CN103169667B

CN103169667B - 一种携载棉酚衍生物的多功能介孔硅纳米制剂的制备方法

Info

Publication number: CN103169667B
Application number: CN201310016135.2A
Authority: CN
Inventors: 詹勇华; 孙玉林; 梁继民; 田捷; 张象涵; 张金瑶
Original assignee: Xidian University
Current assignee: Xidian University
Priority date: 2013-01-17
Filing date: 2013-01-17
Publication date: 2014-08-20
Anticipated expiration: 2033-01-17
Also published as: CN103169667A

Abstract

本发明公开了一种携载新型棉酚衍生物ApoG2的多功能介孔硅纳米制剂的制备方法；将一定量的介孔表面活性剂加入到稀的强碱溶液中，搅拌，加热至一定温度后滴加TEOS和花青染料Cy5.5，在恒温和剧烈搅拌条件下反应一定时间，过滤，并数次透析，制备出掺杂荧光染料的介孔硅基体纳米粒子；离心后，将其与新型棉酚衍生物ApoG2溶液混合，振荡，离心并洗涤，从而得到一种可示踪的携载新型棉酚衍生物ApoG2的多功能介孔硅纳米制剂。本发明的制备方法具有过程简单，粒径小，良好的单分散性，荧光性能稳定、载药量高等优点，从而可以使ApoG2更好的发挥抗肿瘤作用。

Description

一种携载棉酚衍生物的多功能介孔硅纳米制剂的制备方法

技术领域

本发明涉及一种多功能介孔硅纳米粒子载药的制备工艺，特别涉及可示踪的携载新型棉酚衍生物ApoG2的多功能介孔硅纳米粒子作为荧光探针及药物传输工具在生物医学领域的应用。

背景技术

介孔材料具有高比表面积、大孔道容量、孔径在2.0～50.0nm之间由合成条件任意调节等结构特征，从而赋予其许多独特的性能，在多相催化、传感器、吸附与分离等众多领域具有潜在的应用价值，已成为一个新兴的蓬勃发展的跨学科研究领域。其纳米尺度所固有的独特性质，在癌症的无创诊断与治疗方面起到了积极重要的作用。

1992年Mobil公司研究人员利用表面活性剂的自组装性质和模板作用，成功地合成了由表面活性剂-氧化硅构成的无机-有机杂化材料，脱除表面活性剂后得到了具有均匀纳米孔、大比表面积M41S类介孔材料。由于具有高的表面积和孔容，易于调变的规整纳米孔(如孔径、维数等)，丰富而易于设计的表面基团以及可调控的宏观形貌(如膜、纤维、球等)，介孔材料在大分子分离、生物传感器、催化、吸附、微电子、光学以及制备新型纳米材料等领域显示了诱人的应用前景。但M41S介孔分子筛水热稳定性不高，且所使用的有机模板剂以及有机硅源价格昂贵，限制了其进一步应用。由商品化三嵌段聚醚高分子表面活性剂聚环氧乙烷-聚环氧丙烷-聚环氧乙烷(PEO-PPO-PEO)导向而成的有序度高、大孔径的(5～30nm)厚壁介孔材料SBA-15的出现，为介孔材料的发展注入了新的活力。为了使介孔材料向功能化和经济实用方向发展，寻找新的模板剂，合成具有新结构、新性能的介孔材料，探索模板剂结构与介孔材料性能之间的关系，成为目前材料研究领域的热点，无论在理论上还是在实际应用中都具有重要的意义。

经过多年的研究，一大批孔径可调，组成可变、形貌多样、孔道形状不一，且孔道排列方式多样化的多孔材料被不断的合成出来尽管人们已经取得了很多突出的成绩，但是多孔材料的研究过程中仍然有许多未知和不足需要我们探索和需求解决之道。开发简单、经济、快速生产高质量多孔材料的新方法，并不断推进多孔材料在吸附领域的实用化仍有大量的工作需要我们去做。这个过程充满了机遇和挑战。有序介孔碳材料是最近发现的一类新型的非硅基介孔材料，可作为储氢材料、大分子催化反应载体、电极材料等，展现出巨大的应用潜力。介孔碳的合成过程多采用硬模板法，成本昂贵，操作繁琐、耗时。因此，其应用受到了极大的限制。近些年来，介孔二氧化硅纳米粒子作为药物传递系统的应用已经成为纳米医药领域研究的热点之一。这主要是由于其具有介孔结构、无毒的本质、大的表面积和孔体积、良好的稳定性及灵活多样的表面修饰方法等特点。

