CN103163288A - 一种优化的适合自动化的血小板聚集功能检测分析方法 - Google Patents

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徐新
董自权
曹宁
周强
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Abstract

一种血小板聚集功能检测分析的优化自动化检测方法，属于临床检验医学领域。本方法是对应用自动化计数法检测分析血小板聚集功能方法的改良和优化。该流程方法适用于对采用计数方法的血小板聚集功能自动化分析仪器。本方法流程检测并记录血小板数量和计算聚集率。在本实验室测试结果显示该方法较以往用最大聚集率方法得出的血小板聚集率结果重复性更好。

Description

一种优化的适合自动化的血小板聚集功能检测分析方法
一、技术领域
本发明涉及一种优化的通过自动测量血样在聚集前后血小板数量变化，并依据该变化数据自动进行分析计算获得对被检血样血小板聚集功能评价的一种血小板聚集功能检测的优化的流程及分析方法，属于临床检验医学领域。
二、背景技术
血小板聚集功能(或聚集率)是血液中血小板的一项重要功能，是评价血液凝血功能的一项重要指标。现有的血小板凝聚功能检测方法主要是通过检测血浆或全血中血小板聚集前后血浆(全血)中光密度(或光通性能)改变(简称：光学法)，或将电极放入待检全血中观察血样加入诱聚剂后血小板吸附在电极上导致的电极电阻变化(简称：电学法)。这些方法由于都各有一定缺陷，如光学法、电学法检测操作较繁琐、结果误差较大。之前亦有关于使用血液分析仪进行检测全血加入诱聚剂后血小板数量的变化，进行血小板聚集功能进行检测的方法。但由于现有的关于采用血液分析仪进行血小板聚集功能检测的方法较为简单，其还未达到较高的检测重复性水平。因此，本方法是对计数法检测分析血小板聚集功能的改良和优化。该流程方法适用于对采用计数方法的血小板聚集功能自动化分析仪器。
三、发明内容
本发明的优化方法是：将新鲜枸橼酸抗凝血样充分混匀，而后连续检测二次，记录血小板数量，如二次血小板数量差异小于二数值平均值的10％，则仪器自动将该二次血小板计数结果平均作为未加诱聚剂前血小板基准值；若二次计数值差异超过二次计数平均值的10％，则仪器自动对血样再进行一次检测，若第三次检测获得的血小板值与之前二次血小板计数中一个数字接近，二值之差小于二计数平均值的10％，则采用该二值的平均值作为该次检测血小板基准值；若第三次检测结果与前二次结果差异都较大，则仪器自动终止检测，要求操作者对仪器进行检查处理，而后重新开始检测。如仪器基准值检测通过后，仪器自动对血样中加入诱聚剂，仪器并自动对血样混匀、恒温孵育，在加入诱聚剂后120秒开始，仪器对血样连续多次进行血小板检测计数，仪器自动将此后对血小板计数值进行平均，并将该平均值与加诱聚剂前检测获得的血小板基准值比较计算获得对该血样平均血小板聚集率值。由于现有对血小板计数仪器检测结果往往有一定偏差，采用单次计数结果难以获得稳定满意的检测结果。而采用本检测和计算方法得到的血小板聚集率结果，更加稳定，也就能更好地反映血样的血小板聚集功能。用该方法检测结果(平均血小板聚集率)的计算式如下：
Figure BSA00000638321000021
四、具体实施方式
本发明方法的检测分析流程为：将准备好的待检抗凝血样恒温并充分混匀，而后检测二次血样中血小板数量，如将二次血小板数量结果平均后以平均值与二个检测数据比较，若二个数据差异均不超过平均值的10％，则该平均值就作为本次检测的血小板数值的基准值。但若其中一个数据大于平均值10％，则应再对血样进行一次检测，若结果与之前检测的二个数据中任何一个接近，即不超过该二个结果平均值的10％，则这二个数据的平均值就作为本次检测的基准值。随后，对血样按9∶1(血：诱聚剂)加入诱聚剂，充分混匀，并计时从加诱聚剂后120秒开始连续检测血样中血小板数量，将加诱聚剂后检测获得的血小板数据平均作为聚集后血小板数量的代表，而后按照本发明设计的计算方式即可计算出该样本的血小板聚集率值。
我们在实验室根据，上述流程设计，以人工结合血液分析仪器按照本发明方法进行测试。具体实验操作：随机抽取20份新鲜血样，每份各分为四份血样，按照本方法流程检测并记录血小板数量和计算聚集率。同时，另采用20份新鲜血样采用相同量枸橼酸抗凝剂，用同一台血液分析仪进行检测记录血小板数量，且按照现有的血小板功能检测方法记录最大聚集率。将二组数据进行比较，可以看出二种方法获得的结果以本方法所获得的结果重复性更好。
表1.用本方法检测计算获得血小板聚集率重复性观察表
Figure BSA00000638321000031
*说明：表中“A”、“B”、“C”、“D”则代表同一样本分为4份样品后各自测试结果，其中为便于数据处理，将各次血小板计数平均值小数点后数据4舍5入。
表2.用直接计数法检测计算血小板最大聚集率观察表
*说明：表中“A”、“B”、“C”、“D”则代表同一样本分为4份样品各自测试结果对应值。为便于数据处理，将各次血小板计数平均值小数点后数据4舍5入。
数据分析及结论：采用本发明方法对20个样本分别4次检测，累计误差为75.49；最大误差值的平均值为：3.77(％)。而采用最大聚集率检测计算法获得的血小板聚集率累计误差为：122.12，最大误差平均值为：6.11(％)。二者差异十分明显。说明采用本方法进行血小板聚集率检测结果比用最大聚集率法重复性更好。

