CN103169987A - 一种调控黑色素合成改善皮肤美白的药物 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种调控黑色素合成改善皮肤美白的药物，所述皮肤美白药物含有microRNA-218，所述microRNA-218抑制黑色素的合成。microRNA-218通过抑制转录因子MITF的表达来抑制黑色素的合成，从根本上达到美白效果，对晒斑、黄褐斑等色斑和黑变病也起到很好的美白效果。
Description
发明领域
本发明涉及一种调控黑色素合成改善皮肤美白的药物，尤其涉及含有microRNA-218的调控黑色素合成改善皮肤美白的药物。
背景技术
美白是一个永恒的话题，每个女性都渴求有一个白皙的肌肤和细嫩的脸庞。俗话说“一白遮百丑”，所以女性对于美白的追求就像人类对于光明的追求一样从未停止，胭脂水粉几乎是每个成年女性的必备品，到了现在，更是有遮瑕膏、粉底、散粉、定妆粉、粉饼等零零总总的粉饰家族，粉饰美白、粉饰太平。其实，美白就像是治病，治标不如治本，只有把内在肤质调理好，根治影响美白的罪魁祸首——黑色素，肌肤才能展现真正由内而外的自然美白光彩。
黑色素是存在于每个人皮肤基底层的一种蛋白质。紫外线的照射会令黑色素产生变化，生成一种保护皮肤的物质，然后黑色素又经由细胞代谢的层层移动，到了肌肤表皮层，形成了我们现在所看到的色斑和肤色不匀等皮肤问题。
黑色素的生物合成是一个非常复杂的过程，主要是通过黑色素细胞内的酪氨酸酶催化反应形成的。在这个过程中，有很多基因参与了调控。其中，被称为“黑色素细胞主调节器”的MITF基因发挥了至关重要的作用。MITF是于黑色素细胞中所发现的，且是黑色素细胞适当成长及长期持续存活所不可或缺。MITF是一个转录因子，激活黑色素生成的关键酶－酪氨酸酶的活性，参与调控黑色素的合成。因此，抑制MITF的表达和酪氨酸酶的活性，才能抑制黑色素的合成，达到美白的效果。
MicroRNA（miRNA）是长度为20～24个核苷酸的非编码小RNA，可以通过与靶点的结合而特异性的抑制目标基因的表达。近十年来，研究者发现microRNA在胚胎发育以及细胞的增殖、分化和凋亡等生理过程中发挥着极其重要的功能。目前只有一小部分microRNAs生物学功能得到阐明。例如，microRNA-273和lys-6编码的microRNA，参与线虫的神经系统发育过程；microRNA-430参与斑马鱼的大脑发育；microRNA-181控制哺乳动物血细胞分化为B细胞；microRNA-375调节哺乳动物胰岛细胞发育和胰岛素分泌；microRNA-143在脂肪细胞分化起作用；microRNA-196参与了哺乳动物四肢形成，microRNA-1与心脏发育有关。但是对于microRNA在皮肤美白方面的相关研究很少。
发明内容
本发明的目的在于提供一种调控黑色素合成改善皮肤美白的药物。
为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：
一种调控黑色素合成改善皮肤美白的药物，所述调控黑色素合成改善皮肤美白的药物含有microRNA-218。
优选地，所述microRNA-218抑制黑色素的合成。
优选地，所述microRNA-218通过抑制转录因子MITF的表达来抑制黑色素的合成。
进一步优选，所述microRNA-218的序列为SEQ ID NO.1所示的序列。
更进一步优选，所述调控黑色素合成改善皮肤美白的药物是一种皮肤外用制剂。
更进一步优选，所述调控黑色素合成改善皮肤美白的药物是化妆品或护肤品。
与现有技术相比，本发明一种调控黑色素合成改善皮肤美白的药物，microRNA-218通过抑制转录因子MITF的表达来抑制黑色素的合成，从根本上达到美白效果。而且，本发明调控黑色素合成改善皮肤美白的药物对晒斑、黄褐斑等色斑和黑变病也起到很好的美白效果。
附图说明
图1为microRNA-218对黑色素合成的抑制效果；图1中A为microRNA-218对melan-a细胞的黑色素合成的抑制效果图，图1中B为microRNA-218对酪氨酸酶活性的抑制效果图，图1中C为不同处理组酪氨酸酵素组织学染色结果图，（“**”表示P＜0.01）。
图2为microRNA-218对MITF表达的抑制效果。
图3为microRNA-218在模拟人基地皮肤实验中对黑色素合成的抑制效果。
上述附图中，C代表空白对照，miR-218代表microRNA-218，Anti-miR-218代表反义microRNA-218，NC代表阴性对照，Anti-NC代表反义阴性对照。
具体实施方式
为了更好的理解本发明，下面结合附图和实施例对本发明做进一步说明。本申请中未明确记载的实验步骤和条件，则采用常规的实验步骤和条件，因为这些实验步骤和条件是本领域的技术人员所熟知的，因此，在本申请文件中未再赘述。
在研究中发现一些microRNA能抑制黑色素的合成，从而起到皮肤美白的效果。MITF是黑色素合成的关键转录调控因子，以它为靶标，通过生物信息学预测，确定了microRNA-218能与之配对，并且进行相关实验。结果证实microRNA-218能抑制MITF的表达，并且能明显的在细胞模型上抑制黑色素的合成。在后续的模拟人基地皮肤色素形成实验（OTC）中也证实microRNA-218抑制MITF的表达，从而影响色黑色素的合成。
基于以上几点，我们可以推断microRNA-218在晒斑、黄褐斑、妊娠斑和黑变病等的美白方面具有一定的效果，它能通过抑制黑色素调节器MITF的表达来抑制黑色素的形成。
实施例1 MicroRNA-218对黑色素合成的抑制实验
MicroRNA-218由上海吉玛公司合成，其序列为SEQ ID NO.1所示。另设随机序列为阴性对照，其序列为SEQ ID NO.2所示。
采用鼠源的melan-a作为细胞模型。Melan-a细胞采用RPMI1640培养基加入5％体积百分数的FBS和1％体积百分数的双抗在5%体积百分数的CO2，37℃培养。将细胞按5×105/孔的密度种12孔板，24小时后，按照Invitrogen公司的Lipofectamine2000的使用说明书，将microRNA-218及阴性对照转染至melan-a内，转染后细胞继续培养72h，收集样本，分别检测黑色素（melanin）的表达（见图1中A所示），酪氨酸酶的活性（见图1中B所示）及酪胺酸酵素的组织学染色（见图1中C所示）。由图1可知，microRNA-218组比其他对照组的黑色表达量低，酪氨酸酶的活性也低。