根据微观结构区别，介孔二氧化硅可分为两大类型：一类是C.T.Kresge等1992年首次报道以MCM241命名的介孔二氧化硅，其结构特点是孔径大小均匀，按六方有序排列，在不同制备条件下，孔径在1.5～10nm范围可连续调节。另一类是以R.E.Russo等报道的二氧化硅干凝胶和气凝胶类为代表无序介孔固体，其中的介孔的形状不规则但是相互连通，孔形通常可用圆柱形、平行板形或细颈瓶状近似，宏观状态与MCM241类介孔二氧化硅大多为粉体不同，二氧化硅干凝胶和气凝胶可以是块体、片状体甚至是薄膜，这些形态对纳米复合材料的实际应用具有非常重要意义。

此外，以二氧化硅为主体材料，通过组装、包覆、掺杂等方式，将金颗粒、磁性粒子、荧光分子等功能材料与二氧化硅基质复合，构筑出具有多功能特性的纳米输送系统，可同时将荧光成像、磁共振成像、特异性标记等技术连用，以实现对癌症的多模式成像、同步诊断与治疗。

ApoG2是一种新型棉酚衍生物，具有广谱抗肿瘤作用，是近年来国内外研究的一个热点，由于其水溶性差，从而导致其在体抗肿瘤效果非常差，因此对其给药方式的改变一直是其研究的一个重要方向。然而目前国内外在此方面的相关研究及专利还未见报道。

目前，大部分专利都是涉及关于介孔硅分子筛的制备及应用。如：中国发明专利“一种基于介孔硅基分子筛的铁基载氧体及其制备方法”(CN102260570A)公开了一种新型的基于介孔硅基分子筛的铁基载氧体及其制备方法；中国发明专利“一种介孔硅铝分子筛的合成方法”(CN102295297A)公开了一种将硅源、铝源、糖类模板剂以及水混合，制备先驱体溶胶，得到介孔硅铝分子筛的方法；中国专利文献“一种Ce掺杂于介孔硅基分子筛为载体的Co基费托合成催化剂的制备及其应用”(CN101411988)公开了一种以Ce接枝于M41S型介孔硅基分子筛为载体的Co基费-托合成催化剂的制备方法；中国发明专利“一种介孔硅磷酸铝分子筛及其制备”(C N1362365)公开了一种采用十六烷基三甲基氯化铵(CTMAC)为主要模板剂，低温水热合成的制备方法。而关于可示踪的载药复合荧光介孔硅纳米制剂的相关专利还没有类似报道。

发明内容

本发明旨在提供一种携载新型棉酚衍生物ApoG2的多功能介孔硅纳米制剂的制备方法，其表面通过多种功能基团的修饰，作为荧光探针及药物传输工具在生物医学领域具有广阔的应用前景。

为达到以上目的，本发明是采取如下技术方案予以实现的。

一种携载新型棉酚衍生物ApoG2的多功能介孔硅纳米制剂的制备方法，包括下列步骤：

(1)摩尔比率为1∶5-1∶30的荧光染料Cy5.5和APTES在1ml-11ml的有机溶剂中避光反应12h，得到Cy5.5-APTES；

(2)将0.5g-60g的CTAB溶解在20ml-300ml的去离子水中，设定温度为和转速，磁力搅拌条件下加入20ul-1000ul的TEA，并调节溶液的PH值为4-11；

(3)待上述混合液加热至设定的温度值，提高转速，搅拌10min-120min，滴加0.1ml-2ml的TEOS和30ul-500ul的Cy5.5-APTES，直至浅绿色溶胶状的复合荧光介孔硅纳米制剂出现；

(4)0.1mg-200mg复合荧光介孔硅纳米粒子分散在10ml-500ml的有机溶剂中，回流30-240min，加入0.2ml-50ml的氨基化合物，离心、洗涤，制备出表面氨基功能化的复合荧光介孔硅纳米制剂；