Claims (4)

1.一种优化的适合自动化的血小板聚集功能检测分析方法，其特征是：该方法借助于自动化对血小板计数分析仪器，先将未加诱聚剂前血样进行二次或二次以上检测结果差异小于10％的血小板计数平均值作为血小板基准值，随后对同一血样加入诱聚剂处理后对该样本多次检测，并将所获得的聚集后血小板计数值平均值(聚集后对血小板计数检测获得多次计数值的平均值)作为聚集后血小板数量值代表，并采用血小板基准值与聚集后血小板平均值的差值与血小板基准值之比值或百分比值作为该方法检测获得的血小板聚集功能水平指标，本方法对聚集后血样检测计数在加诱聚剂后120秒开始到480秒时间内对样本血小板进行不少于3次计数检测，在此期间所有检测结果均参与聚集后血小板平均值计算。
2.根据权利1所述的一种优化的适合自动化的血小板聚集功能检测分析方法，其特征是：该方法采用自动仪器对血小板数量直接计数检测获得的数据分析计算血小板聚集功能。该方法的计算式可以为以下述A或B二种计算方式：
A： 
Figure FSA00000638320900011
B： 
Figure FSA00000638320900012
。
3.根据权利1所述的一种优化的适合自动化的血小板聚集功能检测分析方法，其特征是：该方法对未加诱聚剂前血样进行不少于二次检测，其结果的平均值作为基准值，即基准值的数据应来源于不少于二次检测数据平均值，该多次检测结果中若差值小于该各检测结果平均值10％的结果予以保留，对于该检测结果中差值大于平均值10％的结果予以删除，且该删除的检测结果也不参血小板基准值计算。 
4.根据权利要求1所述的一种优化的适合自动化的血小板聚集功能检测分析方法，其特征是该方法在对未加诱聚剂血样进行检测并根据上述条件获得满意的血小板基准值结果后，仪器可自动计算剩余血量并按照9∶1(血样与诱聚剂)的比例对剩余血样加入诱聚剂，而后自动充分混匀血样且按照设定时间对血样继续进行血小板计数检测。该方法适用于采用计数方法对血小板进行聚集功能自动化分析的仪器。 
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