实施例2 MicroRNA-218对MITF表达的抑制实验
采用了Western Blotting法检测microRNA-218在黑色素细胞中中对MITF表达的抑制。具体步骤如下：
1）microRNA-218及阴性对照转染后，继续培养3天。去掉上清，用PBS洗3次，加入100ul细胞裂解液，冰上裂解15min。收集蛋白，1,2000rpm离心10min以去掉碎片；
2）测定蛋白浓度，按照10ug的蛋白上样后，SDS-PAGE跑胶，转膜后，在4%脱脂奶粉中封闭后，加入兔源的MITF的抗体孵育过夜，然后加入羊抗兔的二抗后，ECL显色，压片，结果图2。由图2可知，microRNA-218组比其他对照组的MITF表达量低。
实施例3 MicroRNA在模拟人基地皮肤实验中对黑色素合成的抑制实验
以稳定表达microRNA-218的人的原代的黑色素细胞模拟人的体内的皮肤结构进行3-D培养一个月，经4%多聚甲醛固定，石蜡包埋，切成5um薄片，放在TESPA包被的玻片上，染色液染色后，显微镜下拍照。结果见图3。由图3可知，microRNA-218组比其他对照组的黑色素合成少，皮肤颜色较浅。
因microRNA-218能抑制MITF的表达，并且能明显的在细胞模型上抑制黑色素的合成。所以，我们可以推断microRNA-218在由黑色素引起的晒斑、黄褐斑、妊娠斑和黑变病等皮肤问题或疾病的美白方面具有一定的效果。
MicroRNA-218可以用于制备单独具有美白作用的药物，也可以与其他药物组合制备具有多种功效的药物，如同时具备保水和美白功效的药物。所制备的药物可以含有一般药物所需的辅助成份；所述药物包括外用制剂、化妆品和护肤品。本发明调控黑色素合成改善皮肤美白的药物的使用方式包括但不限于皮肤涂抹的方式。
以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对本发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。
Claims (6)
1.一种调控黑色素合成改善皮肤美白的药物，其特征在于，所述调控黑色素合成改善皮肤美白的药物含有microRNA-218。
2.根据权利要求1所述调控黑色素合成改善皮肤美白的药物，其特征在于，所述microRNA-218抑制黑色素的合成。
3.根据权利要求2所述调控黑色素合成改善皮肤美白的药物，其特征在于，所述microRNA-218通过抑制转录因子MITF的表达来抑制黑色素的合成。
4.根据权利要求1、2或3所述调控黑色素合成改善皮肤美白的药物，其特征在于，所述microRNA-218的序列为SEQ ID NO.1所示的序列。
5.根据权利要求4所述调控黑色素合成改善皮肤美白的药物，其特征在于，所述调控黑色素合成改善皮肤美白的药物是一种皮肤外用制剂。
6.根据权利要求5所述调控黑色素合成改善皮肤美白的药物，其特征在于，所述调控黑色素合成改善皮肤美白的药物是化妆品或护肤品。
Priority Applications (1)
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| CN 201310089348 CN103169987A (zh) | 2013-03-19 | 2013-03-19 | 一种调控黑色素合成改善皮肤美白的药物 |
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| CN 201310089348 CN103169987A (zh) | 2013-03-19 | 2013-03-19 | 一种调控黑色素合成改善皮肤美白的药物 |
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Family Applications (1)
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| CN 201310089348 Withdrawn CN103169987A (zh) | 2013-03-19 | 2013-03-19 | 一种调控黑色素合成改善皮肤美白的药物 |
Country Status (1)
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Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104027256A (zh) * | 2014-06-12 | 2014-09-10 | 中国人民解放军第三军医大学第一附属医院 | eIF6在调控黑色素合成中的用途 |
| CN112773730A (zh) * | 2021-01-28 | 2021-05-11 | 南昌大学 | 微小rna在美白护肤产品中的应用 |
| CN112920990A (zh) * | 2021-02-07 | 2021-06-08 | 苏州大学 | 一种斑马鱼黑色素沉着模型的构建方法 |
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2013
- 2013-03-19 CN CN 201310089348 patent/CN103169987A/zh not_active Withdrawn
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| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C04 | Withdrawal of patent application after publication (patent law 2001) | ||
| WW01 | Invention patent application withdrawn after publication |
Application publication date: 20130626 |