(5)将上述表面氨基功能化的复合荧光介孔硅纳米制剂与10ml-500ml的ApoG2水溶液混合，振荡、离心并洗涤。

上述方案中，所述的温度为30°C-95°C。所述的转速在步骤2、3中分别为20r/min-50r/min和30r/min-60r/min。滴加方式为TEOS和Cy5.5-APTES同时滴加到混合液中，限定滴速为每分钟3-60滴。所述的表面功能化的氨基化合物选自3-氨丙基三乙氧基硅烷(APTES)、二乙氨基乙醇、氨基乙腈盐酸盐、四乙基二氨基二苯甲胺和6-氨基己醇中的两种混合物，其中APTES和二乙氨基乙醇的混合物的体积比v/v=1:1-1:8、氨基乙腈盐酸盐和二乙氨基乙醇的混合物的体积比v/v=2:1-2:7、四乙基二氨基二苯甲胺和氨基乙腈盐酸盐的混合物的体积比v/v=1:2-1:9、APTES和氨基乙腈盐酸盐的混合物的体积比v/v=1:3-1:9、APTES和6-氨基己醇的混合物的体积比v/v=3:1-3:10、APTES和四乙基二氨基二苯甲胺混合物的体积比v/v=2:3-2:9、二乙氨基乙醇和四乙基二氨基二苯甲胺混合物的体积比v/v=3:1-3:7、二乙氨基乙醇和6-氨基己醇混合物的体积比v/v=2:3-1:5、氨基乙腈盐酸盐和6-氨基己醇的混合物的体积比v/v=3:2-1:5、四乙基二氨基二苯甲胺和6-氨基己醇的混合物的体积比v/v=2:5-1:7。所述的表面氨基功能化的复合荧光介孔硅纳米制剂与10ml-500ml的ApoG2水溶液混合，其中ApoG2的浓度为0.1mg/ml。

本发明方法较现有技术合成介孔硅载荧光载药的方法具有如下明显的有益效果：

(1)本专利中提出的制备具有规则介孔结构的纳米粒子的方法，过程简单，且合成的介孔硅基体粒径小于20nm，单分散性好。

(2)本专利中的介孔硅纳米粒子复合荧光、药物及通过表面功能化修饰后形成的复合纳米粒子，具有稳定的荧光特性及介孔性。

(3)本专利中，通过表面的功能修饰使载药复合荧光介孔硅纳米粒子在作为荧光探针及药物传输工具方面具有巨大的开发潜能。该专利也提供了表面修饰功能集团的合成方法，同时在介孔硅层表面还可以复合多种其他种类的功能基团，为生物医学应用提供了多种多功能的复合纳米粒子的制备方法。

(4)本专利中合成的携载ApoG2的多功能介孔硅纳米制剂具有重要的应用价值，尤其是在肿瘤治疗方面，表现出良好的应用前景和经济价值。

附图说明

以下结合附图及实施例对本发明作进一步的详细说明。

图1为制备携载ApoG2的多功能介孔硅纳米粒子的过程原理图。

图2为多功能介孔硅纳米粒子的透射电镜图和X射线粉末衍射图。

图3为多功能介孔硅纳米粒子的N₂吸收和释放谱线，左上角的插入图为孔径的分布图。

图4为多功能介孔硅纳米粒子的荧光光谱图。

图5为在温度RT和37°C下，多功能介孔硅纳米粒子在几种不同环境(D.I.water，PBS,and DMEM+10％FBS)中培养10天粒子的稳定性检测曲线。

图6为多功能介孔硅纳米制剂在载ApoG2之前和载ApoG2之后的比表面积分析曲线。

图7为携载ApoG2的多功能介孔硅纳米制剂在PBS中释放ApoG2的特性曲线。

图8为多功能介孔硅纳米粒子、携载ApoG2的多功能介孔硅纳米粒子和ApoG2对肿瘤细胞生长的抑制曲线。

具体实施方式

实施例1

摩尔比率为1:5的荧光染料Cy5.5和APTES在11ml的丙酮中避光反应12h，得到Cy5.5-APTES；0.5g的CTAB和20ul的TEA加入到20ml的水溶液中，设定温度为30°C，转速20r/min。待混合液加热至30°C，转速改为30r/min，搅拌10min，0.1ml的TEOS和30ul的Cy5.5-APTES滴加到上述混合溶液中，滴速为每分钟60滴，剧烈搅拌直到浅绿色溶胶状的复合荧光介孔硅纳米制剂出现，过滤、透析，测定最后溶液的PH值为11、平均粒径为713d.nm；取0.1mg上述制备的复合荧光介孔硅纳米粒子分散在10ml的乙醇中，回流30min，加入0.2ml的体积比v/v=1:3的APTES和二乙氨基乙醇的混合物，离心，洗涤，得到表面氨基功能化的复合荧光介孔硅纳米粒子；将其与10ml浓度为0.1mg/ml的APOG2水溶液混合，振荡12h，离心并洗涤。

