菌处理可以采用本领域技术人员所详知且惯用的技术来进行。适用于本发明的灭菌处理包括，但不限于：珈玛射线灭菌(γ-ray sterilization)、电子束灭菌(electron beam sterilization)、加热灭菌(heat sterilization)以及高压灭菌(high-pressure sterilization)。在本发明的一个较佳实例中，该灭菌处理是珈玛射线灭菌。

依据本发明，该生物纤维敷料可进一步包含有一活性剂(active agent)。适用于本发明的活性剂包括，但不限于：胶原蛋白(collagen)、海藻酸盐(alginate)、抗发炎剂(anti-inflammatory agents)(例如，皮质类固醇(corticosteroids))、抗菌剂(antibacterial agents)(例如，壳聚糖(chitosan)、纳米银(nano silver)以及乳酸链球菌素(nisin)等)以及伤口治疗剂(wound-healing agents)(例如，表皮生长因子(epidermal growthfactor，EGF)、酸性成纤维细胞生长因子(acidic fibroblast growthfactor)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)、血小板衍生生长因子(platelet-derived growth factor，PDGF)、类胰岛素生长因子(insulin-like growth factor，IGF)、转化生长因子(transforminggrowth factor，TGF)、生长与分化因子(growth and differentiation factor，GDF)、骨形态发生蛋白(bone morphogenetic protein，BMP)、脱钙骨基质(demineralized bone matrix，DBM)、VIII因子(factor VIII)以及乙酰磺胺(sulfacetamide)等)。有关这些活性剂的选用与数量是本领域技术人员熟知的。

本发明还提供一种用于促进皮肤伤口的愈合的方法，其包括对该皮肤伤口施用如上所述的生物纤维敷料。

依据本发明，该生物纤维敷料的使用期间(duration of applying)以及更换的频率(frequency of replacement)，本领域技术人员可依据下列因素来调整：伤口的种类、位置、面积、深度与严重性、伤口渗出物的位准以及伤口愈合的程度。一般而言，依据本发明的生物纤维敷料通常是每隔2至5天被更换1次。

本发明将就下面的实施例来做进一步说明，但应了解的是，以下实施例只是供例示说明用，而不应被解释为对本发明的实施的限制。

<实施例>

实施例1.生物纤维敷料(biocellulose dressing)的制备

首先，将购自于越南佳美公司的具有一厚度约为2-10mm的微生物纤维素片(microbial cellulose pellicle)(商品名为椰果，货号为CP4-BB142-HKP-30)置于0.25％NaOH溶液中并于25℃下浸泡8小时，接着将其置于0.2％H₂O₂溶液中并于25℃下浸泡6小时，然后用水洗涤数次，去除残留在该微生物纤维素片中的细菌细胞与化学药剂。接着，将经洗涤的微生物纤维素片置于95℃下进行加热杀菌10分钟，继而使用压缩机(compressor)(PX1，南工机械)在5kg/cm²的压力下进行压缩60秒，挤压出部分水分。由此所得到的生物纤维薄膜(biocellulose film)经针盘式厚度规(dial thicknessgauge)(Peacock，MODEL G)测量，具有大约为0.2-1mm的厚度。接着，该生物纤维薄膜的成分测定是依据本领域技术人员所详知且惯用的技术来进行，由所测得的结果发现到：该生物纤维薄膜具有一范围落在85-95％(w/w)内的水以及一范围落在5-15％(w/w)内的微生物纤维素(microbial cellulose)。

之后，将该生物纤维薄膜与保水溶液(water retention solution)(含有10％甘油、2％乳糖(lactose)以及0.1％羧甲基纤维素钠(sodiumcarboxymethylcellulose)作为保水剂(water retention agent))在1∶1(w/w)的比例下浸泡24小时，使得该生物纤维薄膜具有最终约为5％(w/w)的甘油浓度、1％(w/w)的乳糖浓度以及0.05％(w/w)的羧甲基纤维素钠浓度。之后，将吸收有保水剂的生物纤维薄膜进行阴干(shade drying)96小时，由此所得到的生物纤维敷料经针盘式厚度规测量，具有大约为0.1-0.3mm的厚度。