实施例2

摩尔比率为1:8的荧光染料Cy5.5和APTES在9ml的丙酮中避光反应12h，得到Cy5.5-APTES；6g的CTAB和100ul的TEA加入到30ml的水溶液中，设定温度为40°C，转速20r/min。待混合液加热至40°C，转速改为40r/min，搅拌20min，0.2ml的TEOS和60ul的Cy5.5-APTES滴加到上述混合溶液中，滴速为每分钟55滴，剧烈搅拌直到浅绿色溶胶状的复合荧光介孔硅纳米制剂出现，过滤、透析，测定最后溶液的PH值为10、平均粒径为403d.nm；取20mg上述制备的复合荧光介孔硅纳米粒子分散在60ml的乙醇中，回流50min，加入10ml的体积比v/v=2:5的氨基乙腈盐酸盐和二乙氨基乙醇的混合物，离心，洗涤，得到表面氨基功能化的复合荧光介孔硅纳米粒子；将其与60ml浓度为0.1mg/ml的APOG2水溶液混合，振荡12h，离心并洗涤。

实施例3

摩尔比率为1:11的荧光染料Cy5.5和APTES在8ml的丙酮中避光反应12h，得到Cy5.5-APTES；12g的CTAB和200ul的TEA加入到60ml的水溶液中，设定温度为50°C，转速20r/min。待混合液加热至50°C，转速改为50r/min，搅拌40min，0.4ml的TEOS和120ul的Cy5.5-APTES滴加到上述混合溶液中，滴速为每分钟50滴，剧烈搅拌直到浅绿色溶胶状的复合荧光介孔硅纳米制剂出现，过滤、透析，测定最后溶液的PH值为9、平均粒径为381d.nm；取40mg上述制备的复合荧光介孔硅纳米粒子分散在110ml的乙醇中，回流70min，加入15ml的体积比v/v=1:7的四乙基二氨基二苯甲胺和氨基乙腈盐酸盐的混合物，离心，洗涤，得到表面氨基功能化的复合荧光介孔硅纳米粒子；将其与110ml浓度为0.1mg/ml的APOG2水溶液混合，振荡12h，离心并洗涤。

实施例4

摩尔比率为1:14的荧光染料Cy5.5和APTES在7ml的丙酮中避光反应12h，得到Cy5.5-APTES；18g的CTAB和300ul的TEA加入到100ml的水溶液中，设定温度为60°C，转速20r/min。待混合液加热至60°C，转速改为60r/min，搅拌60min，0.6ml的TEOS和240ul的Cy5.5-APTES滴加到上述混合溶液中，滴速为每分钟40滴，剧烈搅拌直到浅绿色溶胶状的复合荧光介孔硅纳米制剂出现，过滤、透析，测定最后溶液的PH值为8、平均粒径为214d.nm；取60mg上述制备的复合荧光介孔硅纳米粒子分散在160ml的乙醇中，回流90min，加入20ml的体积比v/v=1:5的APTES和氨基乙腈盐酸盐的混合物，离心，洗涤，得到表面氨基功能化的复合荧光介孔硅纳米粒子；将其与160ml浓度为0.1mg/ml的APOG2水溶液混合，振荡12h，离心并洗涤。

实施例5

摩尔比率为1:17的荧光染料Cy5.5和APTES在6ml的丙酮中避光反应12h，得到Cy5.5-APTES；24g的CTAB和400ul的TEA加入到150ml的水溶液中，设定温度为70°C，转速30r/min。待混合液加热至70°C，转速改为40r/min，搅拌70min，0.8ml的TEOS和300ul的Cy5.5-APTES滴加到上述混合溶液中，滴速为每分钟30滴，剧烈搅拌直到浅绿色溶胶状的复合荧光介孔硅纳米制剂出现，过滤、透析，测定最后溶液的PH值为7、平均粒径为168d.nm；取80mg上述制备的复合荧光介孔硅纳米粒子分散在210ml的乙醇中，回流100min，加入25ml的体积比v/v=3:7的APTES和6-氨基己醇的混合物，离心，洗涤，得到表面氨基功能化的复合荧光介孔硅纳米粒子；将其与210ml浓度为0.1mg/ml的APOG2水溶液混合，振荡12h，离心并洗涤。

实施例6

摩尔比率为1:20的荧光染料Cy5.5和APTES在5ml的丙酮中避光反应12h，得到Cy5.5-APTES；30g的CTAB和500ul的TEA加入到180ml的水溶液中，设定温度为75°C，转速30r/min。待混合液加热至75°C，转速改为50r/min，搅拌80min，1ml的TEOS和340ul的Cy5.5-APTES滴加到上述混合溶液中，滴速为每分钟25滴，剧烈搅拌直到浅绿色溶胶状的复合荧光介孔硅纳米制剂出现，过滤、透析，测定最后溶液的PH值为6、平均粒径为139d.nm；取100mg上述制备的复合荧光介孔硅纳米粒子分散在260ml的乙醇中，回流120min，加入30ml的体积比v/v=2:5的APTES和四乙基二氨基二苯甲胺的混合物，离心，洗涤，得到表面氨基功能化的复合荧光介孔硅纳米粒子；将其与260ml浓度为0.1mg/ml的APOG2水溶液混合，振荡12h，离心并洗涤。

实施例7

摩尔比率为1:23的荧光染料Cy5.5和APTES在4ml的丙酮中避光反应12h，得到Cy5.5-APTES；36g的CTAB和600ul的TEA加入到200ml的水溶液中，设定温度为80°C，转速30r/min。待混合液加热至80°C，转速改为60r/min，搅拌90min，1.2ml的TEOS和380ul的Cy5.5-APTES滴加到上述混合溶液中，滴速为每分钟20滴，剧烈搅拌直到浅绿色溶胶状的复合荧光介孔硅纳米制剂出现，过滤、透析，测定最后溶液的PH值为5、平均粒径为127d.nm；取140mg上述制备的复合荧光介孔硅纳米粒子分散在310ml的乙醇中，回流150min，加入35ml的体积比v/v=3:7的二乙氨基乙醇和四乙基二氨基二苯甲胺的混合物，离心，洗涤，得到表面氨基功能化的复合荧光介孔硅纳米粒子；将其与310ml浓度为0.1mg/ml的APOG2水溶液混合，振荡12h，离心并洗涤。

实施例8

摩尔比率为1:25的荧光染料Cy5.5和APTES在3ml的丙酮中避光反应12h，得到Cy5.5-APTES；42g的CTAB和800ul的TEA加入到230ml的水溶液中，设定温度为85°C，转速40r/min。待混合液加热至85°C，转速改为50r/min，搅拌100min，1.6ml的TEOS和420ul的Cy5.5-APTES滴加到上述混合溶液中，滴速为每分钟15滴，剧烈搅拌直到浅绿色溶胶状的复合荧光介孔硅纳米制剂出现，过滤、透析，测定最后溶液的PH值为4、平均粒径为111d.nm；取160mg上述制备的复合荧光介孔硅纳米粒子分散在360ml的乙醇中，回流180min，加入40ml的体积比v/v=2:9的二乙氨基乙醇和6-氨基己醇的混合物，离心，洗涤，得到表面氨基功能化的复合荧光介孔硅纳米粒子；将其与360ml浓度为0.1mg/ml的APOG2水溶液混合，振荡12h，离心并洗涤。

实施例9

摩尔比率为1:27的荧光染料Cy5.5和APTES在2ml的丙酮中避光反应12h，得到Cy5.5-APTES；50g的CTAB和900ul的TEA加入到260ml的水溶液中，设定温度为90°C，转速40r/min。待混合液加热至90°C，转速改为60r/min，搅拌110min，1.8ml的TEOS和460ul的Cy5.5-APTES滴加到上述混合溶液中，滴速为每分钟10滴，剧烈搅拌直到浅绿色溶胶状的复合荧光介孔硅纳米制剂出现，过滤、透析，测定最后溶液的PH值为3、平均粒径为29d.nm；取180mg上述制备的复合荧光介孔硅纳米粒子分散在410ml的乙醇中，回流200min，加入45ml的体积比v/v=3:11的氨基乙腈盐酸盐和6-氨基己醇的混合物，离心，洗涤，得到表面氨基功能化的复合荧光介孔硅纳米粒子；将其与450ml浓度为0.1mg/ml的APOG2水溶液混合，振荡12h，离心并洗涤。