接着，将该生物纤维敷料委托元智大学环境科技研究中心来进行水含量的测定，并且依据本领域技术人员所详知且惯用的技术来进行保水剂以及微生物纤维素的含量测定，由所测得的结果发现到：该生物纤维敷料具有14.92％(w/w)的水、12.08％(w/w)的微生物纤维素以及73％(w/w)的保水剂。

之后，将该生物纤维敷料进行裁切，得到一具有预定的形状以及面积大小的生物纤维敷料备用。

实施例2.生物纤维敷料的物理性质分析(physical property analysis)

实验方法：

A.拉伸试验(tensile test)：

在上面实施例1中所得到的生物纤维敷料(具有如图1所示的形状以及面积大小)，使用拉伸试验机(tensile testing machine)(HT-8504，Hung TaInstrument Co.，Ltd)并依照厂商所提供的操作说明，在100mm/min的拉伸速度(pulling speed)下来进行杨氏模数(Young’s modulus)、断裂强度(fracture strength)以及伸长率(elongation)的测定。重复实验5次，所得到的实验数据以平均值±标准偏差(Standard Deviation，S.D.)来表示。

B.水汽渗透试验(water vapor permeation test)：

将在上面实施例1中所得到的生物纤维敷料(具有一为4cm×4cm的面积大小)包覆于一个50mL的离心管(添加有35mL的水)的管口上，继而将该包覆有生物纤维敷料的离心管称重，然后于37℃下静置78小时。在静置之后的第0、1、2、3、4、5、6、7、23、24、27、30、48、51、54、73、75以及78小时，分别取出该包覆有生物纤维敷料的离心管并称重。接着，水汽渗透值(water vapor permeation value)通过将所测得的重量(g)代入下列公式(1)而被计算出：

公式(1)：A＝B-C

其中：A＝水汽渗透值(g)

B＝在静置之前所测得的重量

C＝在静置之后的各个测试时间点所测得的重量

重复实验5次，所得到的实验数据以平均值±标准偏差来表示。

C.吸水率(water absorption)的测定：

将在上面实施例1中所得到的生物纤维敷料(具有一为4cm×4cm的面积大小)称重，继而将其浸泡于蒸馏水(dH₂O)中2小时。在浸泡之后的第10与30分钟以及第1与2小时，分别取出该生物纤维敷料并予以称重。接着，吸水率通过将所测得的重量(g)代入下列公式(2)被计算出：

公式(2)：D＝(F/E)×100％

其中：D＝吸水率(％)

E＝在浸泡之前所测得的重量

F＝在浸泡之后的各个测试时间点所测得的重量

重复实验3次，所得到的实验数据以平均值来表示。

此外，为比较，依据TW 200803924的实施例1中所揭示的方法而得到的生物纤维薄片被用来进行相同的实验。重复实验10次，所得到的实验数据以平均值来表示。

结果：

A.拉伸试验：

依据本发明的生物纤维敷料在100mm/min的拉伸速度下所测得的杨氏模数、断裂强度以及伸长率分别为33.57±4.13MPa、14.77±2.05MPa以及32.17±2.85％。这个结果显示：依据本发明的生物纤维敷料具有良好的弹性(elasticity)以及延展性(ductility)。因此，申请人认为：依据本发明的生物纤维敷料可以紧密地贴附(appressed)于伤口上并且不易产生位移，因而不会对伤口造成刺激。

B.水汽渗透试验：

图2显示依据本发明的生物纤维敷料的水汽渗透值随着时间的变化。从图2可见，在该包覆有生物纤维敷料的离心管中的水会随着时间而稳定地蒸散。这个结果显示：依据本发明的生物纤维敷料具有良好的透气性。

C.吸水率的测定：

表1显示依据本发明的生物纤维敷料以及依据TW 200803924的实施例1所得到的生物纤维薄片在各个测试时间点所测得的吸水率。从表1可见，依据TW200803924的实施例1所得到的生物纤维薄片在各个测试时间点所测得的吸水率大约皆为100％，并且不会随着时间而有显著的增加。相对地，依据本发明的生物纤维敷料在浸泡之后的第10分钟所测得的吸水率已达到大约800％，并且会随着时间而快速地增加。这个结果显示：与TW 200803924的实施例1所得到的生物纤维薄片相比，本发明的生物纤维敷料具有较佳的吸水性。申请人因此认为：本发明的生物纤维敷料可以吸收大量的伤口渗出物(wound exudate)并且保持伤口的湿度(moisture)，进而促进伤口愈合(wound healing)。