实施例10

摩尔比率为1:30的荧光染料Cy5.5和APTES在1ml的丙酮中避光反应12h，得到Cy5.5-APTES；60g的CTAB和1000ul的TEA加入到300ml的水溶液中，设定温度为95°C，转速50r/min。待混合液加热至95°C，转速改为60r/min，搅拌120min，2ml的TEOS和500ul的Cy5.5-APTES滴加到上述混合溶液中，滴速为每分钟3滴，剧烈搅拌直到浅绿色溶胶状的复合荧光介孔硅纳米制剂出现，过滤、透析，测定最后溶液的PH值为2、平均粒径为19d.nm；取200mg上述制备的复合荧光介孔硅纳米粒子分散在500ml的乙醇中，回流240min，加入50ml的体积比v/v=2:9的四乙基二氨基二苯甲胺和6-氨基己醇的混合物，离心，洗涤，得到表面氨基功能化的复合荧光介孔硅纳米粒子；将其与500ml浓度为0.1mg/ml的APOG2水溶液混合，振荡12h，离心并洗涤。

实验结果表明：合成的多功能介孔硅纳米粒子的孔道呈六方有序排列、大小分布均匀且可以观察到非常清晰的荧光图像；从实验结果可以明显看出,携载ApoG2的多功能介孔硅纳米制剂抑制肿瘤细胞的效果是ApoG2的3倍。也进一步说明了所制备的携载ApoG2的多功能介孔硅纳米制剂的抗肿瘤效果好，做为荧光探针及药物传输工具具有良好应用前景和经济价值。

Claims

1.一种携载棉酚衍生物ApoG2的多功能介孔硅纳米制剂的制备方法，其特征是，该制备方法包括下列步骤：

(1)摩尔比率为1:5-1:30的荧光染料Cy5.5和APTES在1ml-11ml的有机溶剂中避光反应12h，得到Cy5.5-APTES；

(2)将0.5g-60g的CTAB溶解在20ml-300ml的去离子水中，设定温度和转速，磁力搅拌条件下加入20μl-1000μl的TEA，并调节溶液的pH值为4-11；

(3)待上述混合液加热至设定的温度值，提高转速，搅拌10min-120min，滴加0.1ml-2ml的TEOS和30μl-500μl的Cy5.5-APTES，直到浅绿色溶胶状的复合荧光介孔硅纳米制剂出现；

2.如权利要求1所述的携载棉酚衍生物ApoG2的多功能介孔硅纳米制剂的制备方法，其特征在于，步骤(2)中所述的温度为30℃-95℃，转速为20r/min-50r/min。

3.如权利要求1所述的携载棉酚衍生物ApoG2的多功能介孔硅纳米制剂的制备方法，其特征在于，步骤(3)中转速为30r/min-60r/min。

4.如权利要求1所述的携载棉酚衍生物ApoG2的多功能介孔硅纳米制剂的制备方法，其特征在于，步骤(3)进一步包括以下步骤；测定此溶胶悬浮液pH值为3-12，过滤、透析后溶液的pH值为2-11。

5.如权利要求1所述的携载棉酚衍生物ApoG2的多功能介孔硅纳米制剂的制备方法，其特征在于，步骤(3)中TEOS和Cy5.5-APTES同时滴加到混合液中，限定滴速为每分钟3-60滴。

6.如权利要求1所述的携载棉酚衍生物ApoG2的多功能介孔硅纳米制剂的制备方法，其特征在于，步骤(4)中表面功能化的氨基化合物选自3-氨丙基三乙氧基硅烷(APTES)、二乙氨基乙醇、氨基乙腈盐酸盐、四乙基二氨基二苯甲胺和6-氨基己醇中的两种混合物，其中APTES和二乙氨基乙醇的混合物的体积比v/v＝1:1-1:8；氨基乙腈盐酸盐和二乙氨基乙醇的混合物的体积比v/v＝2:1-2:7；四乙基二氨基二苯甲胺和氨基乙腈盐酸盐的混合物的体积比v/v＝1:2-1:9；APTES和氨基乙腈盐酸盐的混合物的体积比v/v＝1:3-1:9；APTES和6-氨基己醇的混合物的体积比v/v＝3:1-3:10；APTES和四乙基二氨基二苯甲胺混合物的体积比v/v＝3:1-3:7；二乙氨基乙醇和6-氨基己醇混合物的体积比v/v＝2:3-1:5；氨基乙腈盐酸盐和6-氨基己醇的混合物的体积比v/v＝3:2-1:5；四乙基二氨基二苯甲胺和6-氨基己醇的混合物的体积比v/v＝2:5-1:7。

7.如权利要求1所述的携载棉酚衍生物ApoG2的多功能介孔硅纳米制剂的制备方法，其特征在于，步骤(5)中把表面氨基功能化的复合荧光介孔硅纳米制剂与10ml-500ml浓度为0.1mg/ml的ApoG2水溶液混合。