表1.本发明的生物纤维敷料以及TW 200803924的实施例1所得到的生物纤维薄片在各个测试时间点所测得的吸水率

申请人依据以上的实验结果认为：本发明的生物纤维敷料具有良好的弹性、延展性、透气性以及吸水性，因而在临床应用上可以使病患具有较佳的舒适感。

实施例3.生物纤维敷料在促进皮肤伤口愈合上的效用评估

实验材料与方法：

A.实验动物：

下面实验中所使用的雄性Sprague-Dawley(S.D.)大鼠(8周大，体重约为200g)是购自于乐斯科生物科技股份有限公司(BioLasco Taiwan Co.，Ltd)。所有的实验动物被饲养于一个光照与黑暗各为12小时、室温维持在22℃以及相对湿度维持在42％的独立空调的动物房内，而且水分与饲料被充分地供给。在实验之前，给予动物至少2周的期间去适应环境。有关实验动物的饲养环境、处理以及一切实验程序均符合国家卫生研究院(National Institutes ofHealth，NIH)的实验动物饲养管理及使用规范(Guide for the Care and Useof Laboratory Animals)。

B.生物纤维敷料的灭菌(sterilization)：

将在上面实施例1中所得到的生物纤维敷料(具有一为4cm×4cm的面积大小)用珈玛射线(γ-ray)(剂量为40kGy)予以灭菌，继而将其用于进行下面的实验。

C.皮肤伤口(skin wound)的形成：

将S.D.大鼠的背侧部分(dorsal part)进行剃毛(shaving)，然后以碘酒(tincture of iodine)以及70％酒精予以消毒(disinfected)。之后，使用手术刀(surgical knife)在S.D.大鼠的背部的左侧与右侧上总共切出5个具有约为1.2cm×1.2cm的面积大小以及约为2-3mm的深度的皮肤伤口。

D.敷料的施用：

S.D.大鼠被随机地分成1个实验组以及3个对照组(也就是对照组1、2以及3)(每组n＝9)，其中各组的S.D.大鼠是依照上面第C项中所述的方法来形成皮肤伤口。接着，在实验组的S.D.大鼠的皮肤伤口上使用依据上面第B项所制得的经灭菌的生物纤维敷料，而对照组1、2以及3的S.D.大鼠的皮肤伤口分别被施用SkinTemp胶原蛋白敷料(SkinTemp collagen dressing)(购自于BioCore)、Tegaderm^TM水胶体敷料(Tegaderm^TM Hydrocolloid Dressing)(购自于3M)以及Tegaderm^TM透明敷料(Tegaderm^TM Transparent Dressing)(购自于3M)，之后各组大鼠每隔2-3天更换新的敷料。实验总共进行20天，在施用敷料之前以及在施用敷料之后的第1、3、6、8、10、13、15、17以及20天时，分别对各组S.D.大鼠的伤口部位进行拍照，并依据下面第E项当中所述的方法来进行分析。另外，在施用敷料之后的第7以及14天时，使用手术刀收集各组S.D.大鼠的伤口组织。然后，将所得到的各个组织样品进行下面第F项的分析。

E.伤口愈合率(wound healing rate)的测定：

使用ImageJ软体(NIH)分析各组S.D.大鼠的皮肤伤口在各个测试时间点所分别拍摄到的照片，可估算出在各个测试时间点的伤口面积。伤口愈合率是将所得到的伤口面积(cm²)代入下列公式(3)计算出：

公式(3)：G＝(I/H)×100％

其中：G＝伤口愈合率(％)

H＝在施用敷料之前所测得的伤口面积

I＝在施用敷料之后的各个测试时间点所测得的伤口面积

所得到的实验数据以平均值±标准偏差来表示。

F.组织病理学检验(histopathological examination)：

在室温下将所取得的组织样品用固定溶液(配于PBS中的4％三聚甲醛(paraformaldehyde))进行固定处理(fixation)至少24小时，继而进行乙醇脱水处理(ethanol dehydrating)。之后，将经脱水的组织样品包埋(embedding)于石蜡(paraffin)中，继而进行切片处理，得到具有厚度为5mm的切片(sections)。在脱蜡之后，使用苏木精-伊红(hematoxylin-eosin)并且依据本领域技术人员所详知且惯用的技术来对切片进行染色。使一光学显微镜(Eclipse 80i，Nikon)并在100X以及200X的放大倍率下观察经染色的切片。

结果：

A.伤口愈合率的测定：

图3显示各组S.D.大鼠的伤口愈合率随着时间的变化。从图3可见，在使用敷料之后的第1至6天内，实验组以及对照组1的S.D.大鼠的伤口愈合率均大于对照组2与3，并且在使用敷料之后的第6天，实验组以及对照组1的S.D.大鼠的伤口愈合率皆已达60％以上。而在使用敷料之后的第20天，各组S.D.大鼠的皮肤伤口几乎皆已完全愈合。这个实验结果显示：本发明的生物纤维敷料具有与市售的皮肤伤口敷料(skin wound dressing)相似、甚至更优越的促进伤口愈合的效用。

B.组织病理学检验：

图4显示在使用敷料之后的第7天，从各组S.D.大鼠的皮肤伤口中所取得的组织经苏木精-伊红染色并在100X的放大倍率下观察到的结果。从图4可见，在使用敷料之后的第7天，各组S.D.大鼠的皮肤伤口皆有出现肉芽组织增生(granulation tissue proliferation)以及血管生成(angiogenesis)的情形。特别地，实验组以及对照组1与2的S.D.大鼠的伤口组织皆有出现上皮细胞增生与移动(epithelial cell proliferation and migration)以及上皮形成(epithelialization)的现象，而对照组3的S.D.大鼠的伤口组织则尚未有出现明显的上皮形成的现象。

图5的A区与B区分别显示在使用敷料之后的第14天，从各组S.D.大鼠的皮肤伤口中所取得的组织经苏木精-伊红染色并在100X以及200X的放大倍率下观察到的结果。从图5可见，在使用敷料之后的第14天，各组S.D.大鼠的伤口组织中皆可明显地观察到有新生表皮层(neoepithelium)以及角质层(stratum corneum)，并且有出现胶原蛋白重塑(collagen remolding)的情形。特别地，实验组以及对照组1与2的S.D.大鼠的伤口组织皆有出现毛囊形成(hair follicle formation)的现象，而对照组3的S.D.大鼠的伤口组织尚未形成完整的毛囊。这个实验结果显示：本发明的生物纤维敷料可以促进伤口的正常肉芽组织的增生以及新表皮的形成，进而达到伤口愈合的效用。

本说明书中被引述的所有专利和文献以其整体被并入本申请作为参考资料。若有所冲突时，以本申请详细说明(包含界定在内)为准。

虽然已参考上述特定的实例描述本发明，但是明显地在不背离本发明的范围和精神之下可作出很多的修改和变化。因此，本发明只受专利申请范围的限制。

Claims (20)

1.一种生物纤维敷料，其特征在于：该生物纤维敷料包含有一范围落在10-20％(w/w)内的水、一范围落在5-30％(w/w)内的微生物纤维素以及一范围落在50-85％(w/w)内的保水剂。

2.如权利要求1所述的生物纤维敷料，其特征在于：该生物纤维敷料是通过一包含下列步骤的方法而制得：

提供一含有水以及微生物纤维素的生物纤维材料；

将该生物纤维材料浸泡于一含有一保水剂的水性溶液中；以及

将该经浸泡的生物纤维材料进行一干燥处理，由此得到该生物纤维敷料。

3.如权利要求2所述的生物纤维敷料，其特征在于：在该方法中，该保水剂是选自下组：甘油、乳糖、羧甲基纤维素钠、蔗糖、葡萄糖、甲基纤维素钠、糖醇、淀粉、糊精、凡士林，以及它们的组合。

4.如权利要求3所述的生物纤维敷料，其特征在于：在该方法中，该保水剂是由甘油、乳糖以及羧甲基纤维素钠所构成。

5.如权利要求4所述的生物纤维敷料，其特征在于：在该方法中，该经浸泡的生物纤维材料具有5％(w/w)的甘油、1％(w/w)的乳糖以及0.05％(w/w)的羧甲基纤维素钠。

6.如权利要求2所述的生物纤维敷料，其特征在于：在该方法中，该生物纤维材料是通过一选自于下列所构成的群组中的纤维素-生成细菌而生成：葡萄糖酸醋酸菌属物种、八迭球菌属物种、假单孢菌属物种、根瘤菌属物种、固氮菌属物种、产气杆菌属物种、产碱杆菌属物种、无色杆菌属物种、土壤杆菌属物种，以及它们的组合。

7.如权利要求2所述的生物纤维敷料，其特征在于：在该方法中，该生物纤维材料在被浸泡于该水性溶液之前先经过一干燥处理，使得该生物纤维材料具有一范围落在85-95％(w/w)内的水以及一范围落在5-15％(w/w)内的微生物纤维素。

8.如权利要求2所述的生物纤维敷料，其特征在于：在该方法中，该生物纤维敷料进一步进行一选自于由下列所构成的群组中的灭菌处理：珈玛射线灭菌、电子束灭菌、加热灭菌以及高压灭菌。

9.如权利要求1所述的生物纤维敷料，其特征在于：该生物纤维敷料包含有一范围落在13-17％(w/w)内的水、一范围落在8-15％(w/w)内的微生物纤维素以及一范围落在68-79％(w/w)内的保水剂。

10.如权利要求1所述的生物纤维敷料，其特征在于：该生物纤维敷料具有一范围落在0.1-0.3mm内的厚度。

11.一种用以制备一生物纤维敷料的方法，其特征在于：该方法包括：

提供一含有水以及微生物纤维素的生物纤维材料；

将该生物纤维材料浸泡于一含有一保水剂的水性溶液中；以及

将该经浸泡的生物纤维材料进行一干燥处理，由此得到该生物纤维敷料。

12.如权利要求11所述的方法，其特征在于：该保水剂是选自于下列所构成的群组：甘油、乳糖、羧甲基纤维素钠、蔗糖、葡萄糖、甲基纤维素钠、糖醇、淀粉、糊精、凡士林，以及它们的组合。

13.如权利要求12所述的方法，其特征在于：该保水剂是由甘油、乳糖以及羧甲基纤维素钠所构成。

14.如权利要求13所述的方法，其特征在于：该经浸泡的生物纤维材料具有5％(w/w)的甘油、1％(w/w)的乳糖以及0.05％(w/w)的羧甲基纤维素钠。

15.如权利要求11所述的方法，其特征在于：该生物纤维材料是由一选自于下列所构成的群组中的纤维素-生成细菌生成：葡萄糖酸醋酸菌属物种、八迭球菌属物种、假单孢菌属物种、根瘤菌属物种、固氮菌属物种、产气杆菌属物种、产碱杆菌属物种、无色杆菌属物种、土壤杆菌属物种，以及它们的组合。

16.如权利要求11所述的方法，其特征在于：该生物纤维材料在被浸泡于该水性溶液之前有先经过一干燥处理，而使得该生物纤维材料具有一范围落在85-95％(w/w)内的水以及一范围落在5-15％(w/w)内的微生物纤维素。

17.如权利要求11所述的方法，其特征在于：该生物纤维敷料进一步进行一选自于由下列所构成的群组中的灭菌处理：珈玛射线灭菌、电子束灭菌、加热灭菌以及高压灭菌。

18.如权利要求11所述的方法，其特征在于：由该方法所得到的生物纤维敷料包含有一范围落在10-20％(w/w)内的水、一范围落在5-30％(w/w)内的微生物纤维素以及一范围落在50-85％(w/w)内的保水剂。

19.如权利要求18所述的方法，其特征在于：由该方法所得到的生物纤维敷料包含有一范围落在13-17％(w/w)内的水、一范围落在8-15％(w/w)内的微生物纤维素以及一范围落在68-79％(w/w)内的保水剂。

20.如权利要求11所述的方法，其特征在于：由该方法所得到的生物纤维敷料具有一范围落在0.1-0.3mm内的厚度。

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